Přejít na domovskou stránku

Buňky Hep2 a jejich role ve výzkumu rakoviny hrtanu

Buňky Hep 2 jsou klíčovým in vitro modelem, který se hojně využívá v různých oblastech biomedicínského výzkumu, jako je revmatologie, výzkum rakoviny a imunologie. Tyto lidské buňky, pocházející z karcinomu hrtanu, jsou nedílnou součástí objasňování tkáně původu a specifických vlastností novotvarů hrtanu. Jejich význam je dobře uznáván v translačním výzkumu rakoviny, kde významně přispěly k našemu porozumění povaze a původu rakoviny hrtanu a zaujímají významné místo v publikacích věnovaných výzkumu rakoviny hrtanu [1].

📋 Buněčná linie Hep2 — Stručné informace
Růstové médium
K kultivaci buněk Hep 2 se používá EMEM neboli Eagleovo minimální esenciální médium. Toto médium je doplněno 10 % FBS, 1,0 g/l glukózy, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutaminu, 1 % NEAA a 1 mM pyruvátu sodného pro ideální růst buněk. Média by se měla obnovovat 2 až 3krát týdně.
Doba zdvojnásobení
Doba zdvojnásobení uváděná pro buňky Hep 2 je přibližně 40 hodin.
Typ růstu
Buňky Hep 2 jsou adhezivní a rostou do monovrstev.
Úroveň biologické bezpečnosti
BSL-1
K dispozici u
Cytion — Objednat Hep2

Původ a obecné charakteristiky buněk Hep 2

Původ a obecné charakteristiky buněčné linie určují její použitelnost ve výzkumu. Tato sekce vám pomůže seznámit se s původem a některými významnými vlastnostmi buněk Hep 2. Dozvíte se například: Co je buněčná linie HEp-2? Jaký je zdroj buněk Hep 2? A jaká je morfologie buněk Hep 2?

  • Hep 2, nesmrtelná lidská epiteliální buněčná linie, byla poprvé popsána H.W. Toolanem jako buňky karcinomu hrtanu v roce 1954. V poslední době však bylo oznámeno, že buněčná linie Hep 2 se skládá z buněk adenokarcinomu děložního čípku a vznikla kontaminací buněčné linie Hela [2].
  • Buňky Hep 2 obsahují markerové chromozomy Hela a jsou pozitivní na keratin a sekvence DNA lidského papilomaviru, což bylo potvrzeno imunoperoxidázovým barvením a PCR.
  • Derivát buněčné linie Hela, Hep 2, má epiteliální morfologii.
  • Buněčná linie Hep 2 vykazuje jak strukturální, tak numerické chromozomální aberační změny s téměř triploidním karyotypem [3].

Dělění buněk rakoviny děložního čípku HeLa pod mikroskopem.

Buněčná linie HEp-2: Informace o kultivaci

Před zahájením práce s buněčnou linií je nutné znát následující klíčové body týkající se její kultivace. Tyto informace mohou být užitečné pro efektivní kultivaci a udržování buněčné linie. Měli byste vědět: Jaká je doba zdvojnásobení buněk HEp-2? Jsou buňky Hep 2 adhezivní? Jaká je hustota výsevu buněk Hep2?

 

Doba zdvojnásobení populace:

Doba zdvojnásobení uváděná pro buňky Hep 2 je přibližně 40 hodin.

Adhezivní nebo v suspenzi:

Buňky Hep 2 jsou adhezivní a rostou do monovrstev.

Hustota výsevu:

Pro kultivaci buněk Hep 2 je ideální hustota výsevu 1 x 104 buněk/cm2. Pro výsev se adhezivní buňky Hep 2 propláchnou roztokem 1 x PBS a následně se inkubují s disociačním roztokem Accutase. Po 8–10 minutách inkubace při pokojové teplotě se buňky resuspendují v médiu a odstředí. Shromážděné buňky se poté rozdělí do čerstvého média a přelijí do nových lahví pro kultivaci.

Růstové médium:

K kultivaci buněk Hep 2 se používá EMEM nebo Eagleovo minimální esenciální médium. Toto médium je doplněno 10 % FBS, 1,0 g/l glukózy, 2,2 g/l NaHCO3, 2,0 mM L-glutaminu, 1 % NEAA a 1 mM pyruvátu sodného pro ideální růst buněk. Média by se měla obnovovat 2 až 3krát týdně.

Podmínky růstu:

Stejně jako jiné savčí buněčné linie se i Hep 2 kultivuje ve zvlhčeném inkubátoru nastaveném na teplotu 37 °C a s nepřetržitým přívodem 5 % CO2.

Skladování:

Buňky Hep 2 lze pro dlouhodobé skladování uchovávat v elektrických mrazničkách s ultra nízkou teplotou (pod -150 °C) nebo v plynné fázi kapalného dusíku.

Proces zmrazování a médium:

Pro zmrazení buněk Hep 2 se doporučuje médium CM-1 nebo CM-ACF. Buňky by měly být zmrazeny pomalým procesem, který umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C a chrání životaschopnost buněk.

Proces rozmrazování:

Lahvičku se zmrazenými buňkami rychle rozmrazíme protřepáváním ve vodní lázni při teplotě 37 °C, dokud nezůstane jen malá hrudka ledu. Buňky se poté přidají do čerstvého média a odstředí se, aby se odstranily složky mrazicího média. Poté se buněčný pelet resuspenduje v médiu a buňky se rozdělí do kultivačních lahví. Buňky musí odpočívat téměř 24 hodin, aby se přichytily.

Úroveň biologické bezpečnosti

Pro manipulaci a udržování buněčných kultur Hep 2 se doporučuje laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1.

Hep2 cells

Buňky Hep 2 před a po dosažení konfluence.

Výhody a omezení buněčné linie Hep 2

Téměř všechny buněčné linie vykazují jedinečnou kombinaci výhod a omezení, které přispívají k jejich využití ve výzkumu. V této části popíšeme několik hlavních kladů a záporů spojených s buněčnou linií Hep 2.

Výhody

Hlavní výhody buněčné linie Hep 2 jsou:

  • Lidský původ: Hep 2 je odvozena z lidských epitelových buněk, což z ní činí cenný in vitro model pro studium lidských onemocnění a virových infekcí.
  • Detekce ANA: Buněčná linie Hep 2 obsahuje nativní proteinové pole, které prezentuje četné antigeny, což z ní činí vynikající substrát pro detekci antinukleárních protilátek (ANA). Tato vlastnost umožňuje specifické a vysoce citlivé screeningové testy ANA v séru, což z ní činí klíčový diagnostický nástroj pro identifikaci onemocnění pojivové tkáně.

Omezení

  • Chromozomální abnormality: Buňky Hep 2 vykazují četné numerické a strukturální chromozomální abnormality. Tyto abnormality mohou ovlivnit chování buněk a omezit jejich použitelnost v určitých laboratorních experimentech.
  • Tumorigenita: Hep 2, lidská epiteliální buněčná linie odvozená z nádoru, může vykazovat genetické abnormality, které se v epiteliálních buňkách obvykle nevyskytují. V důsledku toho může být použití buněk Hep 2 omezeno v konkrétních studiích zaměřených na normální buněčnou fyziologii.

Rozšiřující se aplikace buněčné linie Hep 2 v biomedicínském výzkumu

Buněčná linie Hep 2 vyniká jako příkladný model pro celou řadu aplikací v biomedicínském výzkumu. Tyto buňky, známé svou univerzálností, hrají klíčovou roli v in vitro experimentech, od analýzy receptorů až po studium komplexních onemocnění.

Zkoumání tumorigenních mechanismů a terapeutických cílů pomocí buněk Hep 2

Buňky Hep 2, které jsou tumorigenní, jsou klíčové pro zkoumání složitostí biologie rakoviny. Poskytují vhled do signálních drah rakoviny, mechanistických studií a jsou oporou při screeningu a hodnocení protinádorových léků. Například jedna přínosná studie využila buňky Hep 2 k popisu vlivu miRNA-33a na proliferaci rakovinných buněk. Zjištění objasnila antiproliferační účinky miRNA-33a prostřednictvím její interakce s PIM1, známým onkogenem, což naznačuje nový terapeutický cíl [4]. V jiném případě byly buňky Hep 2 použity k posouzení terapeutického potenciálu nanočástic oxidu zinečnatého Marsdenia tenacissima, přičemž byla zdůrazněna jejich antiproliferační a apoptotická účinnost [5].

Pokrok ve virologickém výzkumu díky poznatkům o buňkách Hep 2

Náchylnost buněk Hep 2 k různým lidským virům z nich činí neocenitelný zdroj pro virologický výzkum. Byly účinně využity při expresi virových genů SARS-CoV-2 k odhalení složité interakce mezi virem a buněčnými mechanismy hostitele [6]. Tato aplikace je obzvláště důležitá v současné době, kdy je porozumění a boj proti virovým infekcím, jako je COVID-19, globální prioritou.

Rozluštění buněčných funkcí: genová manipulace v buňkách Hep 2

Přizpůsobivost buněčné linie Hep 2 genetické manipulaci podtrhuje její užitečnost v mechanistických studiích. Vědci tuto vlastnost využívají k modulaci genové exprese a objasnění role konkrétních genů v buněčných funkcích. Pozoruhodná studie se zabývala nadměrnou expresí RNA-vázajícího proteinu RBM6 v buňkách Hep 2, což usnadnilo zkoumání jeho potenciálu jako tumor supresoru a poskytlo cenné poznatky o molekulárních základech rakoviny [7].

Zlepšení diagnostiky nemocí díky aplikacím buněčné linie Hep 2

Kromě těchto oblastí výzkumu jsou buňky Hep 2 uznávané pro své diagnostické schopnosti, zejména při detekci ANA, které jsou klíčové pro diagnostiku autoimunitních onemocnění, jako je systémový lupus erythematodes. Přesnost, s jakou buňky Hep 2 dokážou prezentovat ANA, podporuje diagnostiku a vývoj cílených léčebných postupů, prohlubuje naše porozumění autoimunitním patologiím a zlepšuje péči o pacienty.

Díky těmto rozmanitým aplikacím buňky Hep 2 významně přispěly k pokroku v translačním výzkumu rakoviny, studiu virových infekcí a zkoumání buněčných mechanismů. Jejich přínos k získávání klinicky relevantních dat je neocenitelný, což potvrzuje jejich nepostradatelnou roli jak v laboratoři, tak v klinické praxi. S pokračujícím vývojem výzkumu zůstane buněčná linie Hep 2 jistě v popředí a bude pomáhat při objevování nových léčebných postupů a rozšiřování našich znalostí o lidském zdraví a nemocech.

Zajistěte si svou buněčnou linii HEp-2 ještě dnes

Buňky Hep 2: Vědecké publikace

Následuje výběr zajímavých a nejčastěji citovaných výzkumných publikací týkajících se buněk Hep 2.

Zdroje pro buněčnou linii Hep2: protokoly, videa a další

Hep 2 je dobře známá buněčná linie. Existuje několik dostupných zdrojů věnovaných buněčné linii Hep 2.

Často kladené otázky o buňkách HEp-2 v biomedicínském výzkumu

Buňky HEp-2 jsou nesmrtelnou buněčnou linií, která původně pocházela z karcinomu hrtanu, ale později byla identifikována jako buňky adenokarcinomu děložního hrdla kontaminované buňkami HeLa. Díky svému lidskému epiteliálnímu původu jsou klíčovým nástrojem při studiu různých onemocnění, zejména ve výzkumu rakoviny, imunologii a virologii, a poskytují tak vhled do mechanismů onemocnění a potenciální léčby
Vzorky barvení v buňkách HEp-2 při testování antinukleárních protilátek (ANA) mají zásadní význam pro diagnostiku autoimunitních onemocnění. Tyto vzorce pomáhají identifikovat specifické autoprotilátky, což napomáhá diagnostice stavů, jako je systémový lupus erythematodes, a jsou základním kamenem klinické imunologie pro svou roli v pochopení autoimunitních patologií
Buňky HEp-2 jsou široce používány pro detekci ANA díky své schopnosti prezentovat širokou škálu antigenů, což umožňuje citlivý a specifický screening ANA ve vzorcích séra. Díky tomu jsou neocenitelné při diagnostice autoimunitních onemocnění, což podtrhuje jejich klíčovou roli v rozvoji diagnostických metod v imunologii
Titry ANA v buňkách HEp-2 udávají nejvyšší ředění séra, při kterém zůstávají autoprotilátky detekovatelné, a slouží jako klíčové měřítko při hodnocení závažnosti a progrese autoimunitního onemocnění. Vysoké titry často naznačují aktivnější onemocnění, což je vodítkem pro lékaře při rozhodování o léčbě a sledování onemocnění
Buňky HEp-2, které pocházejí z karcinomu hrtanu, mají zásadní význam pro zkoumání původu a vlastností rakoviny hrtanu. Jejich využití v translačním výzkumu rakoviny vedlo k významnému pokroku v pochopení rakoviny hrtanu, napomohlo vývoji cílené léčby a obohatilo literaturu o rakovině hrtanu
Buňky HEp-2, které byly původně považovány za buňky karcinomu hrtanu, byly později identifikovány jako buňky adenokarcinomu děložního hrdla, což zdůraznilo složitost původu buněčných linií, ale neubralo jim to na hodnotě ve výzkumu díky jejich jedinečným vlastnostem a využití při studiu chování epiteliálních buněk a patologií
Navzdory společnému původu z lidských buněk rakoviny děložního čípku vykazují buňky HeLa a HEp-2 odlišné vlastnosti. HeLa jsou díky své rychlé proliferaci vhodné pro širokou škálu studií, zatímco HEp-2 mají jedinečné vlastnosti, zejména v oblasti výzkumu epiteliálních buněk, a nabízejí specifické výhody při studiu patologií a mechanismů epiteliálních buněk
Úspěšná kultivace buněk HEp-2 vyžaduje specifické podmínky, jako je použití EMEM doplněného FBS a udržování kontrolovaného prostředí při 37 °C s 5 % CO2. Znalost požadavků na jejich kultivaci, včetně hustoty výsevu a složení média, je nezbytná pro jejich účinné použití ve výzkumu
Buňky HEp-2 mají řadu výhod, včetně jejich významu pro studium lidských onemocnění a užitečnosti při detekci ANA.Jejich chromozomální abnormality a nádorová povaha však mohou omezit jejich použitelnost v určitých oblastech výzkumu, což vyžaduje pečlivé zvážení jejich použití
Buňky HEp-2 rozšířily obzory výzkumu v různých biomedicínských oborech, od screeningu léčiv až po studie mechanismů onemocnění. Jejich všestrannost a přínos k pochopení a léčbě nemocí podtrhují jejich neocenitelnou roli v základním i translačním výzkumu a slibují trvalý význam v budoucím vědeckém úsilí

Literatura

  1. Fusi, M. a S. Dotti, Adaptace buněčné linie HEp-2 na kultivační systémy zcela bez živočišných složek a analýza buněčného růstu v reálném čase. Biotechniques, 2021. 70(6): s. 319–326.
  2. Gorphe, P., Komplexní přehled buněčné linie Hep-2 v translačním výzkumu rakoviny hrtanu. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): s. 644–649.
  3. Wang, M., et al., Fibroblasty asociované s rakovinou v lidském xenotransplantovaném nádoru hrtanu založeném na buněčné linii HEp-2 nepocházejí z rakovinných buněk prostřednictvím epiteliálně-mezenchymální transformace, jsou fenotypicky aktivované, ale karyotypicky normální. PLoS One, 2015. 10(2): s. e0117405.
  4. Karatas, O.F., Antiproliferační potenciál miR-33a v buňkách rakoviny hrtanu Hep-2 prostřednictvím cílení na PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): s. 2455–2461.
  5. Wang, Y., et al., Syntéza nanočástic oxidu zinečnatého z Marsdenia tenacissima inhibuje buněčnou proliferaci a indukuje apoptózu v buňkách rakoviny hrtanu (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: s. 111624.
  6. Zhang, J., et al., Systémová a molekulární studie subcelulární lokalizace proteinů SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): s. 269.
  7. Wang, Q., et al., Protein RBM6 vázající RNA jako tumor supresorový gen potlačuje růst a progresi karcinomu hrtanu. Gene, 2019. 697: s. 26-34.

Zjistili jsme, že se nacházíte v jiné zemi nebo používáte jiný jazyk prohlížeče, než je aktuálně zvolený. Chcete přijmout navrhované nastavení?

Zavřít