Клетъчна линия BEWO
BeWo е клетъчна линия, получена от човешки хориокарцином, широко използвана в биомедицинските изследвания. Тя служи като ценен in vitro модел за изследване на сложния процес на развитие на плацентата и синцитиализацията на човешките трофобласти. Изследователите използват тези клетки и за изучаване на поведението на трофобластните клетки, производството на хормони и транспорта на вещества през плацентата. Освен това, BeWo клетките намират приложение и в токсикологията, както и в проучванията на инфекциите и предаването на заболявания.
Тази статия обхваща основни познания за BeWo клетките, които могат да ви помогнат при работата с тях във вашите изследвания. Тя ще включва:
- Общи характеристики и произход на BeWo клетките
- Клетъчна линия BeWo: Информация за култивиране
- Предимства и недостатъци на клетъчната линия BeWo
- Приложения на BeWo клетките в научните изследвания
- Научни публикации, посветени на BeWo клетките
- Ресурси за клетъчната линия BeWo: протоколи, видеоклипове и др.
Общи характеристики и произход на BeWo клетките
Предварителните познания за произхода и общите характеристики на клетъчната линия са от решаващо значение за нейното използване във вашите изследвания. В тази част на статията се разглеждат произходът, характерните особености и много други аспекти на клетъчната линия BeWo. Тук ще научите: Какво представлява клетъчната линия BeWo от хориокарцином? Какво е синцитиализацията на BeWo? Откъде произхождат BeWo клетките? Каква е морфологията на BeWo клетките? Каква е плоидността на BeWo?
- Плацентарната клетъчна линия BeWo произхожда от злокачествен гестационен хориокарцином на плацентата на мъжки плод през 1968 г. [1]. По този начин тя служи като безценен модел за изследвания на плацентата.
- Клетките BeWo имат епителиална морфология.
- Клетките BeWo са относително малки, с размер между 20 и 30 µM [2].
- Клетките BeWo имат стабилен кариотип. Броят на хромозомите им е хипотетраплоиден. Модалният брой хромозоми на клетките BeWo е 86. Той може да варира от 71 до 178.
- BeWo клетките произвеждат няколко хормона, а именно човешки хорионгонадотропин, човешки хорионгонадотропин (hCG) и стероидни хормони.
- BeWo клетките експресират молекулни маркери, включително CK 7, E-кадхерин и VE-кадхерин.
Поджак B30
B30 е подлиния на BeWo клетките. Тя се използва за изследване на усвояването и транспорта на хранителни вещества. Това се дължи на техния бурен растеж върху порести мембрани.
BeWo и JEG-3
Клетъчните линии BeWo и JEG-3 са получени от хориокарциноми и се използват в изследвания на плацентата. Клетките BeWo произвеждат хормони в по-ниски нива от JEG-3, като човешки хорионгонадотропин (hCG) и естрадиол.
Клетъчна линия BeWo: Информация за култивиране
Поддържането на клетъчна култура може да бъде трудно, ако не знаете ключовите подробности. Например: Какво е времето за удвояване на BeWo? Каква е средата за култивиране на BeWo? Как се култивира клетъчната линия BeWo? И как се замразяват BeWo клетките?
Ключови моменти при култивирането на клетки BeWo
Време за удвояване:
Времето за удвояване на популацията на клетките BeWo е приблизително 30 часа.
Адхезивни или в суспензия:
BeWo е адхезивна клетъчна линия.
Плътност на засяване:
Препоръчителната плътност на засяване за BeWo клетките е 1 x 10⁴ клетки/cm². За засяването старата среда се отстранява от клетките, а клетките се промиват с 1x PBS. След това се добавя Accutase (разтвор за пасажиране) и клетките се инкубират в продължение на 8 до 10 минути при стайна температура. След това отделените клетки се смесват с културална среда и се центрофугират. Отделените клетки се ресуспендират и се прехвърлят в нова колба.
Среда за растеж:
За отглеждане на BeWo клетки се използва среда Ham's F12K, съдържаща 10% FBS, 2,0 mM L-глутамин, 2,0 mM натриев пируват и 2,5 g/L NaHCO3. Клетъчната среда за BeWo клетки трябва да се сменя 2 до 3 пъти седмично.
Условия за отглеждане:
Клетките BeWo се поддържат в овлажнен инкубатор, настроен на температура 37 градуса Целзий и с подаване на 5% CO₂.
Съхранение:
Замразените BeWo клетки се съхраняват при температура под -150 °C в електрически фризер за ултраниски температури или във фазата на пари на течен азот.
Процес на замразяване и среда:
Препоръчва се клетките BeWo да се замразяват в среда за замразяване CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват чрез метод на бавно замразяване. Този метод позволява понижение на температурата само с 1 градус на минута, като по този начин се предотвратява шок за клетките и се запазва тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:
Замразените клетки се размразяват чрез потапяне в предварително настроена водна баня при 37°C за 40 до 60 секунди, докато остане малък леден буцик. След това се добавя свежа културална среда и клетките се центрофугират, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда. Събраният клетъчен пелетен остатък се ресуспендира и се прехвърля в културална колба за отглеждане.
Ниво на биологична безопасност:
За работа с и поддържане на клетъчни култури BeWo е необходима лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.
Публикувано: 2023 г. | Последно актуализирано: май 2026 г.
- Предимства и недостатъци на клетъчната линия BeWo
- Приложения на BeWo клетките в научните изследвания
- Клетъчна линия BeWo: Информация за култивиране
- Общи характеристики и произход на BeWo клетките
- 5. Научни публикации, посветени на BeWo клетките
- Ресурси за клетъчната линия BeWo: протоколи, видеоклипове и др.
- Често задавани въпроси
Предимства и недостатъци на клетъчната линия BeWo
Клетките BeWo притежават уникални характеристики и имат специфични предимства и недостатъци. В тази секция ще разгледаме някои от най-важните от тях.
Предимства
Основните предимства на клетъчната линия BeWo от хориокарцином са:
-
Ин витро модел на плацентни клетки
Клетките BeWo предоставят in vitro модел за изучаване на поведението на трофобластните клетки и синцитиализацията на плацентата, като възпроизвеждат процеси, които са трудни за наблюдение in vivo.
-
Производство на хормони
Клетките BeWo секретират хормони, като hCG и плацентен лактоген, което ги прави ценни за проучвания на хормоналната регулация и изследвания в репродуктивната биология.
Недостатъци
Недостатъците на трофобластните клетки BeWo са:
-
Клетъчна линия от рак
BeWo клетките са получени от хориокарцином, който е плацентен тумор. Този произход може да не отразява напълно нормалната функция на плацентните клетки.
Приложения на BeWo клетките в научните изследвания
Клетъчната линия BeWo се използва широко в изследванията на плацентата. Тук са споменати няколко конкретни приложения на тази клетъчна линия:
- Изследвания, свързани с плацентата и бременността: Клетките BeWo са от ключово значение в изследванията, свързани с плацентата и бременността. Изследователите използват тези клетки, за да изучават транспорта на вещества, включително лекарства, хранителни вещества и токсини, през плацентарната бариера. Освен това те изследват и производството и регулирането на хормони, включително човешки хорионгонадотропин (hCG), плацентен лактоген и стероидни хормони. Това е важно за разбирането на хормоналните промени по време на бременността. Изследване, проведено през 2018 г., проучи ефекта на бромираните огнезащитни средства (BFR) върху активността на сулфотрансферазата в човешката трофобластна клетъчна линия (BeWo). Този ензим участва в регулирането на вътреклетъчните нива на тиреоидния хормон [3].
- Изследвания на инфекции и заболявания: Клетките BeWo се използват и за изследване на взаимодействието между патогени и плацентни клетки. Това изследване е ценно за разбирането на заболявания, които могат да се предават от майката на плода, и за разработването на стратегии за защита на здравето на плода. Освен това тази клетъчна линия помага на изследователите да проучват усложненията, възникващи по време на бременността, като прееклампсията. Например, проучване, проведено от Михалина Бралевска през 2023 г., използва модела на трофобластните клетки BeWo и установи, че както хромогранин А (CgA), така и пептидът, получен от него, катестатин (CST), могат да имат роля в сложния процес на патогенезата на прееклампсията (PE) [4]. В по-нататъшен план друго проучване изследва противораковия потенциал на трихосантина, като използва клетъчната линия на хориокарцином BeWo. Изследването също така положи допълнителни усилия за откриване на биомаркери чрез извършване на сравнителен протеомичен анализ преди и след експеримента [5].
5. Научни публикации, посветени на BeWo клетките
Ето някои значими научни публикации, посветени на трофобластните клетки BeWo.
Това проучване, публикувано в Frontiers in Bioscience-Landmark (2022), предлага, че AMPK сигнализацията активира митофагията в трофобластните клетки BeWo чрез FUNDC1 и PRKN-улеснени митофагични пътища. В резултат на това митофагията помага за поддържането на производството на АТФ и митохондриалния мембранен потенциал.
Тази статия е публикувана в Animal Cells and Systems (2020). Проучването предлага, че етилпарабенът медиира апоптозата на BeWo клетките чрез регулиране на каспаза 3 пътя.
Това проучване, публикувано в списанието „Drug Metabolism and Disposition“ (2023 г.), използва плацентни клетъчни линии, включително BeWo, JAR, JEG-3 и HTR-8/SVneo, за да изследва натрупването на ксенобиотици и стероиди в клетките.
Тази научна статия в списанието „International Journal of Molecular Medicine“ (2020 г.) предлага, че апелинът, лигандът на APJ рецептора, стимулира пролиферацията на BeWo клетките чрез APJ и ERK1/2, stat3 и AMPK сигнализация. По този начин той може да бъде основен адипокин, регулиращ развитието на плацентата.
Това проучване, публикувано в Epilepsia (2021), изследва ефектите на феталните хранителни вещества и антиепилептичните лекарства върху холиновите транспортери в човешката трофобластна клетъчна линия BeWo.
Ресурси за клетъчната линия BeWo: протоколи, видеоклипове и др.
Ето някои онлайн ресурси, достъпни за BeWo клетките:
- Трансфекция in vitro: Това видео ще ви помогне да научите протокола за трансфекция на плазмидна ДНК in vitro за адхезивни клетки.
Следният линк съдържа информация за клетъчната култура на BeWo клетките:
- Клетки BeWo: Този уебсайт съдържа основна информация за клетъчната култура на клетъчната линия BeWo. Тя включва информация относно клетъчните среди и условията за култивиране. Също така съдържа протоколи за субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.
Източници
- Weber, M., et al., Cytogenomics of six human trophoblastic cell lines. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Характеристики на трофобластите при дългосрочно култивиране. Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 2017. 164: стр. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt и H.M. Stapleton, Нарушаване на активността на тиреоидния хормон сулфотрансфераза от бромирани химикали за забавяне на горенето в човешката клетъчна линия на хориокарцином на плацентата, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: стр. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha и A. Sakowicz, Намаляване на нивото на CST протеина, произведен от CgA, в трофобластните клетъчни линии HTR-8/SVneo и BeWo, причинено от прееклампсична среда. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): стр. 7124.
- Hu, Y. и др., Сравнителен протеомичен анализ на добавянето на лекарството трихосантин към клетъчната линия BeWo. Molecules, 2022. 27(5): стр. 1603.