Отидете на началната страница

Публикувано: 2023 г. | Последно преразгледано: май 2026 г.

Човешки мезенхимни стволови клетки (HMSC)

Мезенхимните стволови клетки (MSCs) са стромални клетки, които се характеризират със способността си за самообновяване и забележителната способност да се диференцират в различни видове клетки. Това ги прави ценен инструмент в регенеративната медицина, тестването на лекарства и изследването на заболявания. Обикновено се получават от различни тъкани като пъпна връв, костен мозък и мастна тъкан. Въпреки това са открити и нови източници, като менструална кръв и ендометриум. Тези източници са предпочитани заради достъпността си и потенциалните клинични приложения [1].

  • 4. Изследвания на мезенхимните стволови клетки
  • 1. Общи характеристики на мезенхимните стволови клетки

    В тази секция ще бъдат разгледани общите свойства на мезенхимните стволови клетки, които включват:

    • Мултипотентност

      МСК са мултипотентни стволови клетки. Те имат способността да се диференцират в множество видове клетки, което ги прави ценен изследователски инструмент за регенеративната медицина.

    • Самообновяване

      Подобно на другите стволови клетки, мезенхимните стволови клетки притежават способност за самообновяване, като по този начин поддържат стабилен източник на стволови клетки за продължителен период от време.

    • Имуномодулиращ потенциал

      МСК оказват имуномодулиращо действие и затова се използват при лечението на различни автоимунни заболявания.

    • Имуногенност

      Като цяло МСК притежават ниски нива на имуногенност, което намалява риска от имунно отхвърляне при трансплантация. Въпреки това, това може да варира в зависимост от типа.

    • Наличност и достъпност

      МСК могат да бъдат изолирани от различни тъкани, включително костен мозък, мастна тъкан и тъкан от пъпната връв, което ги прави лесно достъпни за научни изследвания и терапевтични приложения.

     

    2. Информация за култивирането на мезенхимни стволови клетки

    За ефективното управление и работа с култури от мезенхимни стволови клетки е наложително да имате цялостно разбиране за следната информация за култивирането на МСК. Тези знания не само ще улеснят работата ви, но и ще ускорят напредъка на вашите научни изследвания.

    Ключови моменти при култивирането на мезенхимни стволови клетки

    Време за удвояване:

    Времето за удвояване на популацията варира при различните видове МСК. То може да варира от 15,8 до 41,9 часа [2].

    Прилепнали или в суспензия:

    Мезенхимните стволови клетки са адхезивни.

    Плътност на засяване:

    Препоръчителната плътност на засяване на МСК се поддържа между 1 и 3 x 104 клетки/cm2. За засяване клетките се изплакват с 1 x PBS (фосфатен буферен разтвор) и се инкубират с Accutase (разтвор за пасажиране) за приблизително 10 минути при стайна температура. След отделяне на клетките се добавя среда и клетките се центрофугират. След това клетъчният пелетен се ресуспендира внимателно и клетките се разпределят в нова културална колба, съдържаща свежа културална среда.

    Среда за растеж:

    Среда Alpha MEM, съдържаща 0,1 ng/ml bFGF (базов фибропластен растежен фактор), 2,0 mM стабилен глутамин, рибонуклеозиди, дезоксирибонуклеозиди, 1,0 mM натриев пируват и 2,2 g/L NaHCO3 се използва за култивиране на мезенхимни стволови клетки. Средата трябва да се сменя на всеки 2 до 3 дни. 

    Условия за растеж:

    Културите от мезенхимни стволови клетки се съхраняват в овлажнен инкубатор при температура 37ºC и 5% CO2.

    Съхранение:

    Мезенхимните стволови клетки могат да се съхраняват във фазата на пари на течен азот или при температура под -150 °C за по-дълъг период.

    Процес на замразяване и среда:

    За съхранение на мезенхимните стволови клетки се използват замразяващи среди CM-1 или CM-ACF. Обикновено се прилага процес на бавно замразяване, при който температурата се понижава само с 1 °C на минута. Това предпазва жизнеспособността на клетките.

    Процес на размразяване:

    Замразените МСК се потапят леко във водна баня, предварително настроена на 37 °C, за приблизително 60 секунди. След това се добавя свежа културална среда, клетките се ресуспендират и центрофугират. Тази стъпка премахва компонентите на замразяващата среда от клетките. Полученият клетъчен пелетен остатък се добавя към средата за растеж, а клетките се разпределят в нови колби за култивиране.

    Ниво на биологична безопасност:

    За работа с и поддържане на култури от мезенхимни стволови клетки се изисква лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

     

    3. Различни видове мезенхимни стволови клетки и техните основни характеристики

    Съществуват много видове мезенхимни стволови клетки, класифицирани според източника им. В тази част на статията се разглеждат три основни типа МСК.

    3.1 Мезенхимни стволови клетки, получени от мастна тъкан

    • Мезенхимните стволови клетки, получени от мастна тъкан (AD-MSCs), са вид мезенхимни стволови клетки, извлечени от мастна тъкан.
    • Те се срещат в изобилие в мастната тъкан, а процедурата по извличането им е относително лесна чрез минимално инвазивна процедура, наречена липосукция.
    • Те са по-малко склонни да предизвикат имунен отговор при алогенна трансплантация.
    • Тези клетки проявяват силен адипогенен потенциал, което означава, че имат висока тенденция към диференциация в адипоцити (мастни клетки) в сравнение с други видове мезенхимни стволови клетки.

    HMSC.AD 1

    Човешки мезенхимни клетки от мастна тъкан (HMSC.AD) при 10-кратно увеличение в клетъчна култура MSC-2 и среда за адипогенна диференциация, оцветени с Oil-Red-O, което подчертава триглицеридите като маркер за адипоцитите.

    Мезенхимни стволови клетки, извлечени от костния мозък

    • Мезенхимните стволови клетки, извлечени от костния мозък (BM-MSCs), се събират от костния мозък, обикновено взет от тазобедрената и бедрената кост. Тези нехематопоетични клетки са открити през 1970 г. от А.Дж. Фриденщайн.
    • Процедурата за извличане на BM-MSCs е болезнена и по-инвазивна, например аспирация на костен мозък.
    • Трансплантацията на мезенхимни стволови клетки от костния мозък изисква точно съвпадение с реципиента, за да се намали рискът от имунно отхвърляне.
    • BM-MSCs притежават остеогенен потенциал. Те имат по-силна склонност към диференциация в остеоцити, т.е. костни клетки.

    HMSC.AD 2

    При 40-кратно увеличение – клетки, преминаващи през остеогенна диференциация, оцветени с ализарин-червено-S за визуализиране на калциевите отлагания, и при същото увеличение – клетки, преминаващи през адипогенна диференциация, оцветени с Oil-Red-O.

    Публикувано: 2023 г. | Последно актуализирано: май 2026 г.

    Мезенхимни стволови клетки, получени от пъпна връв

    • Стволовите клетки, извлечени от пъпната връв (UC-MSCs), се получават от тъканта на пъпната връв.
    • Тъканта на пъпната връв е лесно достъпна за извличане на стволови клетки след раждането.
    • Подобно на BM-MSCs, стволовите клетки от пъпната връв също изискват HLA съвместимост между реципиент и донор за трансплантация, за да се избегне имунна реакция.
    • Те проявяват по-висока склонност към невронална диференциация и следователно са ценни инструменти за неврологични изследвания.

    4. Изследователски приложения на мезенхимните стволови клетки

    Мезенхимните стволови клетки (MSCs) се използват широко в биомедицинските изследвания поради значителния си терапевтичен потенциал. В тази секция са споменати няколко обещаващи приложения на различни видове MSC.

    📋 Клетъчна линия HMSC — кратки факти
    Среда за растеж
    Среда Alpha MEM, съдържаща 0,1 ng/ml bFGF (базов фибропластен растежен фактор), 2,0 mM стабилен глутамин, рибонуклеозиди, дезоксирибонуклеозиди, 1,0 mM натриев пируват и 2,2 g/L NaHCO3 се използва за култивиране на мезенхимни стволови клетки. Средата трябва да се сменя на всеки 2 до 3 дни.
    Време за удвояване
    Времето за удвояване на популацията варира при различните видове МСК. То може да варира от 15,8 до 41,9 часа [2].
    Тип растеж
    Мезенхимните стволови клетки са адхезивни.
    Ниво на биологична безопасност
    BSL-1
    • Изследвания в областта на регенеративната медицина: Мезенхимните стволови клетки са мултипотентни клетки; те имат потенциал да се диференцират в различни видове клетки, като хрущялни, костни, мускулни и мастни клетки. Поради това те се прилагат като регенеративна медицина за възстановяване и заместване на увредени или повредени тъкани. Регенеративните приложения на МСК се наблюдават предимно при увреждания на кожата, костите и опорно-двигателния апарат. Например, проучване, проведено от Хелена Дебиази Зомер и колеги през 2020 г., установи, че мезенхимните стволови клетки, получени от мастна тъкан (AD-MSC), са в състояние да ускорят заздравяването на кожни рани при мишки. Те стимулират ангиогенезата и ремоделирането на екстрацелуларния матрикс, за да се получи белег с по-добро качество, наподобяващ нормална здрава кожа, в сравнение с контролната група [3]. Изследванията са наблюдавали и свойствата за възстановяване на костни дефекти на мезенхимните стволови клетки, получени от пъпната връв. Те оказват възстановителен ефект, като стимулират ангиогенезата, остеокластогенезата и мобилизацията на MSC на приемника или се диференцират в остеобластоподобни клетки [4].
    • Заболявания/разстройства на имунната система: Мезенхимните стволови клетки оказват имуномодулиращо действие. Те имат тенденция да регулират имунните реакции и да намаляват възпалението. Поради това се използват за лечение на автоимунни заболявания, т.е. ревматоиден артрит, множествена склероза, възпалителни заболявания на червата и др. В едно проучване е изследван имуномодулиращият ефект на мезенхимните стволови клетки, получени от костен мозък, върху Т-клетките в периферната кръв, извлечени от пациенти с ревматоиден артрит. Клетките BM-MSC оказват инхибиторен ефект върху Т-клетките и потискат цитокините, участващи във физиопатологията на ревматоидния артрит [5].
    • Неврологични и сърдечно-съдови изследвания: МСК притежават значителен потенциал за приложения в неврологичните и сърдечно-съдовите изследвания. Те се използват за лечение на няколко невродегенеративни заболявания, включително болестта на Паркинсон и Алцхаймер. Освен това, те се използват при лечението на сърдечно-съдови заболявания, тъй като възстановяват увредените или наранени сърдечни тъкани след сърдечни събития. Освен това МСК също стимулират ангиогенезата и по този начин са ценни в сърдечно-съдовите изследвания. Едно такова проучване изследва терапевтичния потенциал на мезенхимните стволови клетки, извлечени от мастна тъкан и костен мозък, в модел на остър миокарден инфаркт (МИ). Проучването установи, че и двата източника са еднакво полезни за регенерирането на сърдечни тъкани и намаляването на фиброзата [6]. Интересно е, че проучване, проведено през 2022 г., установи, че мезенхимните стволови клетки, извлечени от човешката пъпна връв (UC-MSCs), оказват невропротективно действие в миши модели на болестта на Паркинсон чрез регулиране на чревните микроорганизми. Мишият модел показа подобрена двигателна функция след интраназална трансплантация на UC-MSCs [7].

    Източници

    1. Ding, D.C., W.C. Shyu и S.Z. Lin, Мезенхимни стволови клетки. Cell Transplant, 2011. 20(1): стр. 5-14.
    2. Zhan, X.-S., et al., Сравнително проучване на биологичните характеристики и транскриптомните профили на мезенхимните стволови клетки от различни кучешки тъкани. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): стр. 1485.
    3. Zomer, H.D., et al., Мезенхимните стромални клетки от дермални и мастни тъкани индуцират поляризация на макрофагите към фенотип, благоприятстващ възстановяването, и подобряват заздравяването на кожни рани. Cytotherapy, 2020. 22(5): стр. 247-260.
    4. Косински, М., и др., Възстановяване на костни дефекти с помощта на костен заместител, подкрепен от мезенхимни стволови клетки, извлечени от пъпната връв. Stem Cells International, 2020. 2020.
    5. Pedrosa, M., et al., Имуномодулиращ ефект на мезенхимни стромални/стволови клетки, извлечени от човешка костна мозък, върху Т-клетките в периферната кръв на пациенти с ревматоиден артрит. Journal of tissue engineering and regenerative medicine, 2020. 14(1): стр. 16-28.
    6. Omar, A.M., et al., Сравнително проучване на терапевтичния потенциал на мезенхимните стволови клетки, получени от мастна тъкан и костен мозък, върху модел на остър миокарден инфаркт. Oman Med J, 2019. 34(6): стр. 534-543.
    7. Sun, Z., et al., Мезенхимните стволови клетки от човешката пъпна връв подобряват двигателната функция в миши модел на болестта на Паркинсон чрез регулиране на чревните микроорганизми. Frontiers in Cell and Developmental Biology, 2022. 9: стр. 808905.

     

    Установихме, че се намирате в друга държава или използвате друг език на браузъра, различен от избрания в момента. Искате ли да приемете предложените настройки?

    Затвори