Клетъчна линия Neuro-2a

Neuro-2a е невронна клетъчна линия, управлявана от мишка, която се използва широко в неврологичните изследвания. Основно тези клетки се използват за изследване на невронното развитие, диференциацията, невротоксичността, пътищата на клетъчните сигнали и аксоналния растеж. Освен това те се използват за разработване на лекарства и за скрининг.

Тази статия се фокусира върху важни аспекти на невробластомните клетки Neuro-2a, които могат да ви помогнат, преди да започнете работа с тях. В нея ще бъдат разгледани главно:

Общи характеристики и произход на клетките Neuro-2a
Информация за култивирането на клетъчна линия Neuro-2a
Предимства и недостатъци на клетъчната линия Neuro-2a
Изследователски приложения на клетъчната линия Neuro-2a
Изследователски публикации с участието на Neuro-2a клетки
Ресурси за Neuro-2a клетки: Протоколи, видеоклипове и др

1. Общи характеристики и произход на клетките Neuro-2a

В тази част на статията ще бъдат разгледани предисторията и основните характеристики на клетъчната линия Neuro-2a, които е важно да се знаят, преди да се работи с нея. Тук ще научите: Какво представлява клетъчната линия Neuro-2a? Какъв е произходът на клетъчната линия Neuro-2a? Какво представлява клетъчната диференциация на Neuro-2a? Какъв е размерът на Neuro-2a клетка? Каква е морфологията на клетките Neuro-2a?

Клетките Neuro-2a произхождат от спонтанен тумор (невробластом) на мишка албинос (щам А). Клетъчната линия е създадена от R.J. Klebe и F.H. Ruddle.
Невробластомните клетки Neuro-2a показват морфология на невронни и амебоидни стволови клетки.
Размерът на клетките Neuro-2a е 12 микрометра на височина [1].
Броят на хромозомите на клетките Neuro-2a може да варира от 59 до 193, като модалният брой е 95. Кариотипът на тези невробластомни клетки е нестабилен в границите от 94 до 98 хромозоми.

Илюстрирана е невронната сигнализация: 3D представяне на освобождаването на невротрансмитер в синаптичната празнина от пресинаптичния неврон, предизвикано от приток на Ca2+, което води до активиране на йонните канали и приток на Na+ в постсинаптичния неврон.

2. Информация за култивирането на клетъчната линия Neuro-2a

Клетките Neuro-2a се използват широко в лабораториите за неврологични изследвания. Преди да работите с тези клетки, трябва да научите задължителната информация за култивиране на клетки, посочена по-долу. Това може да ви помогне да се справите лесно с тях. Ще знаете: Какво представлява клетъчната среда за култивиране на Neuro-2a? Как се култивират клетки Neuro-2a? Какво е времето за удвояване на клетките Neuro-2a? Каква е гъстотата на посяване на Neuro-2a? Какъв е протоколът за култивиране на клетки Neuro-2a? Каква е клетъчната среда Neuro-2a?

Ключови моменти при култивирането на клетки Neuro-2a

Време за удвояване:	Времето за удвояване на клетките Neuro-2a е приблизително 70 часа.
Прилепнали или в суспензия:	Neuro-2a е адхезивна клетъчна линия.
Гъстота на засяване:	Оптимизираната гъстота на посяване на клетките за клетъчната линия Neuro-2a е 1 x¹⁰⁴ ^{клетки/cm2}. За посяването клетките се промиват с безмагнезиев и безкалциев фосфатен буферен физиологичен разтвор (1x). По-късно се добавя разтвор за пасиране (Accutase) и клетките се инкубират за 8 до 10 минути при стайна температура. След дисоциацията на клетките се добавя свежа среда и клетките се центрофугират. Събраната клетъчна пелета се ресуспендира внимателно и клетките се изсипват в култивационен съд за растеж.
Среда за растеж:	За култивирането на клетките Neuro-2a се използва ЕМЕМ. Тя съдържа 10% FBS, 2 mM L-глутамин, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM натриев пируват и NEAA за идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се подменя 1 до 2 пъти седмично.
Условия за растеж:	Културите Neuro-2a се поддържат в овлажнен инкубатор с температура 37 °C, свързан с 5 % CO2.
Съхранение:	Клетките трябва да се съхраняват дългосрочно при температура под -150 °C в електрически фризер за ултраниски температури или в парната фаза на течен азот.
Процес на замразяване и среда:	За замразяване на клетките Neuro-2a се използват среди CM-1 или CM-ACF. Клетките се замразяват чрез бавен процес на замразяване, който позволява спадане на температурата само с 1 °C в минута. Това предпазва клетките от шок и запазва тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:	За да се размразят замразените култури, флаконът се поставя на водна баня с температура 37 °C за 40 до 60 секунди, докато остане само малка бучка лед. След това се добавя хранителна среда и клетките се подлагат на центрофугиране. Тази стъпка помага за отстраняване на компонентите на замразяващата среда. След това клетъчната пелета се ресуспендира и клетките се прехвърлят в нова колба, пълна с хранителна среда. След това клетките се поставят в инкубатор при 37 °C за минимум 24 часа.
Ниво на биологична безопасност:	Лабораторните условия на ниво на биологична безопасност 1 са задължителни за работа и поддържане на културите Neuro-2a.

Микроскопска снимка на ранна пасаж от адхерирани невробластомни клетки Neuro 2a, изобразяваща морфологията им при 10-кратно и 20-кратно увеличение.

3. Предимства и недостатъци на клетъчната линия Neuro-2a

Клетките Neuro-2a притежават някои предимства и недостатъци, които ги отличават от други невронни клетъчни линии. Тук са изброени някои забележителни предимства и недостатъци на тези клетки.

Предимства

Предимствата на клетъчната линия Neuro-2a от миши невробластом са:

Лесни за поддържане
Клетъчната линия Neuro-2a не е свързана със сложни или заплетени процедури за култивиране на клетки. Те са лесни за култивиране и поддържане в изследователски лаборатории.
Ин витро модел на невронни клетки
Neuro-2a е удобен модел на невронни клетки, който се използва широко от изследователите при проучвания на развитието и диференциацията на невроните.

Недостатъци

Недостатъците на клетките Neuro-2a са:

Произход от мишки
Невро-2а е с миши произход и изследователите трябва да бъдат предпазливи при екстраполирането на резултатите от проучвания, базирани на мишки, към човешкото здраве и болести, тъй като биологията на мишките и човека може да се различава значително.

4. Изследователски приложения на клетъчна линия Neuro-2a

Клетките Neuro-2a предлагат много приложения в областта на неврологичните изследвания. Тук са разгледани няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия:

Невронно развитие: Neuro-2a е in vitro модел на невронни клетки, който се използва широко за изследване на невронното развитие и свързаните с него процеси, като диференциация, аксонален растеж и образуване на синапси. В проучване, проведено през 2020 г., са използвани клетки Neuro-2a за изследване на ролята на микроРНК-124 в индуцираната от ретиновата киселина диференциация на невронните клетки [2]. В друго проучване е изследвана експресията на рецептора за ретиноидна киселина гама (RARG) и миРНК-124 в клетъчната линия на невробластома (N2A) Neuro 2a. В това проучване се предлага, че RARG е таргет на miR-124 и потиска невронния растеж [3].
Невротоксичност: Neuro-2a се използва и за оценка на токсичните ефекти на лекарства, химикали или фактори на околната среда върху невронните клетки. Например в проучване, проведено от Zhihong Yin и колегите му, е изследвана невротоксичността на бисфенол А (BPA), химикал от околната среда, като са използвани клетки Neuro-2a. Те наблюдават, че BPA потиска диференциацията и пролиферацията на невронните клетки, като нарушава тяхната клетъчна и синаптична цялост [4].
Скрининг на лекарства: Невро-2а клетките се използват и за оценка на терапевтичната активност на редица лекарства, съединения и природни продукти. Например в едно проучване са използвани Neuro-2a клетки и е изследван антиоксидантният потенциал на растителен екстракт от Гинко билоба. Нещо повече, изследването предлага той да предизвиква намаляване на агрегацията на Aβ и може да бъде потенциално средство за лечение на болестта на Алцхаймер [5].

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 400394

5. Научни публикации с участието на клетки Neuro-2a

Ето някои интересни научни статии с участието на клетъчната линия Neuro-2a.

Пипериноподобни алкамиди от Piper nigrum индуцират промотора на BDNF и насърчават израстването на неврити в Neuro-2a клетки

Това проучване в Journal of Natural Medicines, 2018 г. изследва терапевтичните ефекти на алкамиди, изолирани от бял пипер (P. nigrum), върху невронни клетки Neuro-2a.

Намаляването на регулацията на Nkx2. 1 участва в мозъчните аномалии, предизвикани от излишък на ретиноева киселина

В това изследване в Acta Biochimica et Biophysica Sinica, 2020 г. се предлага, че генът Nkx2.1 играе важна роля в развитието на мозъка на мишки чрез регулиране на сигналната каскада Shh.

Излагането на бисфенол А предизвиква невротоксичност, свързана със синаптична и цитоскелетна дисфункция в клетките на neuro-2a

Статията е публикувана в Toxicology and Industrial Health (2023) и в нея се предлага, че екологичният химикал бисфенол А, предизвиква невротоксичност в невро-2а клетки и нарушава тяхната синаптична и цитоскелетна дисфункция.

Модулацията на хексарелина на MAPK и PI3K/Akt пътищата в клетките Neuro-2A инхибира апоптотичната токсичност, предизвикана от водороден пероксид

В тази статия в списание Pharmaceuticals (2021) се предлага лекарството хексарелин да модулира PI3K/AKT и MAPK каскадата в клетките на невробластома (Neuro-2a) и да инхибира апоптозата, предизвикана от водороден пероксид в клетките на Neuro-2a.

Етаноловият екстракт от плодове на Emblica officinalis потиска невровъзпалението в микроглия и насърчава израстването на неврити в клетки Neuro2a

В тази научна статия в Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2021) се предлага, че плодовият екстракт от Emblica officinalis потиска невровъзпалението в Neuro-2a клетки и по този начин може да бъде полезен при невровъзпалителни заболявания.

6. Ресурси за Neuro-2a клетки: Протоколи, видеоклипове и др

По-долу са посочени наличните онлайн ресурси за клетките Neuro-2a. Те включват протокол за култивиране и трансфекция на клетки Neuro-2a.

Протокол за трансфекция на Neuro-2a: Neuro-2a е подходящ гостоприемник за трансфекция. Този линк ще ви даде насоки относно протокола за трансфекция на клетъчната линия. Ефективността на трансфекцията на Neuro 2a варира в зависимост от реактива.

Следващият линк съдържа протокола за клетъчно култивиране на Neuro-2a.

Протокол за клетъчна култура Neuro-2a: Този линк ще ви помогне да научите протокола за субкултивиране на клетките Neuro 2a.
Невро-2а клетки: Уебсайтът съдържа изчерпателни познания за средите за Neuro-2a клетки, плътността на посяване и протоколите за субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури.

Препратки

Lulevich, V., et al., Single-cell mechanics provides a sensitive and quantitative means for probing amyloid-beta peptide and neuronal cell interactions (Механиката на една клетка осигурява чувствително и количествено средство за изследване на взаимодействията между амилоид-бета пептид и невронни клетки). Proc Natl Acad Sci U S A, 2010 г. 107(31): p. 13872-7.
You, Q., et al., Role of miR-124 in the regulation of retinoic acid-induced Neuro-2A cell differentiation. Neural Regen Res, 2020. 15(6): p. 1133-1139.
Su, X., et al., Retinoic acid receptor gamma is targeted by microRNA-124 and inhibits neurite outgrowth (Рецепторът на ретиновата киселина гама е таргетиран от микроРНК-124 и инхибира невронния растеж). Neuropharmacology, 2020 г. 163: p. 107657.
Yin, Z., et al., Bisphenol-A exposure induced neurotoxicity and associated with synapse and cytoskeleton in Neuro-2a cells (Експозицията на бисфенол-А предизвиква невротоксичност и е свързана със синапса и цитоскелета в клетките Neuro-2a ). Токсикология in Vitro, 2020 г. 67: p. 104911.
Chen, L., et al., Gingko biloba extract (EGb) inhibits oxidative stress in neuro 2A cells overexpressing APPsw. BioMed research international, 2019. 2019.