Клетки NIH-3T3: Напредък в изследванията на фибробластите и приложенията на NIH-3T3

Клетъчната линия NIH-3T3, създадена от тъкан на 17-дневен ембрион на швейцарска мишка албинос през 1962 г. от Хауърд Грийн и Джордж Тодаро в Медицинското училище на Нюйоркския университет, се превърна в основен ресурс в биомедицинските изследвания. Признати заради високата си възприемчивост към образуване на огнища на левкемичен вирус и саркома вирус, клетките NIH-3T3 служат като важен инструмент за множество научни изследвания, включително вирусни онкологични проучвания, анализ на генната експресия и изследване на динамиката на клетъчния растеж. Номенклатурата "3T3" отразява метода на клетъчно култивиране, като обозначава интервал от "3 дни трансфер" с първоначална плътност на посявка от 3 × 10^5 клетки, подчертавайки стандартизираните условия, при които тези клетки са били култивирани и разширени за първи път.

Разнообразни морфологии и приложения на клетките NIH-3T3

Една от отличителните характеристики на клетките NIH-3T3 е тяхната морфологична адаптивност, която варира значително в зависимост от слятостта на културата. При по-ниска плътност тези фибробласти показват вретеновидна, единична клетъчна структура, която се превръща в плътни, вихрови модели, когато популацията достигне срастване. Със среден диаметър от около 18 μm клетките NIH-3T3 предлагат универсален модел за задълбочени изследвания в областта на клетъчната биология, вариращи от механизмите за възстановяване на тъкани до сложните пътища за регулиране на клетъчния цикъл.

Информация за култивиране

Швейцарска мишка албинос в лаборатория.

Плюсове и минуси при използването на клетки NIH 3T3

Предимства

• Ефективност на трансфекцията: Клетките NIH 3T3 са известни с високата си скорост на трансфекция и са подходящи както за преходни, така и за стабилни изследвания на генната експресия, като могат да се използват различни техники за трансфекция.

• Полезност на захранващия слой: Тези клетки често служат като поддържащ захранващ слой за ко-култури с клетки като кератиноцити и стволови клетки, благодарение на отделяните от тях растежни фактори, които насърчават растежа на ко-културираните клетки.

• Изследване настволови клетки : Клетките NIH-3T3 са предпочитан избор в изследванията на стволови клетки, тъй като индуцират плурипотентност без генетична модификация и осигуряват благоприятна среда за диференциране на стволовите клетки.

• Стабилност на културата: Клетките NIH-3T3 са известни със своята стабилност и ниска честота на спонтанна трансформация. Въпреки това при определени условия или след излагане на специфични онкогени или мутагени NIH-3T3 клетките могат да претърпят спонтанна трансформация. Тази трансформация може да доведе до придобиване на ракови свойства, като неконтролиран растеж, загуба на контактно инхибиране и способност за образуване на тумори, когато се инжектират в чувствителни гостоприемници.

Недостатъци

• Непостоянен размер на клетките: Продълговатата, подобна на вретено морфология на клетките NIH-3T3 може да варира, което усложнява анализа на изображенията в тестовете.

• Възприемчивост към инфекции: Тези клетки са податливи на бактериални и микоплазмени инфекции, ако не се поддържат при строги асептични условия, което може да повлияе на целостта на експеримента.

Научни приложения на клетките NIH-3T3

• Изследвания за трансфекция на ДНК: Здравината на клетките NIH-3T3 ги прави идеални за въвеждане и изследване на функцията на различни гени, което се демонстрира при изследвания, изследващи протеини като NAB2-STAT6 и тяхната роля в клетъчните процеси.

• Клетъчни изследвания: Тяхната надеждност се разпростира върху различни тестове, включително тестове за жизнеспособност, апоптоза и образуване на огнища, предлагайки поглед върху клетъчните реакции при различни експериментални условия.

• Изследване на клетъчния цикъл: Клетъчната линия може лесно да манипулира клетъчния цикъл чрез серумните нива, което я прави мощен модел за изследване на регулацията на клетъчния цикъл и неговите отклонения в контекста на заболяванията.

Подобрете изследванията си с клетки NIH-3T3

Изтъкване на ключови проучвания, включващи фибробластната клетъчна линия NIH 3T3

Клетъчната линия NIH-3T3 е била ключова в многобройни изследователски проекти, обхващащи различни аспекти на клетъчната биология. По-долу са представени някои значими проучвания, в които са използвани тези клетки:

• Изследване на синтезния протеин NAB2-STAT6: Това изследване, публикувано в Biochemical and Biophysical Research Communications, разглежда как NAB2-STAT6 фюжън протеинът влияе върху клетките на NIH-3T3, по-специално ролята му за увеличаване на клетъчния растеж и миграция чрез регулиране на EGR-1
• Изследване на APOBEC3 и вируса на левкемията по мишките: Това изследване в списание Virology разглежда хипермутацията на вируса на мишия левкемичен вирус AKV в клетки NIH-3T3, експресиращи мишия ген APOBEC3
• Оценка на антиметастатичния потенциал на епигенетичните лекарства: В Oncotargets and Therapy това проучване оценява антиметастатичните ефекти на хидралазин и валпроева киселина върху RAS-трансформирани NIH-3T3 клетки
• Въздействие на байкалеина върху пролиферацията и синтеза на колаген в NIH-3T3: В това изследване се използват клетки NIH-3T3, за да се проучи как байкалеинът влияе върху клетъчната пролиферация и производството на колаген чрез модулация на оста miR-9/инсулиноподобен растежен фактор-1
• Изследване на изчерпването на рибофлавина и туморигенезата: Това проучване представя резултати за това как недостигът на рибофлавин в клетките NIH-3T3 допринася за туморогенезата чрез насърчаване на клетъчната пролиферация и дисрегулиране на гените на клетъчния цикъл

Основни ресурси за изследване на клетки NIH-3T3

За изследователите, които се интересуват от работа с NIH-3T3 клетки, са налични разнообразни ресурси, които да насочват култивирането и експерименталните протоколи:

• Формиране на сфероиди в клетки NIH-3T3: Този видеоклип предоставя подробна информация за формирането на сфероиди - техника за 3D клетъчно култивиране, която обединява NIH-3T3 клетките в клъстери, предлагайки по-физиологичен модел за изследвания
• Мониторинг на растежа на NIH-3T3 клетките: Това видео заснема динамиката на растежа на клетките NIH-3T3 в продължение на 65 часа, демонстрирайки клетъчната пролиферация в реално време

Тези ресурси имат за цел да подпомогнат вашите изследователски начинания с клетки NIH-3T3, като осигурят основа за успешни експерименти и открития.

Препратки

1. Rahimi, A.M., M. Cai, and S. Hoyer-Fender, Heterogeneity of the NIH3T3 Fibroblast Cell Line. Cells, 2022. 11(17): p. 2677.
2. Leibiger, C., et al., Първо молекулярно-цитогенетично характеризиране с висока резолюция на клетъчната линия NIH 3T3 чрез мишия многоцветен бандинг. Списание за хистохимия и цитохимия, 2013. 61(4): p. 306-312.
3. Wang, H.-X., et al., Comparative analysis of different feeder layers with 3T3 fibroblasts for culturing rabits limbal stem cells (Сравнителен анализ на различни захранващи слоеве с фибробласти 3T3 за култивиране на лимбални стволови клетки на зайци ). Международно списание по офталмология, 2017 г. 10(7): p. 1021.
4. Wang, Z., et al., Differentiation of neuronal cells from NIH/3T3 fibroblasts under defined conditions (Диференциране на невронни клетки от фибробласти NIH/3T3 при определени условия ). Развитие, растеж и диференциация, 2011 г. 53(3): p. 357-365.
5. Park, Y.-S., et al., NAB2-STAT6 fusion protein mediates cell proliferation and oncogenic progression via EGR-1 regulation (Фюжън протеин NAB2-STAT6 медиира клетъчната пролиферация и онкогенната прогресия чрез регулацията на EGR-1). Съобщения за биохимични и биофизични изследвания, 2020. 526(2): p. 287-292.
6. Mattsson, M., Expression of the Sloppymerase™ in NIH/3T3 Cells (Експресия на Sloppymerase™ в клетки NIH/3T3): Изследване на гъвкавостта на една склонна към грешки полимераза за сливане. 2021.
7. Sahinturk, V., et al., Acrylamide exerts its cytotoxicity in NIH/3T3 fibroblast cells by apoptosis (Акриламидът проявява своята цитотоксичност в NIH/3T3 фибробластни клетки чрез апоптоза ). Токсикология и индустриално здраве, 2018 г. 34(7): p. 481-489.
8. Lusi, E.A. and F. Caicci, Discovery of the First Human Retro-Giant Virus (Откриване на първия човешки ретро-гигантски вирус): Описание на неговата морфология, ретровирусна киназа и способност да предизвиква тумори при мишки. bioRxiv, 2019: p. 851063.
9. Endo, M., et al., E2F1-Ror2signaling mediates coordinated transcriptional regulation to promote G1/S phase transition in bFGF-stimulatedNIH/3T3 fibroblasts ( E2F1-Ror2сигнализацията медиира координирано транскрипционно регулиране за насърчаване на G1/S фазовия преход в стимулираниотbFGFфибробласти). The FASEB Journal, 2020. 34(2): p. 3413-3428.
10. Long, L., et al., Riboflavin Depletion Promotes Tumorigenesis in HEK293T and NIH3T3 Cells by Sustaining Cell Proliferation and Regulating Cell Cycle-Related Gene Transcription (Изчерпването на рибофлавина насърчава туморигенезата в клетките HEK293T и NIH3T3 чрез поддържане на клетъчната пролиферация и регулиране на транскрипцията на гени, свързани с клетъчния цикъл). The Journal of Nutrition, 2018. 148(6): p. 834-843.