Клетъчна линия INS-1

INS-1 е добре характеризирана инсулиномна клетъчна линия на плъх, широко използвана в изследванията на диабета. Клетките INS-1 секретират инсулин при стимулиране с глюкоза; поради това те се използват за изследване на метаболизма на глюкозата, физиологията на бета-клетките и регулирането на инсулиновата секреция. Освен това тези клетки се използват и за скрининг, тестване и разработване на потенциални терапевтични средства срещу захарен диабет.

Тази статия ще ви предостави цялата необходима информация за бета-клетките INS-1, която трябва да знаете, преди да ги използвате във вашите изследвания. Ще научите главно следното:

Общи характеристики и произход на INS-1 клетките
Клетъчна линия INS-1: Информация за култивирането
Предимства и недостатъци на клетъчната линия INS-1
Изследователски приложения на INS-1 инсулиномни клетки на плъхове
Изследователски публикации с участието на бета-клетки INS-1
Ресурси за клетъчна линия INS-1: Протоколи, видеоклипове и др

1. Общи характеристики и произход на клетките INS-1

Познаването на общите характеристики и произхода на дадена клетъчна линия може значително да ви помогне да я използвате ефикасно и ефективно във вашите изследвания. Този раздел от статията ще ви информира за произхода и общите характеристики на INS-1. Ще научите: Какво представлява клетъчната линия INS-1 за инсулином на плъх? Какви са общите характеристики на INS-1? Какво представлява клетъчната линия INS-1 832/3? Какво представлява INS-1E?

Клетките INS-1 първоначално са изолирани от 666-дневен плъх с рентгеново индуциран трансплантируем инсулином.
Клетките INS-1 са двухормонални. Те експресират едновременно инсулинови и проглюкагонови протеини. Тези клетки се считат за незрели, тъй като показват ниски нива на експресия на транскрипционния фактор Nkx6.1 и са лишени от алфа клетъчни маркери [1].
Съществуват два подклона на клетките INS-1, т.е. INS-1E и INS-1 832/3.
INS-1E се различава от майчината клетъчна линия INS-1 по отношение на реакциите на секретарите към глюкозата и съдържанието на инсулин.
INS-1 832/3 или INS-1 832/13 също е подклон на клетъчната линия INS-1. Тя е безценен модел за изучаване на функцията на бета-клетките на панкреасните островчета и регулирането на инсулиновата секреция. Тя също така се различава от родителските клетки INS-1 в контекста на стимулираната с глюкоза секреция на инсулин (GSIS).

3D моделиране на инсулин-медиираното усвояване на глюкоза.

2. Клетъчна линия INS-1: Информация за култивиране

За да работите ефективно и да поддържате клетъчна линия, трябва да знаете следната информация за култивирането ѝ. В този раздел на статията ще бъдат разгледани всички ключови моменти за култивирането на клетките INS-1: Как се култивират бета-клетките INS-1? Какво представлява протоколът за култивиране на клетките INS-1? Какво е времето за удвояване на клетките INS-1? Каква е хранителната среда за INS-1 инсулиномни клетки на плъхове?

Ключови моменти за култивиране на клетките INS-1

Време за удвояване:	Времето за удвояване на популацията на INS-1 клетките е приблизително 44 часа.
Прилепнали или в суспензия:	Клетките INS-1 растат както в суспензия, така и в адхезивна форма.
Съотношение на субкултивиране:	Клетките INS-1 се субкултивират в съотношение 1:3. Накратко, суспендираните клетки се събират. Адхезивните клетки се изплакват с PBS и се инкубират с разтвора на Accutase. След отделянето на клетките се добавят свежи среди. След това суспендираните и адхезивните клетки се центрофугират и събират. Клетките се ресуспендират внимателно и се разпределят в нови колби за растеж.
Растежна среда:	RPM1 1640 се използва за култивиране на инсулиномната клетъчна линия INS-1rat. Средата се допълва с 10% топлинно инактивиран фетален говежди серум, 2,1 mM стабилен глутамин, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 и 1 mM натриев пируват.
Условия за растеж:	Клетките INS-1 се държат в овлажнен инкубатор при температура 37 °C и непрекъснато подаване на 5 % CO2.
Съхранение:	INS-1 бета-клетките могат да се съхраняват в парната фаза на течен азот или при температура под -150 °C в електрически фризер за дълъг период от време.
Процес на замразяване и среда:	За замразяване на клетките INS-1 чрез бавен процес на замразяване се използват среди CM-1 или CM-ACF. Тя позволява само 1 °C спад на температурата в минута, за да се защити жизнеспособността на клетките.
Процес на размразяване:	Замразените INS-1 клетки се размразяват на водна баня, предварително настроена на 37 градуса по Целзий за 40 до 60 секунди. След размразяването клетките се добавят с прясна среда и се изсипват директно в нова колба за растеж. След 24 часа средата се заменя, за да се отстранят компонентите на замразяващата среда.
Ниво на биологична безопасност:	За култивиране на инсулиномни клетки INS-1 на плъх се изисква лаборатория с ниво на биологична безопасност 1.

Клетки INS-1, растящи в островчетата, при увеличение 10x и 20x.

3. предимства и недостатъци на клетъчната линия INS-1

Подобно на други клетъчни линии, INS-1 също притежава някои отличителни характеристики, свързани с определени предимства и недостатъци. Тук сме посочили няколко важни от тях.

Предимства

Основните предимства на клетъчната линия INS-1 са:

Добре характеризирана
INS-1 е утвърдена и добре характеризирана клетъчна линия. Тя е използвана в многобройни научни изследвания. Тя запазва фенотипните си характеристики и способността си за секреция на инсулин за по-дълъг период от време, като по този начин осигурява надеждни и последователни експериментални резултати.
Модел на бета клетки
Клетките INS-1 се използват за изследване на функцията на бета-клетките на панкреасните острови, тъй като те отделят инсулин и реагират на колебанията в нивата на глюкозата.

недостатъци

Недостатъците на INS-1 клетките са:

Нечовешки произход
Бета-клетките INS-1 нямат човешки произход. Те са получени от инсулином на плъх. Това може да доведе до видово специфични различия и да ограничи директното пренасяне на експерименталните резултати към човешката физиология.

4. Изследователски приложения на INS-1 инсулиномни клетки от плъх

Бета-клетките INS-1 се използват широко в изследванията на диабета. Тук са посочени няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия.

Изследвания на инсулиновата секреция: Клетките INS-1 имат инсулиносекретираща способност и по този начин се използват широко за изследване на основните клетъчни механизми на инсулиновата секреция. Изследователите проучват основните фактори, участващи в отделянето на инсулин, включително метаболизма на глюкозата, сигналните пътища, хормоните и фармакологичните средства. Проучване установи, че зависим от К + АТФ йонен канал път регулира секрецията на инсулин в бета-клетките на INS-1 [2]. Освен това проучванията разкриват, че пътищата GLP-1R и AKT/PDX1 също участват в секрецията на инсулин в INS-1 инсулинови клетки на плъхове [3].
Изследвания на функцията на бета клетките: Клетките INS-1 имат характеристики, подобни на бета-клетките на панкреасните островчета, като отзивчивост към метаболизма на глюкозата и секреция на инсулин. Поради това те се използват за изследване на физиологичните процеси и функции на бета клетките. В проучване, проведено през 2022 г., са използвани INS-1 клетки и е разработен модел на дисфункция на бета клетките чрез _H2O2 Те са изследвали клетъчната жизнеспособност, инсулиновата секреция и маркерите, свързани с оксидативния стрес, в тези клетки в отговор на лечението с естествени съединения [4].
Откриване и разработване на лекарства: Инсулиномните клетки на плъхове INS-1 се използват широко за скрининг и тестване на антидиабетни съединения или лекарства. Те могат да бъдат използвани за изследване на потенциалните ефекти на терапевтичните агенти върху инсулиновата секреция и други съответни параметри. Проучване установява, че логанинът, компонент на китайска билкова формула, защитава инсулиносекретиращата функция на INS-1 клетките и оказва потенциално антидиабетно действие. Компонентът медиира тези благоприятни ефекти чрез инхибиране на ядрената транслокация на гена FOXO1 по пътя PI3K/AKT [5].

550,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300471

5. Научни публикации с участието на бета-клетките INS-1

Ето някои важни научни публикации, в които е използвана клетъчната линия INS-1 за инсулином на плъхове.

Алфа-мангостинът подобрява инсулиновата секреция и предпазва INS-1 клетките от увреждане, предизвикано от стрептозотоцин

Това проучване е публикувано в Internation Journal of Molecular Sciences през 2018 г. В проучването се предлага жълто кристално природно съединение, алфа-мангостин, да насърчава секрецията на инсулин в бета клетките INS-1 и да ги предпазва от увреждане, предизвикано от токсина стрептозотоцин в бета клетките.

Потенцирането на стимулираната с глюкоза инсулинова секреция в INS-1 клетките от епикатехин не зависи от антиоксидантната му активност

Това изследване е публикувано в acta pharmacologica sinica през 2018 г. Резултатите от изследването разкриват, че съединението епикатехин стимулира стимулираната от глюкоза инсулинова секреция в бета клетките INS-1, увредени от наситени мастни киселини, чрез активиране на CaMKII пътя.

Новооткрит фенилетаноиден гликозид от Stevia rebaudiana Bertoni влияе на инсулиновата секреция в INS-1 островни β клетки на плъх

В тази статия в Molecules (2019) се предлага, че ново природно съединение Фенилетаноиден гликозид влияе върху секрецията на инсулин в INS-1 инсулинови клетки на плъхове и по този начин има антидиабетен потенциал.

Лурейрин В стимулира секрецията на инсулин чрез пътищата GLP-1R и AKT/PDX1

Това изследване е публикувано в European Journal of Pharmacology (2022). В изследването се предлага, че Лурейрин В, природен продукт, повишава секрецията на инсулин в бета-клетките на панкреасните островчета INS-1 чрез модулация на пътищата AKT/PDX1 и GLP-1R.

In vitro противоракови активности на Withania coagulans срещу ракови клетки HeLa, MCF-7, RD, RG2 и INS-1 и фитохимичен анализ

В тази статия на Integrative Medicine Research (2018 г.) се оценява противораковият потенциал на екстракт от Withania coagulans , като се използват ракови клетки INS-1.

6. Ресурси за клетъчната линия INS-1: Протоколи, видеоклипове и др

Ето някои онлайн ресурси, представящи INS-1 клетки:

Субкултивиране на суспензионни клетки: Това видео представлява изчерпателно ръководство за субкултивиране на клетки, растящи в суспензионни култури.
Субкултивиране на адхезивни клетки: Това видео ще ви помогне да научите общия протокол за пасиране на адхерентни клетки.

Следният линк съдържа протокола за култивиране на INS-1 клетки:

INS-1 клетъчна линия: Този уебсайт съдържа цялата информация за клетъчната култура INS-1. Той включва информация за клетъчни култури INS-1 и среди за замразяване, протоколи за субкултивиране и работа с криоконсервирани и пролиферативни култури INS-1.

Препратки

Acosta-Montalvo, A., et al., Proglucagon-Derived Peptides Expression and Secretion in Rat Insulinoma INS-1 Cells. Front Cell Dev Biol, 2020 г. 8: p. 590763.
Park, J.E. and J.S. Han, A Portulaca oleracea L. extract promotes insulin secretion via a K+ ATP channel dependent pathway in INS-1 pancreatic β-cells (Екстракт от Portulaca oleracea L. подпомага секрецията на инсулин по зависим от K+ АТФ канал път в панкреасни β-клетки INS-1). Nutrition Research and Practice, 2018 г. 12(3): p. 183.
Fang, H., et al., Loureirin B promotes insulin secretion through GLP-1R and AKT/PDX1 pathways (Лурейрин В насърчава секрецията на инсулин чрез пътищата GLP-1R и AKT/PDX1 ). European Journal of Pharmacology, 2022 г. 936: p. 175377.
Duan, J., et al., Swietenine and swietenolide from Swietenia macrophylla king improve insulin secretion and attenuate apoptosis in H2O2 induced INS-1 cells. Environmental Toxicology, 2022. 37(11): p. 2780-2792.
Mo, F.-F., et al., Anti-diabetic effect of loganin by inhibiting FOXO1 nuclear translocation via PI3K/Akt signaling pathway in INS-1 cell (Антидиабетичен ефект на логанина чрез инхибиране на ядрената транслокация на FOXO1 чрез PI3K/Akt сигнален път в INS-1 клетки). Iranian Journal of Basic Medical Sciences, 2019. 22(3): p. 262.