Клетъчна линия BxPC-3
BxPC-3 е клетъчна линия на рак на панкреаса, получена от човека. Тя намира широко приложение в изследванията на рака. Изследователите използват тези клетки главно за изучаване на биологията на рака на панкреаса, за идентифициране на терапевтични цели и за разработване на противоракови лекарства.
Тази статия обхваща важна информация за клетъчната линия BxPC-3, която може значително да ви помогне при работата с нея. В нея ще бъдат разгледани основно:
- Обща информация и произход на клетъчната линия BxPC-3
- Култивиране на BxPC-3 клетки
- Клетъчна линия BxPC-3: Предимства и ограничения
- Приложения на BxPC-3 клетки в научните изследвания
- Научни публикации за BxPC-3 клетки
- Ресурси за клетъчната линия BxPC-3: Протоколи, видеоклипове и др
1. обща информация и произход на клетъчната линия BxPC-3
Познаването на произхода на дадена клетъчна линия е от решаващо значение за нейната приложимост в научните изследвания. Запознаването с нейните характеристики, включително морфология, размер на клетките и плоидност, прави използването ѝ по-просто и удобно. Тук ще се запознаете с произхода и общите характеристики на клетките BxPC-3: Какво представляват клетките BxPC-3? Какво представлява клетъчната линия BxPC-3? Какъв е произходът на клетъчната линия BxPC-3? Каква е морфологията на BxPC-3?
- Клетките на BxPC-3, човешки карцином на панкреаса, са получени от 61-годишна европейка с аденокарцином на панкреаса през 1986 г. Тези клетки са потвърдени като туморогенни, дори след като пациентката е преминала през няколко сеанса на радио- и химиотерапия. По този начин създадената клетъчна линия е безценен модел за изследване на развитието и прогресията на рака.
- Клетките BxPC-3 притежават морфология, подобна на тази на епителните клетки.
- Модалният хромозомен номер за BxPC-3 е 59. Тези клетки имат хомозиготна делеция в хромозома 18q, която кодира протеина SMAD4/DPC4. Освен това в клетъчната линия липсва мутацията BxPC-3 kras, която е често срещана сред туморите на панкреаса. В тези клетки от рак на панкреаса е открита и делеция на BxPC-3 braf.
Каква е разликата между BxPC3 и PANC-1?
Клетките BxPC-3 PADC (панкреатичен дуктален аденокарцином) и PANC-1 са първични клетъчни линии на рак на панкреаса с епителна морфология. При това първите клетки притежават повече епителиални свойства, докато по-късните проявяват повече мезенхимни атрибути [1].
2. култивиране на клетки BxPC-3
Клетъчната линия BxPC-3 се използва широко в лабораториите за изследване на рака. За ефективното култивиране на тази клетъчна линия за рак на панкреаса е необходимо да знаете следните основни моменти. Ще научите: Какво е времето за удвояване на bxpc3? Как се култивира клетъчната линия BxPC-3?
Ключови точки за култивиране на клетките BxPC-3
|
Време за удвояване на популацията: |
Времето за удвояване на клетките BxPC-3 варира между 48 и 60 часа. |
|
Прилепнали или в суспензия: |
BxPC-3 е адхезивна клетъчна линия. |
|
Съотношение на разделяне: |
Клетките BxPC-3 се субкултивират в съотношение 1:2 до 1:4. Клетките се промиват с 1 x PBS и се инкубират с разтвор за пасиране, наречен акутаза. След 8-10 минути към клетките се добавя свежа среда и клетките се центрофугират. Пелетата отново се ресуспендира в среда и клетките се преливат в нов култивационен съд за растеж. |
|
Среда за растеж: |
За култивиране на клетъчната линия BxPC-3 се използва среда RPMI 1640. Тя се допълва с 10% фетален говежди серум, 2,1 mM стабилен глутамин и 2,0 g/L NaHCO3 за постигане на идеален клетъчен растеж. Средата трябва да се подменя 2 до 3 пъти седмично. |
|
Условия за растеж: |
Клетъчните култури BxPC-3 се поддържат в овлажнен инкубатор при 37 °C, свързан с 5 % CO2. |
|
Съхранение: |
Замразените клетки обикновено се съхраняват при температура под -150 °C или в парната фаза на течен азот, за да се защити жизнеспособността на клетките. |
|
Процес на замразяване и среда: |
За замразяване на клетъчни култури BxPC-3 може да се използва CM-1 или CM-ACF. Следва се бавен процес на замразяване, който позволява спад на температурата само с 1 °C, за да се предпазят клетките от шок. |
|
Процес на размразяване: |
Замразените клетки BxPC-3 се размразяват на предварително настроена водна баня с температура 37 °C за 40 до 60 секунди. След като остане малка ледена бучка, клетките се добавят с прясна културална среда и се центрофугират, за да се отстранят елементите на замразяващата среда. След това клетъчната пелета се ресуспендира и клетките се разпределят в колбата за растеж. |
|
Ниво на биологична безопасност: |
Клетъчните култури BxPC-3 се поддържат в лаборатории с ниво на биологична безопасност 1. |
3. клетъчна линия BxPC-3: Предимства и ограничения
BxPC-3 е добре позната клетъчна линия за аденокарцином на панкреаса, която има няколко предимства и ограничения. Основните предимства и недостатъци на клетъчната линия са изброени тук.
Предимства
Основните предимства на клетките BxPC-3 са:
-
Ин витро модел на рак на панкреаса
Клетките BxPC-3, получени от пациенти с аденокарцином на панкреаса, притежават съответните характеристики, което ги прави подходящ модел за изучаване на поведението на рака на панкреаса in vitro.
-
Туморогенна клетъчна линия
Клетките BxPC-3 притежават туморогенни свойства и могат да образуват тумори при инжектиране в голи или имунокомпрометирани мишки. Тези тумори много наподобяват първичните тумори на аденокарцинома на панкреаса, което прави ксенографския модел BxPC-3 идеален за изучаване на растежа и прогресията на рака.
Ограничения
Ограниченията, свързани с клетъчната линия BxPC-3, са следните:
-
Кръстосано замърсяване
Клетъчната линия BxPC-3, както и всяка друга, носи риск от кръстосано замърсяване. Изследователите трябва да бъдат внимателни и да спазват строги протоколи за предотвратяване на замърсяването, когато работят с тези клетки.
-
Бавен темп на растеж
Клетките BxPC-3 показват сравнително бавна пролиферация, като времето за удвояване е между 48 и 60 часа. Тази характеристика може да изисква по-дълги периоди на инкубация за определени експерименти, което може да доведе до забавяне на напредъка на изследванията.
4. приложения на BxPC-3 клетки в научните изследвания
BxPC-3 клетките предлагат много приложения в изследванията на рака. Най-често срещаните приложения са:
- Изследване на рака на панкреаса: Клетките BxPC-3 имитират аденокарцином на панкреаса и по този начин се използват за изследване на генетичните и молекулярните механизми, които са в основата на развитието и растежа на тумора. Освен това изследователите откриват нови биомаркери и терапевтични цели, използвайки тези клетки. Освен това клетките BxPC-3 експресират значително ангиогенни фактори, т.е. интерлевкин-8 (IL-8), простагландин Е2 (PGE2) и съдов ендотелен растежен фактор (VEGF), което ги прави подходящи за изследване на ангиогенезата. Тук ангиогенезата е ключов процес, свързан с растежа и метастазирането на рака. В проучване, публикувано през 2022 г., се проучва, че свръхекспресията на ламинин-5 гама-2 (LAMC2) в BxPC3 PDAC (панкреатичен дуктален аденокарцином) засилва неговата туморогенеза чрез регулиране на BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR сигналния път [2].
- Откриване и разработване на лекарства: Клетъчната линия BxPC-3 служи като безценен модел за тестване на противоракови лекарства. Изследователите проучват цитотоксичните, антиметастатичните и апоптотичните ефекти на потенциалните лекарства върху BxPC3 PDAC. Проучване, проведено от Александрия Търнър и колегите ѝ през 2020 г., изследва апоптотичните свойства на екстракти от плодове на Elaeocarpus reticulatus в клетки на BxPC-3 рак на панкреаса [3]. По подобен начин през 2020 г. е проведено изследване, което определя противораковия потенциал на метанолов екстракт от растение, наречено Oxialis obtriangulata , в клетки BxPC-3. Освен това изследователите са проучили и клетъчния механичен път, чрез който растителният екстракт оказва терапевтично въздействие [4].
5.изследователски публикации за клетките BxPC-3
В този раздел са изброени някои от най-цитираните и интересни публикации, в които се използва клетъчната линия BxPC-3.
Ликокумаронът индуцира клетъчна смърт на BxPC-3 панкреатичен аденокарцином чрез инхибиране на DYRK1A
Тази публикация в Chemico-Biological Interactions (2020) изследва апоптотичните ефекти на естествен продукт, ликокумарон, върху клетките на панкреатичен рак BxPC-3.
Тази научна статия е публикувана в Anticancer Research (2022). В изследването се предлага хидроксихлороквинът да причинява смърт на клетките BxPC3 чрез инхибиране на гена BCL-XL.
Това изследване е публикувано през 2020 г. в Journal of Cellular Biochemistry. В изследването се посочва, че естествено съединение, салидрозид, проявява противоракови действия в клетките BxPC-3 чрез регулиране на сигналната каскада HIF-1α (хипоксия-индуцируем фактор) и LOXL2.
Тази статия в Biomedicine & Pharmacotherapy показва, че ibrutinib може да се използва като чудесен радиочувствител при пациенти с рак на панкреаса. In vitro проучването при BxPC-3 клетки показва, че той намалява фосфорилирането на BxPC3 EGFR и експресията на pAKT и гените надолу по веригата, които се регулират от радиотерапия.
Хелидонинът индуцира апоптоза чрез регулация на GADD45a-p53 в човешки клетки от рак на панкреаса
В това проучване в Integrative Cancer Therapies се предлага природен продукт, хелидонин, да упражнява апоптотична активност в човешки панкреатични клетки BxPC-3 чрез регулиране на BxPC3 p53 и GADD45a сигнализацията.
6. ресурси за клетъчната линия BxPC-3: Протоколи, видеоклипове и др
Клетъчната линия BxPC-3 има много очарователни предимства, които я правят подходяща за използване в научни изследвания. В много онлайн ресурси за клетъчната линия BxPC-3 се споменава нейната обработка, поддръжка и протокол за трансфекцияs.
- Трансекция на BxPC3: Това видео представлява ръководство стъпка по стъпка за изучаване на протокола за трансфекция на BxPC-3 клетки.
Този раздел на статията включва някои връзки, обясняващи протоколи за клетъчна култура BxPC3.
- Клетъчна култура BxPC3: Този уебсайт ще ви помогне да научите протоколи за субкултивиране и обработка на криоконсервирани и пролиферативни култури BxPC-3.
Препратки
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines (Сравнително протеомично профилиране на клетъчни линии на панкреатичен дуктален аденокарцином ). Mol Cells, 2014 г. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruit extracts reduce viability and induce apoptosis in pancreatic cancer cells in vitro (Екстракти от плодове на Elaeocarpus reticulatus намаляват жизнеспособността и предизвикват апоптоза в клетки от рак на панкреаса in vitro). Доклади по молекулярна биология, 2020 г. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-cancer potential of Oxialis obtriangulata in pancreatic cancer cell through the regulation of the ERK/Src/STAT3-mediated pathway. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.