Клетки A431 - задълбочен анализ на клетките на епидермоидния карцином в дерматологичните изследвания

A431 е клетъчна линия на човешки епидермоиден карцином. Тя се използва широко в областта на биомедицинските изследвания, главно в биологията на рака, имуноонкологията и токсикологичните изследвания. Освен това клетките A431 свръхекспресират EGFR (рецептор за епидермален растежен фактор), като по този начин се използват като ценен in vitro модел за изследване на клетъчния цикъл и свързаните с рака сигнални пътища.

В тази статия ще бъдат обяснени основите на раковата клетъчна линия A431. Ще научите следното:

Клетки A431: Общи характеристики и произход
Клетъчна линия A431: Информация за култивирането
Предимства и недостатъци на клетъчната линия A431
Изследователски приложения на клетките A431
Научни публикации с участието на клетки A431
Ресурси за клетъчна линия A431: Протоколи, видеоклипове и др

1. A431 клетки: Общи характеристики и произход

Този раздел от статията ще ви помогне да научите общата информация за клетъчната линия A431, която трябва да знаете, преди да работите с нея. Например какъв е произходът на Какво представлява клетъчната линия A431? Какви са характеристиките на клетъчната линия A431? Каква е морфологията на клетките A431? Откъде идват клетките A431?

A431, човешка клетъчна линия за рак на кожата, е получена от епидермиса на 85-годишна пациентка с епидермоиден карцином [1]. Тя е създадена от D.J. Giard и др., които са разработили много други клетъчни линии от солидни тумори.
Клетките A-431 притежават епителна морфология. Те се агрегират и образуват клетъчни клъстери.
Клетъчната линия за рак на кожата a431 е хипертриплоидна. Модалният хромозомен номер за тази клетъчна линия е 74, който се среща в около 36 % от клетките. По-високи плоиди също се срещат в около 1 % от клетъчната популация.

Тумор, растящ под кожата и проникващ в подлежащите тъкани.

2.a431 клетъчна линия: Информация за култивиране

Познаването на изискванията и процедурите за култивиране на дадена клетъчна линия може да направи работата с нея безпроблемна. Тази част от статията ще ви помогне да научите ключови моменти за култивирането на клетъчната линия A431. Например ще знаете: Какво е времето за удвояване на клетките A431? Адхерентна ли е A431 клетъчната линия за рак? Каква среда за растеж се използва за A431?

Ключови моменти за култивиране на клетките A431

Време на удвояване:	Времето за удвояване на популацията на клетките A431 варира от 80 до 100 часа.
Прилепнали или в суспензия:	A431 е адхезивна клетъчна линия.
Плътност на посявката:	клетъчна плътност: 1 x¹⁰⁴ ^{клетки/cm2} е идеална за клетъчната линия A431. При тази плътност на клетките са необходими почти 4 дни, за да станат конфлуентни. Адхезивните клетки се промиват с PBS (1x) и се инкубират с разтвор за пасиране Accutase. След това клетките се ресуспендират в хранителна среда и се центрофугират. Събраните клетки отново се ресуспендират и се разпределят в нови колби за растеж.
Среда за растеж:	За култивиране на клетъчната линия A431 се използва среда DMEM, допълнена с 10% фетален говежди серум, 4,5 g/L глюкоза, 1,0 mM натриев пируват, 1,5 g/L NaHCO3 и 4 mM L-глутамин. Средата трябва да се подменя на всеки 2 до 3 дни в седмицата.
Условия за растеж:	Раковите клетки A431 се отглеждат в овлажнен инкубатор, оборудван с източник на 5 % CO2, при температура 37 °C.
Съхранение:	Клетъчната линия може да се съхранява в електрически фризер или в парна фаза на течен азот при температура под -150 °C, тъй като това спомага за запазване на жизнеспособността на клетките.
Процес на замразяване и среда:	CM-1 или CM-ACF са двете силно препоръчителни среди за замразяване, използвани за клетките A431. Клетките се замразяват по метода на бавното замразяване, който позволява температурата да спада само с 1 градус в минута.
Процес на размразяване:	Замразените клетки A431 се размразяват на водна баня с температура 37 °C, съдържаща антимикробен агент, за 40 до 60 секунди. Когато остане само малка бучка лед, клетките се добавят към хранителната среда и се центрофугират. Събраните клетки се ресуспендират и се изсипват в колби за култивиране.
Ниво на биологична безопасност:	Препоръчва се първо ниво на биобезопасност за работа и поддържане на културите A431.

Сфероиди A-431 при различна плътност на клетките.

3.предимства и недостатъци на клетъчната линия A431

Клетъчната линия A431 притежава отличителни характеристики и предлага няколко предимства и недостатъци. Някои от тях са обобщени по-долу.

Предимства

Основните предимства на раковата клетъчна линия A431 са:

Свръхекспресия на EGFR

Клетките A431 свръхекспресират рецептора на епидермалния растежен фактор (EGFR). Те служат като положителна контрола за изучаване на сигнализацията на EGFR и нейното значение при рака. Използват се и за оценка на нови терапии за рак.

Туморогенност

Клетките A431 са туморогенни и имат способността да образуват тумори. Те могат да се използват за разработване на ксенографт модели на рак, които са ценни инструменти за изучаване на динамиката на туморния растеж и за оценка на нови терапии за рак.

Недостатъци

Недостатъците на клетките A431 са:

Генетични аномалии

A431 е ракова клетъчна линия, включваща генетични мутации и промени, които могат да я отличават от оригиналните характеристики на тумора.

Микробно замърсяване

А431 е предразположена към микробно замърсяване, предимно бактериално. Поддържането на стандартни асептични условия на култивиране обаче може да помогне за предотвратяване на такова замърсяване в клетъчните култури A431.

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 300112

4. Изследователски приложения на клетки A431

Клетъчната линия A431 се използва широко в изследванията на рака. Тук са изброени няколко обещаващи приложения на тази клетъчна линия за рак на кожата. Ракова биология: Клетъчната линия за рак на кожата A431 е чудесен изследователски инструмент за проучване на клетъчните и молекулярните механизми, които управляват растежа, развитието, метастазирането и инвазията на рака.

Изследователите широко използват тази клетъчна линия за интензивно изучаване на пътищата на клетъчна сигнализация, участващи в различни процеси в раковите клетки. Например в проучване, проведено през 2018 г., е изследвано, че PI3K/AKT/mTOR сигналният път участва в пролиферацията на раковите клетки, а инхибирането на този път предизвиква апоптоза в клетките на кожен тумор, A431 [2]. Освен това в друго проучване се съобщава и за приноса на пътя PI3K/AKT/mTOR в метастазирането на клетките на рака на кожата и прехода от епител към мезенхим (EMT), което показва решаващата му роля в развитието и прогресията на рака [3]. Изпитване и оценка на лекарствата: Клетките A431 се използват за оценка на ефикасността и ефективността на потенциални кандидати за противоракови лекарства. Изследователите определят ефекта на лекарствата върху пролиферацията, метастазирането, инвазията и апоптозата на раковите клетки, като провеждат няколко лабораторни експеримента - изследванията, проведени от Nurhidayah Ab. Рахим и колегите му са използвали клетки A431 и са оценили терапевтичния потенциал на биогенно синтезирани сребърни наночастици от растението Alstonia angustiloba през 2022 г. Резултатите разкриват, че Angustiloba-AgNPs оказват антипролиферативен ефект върху клетките на кожен сквамозен карцином [4]. ксенографт модели на тумори: Клетъчната линия A431 е туморогенна и може да образува тумори, когато се инокулира в миши модел. По този начин тя е полезен инструмент за разработване на ксенографт модели на мишки за изследване на биологията на рака in vivo. Няколко проучвания са използвали раковата клетъчна линия A431 за разработване на туморни ксенографт модели. Например Yu Jin Lim и неговият екип са разработили модел на мишки за ксенографт на тумор на кожата, използвайки клетки A431, за да оценят антитуморния и радиосенсибилизиращия ефект на екзогенния епидермален растежен фактор (EGF) in vivo [5]. 5. Изследователски публикации с участието на клетките A431 Ето някои значими изследователски публикации с участието на клетъчната линия A431 за кожен карцином. Ефективност на биополимерни PVA-AuNPs и PCL-Curcumin, натоварени с електроспинови нановлакна, и тяхната противоракова активност срещу клетъчната линия A431 за кожен карцином Тази статия е публикувана в Materials Today Communications през 2020 г. В проучването е оценен противораковият потенциал на заредени с куркумин поли-ε-капролактон електроспирани нановлакна и поливинил алкохол-AuNPs срещу ракови клетки A431. miRNA-221 промотира прогресията на кожен плоскоклетъчен карцином чрез таргетиране на PTEN В това проучване, публикувано в Cellular & Molecular Biology Letters (2019 г.), се предлага, че микроРНК-221 играе онкогенна роля при кожен плоскоклетъчен карцином чрез таргетиране на гена PTEN. Гъбичният винкристин от Eutypella spp-CrP14, изолиран от Catharanthus roseus, индуцира апоптоза в човешка клетъчна линия на сквамозен карцином-A431 Това изследване в BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) предполага, че винкристинът, вторичен метаболит, изолиран от гъба, Eutypella spp - CrP14, индуцира апоптоза в клетките A431. Свръхекспресията на CDC42SE1 в клетки A431 намалява клетъчната пролиферация чрез инхибиране на пътя Akt Това проучване е публикувано през 2019 г. в списание Cells. Това изследване предлага гена CDC42SE1 като важен биомаркер за прогресията на рака на кожата, тъй като понижаването му улеснява туморогенезата. Метформинът инхибира пролиферацията на клетките A431 чрез модулиране на сигналния път PI3K/Akt Това изследване е публикувано в списание Experimental and therapeutic medicine през 2015 г. В него се предлага метформинът да потиска пролиферацията на клетъчната линия за рак на кожата а431 чрез регулиране на сигналния път PI3K/Akt. 6. Ресурси за клетъчна линия A431: Тук са представени някои онлайн ресурси, свързани с клетъчната линия A431 за рак на кожата: Трансфектиране на клетки A-431: Този линк предоставя ръководство стъпка по стъпка за трансфектиране на ракови клетки A431. Следващият линк съдържа информация за клетъчни култури за клетки A431. Клетъчна линия за рак на кожата A431: Този линк съдържа необходимата информация за клетъчните култури на клетъчната линия A431. Тя включва среди за култивиране, клетъчна плътност, работа с криоконсервирани и пролиферативни култури и т.н. Култивиране на клетки A431: Този уебсайт съдържа кратък протокол за култивиране на клетъчната линия A431.

Препратки:

Quadri, M., et al., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models (Изследване на кожен плоскоклетъчен карцином in vitro и in vivo: нови 3D инструменти и животински модели). Front Med (Lausanne), 2022 г. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n-butyl ester against A431 skin carcinoma cell line occurs via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway (Противоракова активност на n-бутилов естер на кафеената киселина срещу A431 клетъчна линия на кожен карцином възниква чрез индукция на апоптоза и инхибиране на сигналния път mTOR/PI3K/AKT) Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Доклади по молекулярна медицина, 2018 г. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., et al., Eucalyptol targets PI3K/Akt/mTOR pathway to inhibit skin cancer metastasis (Евкалиптолът е насочен към PI3K/Akt/mTOR пътя за инхибиране на метастазите на рака на кожата).

Carcinogenesis, 2022 г. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: p. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells (Потискане на туморния растеж и засилен радиоотговор от екзогенен епидермален растежен фактор в ксенографски модели на мишки с клетки A431).

Cancer Research and Treatment (Изследване и лечение на рака): Официален журнал на Корейската асоциация за борба с рака, 2015 г. 47(4): p. 921-930.