خط الخلايا العصبية-2أ

Neuro-2a هو سلالة خلايا عصبية تعتمد على الفئران وتستخدم على نطاق واسع في أبحاث علم الأعصاب. تُستخدم هذه الخلايا بشكل أساسي لدراسة التطور العصبي والتمايز والسمية العصبية ومسارات إشارات الخلايا ونمو المحاور العصبية. إلى جانب ذلك، يتم استخدامها لأغراض تطوير الأدوية وفحصها.

يركز هذا المقال على جوانب مهمة لخلايا الورم الأرومي العصبي العصبي Neuro-2a التي يمكن أن تساعدك قبل بدء العمل بها. وسيغطي بشكل أساسي:

  1. السمات العامة لخلايا الورم الأرومي العصبي-2أ وأصلها
  2. معلومات عن زراعة خط الخلايا العصبية-2أ
  3. مزايا وعيوب خط الخلايا العصبية-2a الخلوي
  4. التطبيقات البحثية لخط الخلايا العصبية-2أ
  5. المنشورات البحثية التي تضم خلايا عصبية-2أ
  6. موارد الخلايا العصبية-2أ: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد

1. السمات العامة وأصل الخلايا العصبية -2أ

سيغطي هذا الجزء من المقالة الخلفية والخصائص الأساسية لخط الخلايا العصبية-2أ التي من الضروري معرفتها قبل العمل معها. هنا، سوف تتعلم ما هو خط الخلايا العصبية-2أ؟ ما هو أصل خط الخلايا العصبية-2أ؟ ما هو تمايز خلايا Neuro-2a الخلوية؟ ما هو حجم الخلية العصبية-2أ؟ ما هي مورفولوجيا الخلايا العصبية-2أ؟

  • نشأت خلايا Neuro-2a من ورم عفوي (ورم أرومي عصبي) لفأر ألبينو (سلالة A). تم تأسيس خط الخلايا من قبل ر. ج. كليب وف. هـ. رودل.
  • تُظهر خلايا الورم الأرومي العصبي العصبي Neuro-2a مورفولوجيا الخلايا الجذعية العصبية والأميبيّة.
  • يبلغ حجم خلية Neuro-2a 12 ميكرومتر في الارتفاع [1].
  • قد يتراوح عدد الكروموسومات لخلايا الورم الأرومي العصبي-2أ من 59 إلى 193 مع عدد نموذجي يبلغ 95. يكون النمط النووي لخلايا الورم الأرومي العصبي هذه غير مستقر في نطاق 94 إلى 98 كروموسوم.

توضيح الإشارات العصبية: تمثيل ثلاثي الأبعاد لإفراز الناقل العصبي في الفجوة المشبكية من قبل الخلية العصبية قبل المشبكية الذي يحفزه تدفق Ca2+، مما يؤدي إلى تنشيط قنوات الأيونات وتدفق Na+ في الخلية العصبية بعد المشبكية.

2. معلومات عن زراعة خط الخلايا العصبية-2أ

تُستخدم الخلايا العصبية-2a على نطاق واسع في مختبرات أبحاث علم الأعصاب. قبل التعامل مع هذه الخلايا، يجب عليك معرفة معلومات زراعة الخلايا الضرورية المذكورة أدناه. قد يساعدك ذلك على التعامل معها بسهولة. ستعرف ما هو وسط مزرعة الخلايا العصبية-2أ؟ كيف تزرع الخلايا العصبية-2أ؟ ما هو وقت مضاعفة خلايا Neuro-2a؟ ما هي كثافة بذر خلايا Neuro-2a؟ ما هو بروتوكول زراعة الخلايا العصبية-2a؟ ما هي وسائط الخلايا العصبية-2a؟

النقاط الرئيسية لزراعة خلايا Neuro-2a العصبية-2a

وقت المضاعفة:

يبلغ وقت مضاعفة خلايا Neuro-2a العصبية-2a حوالي 70 ساعة.

ملتصقة أو معلقة:

Neuro-2a هو خط خلوي ملتصق.

كثافة البذر:

كثافة البذر الخلوي الأمثل لخط خلايا Neuro-2a هي 1 ×104 خلية/سم2. بالنسبة للبذر، تُغسل الخلايا بمحلول ملحي فوسفاتي خالٍ من المغنيسيوم والكالسيوم (1x). بعد ذلك، يضاف محلول تمرير (أكوتاز)، ويتم تحضين الخلايا لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة حرارة محيطة. بعد تفكك الخلايا، تتم إضافة وسائط جديدة، ويتم طرد الخلايا مركزيًا. يُعاد تعليق كريات الخلايا المحصودة بعناية، وتُسكب الخلايا في وعاء الاستزراع للنمو.

وسط النمو:

يُستخدم EMEM لزراعة الخلايا العصبية-2أ. يحتوي على 10% من FBS، و2 ملي مولار مليغرام من الجلوتامين، و1.5 جم/لتر من NaHCO3، وEBSS، و1 مليغرام من بيروفات الصوديوم، وNEAA لنمو الخلايا بشكل مثالي. يجب استبدال الوسائط من مرة إلى مرتين في الأسبوع.

ظروف النمو:

يتم الاحتفاظ بمزارع Neuro-2a في حاضنة مرطبة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية متصلة بمصدر ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5%.

التخزين:

يجب تخزين الخلايا في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي بدرجة حرارة منخفضة للغاية أو في مرحلة بخار النيتروجين السائل على المدى الطويل.

عملية التجميد والوسط:

تُستخدم وسائط CM-1 أو CM-ACF لتجميد الخلايا العصبية-2a. يتم تجميد الخلايا من خلال عملية تجميد بطيئة تسمح بانخفاض درجة مئوية واحدة فقط في الدقيقة. وهذا يحمي الخلايا من الصدمة ويحافظ على قابليتها للحياة.

عملية الإذابة:

لإذابة المستنبتات المجمدة، توضع القارورة في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى لا يتبقى سوى كتلة ثلج صغيرة. بعد ذلك، تُضاف وسائط الاستزراع، وتخضع الخلايا للطرد المركزي. تساعد هذه الخطوة على إزالة مكونات وسائط التجميد. ثم يتم إعادة تعليق كريات الخلايا، ويتم نقل الخلايا إلى قارورة جديدة مملوءة بوسط المستنبت. بعد ذلك، توضع الخلايا في حاضنة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة على الأقل.

مستوى السلامة البيولوجية:

تُعد إعدادات مختبر مستوى السلامة البيولوجية 1 إلزامية للتعامل مع مزارع الخلايا العصبية-2أ والحفاظ عليها.

صورة مجهرية لمرور مبكر لخلايا الورم الأرومي العصبي العصبي الملتصقة من نوع Neuro 2a، توضح شكلها بتكبير 10x و20x.

3. مزايا وعيوب خط الخلايا العصبية -2أ

تمتلك الخلايا العصبية -2أ بعض المزايا والعيوب التي تميزها عن خطوط الخلايا العصبية الأخرى. وترد هنا بعض المزايا والعيوب البارزة لهذه الخلايا.

المزايا

مزايا سلالة خلايا الورم الأرومي العصبي الفيروسي العصبي Neuro-2a هي

  • سهولة الحفاظ عليها

    لا يرتبط خط الخلايا العصبية-2أ بإجراءات زراعة الخلايا المعقدة أو المعقدة. فهي سهلة الاستزراع والصيانة في المختبرات البحثية.

  • نموذج الخلايا العصبية في المختبر

    Neuro-2a هو نموذج ملائم للخلايا العصبية يستخدمه الباحثون على نطاق واسع في دراسات تطور الخلايا العصبية والتمايز.

العيوب

عيوب الخلايا العصبية-2أ هي:

  • منشأ الفئران

    تنتمي الخلايا العصبية-2أ إلى الفئران، ويجب على الباحثين توخي الحذر عند استقراء النتائج من الدراسات التي أجريت على الفئران على صحة الإنسان ومرضه، حيث يمكن أن تختلف بيولوجيا الفئران عن بيولوجيا الإنسان بشكل كبير.

4. التطبيقات البحثية لخط الخلايا العصبية-2أ

تقدم الخلايا العصبية-2أ العديد من التطبيقات في مجال أبحاث علم الأعصاب. نناقش هنا بعض الاستخدامات الواعدة لهذا الخط الخلوي:

  • التطور العصبي: Neuro-2a هو نموذج للخلايا العصبية في المختبر يستخدم على نطاق واسع لدراسة تطور الخلايا العصبية والعمليات ذات الصلة مثل التمايز ونمو المحاور العصبية وتكوين المشبك العصبي. استخدمت دراسة أُجريت في عام 2020 خلايا Neuro-2a لاستكشاف دور الحمض النووي الريبي الدقيق-124 في تمايز الخلايا العصبية الناجم عن حمض الريتينويك [2]. كما بحثت دراسة أخرى في مستقبلات حمض الريتينويك جاما (RARG) في الخلايا العصبية 2a العصبية (N2A) وتعبير الحمض النووي الريتينويك -124 في خط خلايا الورم الأرومي العصبي (N2A). اقترحت هذه الدراسة أن مستقبلات الحمض الريتينويك جاما (RARG) مستهدفة بواسطة miR-124 وتثبط نمو الخلايا العصبية [3].
  • السمية العصبية: يُستخدم Neuro-2a أيضًا لتقييم الآثار السامة للأدوية أو المواد الكيميائية أو العوامل البيئية على الخلايا العصبية. على سبيل المثال، بحثت دراسة أجراها تشيهونغ يين وزملاؤه في السمية العصبية لثنائي الفينول أ (BPA)، وهو مادة كيميائية بيئية، باستخدام خلايا Neuro-2a. ولاحظوا أن ثنائي الفينول أ يثبط تمايز الخلايا العصبية وتكاثرها عن طريق تعطيل سلامتها الخلوية والمشابكية [4].
  • فحص الأدوية: تُستخدم الخلايا العصبية 2 أ أيضًا لتقييم الأنشطة العلاجية للعديد من الأدوية والمركبات والمنتجات الطبيعية. على سبيل المثال، استخدمت إحدى الدراسات الخلايا العصبية -2أ ودراسة الإمكانات المضادة للأكسدة لمستخلص نبات جينكو بيلوبا. علاوة على ذلك، اقترح البحث أنه يسبب انخفاضًا في تراكم Aβ ويمكن أن يكون علاجًا محتملاً لمرض الزهايمر [5].

5. المنشورات البحثية التي تضم الخلايا العصبية-2أ

فيما يلي بعض الأوراق البحثية المثيرة للاهتمام التي تضم خط الخلايا العصبية-2أ.

تحفز الألكاميدات الشبيهة بالبيبيرين من نبات البيبيرين من نبات بيبر نيجروم على تحفيز محفز BDNF وتعزيز نمو الخلايا العصبية في خلايا Neuro-2a

بحثت هذه الدراسة في مجلة الأدوية الطبيعية، 2018 في التأثيرات العلاجية للألكاميدات المعزولة من الفلفل الأبيض (P. nigrum) على الخلايا العصبية العصبية Neuro-2a.

يشارك خفض تنظيم Nkx2. 1 في شذوذ الدماغ الناجم عن زيادة حمض الريتينويك

اقترح هذا البحث في مجلة Acta Biochimica et Biophysica Sinica، 2020 أن جين Nkx2.1 يلعب دورًا مهمًا في نمو دماغ الفأر من خلال تنظيم سلسلة إشارات Shh.

يؤدي التعرض لثنائي الفينول أ إلى سمية عصبية مرتبطة بالخلل الوظيفي التشابكي والهيكل الخلوي في الخلايا العصبية 2 أ

نُشر هذا المقال في مجلة "علم السموم والصحة الصناعية" (2023)، واقترح أن مادة ثنائي الفينول أ الكيميائية البيئية تحفز السمية العصبية في الخلايا العصبية-2أ، وتؤدي إلى خلل وظيفي في التشابك العصبي والهيكل الخلوي.

تعديل الهكساريلين لمسارات MAPK و PI3K/Akt في الخلايا العصبية-2A يثبط السمية المبرمجة التي يسببها بيروكسيد الهيدروجين

اقترحت هذه الورقة البحثية في مجلة Pharmaceuticals (2021) أن دواء الهكساريلين يعدل سلسلة PI3K/AKT و MAPK في خلايا الورم الأرومي العصبي (Neuro-2a) ويثبط موت الخلايا المبرمج الناجم عن بيروكسيد الهيدروجين.

يثبط مستخلص الفاكهة الإيثانولي من إمبليكا أوفيسيناليس الالتهاب العصبي في الخلايا الدبقية الصغيرة ويعزز نمو الخلايا العصبية في خلايا الورم الأرومي العصبي 2 أ

اقترحت هذه الورقة البحثية في مجلة الطب التكميلي والطب البديل القائم على الأدلة (2021) أن مستخلص فاكهة Emblica officinalis يثبط الالتهاب العصبي في الخلايا العصبية 2a وبالتالي يمكن أن يكون مفيدًا للأمراض العصبية الالتهابية.

6. مصادر للخلايا العصبية-2أ: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد

فيما يلي المصادر المتاحة على الإنترنت حول الخلايا العصبية-2أ. وهي تشمل بروتوكول زراعة الخلايا العصبية -2أ وبروتوكول نقل الخلايا العصبية -2أ.

  • بروتوكول نقل الخلايا العصبية-2a: تعد خلايا Neuro-2a مضيفًا مناسبًا لنقل العدوى. سيرشدك هذا الرابط فيما يتعلق ببروتوكول نقل العدوى لخط الخلية. تختلف كفاءة نقل العدوى العصبية 2a من كاشف إلى آخر.

يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة الخلايا العصبية 2a.

المراجع

  1. Lulevich, V., et al., توفر ميكانيكا الخلية الواحدة وسيلة حساسة وكمية لسبر تفاعلات ببتيد أميلويد بيتا والخلايا العصبية. Proc Natl Acad Sci U S A, 2010. 107(31): p. 13872-7.
  2. You, Q., et al.، دور miR-124 في تنظيم تمايز الخلايا العصبية الناجم عن حمض الريتينويك الناجم عن حمض الريتينويك Neuro-2A. Neural Regen Res، 2020. 15(6): p. 1133-1139.
  3. Su, X., et al., مستقبلات حمض الريتينويك جاما مستهدفة بواسطة microRNA-124 وتثبط نمو الخلايا العصبية. Neuropharmacology، 2020. 163: p. 107657.
  4. Yin, Z., et al.، التعرض لـ Bisphenol-A الناجم عن التعرض للسمية العصبية والمرتبط بالمشابك والهيكل الخلوي في خلايا Neuro-2a. علم السموم في المختبر، 2020. 67: p. 104911.
  5. تشين، ل. وآخرون، مستخلص جينكو بيلوبا (EGb) يثبط الإجهاد التأكسدي في الخلايا العصبية 2A التي تفرط في التعبير عن APPsw. BioMed Research international, 2019. 2019.

لقد اكتشفنا أنك في بلد مختلف أو أنك تستخدم لغة متصفح مختلفة عن اللغة المحددة حاليًا. هل ترغب في قبول الإعدادات المقترحة؟

إغلاق