توثيق خط خلايا الفأر (التكرار الترادفي القصير (STR))
نظرًا لانتشار التلوث المتبادل وأخطاء تحديد الهوية، تُعدّ أصالة الخلايا المستخدمة في مشاريع البحث العلمي مصدر قلق كبير. وتشير التقديرات إلى أن حوالي 15-20% من جميع الأبحاث القائمة على سلالات الخلايا تُجرى باستخدام سلالات خلايا تم تحديد هويتها بشكل خاطئ. لذلك، فإن تحديد خصائص السلالة الخلوية باستخدام تحليل STR أمر بالغ الأهمية لإجراء أبحاث موثوقة وقابلة للتكرار. بالإضافة إلى ذلك، يطالب عدد متزايد من المجلات العلمية بالتحقق من السلالات الخلوية قبل قبول أي مقال.
تشمل خدمتنا ما يلي
- التحقق من أصالة السلالات الخلوية
- المقارنة مع قواعد البيانات عبر الإنترنت
- تقرير تحليل جاهز للنشر
سهلة الاستخدام
- يرجى تنزيل نموذج طلب "التحقق من أصالة السلالات الخلوية" وإرفاق النسخة المملوءة والمطبوعة مع شحنة العينات الخاصة بك.
- يرجى إرسال العينات إلينا في مظروف مبطّن في درجة حرارة الغرفة.
- بالنسبة للحمض النووي الجيني (gDNA)، يرجى تزويدنا بكمية لا تقل عن 50 ميكرولتر من الحمض النووي الجيني بتركيز 50 نانوغرام/ميكرولتر في محلول تريس أو إيديتا (10 مليمولار تريس، 0.1 مليمولار إيديتا).
- بالنسبة لركام الخلايا، يرجى تزويدنا بـ 1.0-5.0 مليون خلية في شكل ركام خلوي. يرجى غسلها مرتين بمحلول PBS وإعادة تعليقها في 0.5 مل من الإيثانول بنسبة 70-90%.
العلامات
- يتم تحديد نوع الخلايا البشرية باستخدام نظام PowerPlex من Promega باستخدام 16 علامة STR.
- يتم تحديد نوع الخلايا الفئرانية باستخدام 18 علامة STR.
- يتم تحديد نوع خلايا الجرذان باستخدام 14 علامة STR وعلامة واحدة خاصة بالجنس.
- يتم تحديد نوع خلايا الكلاب باستخدام 11 علامة STR.
- يتم تحديد أنماط خلايا الهامستر باستخدام 10 علامات STR.
النتائج
ستتلقى النتائج عبر البريد الإلكتروني في غضون أسبوعين. تتضمن النتائج مقارنة البيانات بقاعدة بيانات Cellosaurus. وسيتم تصنيف السلالة الخلوية على أنها مصدقة أو غير مصدقة.
التكرارات الترادفية القصيرة (STRs)
يتكون التكرار الترادفي القصير (STR) من نمط DNA مكون من 2-13 قاعدة تتكرر حتى عدة مئات من المرات. يؤدي التباين الفردي في عدد التكرارات في STR إلى اختلافات في طول الأجزاء الناتجة عند استخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). يتم تحديد ملامح السلالات الخلوية باستخدام هذه الاختلافات في أطوال الأجزاء في عدة مواقع جينية.
الكشف عن خلطات سلالات الخلايا
من الممكن تحديد تلوث خط خلوي واحد بخط خلوي إضافي واحد أو أكثر حتى لو بلغت نسبة الخط الخلوي الملوث 10٪. عادةً ما توفر تركيبات الخطوط الخلوية ملامح STR ذات ثلاث قمم أو أكثر لموقع جيني واحد أو عدة مواقع.