خط خلايا بيوو
BeWo هو خط خلوي بشري مشتق من سرطان المشيمة البشري يستخدم على نطاق واسع في الأبحاث الطبية الحيوية. وتُستخدم كنموذج مختبري قيّم لاستكشاف العملية المعقدة لتطور المشيمة والتخليق المتزامن للأرومة الغاذية البشرية. كما يستخدم الباحثون هذه الخلايا أيضاً لدراسة سلوك خلايا الأرومة الغاذية وإنتاج الهرمونات ونقل المواد عبر المشيمة. إلى جانب ذلك، تُقدم خلايا BeWo أيضًا تطبيقات في دراسات علم السموم والعدوى وانتقال الأمراض.
تشمل هذه المقالة المعرفة الأساسية حول خلايا BeWo التي قد تساعدك في التعامل معها في أبحاثك. وسوف تشمل:
- الخصائص العامة وأصل خلايا BeWo
- خط خلايا بيوو معلومات الزراعة
- مزايا وعيوب خط خلايا BeWo الخلوية
- التطبيقات البحثية لخلايا BeWo
- المنشورات البحثية التي تحتوي على خلايا BeWo
- موارد خط خلايا BeWo: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
1. الخصائص العامة وأصل خلايا BeWo
المعرفة المسبقة حول أصل خط الخلية وخصائصه العامة أمر بالغ الأهمية لاستخدامه في بحثك. يستكشف هذا الجزء من المقالة أصل خط خلايا BeWo وخصائصه المميزة وغير ذلك الكثير. هنا، سوف تتعلم ما هو خط الخلايا المشيمية المشيمية BeWo؟ ما هو خط الخلايا المشيمية المشيمية BeWo؟ من أين تأتي خلايا BeWo؟ ما هي مورفولوجيا خلايا BeWo؟ ما هي الصبغة الصبغية لخلايا BeWo؟
- نشأ خط الخلايا المشيمية، BeWo، من سرطان المشيمة المشيمي الخبيث في المشيمة الجنينية الذكرية في عام 1968 [1]. وبالتالي، فهي بمثابة نموذج لا يقدر بثمن لأبحاث المشيمة.
- تُظهر خلايا BeWo مورفولوجيا شبيهة بالظهارة.
- تكون خلايا BeWo صغيرة نسبياً، ويتراوح حجمها بين 20 إلى 30 ميكرومتر [2].
- تُظهر خلايا BeWo نمطًا نوويًا مستقرًا. ويكون رقم خطها الجذعي ناقص الصبغيات الرباعية الصبغيات. يبلغ عدد الكروموسومات النمطي لخلايا BeWo 86. وقد يتراوح من 71 إلى 178.
- تُنتج خلايا BeWo العديد من الهرمونات، مثل الهرمون الجسدي المشيمي البشري والموجهة التناسلية المشيمية البشرية (hCG) وهرمونات الستيرويد.
- تعبر خلايا BeWo عن علامات جزيئية، بما في ذلك CK 7 وE-cadherin وVE-cadherin.
السلالة الفرعية B30
B30 هو سلالة فرعية من خلايا BeWo. ويُستخدم لدراسة امتصاص المواد الغذائية ونقلها. ويُعزى ذلك إلى نموها القوي على الأغشية المسامية.
BeWo وJEG-3
تُشتق خطوط خلايا BeWo JEG-3 من الخلايا المشيمية وتستخدم في أبحاث المشيمة. تُنتج خلايا BeWo هرمونات بمستويات أقل من JEG-3، مثل موجهة الغدد التناسلية المشيمية البشرية (hCG) والإستراديول.
2. خط خلايا BeWo: زراعة المعلومات
قد يكون الحفاظ على مزرعة الخلية أمرًا صعبًا ما لم تكن على دراية بالتفاصيل الأساسية. مثل: ما هو وقت مضاعفة BeWo؟ ما هي وسائط خلايا BeWo؟ كيف يمكنك زراعة سلالة خلايا BeWo؟ وكيف يمكنك تجميد خلايا BeWo؟
النقاط الأساسية لزراعة خلايا BeWo
|
وقت المضاعفة: |
وقت تضاعف عدد خلايا BeWo هو 30 ساعة تقريبًا. |
|
ملتصقة أو معلقة: |
BeWo هو خط خلايا ملتصقة. |
|
كثافة بذر الخلايا: |
كثافة البذر الموصى بها لخلايا BeWo هي 1 ×104 خلية/سم2. للبذر، تتم إزالة الوسائط القديمة من الخلايا، ويتم شطف الخلايا ب 1 × PBS. بعد ذلك، يتم إضافة أكوتاز (محلول الترحيل)، ويتم تحضين الخلايا لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة الحرارة المحيطة. بعد ذلك، تُضاف الخلايا المنفصلة مع وسائط الاستزراع وتُطرد مركزيًا. ثم يتم إعادة تعليق الخلايا المحصودة وسكبها في دورق جديد. |
|
وسط النمو: |
تُستخدم وسائط هام F12K التي تحتوي على 10% من FBS و2.0 ملي مولار من الجلوتامين و2.0 ملي مولار من بيروفات الصوديوم و2.5 جم/لتر من NaHCO3 لنمو خلايا BeWo. يجب استبدال وسائط خلايا BeWo من 2 إلى 3 مرات أسبوعيًا. |
|
ظروف النمو: |
يتم الاحتفاظ بخلايا BeWo في حاضنة مرطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية مع إمداد بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون. |
|
التخزين: |
يتم تخزين خلايا BeWo المجمدة عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي بدرجة حرارة منخفضة للغاية أو في مرحلة بخار النيتروجين السائل. |
|
عملية التجميد والوسط: |
يوصى بتجميد خلايا BeWo في وسط التجميد CM-1 أو CM-ACF. يتم تجميد الخلايا باستخدام طريقة التجميد البطيء. وتسمح هذه الطريقة بانخفاض درجة الحرارة بمقدار درجة واحدة فقط في الدقيقة الواحدة، مما يقي الخلايا من أي صدمة ويحمي قابلية الخلايا للحياة. |
|
عملية الإذابة: |
يتم إذابة الخلايا المجمدة عن طريق غمرها في حمام مائي مضبوط مسبقاً بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى يتبقى كتلة ثلج صغيرة. بعد ذلك، يتم إضافة وسائط نمو جديدة، ويتم طرد الخلايا مركزيًا لإزالة مكونات وسائط التجميد. يتم إعادة تعليق كريات الخلايا المجمعة وصرفها في دورق مستنبت للنمو. |
|
مستوى السلامة البيولوجية: |
مختبر مستوى السلامة البيولوجية 1 ضروري للتعامل مع مزارع خلايا BeWo وصيانتها. |
3. مزايا وعيوب خط خلايا BeWo الخلوية
تتميز خلايا BeWo بخصائص فريدة من نوعها وتأتي مع مزايا وعيوب محددة. في هذا القسم، سنستكشف في هذا القسم بعضًا من المزايا والعيوب الجديرة بالملاحظة.
المزايا
المزايا الرئيسية لخط خلايا سرطان المشيمة BeWo هي
-
نموذج الخلايا المشيمية في المختبر
توفر خلايا BeWo نموذجًا مخبريًا لدراسة سلوك خلايا الأرومة الغاذية وتلازم المشيمة، مما يكرر العمليات التي يصعب ملاحظتها في الجسم الحي.
-
إنتاج الهرمونات
تفرز خلايا BeWo هرمونات، مثل هرمون قوات حرس الغدد التناسلية المشيمية واللاكتوجين المشيمي، مما يجعلها ذات قيمة لدراسات التنظيم الهرموني والأبحاث في علم الأحياء الإنجابية.
العيوب
عيوب خلايا الأرومة الغاذية BeWo هي:
-
خط الخلايا السرطانية
تم اشتقاق خلايا BeWo من سرطان المشيمة، وهو ورم مشيمي. قد لا يمثل هذا الأصل وظيفة خلايا المشيمة الطبيعية بشكل كامل.
4. التطبيقات البحثية لخلايا BeWo
يُستخدم خط خلايا BeWo على نطاق واسع في أبحاث المشيمة. ونذكر هنا بعض التطبيقات المحددة لهذا الخط الخلوي:
- المشيمة والأبحاث المتعلقة بالحمل: تعتبر خلايا BeWo محورية في الأبحاث المتعلقة بالمشيمة والحمل. حيث يستخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة نقل المواد، بما في ذلك الأدوية والمواد الغذائية والسموم، عبر حاجز المشيمة. إلى جانب ذلك، يبحثون أيضًا في إنتاج الهرمونات وتنظيمها، بما في ذلك موجهة الغدد التناسلية المشيمية البشرية (hCG) واللاكتوجين المشيمي وهرمونات الستيرويد. وهذا أمر مهم لفهم التغيرات الهرمونية أثناء الحمل. بحثت الأبحاث التي أُجريت في عام 2018 في تأثير مثبطات اللهب المبرومة (BFRs) على نشاط إنزيم السلفوترانسفيراز في خط الخلايا الأرومة الغاذية البشرية (BeWo). ويشارك هذا الإنزيم في تنظيم مستويات هرمون الغدة الدرقية داخل الخلايا [3].
- أبحاث العدوى والأمراض: تُستخدم خلايا BeWo أيضًا لفحص التفاعل بين مسببات الأمراض وخلايا المشيمة. وتُعد هذه الأبحاث قيّمة لفهم الأمراض التي يمكن أن تنتقل من الأم إلى الجنين ولتطوير استراتيجيات لحماية صحة الجنين. وعلاوة على ذلك، يساعد هذا الخط الخلوي الباحثين في دراسة المضاعفات التي تنشأ أثناء الحمل، مثل تسمم الحمل. على سبيل المثال، استخدمت دراسة أجرتها ميشالينا براليوسكا في عام 2023 نموذج خلية الأرومة الغاذية BeWo ووجدت أن كلاً من الكروموجرانين أ (CgA) والببتيد المشتق منه، الكاتستاتين (CST)، قد يكون لهما دور في العملية المعقدة لتسمم الحمل (PE) الممرضة [4]. وللمضي قدمًا، استكشفت دراسة أخرى إمكانات التريكوسانثين المضادة للسرطان باستخدام خط خلايا سرطان المشيمة (BeWo). وبذل البحث أيضًا جهدًا إضافيًا لاكتشاف المؤشرات الحيوية من خلال إجراء تحليل بروتيني مقارن قبل التجربة وبعدها [5].
5. المنشورات البحثية التي تضم خلايا BeWo
فيما يلي بعض المنشورات البحثية المهمة التي تضم خلايا الأرومة الغاذية BeWo.
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) أن إشارات AMPK تنشط البلعمة الميتوفولوجية في خلايا الأرومة الغاذية BeWo عبر مسارات البلعمة الميتوبلاتية التي يسهلها FUNDC1 و PRKN. ونتيجة لذلك، يساعد الالتهام الميتوفاجيمي في الحفاظ على إنتاج الأدينوسين ثلاثي الفوسفات وإمكانات غشاء الميتوكوندريا.
يستحث إيثيل بارابين موت الخلايا المبرمج في خلايا المشيمة البشرية BeWo عبر مسار Caspase-3
نُشرت هذه المقالة في مجلة الخلايا والأنظمة الحيوانية (2020). اقترحت الدراسة أن الإيثيل بارابين يتوسط موت الخلايا المبرمج لخلايا BeWo عبر تنظيم مسار كاسباز 3.
استخدمت هذه الدراسة في استقلاب الدواء والتخلص منه (2023) خطوط الخلايا المشيمية، بما في ذلك BeWo وJAR وJEG-3 وHTR-8/SVneo، لدراسة ترسب المواد الحيوية الخارجية والستيرويد في الخلايا.
اقترحت هذه المقالة البحثية في المجلة الدولية للطب الجزيئي (2020) أن الأبلين، وهو رابط مستقبلات الأبلين (APJ)، يعزز تكاثر خلايا BeWo من خلال إشارات الأبلين وإشارات ERK1/2 وStat3 وAMPK. وبالتالي، يمكن أن يكون أديبوكينًا أساسيًا ينظم نمو المشيمة.
الأدوية المضادة للتشنج والمغذيات الجنينية: التأثيرات على ناقلات الكولين في خط خلايا المشيمة البشرية
استكشفت هذه الدراسة في مجلة Epilepsia (2021) تأثيرات مغذيات الجنين ومضادات التشنجات على ناقلات الكولين في خط الخلايا المشيمية الغاذية المشتقة من الإنسان BeWo.
6. مصادر خط خلايا BeWo: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
فيما يلي بعض الموارد المتاحة على الإنترنت عن خلايا BeWo:
- نقل الخلايا في المختبر: سيساعدك هذا الفيديو على تعلم بروتوكول نقل الحمض النووي للبلازميد في المختبر للخلايا الملتصقة.
يحتوي الرابط التالي على معلومات عن زراعة الخلايا لخلايا BeWo:
- خلايا بيوو: يحتوي هذا الموقع الإلكتروني على معلومات أساسية عن خط خلايا BeWo. يتضمن ذلك معلومات عن وسائط الخلايا وظروف الاستزراع. كما يحتوي أيضًا على بروتوكولات للزراعة الفرعية والتعامل مع المزارع المحفوظة بالتبريد والمزارع التكاثري.
المراجع
- ويبر، م. وآخرون، علم الجينوم الخلوي لستة سلالات من الخلايا الأرومة الغاذية البشرية. المشيمة، 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., خصائص الأرومة الغاذية في الثقافة طويلة الأمد. نشرة البيولوجيا التجريبية والطب، 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt, and H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cells line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, انخفاض مستوى بروتين CgA-Derden CST المشتق من CgA في خطوط خلايا سرطان المشيمة المشيمية البشرية HTR-8/SVneo و BeWo Trophoblastic Cell Lines الناجمة عن بيئة ما قبل الولادة. المجلة الدولية للعلوم الجزيئية، 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al.، التحليل البروتيني المقارن لإضافة التريكوسانثين الدوائي إلى خط خلايا BeWo. الجزيئات، 2022. 27(5): p. 1603.