خلايا ويلمز8

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 300416

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

اتفاقية نقل المواد

الوصف	تم اشتقاق سلالة خلايا ويلمز8 من ورم ويلمز الأولي لدى مريض أطفال مصاب بطفرة WT1 في السلالة الجرثومية. ويتميز هذا الخط الخلوي بطفرة متماثلة الزيجوت في جين WT1 (ج. 1168 C>T، p.R390X)، مما يؤدي إلى فقدان كامل لوظيفة WT1. ويُعد WT1 أمرًا حاسمًا لنمو الكلى الطبيعي، ويُعد تعطيله سمة شائعة في بعض الأنواع الفرعية العدوانية من ورم ويلمز وخاصةً تلك التي تظهر تمايزًا ميزانيًا. وبالتالي، يوفر ويلمز8 نموذجاً قيماً لدراسة آثار فقدان WT1 على نشأة الورم، خاصةً في سياق أورام ويلمز التي تنشأ مع مكون لحمي واضح. وبالإضافة إلى طفرة WT1، تحتوي خلايا ويلمز8 على طفرة في جين CTNNB1 (p.S45A)، الذي يشفر β-Catenin، وهو منظم رئيسي لمسار إشارات Wnt. وتؤدي الطفرة في سيرين 45 إلى تعطيل عملية الفسفرة الطبيعية التي تؤدي إلى تحلل بيتا-كاتينين، مما يؤدي إلى استقراره وتراكمه في النواة. ويؤدي ذلك إلى التنشيط التأسيسي لإشارات Wnt، مما يؤدي إلى تكاثر الخلايا ويساهم في الخصائص الورمية لخط خلايا ويلمز8. ويجعل التفاعل بين فقدان WT1 وإشارات Wnt الشاذة في سلالة ويلمز8 نموذجًا حاسمًا لفهم الآليات الجزيئية الكامنة وراء هذه المسارات في بيولوجيا ورم ويلمز. تُظهر خلايا ويلمز8 نمطًا ظاهريًا متوسطي اللُّحمة يتميز بالتعبير عن الفيمينتين وغياب العلامات الظهارية مثل السيتوكراتين. وهذا يتماشى مع التمايز اللحمي الذي لوحظ في الورم الأصلي. تُظهر الخلايا قدرة محدودة على الخضوع للمزيد من التمايز الوسيمي المتوسط، مثل تشكيل خلايا شبيهة بالعضلات في ظل ظروف محددة. كشفت التحليلات البروتينية لورم ويلمز8 عن تنشيط العديد من مستقبلات التيروزين كيناز (RTKs)، بما في ذلك PDGFRβ وAXL، والتي تشارك في عمليات رئيسية مثل بقاء الخلية وهجرتها وتكاثرها. كما يساهم تنشيط مسارات الإشارات النهائية، وخاصةً مسارات MAPK وPI3K/AKT، في زيادة الخصائص العدوانية لخلايا ويلمز8. وبشكل عام، يُستخدم خط خلايا ويلمز8 كأداة أساسية لدراسة الأساس الجزيئي لورم ويلمز المدفوع بفقدان WT1 وإشارات Wnt الشاذة. إن خصائصه الوراثية والمظهرية تجعله منصة قوية لدراسة التفاعل بين هذه المسارات الحرجة ولتحديد الأهداف العلاجية المحتملة في أورام ويلمز ذات المكون اللحمي.
كائن حي	الإنسان
الأنسجة	الكلى
المرض	ورم ويلمز
التطبيقات	نموذج زراعة الخلايا في المختبر. الدراسات البيوكيميائية الحيوية

العمر	8 أشهر
الجنس	الذكور
العرق	قوقازي
علم الصرف	على شكل مغزل
نوع الخلية	خلايا ويلمز
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	ويلمز8 (كتالوج سيتيون رقم 300416)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	9606
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_A5SJ

الملامح الطفرية	حالة الطفرة في WT1: متماثلة الزيجوت c.1168C>T, p.390x, LOH:، حالة الطفرة في CTNNB1: متغايرة الزيجوت TCT>GCT, p.S45A

الوسط الثقافي	مجموعة MSCGM (من لونزا)
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	لا شيء
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
أليلات HLA	A: '02:01:01, '03:01:01 B: '15:01:01, '37:01:01 C: '04:01:01, '06:02:01 DRB1: '08:01:01G, '11:01:01 DQA1: '04:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '04:02:01 DPB1*: '03:01:01, '06:01:01 E: '01:03:02

إذا كنت تنوي استخدام خطوط الخلايا Cytion حصريًا لأغراض البحث الداخلي في موقع بحثي واحد، يرجى ملء وتوقيع اتفاقية نقل المواد (MTA) الخاصة بنا وإرسالها مع طلبك.

لأي تطبيقات تجارية - بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأعمال مقابل أجر، واختبارات مراقبة الجودة، وإطلاق المنتجات، والاستخدام التشخيصي، أو الدراسات التنظيمية - يرجى ملء نموذج الاستخدام المقصود حتى نتمكن من إعداد اتفاقية مناسبة ومصممة خصيصًا لمشروعك.

يرجى ملاحظة: تنطبق اتفاقية نقل المواد (MTA) على سلالات خلوية معينة فقط. إذا ظهر هذا الإشعار ووثيقة اتفاقية نقل المواد (MTA) على صفحة المنتج، فإن الاتفاقية تكون سارية. بالنسبة للسلالات الخلوية التي لا تشملها اتفاقية نقل المواد (MTA)، لن تظهر أي إشارة إلى الاتفاقية. اتفاقية نقل المواد (MTA) غير صالحة للعملاء في الأمريكتين أو الصين أو تايوان. يرجى الاتصال بكياننا في الولايات المتحدة للحصول على الاتفاقية المناسبة.

خلايا ويلمز8

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

اتفاقية نقل المواد