محلول فصل الخلايا Accutase - 100 مل
محلول فصل الخلايا Accutase مع EDTA والفينول الأحمر – 100 مل
Accutase هو محلول فصل الخلايا الجاهز للاستخدام والمصفى بشكل معقم، والمصمم كبديل لطيف للتريبسين/EDTA لفصل الخلايا الثديية الملتصقة عن الأواني البلاستيكية القياسية لزراعة الأنسجة والأسطح المطلية بطبقة لاصقة. وهو يجمع بين نشاط الإنزيمات البروتينية والكولاجينية في محلول ملحي متوازن لتوفير فصل فعال ومحكوم، مع الحفاظ على بروتينات سطح الخلية ودعم قابلية البقاء العالية بعد التمرير وإعادة الالتصاق السريع.
تعتمد تركيبة Accutase على محلول دولبيكو الفوسفاتي (DPBS) مع EDTA والفينول الأحمر كمؤشر بصري لدرجة الحموضة. الإنزيمات من أصل غير ثديي وغير بكتيري، مما يجعل Accutase مناسبًا بشكل خاص لأبحاث الخلايا الجذعية، وعمليات إنتاج اللقاحات، وأي تطبيق يجب فيه تقليل الملوثات المشتقة من الحيوانات أو الميكروبات إلى الحد الأدنى. يتوقف المحلول تلقائيًا عند 37 درجة مئوية، لذلك لا يلزم وجود كاشف معادل أو وسط يحتوي على مصل بعد الفصل – يمكن نقل الخلايا مباشرة إلى وسط جديد.
الميزات الرئيسية
- سائل 1x جاهز للاستخدام ومصفى معقم – لا يحتاج إلى تخفيف أو إعادة تكوين
- نشاط إنزيمي بروتيني وكولاجيني مدمج لفصل لطيف
- تم توحيد كل دفعة وفقًا لنشاط انفصال محدد لضمان الاتساق بين الدفعات
- إنزيمات غير حيوانية وغير بكتيرية المنشأ
- يتم تثبيطه تلقائيًا عند 37 درجة مئوية – لا حاجة إلى محلول معادل
- مركب في محلول PBS من Dulbecco مع EDTA
- يحتوي على الفينول الأحمر كمؤشر بصري لدرجة الحموضة
- درجة الحموضة 6.8 – 7.8
التطبيقات النموذجية
يقوم Accutase بفصل مجموعة واسعة من أنواع الخلايا الملتصقة والحساسة بلطف، بما في ذلك الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs)، والخلايا الجذعية البشرية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs)، والخلايا الجذعية العصبية، والخلايا العصبية الأولية، وخطوط الخلايا الملتصقة المزروعة بشكل روتيني مثل HeLa و HEK 293 و CHO و MDCK و Vero و NIH/3T3 و BHK-21 و A549. تشمل حالات الاستخدام النموذجية ما يلي:
- الاستزراع الفرعي الروتيني وتمرير الخلايا الثديية الملتصقة
- الفصل اللطيف للخلايا المفردة من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs) والخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs) والخطوط الحساسة الأخرى
- تحضير العينات لتحليل التدفق الخلوي وتحليل FACS
- تحليل علامات سطح الخلية حيث تهم سلامة الببتيد
- اختبارات هجرة الخلايا وتكاثرها وموتها المبرمج
- اختبارات السكون عن طريق حرمان المصل ودراسات نقل الجينات المسرطنة
- اختبارات هجرة الخلايا السرطانية وخلايا القمة العصبية
- توسيع نطاق الإنتاج في سير عمل المفاعلات الحيوية
بالنسبة للأعمال الروتينية، استخدم حوالي 10 مل من Accutase لكل 75 سم² من سطح المزرعة وقم بالتحضين لمدة 5-10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. يجب تحديد وقت التحضين الأمثل لكل خط خلوي ويجب ألا يتجاوز ساعة واحدة. قبل الإضافة، اشطف طبقة الخلايا بمحلول ملحي خالٍ من Ca2+/Mg2+ مثل DPBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم لإزالة بقايا المصل والكاتيونات ثنائية التكافؤ.
التعامل والتخزين
قم بتخزين الزجاجة غير المفتوحة مجمدة عند -15 درجة مئوية أو أقل. قم بإذابة الجليد إما في درجة حرارة الغرفة أو طوال الليل عند +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية. لا تقم بإذابة الجليد عن Accutase في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية، حيث أن درجات الحرارة المرتفعة تقلل من نشاط الإنزيم. بعد إذابة الجليد، يمكن تخزين المحلول لمدة تصل إلى شهرين عند +2 درجة مئوية إلى +8 درجة مئوية؛ لا تقم بالتخزين في درجة حرارة الغرفة. لا تقم بتسخين الكاشف مسبقًا إلى 37 درجة مئوية قبل الاستخدام – أضفه مباشرة إلى الخلايا المغسولة في درجة حرارة الغرفة. لضمان صلاحية طويلة الأمد، يوصى بتقسيم الكمية إلى أجزاء للاستخدام مرة واحدة لتجنب دورات التذويب المتكررة. اعمل دائمًا في ظروف معقمة.
الجودة
يتم تصنيعه وفقًا لمعايير جودة صارمة. يتم ترشيح كل دفعة من Accutase بشكل معقم واختبارها للتأكد من تعقيمها ودرجة الحموضة والمظهر ونشاط التفكك لضمان أداء متسق وقابل للتكرار من دفعة إلى أخرى.
مواصفات المنتج
| المواصفات | التفاصيل |
|---|---|
| نوع المنتج | كاشف انفصال الخلايا / التفكك |
| الشكل | سائل معقم ومصفى، جاهز للاستخدام |
| الحجم | 100 مل |
| تركيز العمل | 1x (جاهز للاستخدام) |
| نشاط الإنزيم | بروتينات وكولاجين |
| أصل الإنزيم | غير ثديي وغير بكتيري |
| نظام المخزن المؤقت | PBS دولبيكو مع EDTA |
| مؤشر الأس الهيدروجيني | أحمر الفينول |
| نطاق الرقم الهيدروجيني | 6.8 – 7.8 |
| المظهر | محلول شفاف، لونه أحمر باهت إلى برتقالي |
| درجة حرارة التخزين | -15 درجة مئوية أو أقل |
| الاستقرار بعد الذوبان | حتى شهرين عند درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجة مئوية |
| حجم الاستخدام الموصى به | ~10 مل لكل 75 سم² من سطح المزرعة |
| وقت الحضانة المعتاد | 5 – 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة |
| شروط الشحن | مجمد على ثلج جاف |
| الاستخدام المقصود | للاستخدام في الأبحاث والتصنيع فقط |
التركيبة (التركيب لكل لتر)
| المكون | التركيز (ملغم/لتر) |
|---|---|
| أملاح غير عضوية | |
| كلوريد الصوديوم (NaCl) | 8000.00 |
| فوسفات الهيدروجين ثنائي الصوديوم (Na2HPO4) | 1150.00 |
| كلوريد البوتاسيوم (KCl) | 200.00 |
| ثنائي هيدروجين فوسفات البوتاسيوم (KH2PO4) | 200.00 |
| مكونات أخرى | |
| EDTA · 4Na (EDTA رباعي الصوديوم) | 220.00 |
| الفينول الأحمر | 3.00 |
| مزيج إنزيمي خاص (نشاط بروتيني وكولاجيني) | 1x |
Accutase هي علامة تجارية مسجلة لشركة Innovative Cell Technologies, Inc.