خلايا ويلمز3
٨٠٠٫٠٠ €*
يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 6 خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 106 خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).
معلومات عامة
| الوصف | تم إنشاء سلالة خلايا ويلمز3 من ورم ويلمز الأولي لدى مريض طفل، والذي يتميز بطفرة جسدية في جين WT1. وعلى عكس العديد من خطوط خلايا أورام ويلمز الأخرى، فإن سلالة ويلمز3 تحتوي على طفرة متغايرة الزيجوت في جين WT1 (ج 1293-1294insA، ص V432SfsX87)، مما يؤدي إلى إنتاج بروتين WT1 مبتور. ويرتبط هذا الفقدان الجزئي لوظيفة WT1 بتطور الأورام التي تُظهر نمطًا ظاهريًا لحميًا أو متوسطيًا. ومع ذلك، فإن طفرة WT1 في ويلمز3 ليست متماثلة، مما يضيف تعقيدًا لدراستها، حيث تحتفظ ببعض وظائف WT1 التي يمكن أن تؤثر على بيولوجيا الورم بشكل مختلف مقارنةً بخطوط الخلايا التي تعاني من فقدان كامل لبروتين WT1. يحمل ويلمز3 أيضًا طفرة في جين CTNNB1 تؤثر تحديدًا على الثريونين 41 (p.T41A)، والذي يلعب دورًا حاسمًا في مسار إشارات Wnt. تعمل هذه الطفرة على تثبيت β-Catenin، مما يمنع تدهوره ويؤدي إلى التنشيط المستمر لمسار Wnt. ويؤدي التنشيط المستمر لإشارات Wnt إلى تكاثر الخلايا ويساهم في تكاثر الأورام في ويلمز3، مما يجعله نموذجًا رئيسيًا لدراسة تأثير طفرات CTNNB1 في سياق خلفية WT1 الوظيفية جزئيًا. من الناحية النمطية، تُظهر خلايا ويلمز3 مورفولوجيا شبيهة بالأنسجة الوسيطة تعبر عن الفيمينتين وتفتقر إلى السيتوكراتين، بما يتوافق مع الخصائص اللحمية التي لوحظت في الورم الأصلي. تُظهر هذه الخلايا قدرة محدودة على التمايز، مع القدرة على الخضوع لبعض التمايز الوسيمي الوسيطي في ظل ظروف محددة. وقد كشفت التحليلات البروتينية لويلمز3 عن تنشيط العديد من مستقبلات التيروزين كيناز (RTKs)، بما في ذلك PDGFRβ وAXL، التي تدعم بقاء الخلايا وتكاثرها. وبالإضافة إلى ذلك، يتم تنشيط مسارات الإشارات اللاحقة مثل MAPK وPI3K/AKT، مما يعزز الخصائص الخبيثة لخلايا ويلمز3. ويتمثل أحد الجوانب الفريدة من نوعها في ويلمز3 في وظيفة WT1 الجزئية، والتي توفر منظوراً متميزاً حول كيفية مساهمة طفرات WT1 في بيولوجيا ورم ويلمز عندما لا تكون الطفرة كاملة. ويوفر التفاعل بين إشارات WT1 وإشارات Wnt في ويلمز3 فرصة قيّمة لدراسة الأدوار الدقيقة التي تلعبها هذه المسارات في تطور الورم. وبشكل عام، يُعتبر ويلمز3 نموذجاً مهماً لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء ورم ويلمز في وجود فقدان جزئي لـ WT1 وتنشيط مسار Wnt التأسيسي. |
|---|---|
| كائن حي | الإنسان |
| الأنسجة | الكلى |
| المرض | ورم ويلمز |
| التطبيقات | نموذج زراعة الخلايا في المختبر. الدراسات البيوكيميائية الحيوية |
الخصائص
| العمر | 11-12 شهراً |
|---|---|
| الجنس | الذكور |
| العرق | قوقازي |
| علم الصرف | على شكل مغزل |
| نوع الخلية | خلايا ويلمز |
| خصائص النمو | ملتزم |
البيانات التنظيمية
| اقتباس | ويلمز3 (كتالوج سيتيون رقم 300414) |
|---|---|
| مستوى السلامة البيولوجية | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| سيلوسوروسأكسيون | CVCL_A5SF |
البيانات الجزيئية الحيوية
| الملامح الطفرية | حالة الطفرة في WT1: متماثل الزيجوت c.1293-1294insA, p.V432fsx87، LOH: 11p11-11pter، حالة الطفرة في CTNNB1: النوع البري |
|---|
المناولة
| الوسط الثقافي | مجموعة MSCGM (من لونزا) |
|---|---|
| كاشف التفكك | أكوتاس |
| الاستزراع الفرعي | قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد. |
| وسيط التجميد | كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد. |
| إذابة الخلايا وزراعتها |
|
| أجواء الاحتضان | 37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب. |
| طلاء القارورة | لا شيء |
| إجراء التجميد | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| شروط الشحن | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| ظروف التخزين | للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل. |
مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA
| العقم | يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي. |
|---|---|
| أليلات HLA |
A*: '03:01:01
B*: '35:01:01, '35:03:01
C*: '04:01:01
DRB1*: '04:03:01, '11:04:01
DQA1*: '03:01:01, '05:05:01
DQB1*: '03:01:01, '03:02:01
DPB1*: '01:01:01, '04:01:01
E: '01:03:02, '01:06:01
|
شهادة التحليل (CoA)
| رقم القطعة | نوع الشهادة | التاريخ | رقم الكتالوج |
|---|---|---|---|
| 300414-221 | شهادة التحليل | 23. May. 2025 | 300414 |
اتفاقية نقل المواد
إذا كنت تنوي استخدام خطوط الخلايا Cytion حصريًا لأغراض البحث الداخلي في موقع بحثي واحد، يرجى ملء وتوقيع اتفاقية نقل المواد (MTA) الخاصة بنا وإرسالها مع طلبك.
لأي تطبيقات تجارية - بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأعمال مقابل أجر، واختبارات مراقبة الجودة، وإطلاق المنتجات، والاستخدام التشخيصي، أو الدراسات التنظيمية - يرجى ملء نموذج الاستخدام المقصود حتى نتمكن من إعداد اتفاقية مناسبة ومصممة خصيصًا لمشروعك.
يرجى ملاحظة: تنطبق اتفاقية نقل المواد (MTA) على سلالات خلوية معينة فقط. إذا ظهر هذا الإشعار ووثيقة اتفاقية نقل المواد (MTA) على صفحة المنتج، فإن الاتفاقية تكون سارية. بالنسبة للسلالات الخلوية التي لا تشملها اتفاقية نقل المواد (MTA)، لن تظهر أي إشارة إلى الاتفاقية. اتفاقية نقل المواد (MTA) غير صالحة للعملاء في الأمريكتين أو الصين أو تايوان. يرجى الاتصال بكياننا في الولايات المتحدة للحصول على الاتفاقية المناسبة.