خلايا U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 300461

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث

الوصف	إن سلالة U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple هي سلالة خلايا ساركوما عظمية معدلة وراثياً مشتقة من خط خلايا U-2 OS البشرية المعروفة بخصائص نموها القوية وفائدتها في مختلف الدراسات البيولوجية. وقد تم تعديل هذا المستنسخ الخاص باستخدام تقنية التعديل الجيني CRISPR/Cas9 لدمج بروتين mMaple، وهو بروتين فلوري قابل للتحويل الضوئي، في جين NUP96. ويسمح بروتين mMaple بتقنيات تصوير متقدمة مثل التصوير الخلوي الحي والفحص المجهري فائق الدقة، مما يوفر رؤى ديناميكية لسلوك مجمع المسام النووية وآليات الاستيراد والتصدير الخلوي عبر الغلاف النووي. ويُعد جين NUP96، الذي يشفر أحد المكونات الأساسية للمركب النووي البلمي، عنصراً حيوياً في نقل البلازما النووية. ويمكن أن يؤثر تغيير الجين NUP96 ليس فقط على آليات النقل ولكن أيضاً على البنية والوظيفة النووية الشاملة. وبالتالي، يُستخدم هذا الخط الخلوي كنموذج ممتاز لدراسة الأمراض المرتبطة بالنقل النووي الخلوي ودور النقل النووي في عملية الأيض الخلوي والإشارات. ويسمح دمج mMaple في NUP96 بتتبع وتصور ديناميكيات NUP96 في الوقت الحقيقي في الجسم الحي، مما يجعله أداة لا غنى عنها للباحثين الذين يركزون على دراسات نواة الخلية وأولئك الذين يستكشفون الآثار المترتبة على اختلالات وظائف NPC في أمراض مثل السرطان والعدوى الفيروسية. وباعتباره أداة متخصصة، يدعم استنساخ U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple رقم 16 التصوير عالي الدقة ويوفر بيانات جوهرية فيما يتعلق بالتوزيع المكاني والزماني لمكونات NPC. وهو ذو قيمة خاصة للتجارب التي تتطلب تحليلاً مفصلاً للتعبير الجيني وتوطين البروتين والنقل النووي في ظل الظروف الفسيولوجية والمرضية، مما يسهل فهماً أعمق للعمليات الخلوية على المستوى الجزيئي.
كائن حي	الإنسان
الأنسجة	العظام
المرض	الساركوما العظمية العظمية

العمر	15 سنة
الجنس	أنثى
العرق	قوقازي
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple (كتالوج سيتيون رقم 300461)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	9606
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_B7FK
المودع	مختبر إلينبرغ (EMBL)
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا	GMO-S1: يحتوي هذا الخط الخلوي الساركوما العظمية البشرية (U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple، المستنسخ 16) على تركيبة NUP96-mMaple بوساطة CRISPR تتيح وضع علامات قابلة للتحويل الضوئي على هياكل المسام النووية. التركيبة موجودة بثبات. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى.

التعبير البروتيني	NUP96-mMaple (بروتين المسام النووي المعقد 96، موسوم بوسم mMaple)

الوسط الثقافي	مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
المكملات الغذائية	يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، 1٪ NEAA
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر	1 × 10⁴ ^خلية/^سم2
تجديد السوائل	2 إلى 3 مرات في الأسبوع
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	للحصول على التعلق الأمثل والصلاحية المثلى بعد الذوبان، نوصي باستخدام قوارير أو أطباق مغطاة بالكولاجين.
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

رقم القطعة	نوع الشهادة	التاريخ	رقم الكتالوج
300461-210524	شهادة التحليل	18. Aug. 2025	300461

يُرجى ملاحظة أن هذا الخط الخلوي غير متاح بموجب اتفاقية سايتون MTA القياسية، حيث يتطلب اتفاقية طرف ثالث و/أو يخضع للتفاوض مع المرخص الأصلي.

مدعوم من بايوز شاهد المزيد من التفاصيل عن بايوز

خلايا U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث