خلايا U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 300444

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث

الوصف	إن U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP هو خط خلوي معدّل وراثياً من الساركوما العظمية مشتق من خط الخلايا البشرية U-2 OS الأم. وقد تمت هندسة هذا الخط الخلوي من خلال تعديل الجينوم بوساطة CRISPR/Cas9 لدمج علامة SNAP في جين NUP96، مما يتيح تصور ودراسة ديناميكيات مجمع المسام النووية. تُعدّ مجمعات المسام النووية (NPCs) حاسمة في تنظيم النقل النووي للبلازمية النووية، ويُعدّ NUP96 مكوناً مهماً في NPC، حيث يلعب دوراً محورياً في سلامته الهيكلية ووظيفته. في استنساخ U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP رقم 33، يسمح دمج علامة SNAP في موضع NUP96 بالربط التساهمي المحدد والتساهمي للركائز الفلورية أو غيرها من المسابر الكيميائية التي يمكن استخدامها لتصوير الخلايا الحية وغيرها من الفحوصات الكيميائية الحيوية. هذه الميزة تجعلها أداة لا تقدر بثمن للتحقيق في الديناميكيات الجزيئية للنقل الخلوي الخلوي الخلوي وفهم الأمراض المرتبطة بالخلية العصبية النواة وفحص المركبات العلاجية التي تؤثر على وظيفة الخلية العصبية النواة. كما يحتفظ خط الخلية أيضًا بخصائص خط U-2 OS الأبوي الذي يتضمن مستوى عالٍ من الاستقرار الوراثي وسهولة الاستزراع، مما يجعله مناسبًا للفحص عالي الإنتاجية والدراسات الموسعة في بيولوجيا الخلية. ونظراً لخصوصية التعديل في جين NUP96، يوفر استنساخ U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP رقم 33 نموذجاً فريداً للدراسة التفصيلية لمكونات NPC في سياق الوظيفة الخلوية والخلل الوظيفي. يمكن للباحثين استغلال نظام علامة SNAP لتسمية NUP96 بشكل انتقائي وسريع، مما يسهل التصور في الوقت الحقيقي لديناميكيات NPC في ظل الظروف الفسيولوجية والمرضية. يمكن أن يكون هذا المستنسخ المحدد بمثابة منصة قوية لكل من البحوث الأساسية والدراسات الطبية الحيوية التطبيقية، مما يساهم بشكل كبير في مجالات البيولوجيا الخلوية وعلم الوراثة وعلم الأورام.
كائن حي	الإنسان
الأنسجة	العظام
المرض	الساركوما العظمية العظمية

العمر	15 سنة
الجنس	أنثى
العرق	قوقازي
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP (كتالوج سيتيون رقم 300444)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	9606
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_B7FL
المودع	مختبر إلينبرغ (EMBL)
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا	GMO-S1: يحتوي هذا الخط الخلوي للساركوما العظمية البشرية (U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP، المستنسخ 33) على اندماج NUP96-SNAP المعدل هندسيًا باستخدام تقنية كريسبر لتسهيل وضع العلامات الكيميائية لعلامة SNAP على المسام النووية. تم دمج التعديل بشكل مستقر. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى.

التعبير البروتيني	NUP96-SNAP (بروتين المسام النووي المعقد 96، علامة SNAP)

الوسط الثقافي	مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
المكملات الغذائية	أضف إلى الوسط 10٪ FBS، و3.0 جم/لتر جلوكوز، وغلوتامين مستقر، و2.0 ملي مولار من بيروفات الصوديوم، و2.2 جم/لتر NaHCO3، و1٪ NEAA
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر	1 × 10⁴ ^خلية/^سم2
تجديد السوائل	2 إلى 3 مرات في الأسبوع
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	للحصول على التعلق الأمثل والصلاحية المثلى بعد الذوبان، نوصي باستخدام قوارير أو أطباق مغطاة بالكولاجين.
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

رقم القطعة	نوع الشهادة	التاريخ	رقم الكتالوج
300444-040724	شهادة التحليل	23. May. 2025	300444

يُرجى ملاحظة أن هذا الخط الخلوي غير متاح بموجب اتفاقية سايتون MTA القياسية، حيث يتطلب اتفاقية طرف ثالث و/أو يخضع للتفاوض مع المرخص الأصلي.

مدعوم من بايوز شاهد المزيد من التفاصيل عن بايوز

خلايا U2OS-CRISPR-NUP96-SNAP

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

شهادة التحليل (CoA)

اتفاقية الطرف الثالث