B16-F10 細胞——探討 B16-F10 黑色素瘤細胞系在轉移研究中的應用
B16-F10 細胞是一種源自 C57BL/6J 小鼠的黑素瘤細胞系，廣泛應用於皮膚癌研究。 研究人員利用這些細胞來研究腫瘤的發育與進展，以及治療干預措施。本文將探討 B16-F10 黑色素瘤細胞的基本特性，其中特別包含：
- 生長培養基
- B16-F10 細胞以 DMEM 培養基進行培養。為促進細胞理想生長，培養基中需添加 10% 胎牛血清（FBS）、4 mM L-谷氨醯胺、1.5 g/L 碳酸氫鈉（NaHCO₃）、4.5 g/L 葡萄糖，以及 1.0 mM 丙酮酸鈉。 培養基應每週更換 2 至 3 次。
- 倍增時間
- B16-F10 細胞的倍增時間約為 20.1 小時。視培養條件而定，範圍可能介於 17 至 21 小時之間。
- 生長類型
- B16-F10 為貼壁型細胞系。該細胞生長迅速，並形成單層。
- 生物安全等級
- BSL-1
- 可向以下機構取得
- Cytion — 訂購 B16-F10
- B16-F10 細胞系的來源與一般特性
- B16-F10 細胞的培養資訊
- B16-F10 細胞：優點與缺點
- B16-F10 細胞的研究應用
- 以 B16-F10 細胞系為主題的出版物
- B16-F10 細胞系的相關資源：操作手冊、影片等
B16-F10 細胞系的來源與一般特性
本節將帶您深入了解 B16-F10 黑色素瘤腫瘤細胞的來源及其獨特特性，協助您在研究工作中有效運用此細胞系。您將主要了解：何謂 B16-F10 細胞？ B16-F10 源自何處？B16-F10 細胞系的形態為何？B16-F10 細胞的大小為何？
- B16-F10 是源自 C57BL/6J 小鼠皮膚組織的 B16 腫瘤細胞系的亞克隆。在此，B16F10 黑色素瘤細胞是透過將 B16 細胞系靜脈注射至免疫缺陷小鼠或同基因小鼠後所培育而成的。 這些細胞因其具有在體內形成肺轉移集落的潛力而被篩選出來，並在體外經過十個週期的肺集落形成後確立為細胞系 [1]。該細胞系由 Fidler 及其同事於 1976 年建立。
- B16-F10 細胞系具有上皮樣且紡錘形的形態。
- B16-F10 細胞的大致尺寸為 15.4 ± 1.4 μm [2]。
B16-F1 與 B16-F10 細胞
B16-F1 和 B16-F10 細胞均源自 B16 親本細胞系。兩者源自同一來源，且具有幾乎相似的特徵。然而，兩者的主要差異在於其轉移能力。 B16-F10 細胞具有較高的轉移潛力，而 B16-F1 則具有較低的轉移潛力 [3]。
B16-F10 細胞的培養資訊
在處理及培養細胞系之前，必須了解其倍增時間、生長培養基、培養條件以及細胞培養流程。本節將探討：B16-F10 細胞的倍增時間為何？如何培養 B16-F10 細胞？B16-F10 細胞的培養基為何？ 建議採用何種培養條件來培養 B16-F10 細胞？
B16-F10 細胞培養的重點
倍增時間：
B16-F10 細胞的倍增時間約為 20.1 小時。根據培養條件的不同，其範圍可能介於 17 至 21 小時之間。
貼壁或懸浮培養：
B16-F10 為貼壁型細胞系。該細胞生長迅速，並會形成單層。
傳代比例：
B16-F10 細胞的傳代比例為 1:2 至 1:4。先以磷酸緩衝鹽水（1x）洗滌細胞，接著於室溫下以 Accutase 傳代溶液孵育 8 至 10 分鐘。加入新鮮培養基後進行離心。 將收集到的細胞沉澱再次懸浮，並根據傳代比例將細胞分裝至含有新鮮培養基的新培養瓶中。
生長培養基：
B16-F10 細胞以 DMEM 培養基進行培養。為促進細胞理想生長，培養基中需添加 10% 胎牛血清 (FBS)、4 mM L-谷氨醯胺、1.5 g/L 碳酸氫鈉 (NaHCO₃)、4.5 g/L 葡萄糖及 1.0 mM 丙酮酸鈉。 培養基應每週更換 2 至 3 次。
培養條件：
B16-F10 細胞於 37 °C、5% CO₂ 環境下的加濕培養箱中培養。
儲存：
冷凍細胞應儲存於電熱超低溫冷凍櫃中，溫度低於 -150 °C，或置於液態氮的氣相中，以維持細胞存活率。
冷凍程序與培養基：
B16-F10 細胞需在 CM-1 或 CM-ACF 培養基中冷凍以供儲存。為此，建議採用每分鐘溫度僅下降 1°C 的緩慢冷凍程序，以防止細胞受到任何冷衝擊。
解凍程序：
冷凍的 B16-F10 細胞需置於預設為 37°C 的水浴中解凍 40 至 60 秒。接著，將細胞加入新鮮培養基中並進行離心，以去除冷凍培養基中的成分。收集到的細胞需重新懸浮於生長培養基中，並倒入培養瓶中進行培養。
生物安全等級：
處理及維護 B16-F10 細胞系須於生物安全等級 1 的實驗室進行。
B16-F10 細胞：優點與缺點
與其他細胞系一樣，B16-F10 亦具備某些優點與缺點。本節將探討此皮膚黑色素瘤細胞系的一些顯著優點與缺點。
優點
B16-F10 細胞系在癌症研究中被廣泛應用。B16-F10 細胞的優點包括：
轉移潛力
皮膚黑色素瘤 B16-F10 細胞具有高度轉移潛能，使其成為研究癌症轉移及其潛在機制的重要模型。
體外腫瘤模型
B16-F10 細胞可作為研究癌症進展與生長的體外模型，協助研究人員理解驅動癌症的細胞與分子機制。
缺點
B16-F10 細胞系相關的缺點包括：
源自小鼠的細胞系
B16-F10 為源自小鼠的細胞系，其應用範圍在針對人類的專項研究上受到限制。基於這些細胞的研究結果，未必能完全準確地轉化為人類生物學的現象。
B16-F10 細胞的研究應用
B16-F10 細胞系廣泛應用於癌症研究。本文將探討該細胞系中幾項具潛力的應用。
- 癌症研究：B16-F10 細胞系是研究癌細胞過程（包括增殖、侵襲、遷移以及細胞死亡或凋亡）的寶貴模型。此外，它有助於研究人員深入了解驅動這些細胞過程的分子機制與路徑。 一項於 2018 年進行的研究，探討了 CCR5（C-C 趨化因子受體 5 型）在黑色素瘤細胞上皮-間質轉化及轉移中的作用。 研究結果顯示，CCR5 缺失會抑制腫瘤生長與轉移，而高表達則會導致 B16-F10 細胞的生長與轉移增強。 後續研究指出，CCR5 會調節 TGFβ1 的表達，而 TGFβ1 則透過調節 PI3K/AKT/GSK3β 訊號傳導路徑，促進上皮-間質轉化及細胞遷移 [4]。
- 藥物測試與開發：B16F10 黑色素瘤腫瘤細胞具有高度侵襲性，因此非常適合用於測試潛在的抗腫瘤藥物和治療方法。研究人員利用這些細胞，評估不同化合物對細胞生長、增殖和轉移的影響，藉此輔助藥物開發。 Valentina Nanni 及其同事於 2018 年進行的一項研究，探討了 Spartium junceum 花朵的水醇萃取物的治療效果。 該研究指出，花朵萃取物能有效誘導 B16-F10 細胞進入衰老狀態，進而抑制細胞生長與黑色素生成，因此可能具有潛在的抗癌活性 [5]。
5. 以 B16-F10 細胞系為主題的出版物
以下是幾篇以 B16-F10 黑色素瘤細胞系為研究對象的重要研究論文：
雙色高粱乙醇萃取物對 B16/F10 黑色素瘤細胞中 IBMX 誘導之黑色素生成的抑制作用
這項研究發表於《Nutrients》（2020年）。研究指出，二色高粱乙醇萃取物對皮膚黑色素瘤 B16-F10 細胞具有抗黑色素生成作用。
這項發表於《Medical Science Monitor Basic Research》（2022年）的研究指出，藥物「骨化三醇」透過抑制增殖並誘導凋亡，對B16-F10黑色素瘤細胞發揮抗腫瘤作用。
卡多爾的促氧化作用參與其對小鼠 B16–F10 黑色素瘤細胞的細胞毒性作用
此篇論文發表於《生物化學與生物物理研究通訊》（2022年）。研究結果顯示，卡多爾（一種間苯二酚類脂質）對 B16-F10 細胞系具有強烈的細胞毒性。
銀杏外果皮萃取物透過PI3K/Akt/NF-κB/MMP-9訊號傳導路徑抑制B16-F10黑色素瘤的轉移
這項發表於《循證輔助與替代醫學》（2018年）的研究，利用 B16-F10 細胞探討了銀杏外果皮萃取物的抗轉移潛力。
胸腺呋喃酮透過抑制 p-STAT3 誘導 B16-F10 黑色素瘤細胞凋亡，並抑制小鼠腦內黑色素瘤的腫瘤生長……
這項發表於《世界神經外科》（2018年）的研究提出，由於胸腺喹酮能抑制 B16-F10 細胞生長並誘導凋亡，因此可作為治療腦內轉移病灶的有效療法。
B16-F10 細胞系相關資源：操作手冊、影片及其他資料
B16F10 內皮細胞廣泛應用於皮膚癌研究。以下是一些說明其培養與轉染操作流程的線上資源：
- B16-F10 黑色素瘤細胞轉染：此影片教學可協助您學習 B16-F10 細胞的轉染操作流程。
- B16-F10 轉染：本文件將說明皮膚黑色素瘤 B16F10 細胞的體外 DNA 轉染操作流程。
以下連結包含 B16-F10 細胞的細胞培養操作流程：
- B16-F10 傳代培養：此網站提供有關 B16-F10 黑色素瘤腫瘤細胞的有用資訊，內容涵蓋生長培養基、倍增時間、培養條件、細胞傳代培養流程，以及冷凍保存與增殖性培養物的處理方法。
參考文獻
- Poste, G. 等，來自培養細胞系、皮下腫瘤及個別肺轉移灶所分離之 B16 黑色素瘤克隆的轉移特性比較。《癌症研究》（Cancer Research），1982 年，42(7)：第 2770-2778 頁。
- Nakamura, M.、D. Ono 及 S. Sugita，《利用錐形微流體裝置對 B16 黑色素瘤細胞變異體進行力學表型分析，以評估 (-)-表沒食子兒茶素沒食子酸酯治療的功效》。《微機電系統》，2019。 10(3)：第 207 頁。
- Danciu, C.等人，四種不同 B16 小鼠黑色素瘤細胞亞系的行為：C57BL/6J 皮膚。《國際實驗病理學雜誌》，2015年。96(2)：第 73-80 頁。
- Liu, J. 等，黑色素瘤中 CCR5 的高表達透過 TGFβ1 增強上皮-間質轉化與轉移。《病理學雜誌》，2019 年。247(4)：第 481-493 頁。
- Nanni, V.等人，Spartium junceum L. 花朵的水酒精萃取物透過誘導細胞衰老，抑制 B16-F10 細胞的生長與黑色素生成。《植物醫學》，2018年，46期：第1-10頁。