Cellules de Wilms3

1 104,00 CAD$*

Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10^⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10^⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

tube cryogénique

Numéro de produit : 300414

Fiche signalétique

Fiche de produit

Certificat d'analyse (CoA)

Description	La lignée cellulaire Wilms3 a été établie à partir d’une tumeur de Wilms primaire chez un enfant, caractérisée par une mutation somatique du gène WT1. Contrairement à de nombreuses autres lignées cellulaires de tumeurs de Wilms, Wilms3 porte une mutation hétérozygote avec décalage du cadre de lecture dans le gène WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), ce qui entraîne la production d’une protéine WT1 tronquée. Cette perte partielle de la fonction de WT1 est associée au développement de tumeurs présentant un phénotype stromal ou mésenchymateux. Cependant, la mutation du gène WT1 dans Wilms3 n’est pas homozygote, ce qui complique son étude, car elle conserve une partie de la fonction de WT1 susceptible d’influencer la biologie tumorale différemment par rapport aux lignées cellulaires présentant une perte complète de WT1. La tumeur de Wilms3 porte également une mutation du gène CTNNB1, touchant plus précisément la thréonine 41 (p.T41A), qui joue un rôle essentiel dans la voie de signalisation Wnt. Cette mutation stabilise la β-caténine, empêchant sa dégradation et entraînant l’activation constitutive de la voie Wnt. L’activation persistante de la voie de signalisation Wnt stimule la prolifération cellulaire et contribue à la tumorigenèse dans Wilms3, ce qui en fait un modèle clé pour étudier l’impact des mutations du gène CTNNB1 dans le contexte d’un fond WT1 partiellement fonctionnel. Sur le plan phénotypique, les cellules Wilms3 présentent une morphologie de type mésenchymateuse, exprimant la vimentine et dépourvues de cytokératine, ce qui correspond aux caractéristiques stromales observées dans la tumeur d’origine. Ces cellules présentent un potentiel de différenciation limité, avec la capacité de subir une certaine différenciation mésenchymateuse dans des conditions spécifiques. Les analyses protéomiques de Wilms3 ont révélé l’activation de plusieurs récepteurs tyrosine-kinases (RTK), notamment PDGFRβ et AXL, qui favorisent la survie et la prolifération cellulaires. De plus, des voies de signalisation en aval, telles que MAPK et PI3K/AKT, sont activées, renforçant ainsi les propriétés malignes des cellules Wilms3. Un aspect unique de Wilms3 réside dans la fonctionnalité partielle de WT1, ce qui offre une perspective distincte sur la manière dont les mutations de WT1 contribuent à la biologie de la tumeur de Wilms lorsque la mutation n’est pas complète. L’interaction entre WT1 et la voie de signalisation Wnt dans Wilms3 offre une occasion précieuse d’étudier les rôles nuancés que ces voies jouent dans le développement tumoral. Dans l’ensemble, Wilms3 constitue un modèle important pour l’étude des mécanismes moléculaires sous-jacents à la tumeur de Wilms en présence d’une perte partielle de WT1 et d’une activation constitutive de la voie Wnt.
Organisme	Humain
Tissu	Rein
Maladie	Tumeur de Wilms
Applications	Modèle de culture cellulaire in vitro. Études biochimiques

Âge	11 à 12 mois
Genre	Homme
Origine ethnique	caucasien
Morphologie	En forme de fuseau
Type de cellule	cellules de Wilms
Propriétés de croissance	Adepte

Référence	Wilms3 (numéro de catalogue Cytion 300414)
Niveau de biosécurité	1
NCBI_Numéro d'identification fiscale	9606
Cellosaurus - Numéro d'enregistrement	CVCL_A5SF

Profil mutationnel	Statut mutationnel du gène WT1 : homozygote pour c.1293-1294insA, p.V432fsx87; perte d'hétérozygotie (LOH) : 11p11-11pter; statut mutationnel du gène CTNNB1 : type sauvage

Milieu de culture	Trousse MSCGM (de Lonza)
Réactif de dissociation	Accutase
Repiquage	Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Milieu de congélation	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Décongélation et culture des cellules	Assurez-vous que le flacon reste bien congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche afin de maintenir des températures optimales pendant le transport. À la réception, conservez immédiatement le cryofiole à une température inférieure à -150 °C pour garantir la préservation de l’intégrité cellulaire, ou passez à l’étape 3 si une culture immédiate est nécessaire. Pour une culture immédiate, décongelez rapidement le flacon en l’immergeant dans un bain-marie à 37 °C contenant de l’eau propre et un agent antimicrobien, en agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace. Effectuez toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux laminaire, en désinfectant le cryotube avec de l’éthanol à 70 % avant de l’ouvrir. Ouvrez avec précaution le flacon désinfecté et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant délicatement. Centrifuger le mélange à 300 x g pendant 3 minutes pour séparer les cellules, puis jeter avec précaution le surnageant contenant le milieu de congélation résiduel. Remettre délicatement le culot cellulaire en suspension dans 10 ml de milieu de culture frais. Pour les cellules adhérentes, répartir la suspension dans deux flacons de culture T25; pour les cultures en suspension, transférer la totalité du milieu dans un seul flacon T25 afin de favoriser une interaction et une croissance cellulaires efficaces. Respectez les protocoles de sous-culture établis pour assurer la croissance continue et le maintien de la lignée cellulaire, garantissant ainsi des résultats expérimentaux fiables.
Atmosphère d'incubation	37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'entreposage	Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Stérilité	La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Numéro de lot	Type de certificat	Date	Numéro de catalogue
300414-221	Certificat d'analyse	23. May. 2025	300414

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Renseignements généraux

Caractéristiques

Données réglementaires

Données biomoléculaires

Manipulation

Contrôle de la qualité et analyse moléculaire

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