Cellules Wilms11

1 104,00 CAD$*

Les produits sont expédiés congelés, dans de la glace carbonique, à l'intérieur de cryotubes. Chaque cryotube contient généralement 3 × 10^⁶ cellules pour les lignées adhérentes ou 5 × 10^⁶ cellules pour les lignées en suspension (voir le certificat d'analyse du lot pour plus de détails).

Prix hors taxes, frais de livraison en sus

tube cryogénique

Numéro de produit : 300420

Fiche signalétique

Fiche de produit

Certificat d'analyse (CoA)

Description	La lignée cellulaire Wilms11 a été dérivée d’une tumeur de Wilms (néphroblastome) primaire chez un enfant. Contrairement à de nombreuses autres lignées cellulaires de tumeurs de Wilms, Wilms11 se caractérise par la présence du gène WT1 de type sauvage, ce qui signifie qu’elle ne présente pas de mutations dans le gène WT1, généralement associées à des tumeurs de Wilms présentant des phénotypes plus agressifs ou stromaux. Cependant, la tumeur Wilms11 présentait une différenciation stromale importante, avec de vastes zones de différenciation rhabdomyomateuse, indiquant la présence d’éléments mésenchymateux au sein de la tumeur. La présence du gène WT1 de type sauvage, combinée à la différenciation stromale de la tumeur, offre un modèle unique pour comprendre la biologie de la tumeur de Wilms dans les cas où aucune mutation du gène WT1 n’est présente. Des études génétiques sur Wilms11 ont montré que cette lignée cellulaire porte une mutation spécifique à la tumeur dans le gène CTNNB1, qui code pour la β-caténine et joue un rôle crucial dans la voie de signalisation Wnt. Dans Wilms11, cette mutation affecte la sérine 45, un site de phosphorylation clé impliqué dans la dégradation de la β-caténine. La mutation du gène CTNNB1 entraîne la stabilisation de la β-caténine, ce qui conduit à son accumulation et à l’activation constitutive de la voie de signalisation Wnt, un facteur déterminant de la prolifération cellulaire et de la tumorigenèse. Cela fait de Wilms11 un modèle important pour l’étude de l’interaction entre la signalisation Wnt et le développement de la tumeur de Wilms, en particulier dans les cas où le gène WT1 reste intact. Les analyses protéomiques de Wilms11 ont révélé l’activation de plusieurs récepteurs de tyrosine kinase (RTK), notamment le PDGFRβ et l’AXL, qui contribuent à la croissance et à la survie des cellules tumorales. Des voies de signalisation en aval, telles que les voies MAPK et PI3K/AKT, sont également activées dans les cellules Wilms11, ce qui contribue à leur comportement tumorigène. La capacité des cellules Wilms11 à subir une différenciation mésenchymateuse, en particulier une différenciation rhabdomyomateuse, met en évidence leur potentiel en tant que modèle pour l’étude des composantes mésenchymateuses de la tumeur de Wilms. Dans l’ensemble, Wilms11 constitue un outil précieux pour l’étude des mécanismes moléculaires qui régissent la tumorigenèse de la tumeur de Wilms en l’absence de mutations du gène WT1, mais dans le contexte d’une activation de la voie Wnt.
Organisme	Humain
Tissu	Rein
Maladie	Tumeur de Wilms
Applications	Modèle de culture cellulaire in vitro. Études biochimiques

Âge	22 mois
Genre	Homme
Origine ethnique	caucasien
Morphologie	En forme de fuseau
Type de cellule	cellules de Wilms
Propriétés de croissance	Adepte

Référence	Wilms11 (numéro de catalogue Cytion 300420)
Niveau de biosécurité	1
NCBI_Numéro d'identification fiscale	9606
Cellosaurus - Numéro d'enregistrement	CVCL_A5SM

Profil mutationnel	Statut mutationnel du gène WT1 : homozygote pour la mutation c.901c>T, p.R301x du gène WT1. LOH : . Statut mutationnel du gène CTNNB1 : type sauvage

Milieu de culture	Trousse MSCGM (de Lonza)
Réactif de dissociation	Accutase
Repiquage	Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Milieu de congélation	Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Décongélation et culture des cellules	Assurez-vous que le flacon reste bien congelé à la livraison, car les cellules sont expédiées sur de la glace sèche afin de maintenir des températures optimales pendant le transport. À la réception, conservez immédiatement le cryofiole à une température inférieure à -150 °C pour garantir la préservation de l’intégrité cellulaire, ou passez à l’étape 3 si une culture immédiate est nécessaire. Pour une culture immédiate, décongelez rapidement le flacon en l’immergeant dans un bain-marie à 37 °C contenant de l’eau propre et un agent antimicrobien, en agitant doucement pendant 40 à 60 secondes jusqu’à ce qu’il ne reste qu’un petit morceau de glace. Effectuez toutes les étapes suivantes dans des conditions stériles sous une hotte à flux laminaire, en désinfectant le cryotube avec de l’éthanol à 70 % avant de l’ouvrir. Ouvrez avec précaution le flacon désinfecté et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 ml contenant 8 ml de milieu de culture à température ambiante, en mélangeant délicatement. Centrifuger le mélange à 300 x g pendant 3 minutes pour séparer les cellules, puis jeter avec précaution le surnageant contenant le milieu de congélation résiduel. Remettre délicatement le culot cellulaire en suspension dans 10 ml de milieu de culture frais. Pour les cellules adhérentes, répartir la suspension dans deux flacons de culture T25; pour les cultures en suspension, transférer la totalité du milieu dans un seul flacon T25 afin de favoriser une interaction et une croissance cellulaires efficaces. Respectez les protocoles de sous-culture établis pour assurer la croissance continue et le maintien de la lignée cellulaire, garantissant ainsi des résultats expérimentaux fiables.
Atmosphère d'incubation	37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.
Conditions d'expédition	Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
Conditions d'entreposage	Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Stérilité	La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence. Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Numéro de lot	Type de certificat	Date	Numéro de catalogue
300420-221	Certificat d'analyse	23. May. 2025	300420
300420-240226	Certificat d'analyse	25. Mar. 2026	300420

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Renseignements généraux

Caractéristiques

Données réglementaires

Données biomoléculaires

Manipulation

Contrôle de la qualité et analyse moléculaire

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