U937 Hücreleri - Monositik Lösemi Araştırmaları ve Gelişmeler İçin Bir Model

U937 hücre hattı: Kültivasyon bilgileri

U937 hücrelerinin kültürüyle ilgili aşağıdaki önemli noktaları bilmek, bu hücrelerle çalışmanızı kolaylaştırır ve verimli hale getirir. Öğrenecekleriniz: U937 hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? U937 hücre hattı yapışkan mıdır yoksa süspansiyon mu? U937 besiyeri nedir? U937 hücreleri nasıl kültürlenir?

U937 Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar

Popülasyon Çiftlenme Süresi:

U937 hücrelerinin ortalama popülasyon ikiye katlanma süresi 36 saattir. Ancak bu süre 48 ile 72 saat arasında değişebilir.

Yapışkan mı, Süspansiyonlu mu:

U937 makrofajları yuvarlak şekillidir ve süspansiyon kültürlerinde büyür.

Tohumlama Yoğunluğu:

U937 hücreleri için 1 x 10⁵ hücre/mL ekim yoğunluğu önerilir. Süspansiyon halindeki hücreler için pasaj çözeltisi gerekmez. Hücreler taze besiyeri ile seyreltilir ve sayılır. Hücreler, gerekli hücre yoğunluğunda yeni bir şişeye ekilir.

Büyüme Ortamı:

U937 hücre kültürü, RPMI 1640 besiyerinde muhafaza edilir. Bu besiyeri, optimum hücre büyümesi için 2,0 mM L-glutamin, 2,0 g/L NaHCO3, 2,0 g/L L-glikoz ve %10 FBS ile takviye edilir. Besiyeri haftada 1 ila 2 kez değiştirilir. 

Büyüme Koşulları (Sıcaklık, CO₂):

U937 hücre kültürleri, ideal büyüme için %5 CO₂ beslemesi olan 37°C nemlendirilmiş bir inkübatör gerektirir.

Saklama:

U937 hücreleri, hücre canlılığını daha uzun süre korumak için sıvı azotun buhar fazında veya -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda saklanır.

Dondurma Süreci ve Ortam:

İnsan makrofaj hücre hattı U937'nin dondurulması için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamları kullanılır. Hücre canlılığını en üst düzeyde korumak için yavaş dondurma yöntemi (sıcaklığın kademeli olarak 1°C düşürülmesi) önerilir.

Çözme Süreci:

Dondurulmuş şişeler, küçük bir buz topakçığı kalana kadar 37°C'lik su banyosunda tutulur. Hücrelere taze besiyeri eklenir ve santrifüjlenir. Besiyeri atılır ve hücre peleti yeniden süspansiyon haline getirilerek yeni bir şişeye aktarılır. U937 hücreleri, dondurma işleminden nispeten hızlı bir şekilde toparlanır.

Biyogüvenlik Seviyesi:

U937 hücre kültürü için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar ortamları önerilir.

U937 hücre hattının araştırmalardaki uygulamaları

Histiyositik lenfoma hücre hattı olan U937 hücreleri, çeşitli biyolojik araştırma uygulamaları için paha biçilmez bir model görevi görür. Belirli koşullar altında makrofaj benzeri hücrelere farklılaşabilme yetenekleri nedeniyle, miyeloid hücrelerin incelenmesinde, özellikle de makrofaj modelleri olarak oynadıkları rol nedeniyle büyük önem taşırlar. U937 hücre hattı, enflamatuar yanıtları ve bağışıklık düzenlemesini anlamak için hayati önem taşıyan fagositik aktivite ve sitokinlerin nörobiyolojisi dahil olmak üzere makrofaj fonksiyonunun incelenmesini kolaylaştırır. Bu hücre hattı ayrıca birincil monositlere benzer özellikler sergiler; bu da araştırmacıların, birincil hücrelerde görülen değişkenlik olmadan bağışıklık hücresi davranışının inceliklerini araştırmalarına olanak tanır.

• Sitogenetik: Sitogenetik karakterizasyon alanında, U937 hücreleri, özellikle sentromer yakalama ve homolog kromozomların davranışı açısından, 11. kromozomun ve 16. kromozomun bazı bölümlerinin incelenmesinde kilit rol oynamıştır. Araştırmacılar, U937 hücrelerinin türetildiği histiyositik lenfoma da dahil olmak üzere kanser ilerlemesinin temellerini anlamak için hayati önem taşıyan genom yeniden düzenlenmesi ve genom instabilitesini araştırmak üzere bu hücrelere güvenmektedir. Bu hücre hattı, doğru karyotip bilgisi sağladığından, kromozomlardaki anormallikleri ve yeniden düzenlenmiş kromozomları, özellikle de 20. kromozomun yeniden düzenlenmelerini içerenleri incelemek için mükemmel bir araçtır.
• Monositler/Makrofaj Biyolojisi: U937 hücre hattı, monositlerin ve makrofajların işlevlerini ve düzenlenmesini aydınlatmak için önemli bir model görevi görür. Bu, fagositoz, antijen sunumu ve sitokin üretimi gibi konuların araştırılmasını içerir. Özellikle, 2023 yılında yapılan bir çalışmada, insan makrofaj hücrelerinde glikomakropeptidin enflamatuar yanıt üzerindeki etkisini incelemek için U937 hücreleri kullanılmıştır. Bu araştırma, glikomakropeptidin anti-enflamatuar özelliklerini vurgulamış ve bu hücrelerdeki sitokin düzeylerinde bir azalma olduğunu göstermiştir [2].
• Kanser Araştırmaları: Onkoloji alanında, U937 hücreleri, kanserin temelini oluşturan hücresel mekanizmaların ve sinyal yolaklarının incelenmesinde önemli bir rol oynamaktadır. Ayrıca, antikanser ilaç taramalarında ve yeni kanser tedavilerinin değerlendirilmesinde de kilit öneme sahiptirler. Bu uygulamayı yansıtan bir çalışmada, taze ve buharda pişirilmiş lahana suyunun antikanser etkilerini değerlendirmek için U937 miyeloid lösemi hücre hattı kullanılmıştır. Bu çalışmanın bulguları, söz konusu suyun kaspaz bağımlı bir yolak aracılığıyla kanser hücrelerinde apoptozu teşvik edici faaliyetleri desteklediğini göstermiştir [3].
• Toksikoloji Çalışmaları: U937 hücreleri, çevre kirleticilerinin ve çeşitli kimyasalların sitotoksik etkilerini araştırmak için de kullanılmaktadır. Örneğin, bir çalışmada polietilen mikroplastiklerin potansiyel sitotoksik etkilerini değerlendirmek amacıyla diğer hücre hatlarının yanı sıra U937 hücre hattı da kullanılmıştır [4]. Bu çalışma, diğerleriyle birlikte, toksikoloji alanında U937 hücrelerinin önemini vurgulamakta ve maddelerin insan monositik hücreleriyle nasıl etkileşime girdiğini ve insan sağlığı üzerindeki potansiyel etkilerini anlamak için bir model sunmaktadır.

Konfokal lazer tarama mikroskopisini kullanarak araştırmacılar, U937 hücrelerinin fagositik aktivitesini görselleştirebilir ve nicel olarak ölçebilir; bu da enfeksiyon etkenleri dahil olmak üzere çeşitli uyaranlara verdikleri tepkilerin fenotipleştirilmesine yardımcı olur. Hücre hattı ontolojileri ve doğru karyotip bilgileri, bu tür çalışmaların kesinliğini daha da artırır.

U937 hücreleri: Araştırma yayınları

Aşağıda, U937 hücrelerini konu alan bazı ilginç ve öne çıkan araştırma çalışmaları yer almaktadır.

Planta Medica (2018) dergisinde yayınlanan bu çalışma, Tinospora crispa bitkisinden elde edilen önemli bir biyoaktif metabolitin, U937 makrofajlarında bağışıklık tepkilerini güçlendirme konusunda yüksek bir potansiyele sahip olduğunu ortaya koymuştur.

Bu araştırma makalesi 2020 yılında International Journal of Medical Laboratory dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışmada araştırmacılar, Peganum harmala tohum ekstraktının U937 monositleri ve makrofajlarındaki nitrik oksit üretimi üzerindeki potansiyel etkilerini değerlendirmiştir.

Science of the Total Environment dergisinde (2022) yayınlanan bu çalışma, çevre kirleticilerinin, yani polietilen mikroplastiklerin, U937, THP-1 ve diğer üç insan hücre hattı üzerindeki potansiyel sitotoksik etkisini değerlendirmiştir.

Bu araştırma, 2020 yılında BMC Complementary Medicine and Therapies dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, Vitex trifolia L. bitkisinin yapraklarından hazırlanan farklı özütlerin, U937 makrofajlarındaki sitokin üretimi üzerindeki etkilerini araştırmıştır.

U937 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

U937 hücreleri, yaygın olarak kullanılan araştırma araçlarıdır. U937 hücrelerinin hücre kültürü ve farklılaşma protokolünü açıklayan bazı değerli kaynaklar burada belirtilmiştir:

• U937 farklılaşma protokolü: Bu belge, U937 hücrelerinin farklılaşmasına yönelik bir protokol içermektedir. Ayrıca, U937 insan miyeloid lösemi hücrelerinin kültürlenmesine yönelik bir protokol de bulunmaktadır
• Süspansiyon hücrelerinin alt kültürü: Bu video, U937 gibi süspansiyon hücre hatlarının alt kültürüne ilişkin genel protokolü göstermektedir.
• U937 hücre hattı: Bu web sitesi, U937 hücreleri hakkında çok sayıda bilgi içermektedir. Sitede, U937 monositleri ve makrofajları için alt kültür oluşturma, dondurma ve çözme protokolleri açıklanmaktadır.