U87MG Hücreleri - U87MG Kullanılarak Yapılan Glioblastom Araştırmaları ve Bunların Beyin Kanseri Çalışmalarına Etkisi
İnsan birincil glioblastom hücre hattı olan U-87 MG, biyolojik araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Özellikle bu hücreler, sinirbilim ve immüno-onkoloji alanlarında kullanılmaktadır.
- Büyüme Ortamı
- U 87 MG hücre hattı, 1,0 g/L L-glukoz, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, %1 NEAA, 1 mM sodyum piruvat ve %10 FBS çözeltisi ile zenginleştirilmiş EMEM (Eagle's minimal essential medium) içinde kültürlenir. Besiyeri her 2 ila 3 günde bir yenilenmelidir.
- Çoğalma Süresi
- U 87 MG hücrelerinin popülasyon ikiye katlanma süresi 18-38 saat arasındadır.
- Büyüme Tipi
- U 87 MG, yapışkan bir hücre hattıdır. Hücreler uzun bir şekle sahiptir ve tek tabaka halinde büyürler.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Temin Edilebileceği Yer
- Cytion — U-87 MG Siparişi
- U-87 MG hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
- U-87 MG hücrelerinin kültivasyon bilgileri
- U-87 MG hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
- U-87 MG hücrelerinin kullanıldığı araştırma uygulamaları
- U87 MG Glioma Hücre Hattınızı Bugün Sipariş Edin
- U-87 MG hücre hattı: Araştırma Yayınları
- U-87 MG hücreleri için kaynaklar: Protokoller, videolar ve daha fazlası
- U-87 MG Glioma Araştırmalarına İlişkin Bilgiler: Sık Sorulan Sorular
- Kaynakça
- Sıkça sorulan sorular
U-87 MG hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
Bu bölümde, U87 hücre hattının kökeni ve genel özellikleri ele alınacaktır. U-87 MG hücreleri nedir? U87 hücreleri nereden gelir? U-87 MG'nin tam adı nedir? U87 hücreleri ne kadar büyüktür? U87 hücre hattının morfolojisi nasıldır?
- U87 hücre hattı, bir glioblastom, astrositom hücre hattıdır. 1966 yılında Uppsala Üniversitesi'nde kurulmuştur. Hücreler, glioblastom hastalığına yakalanmış 44 yaşındaki Kafkas bir erkekten elde edilmiştir. Bu hücre hattının resmi adı U 87 MG'dir ve bu kısaltma, Uppsala 87 Malign Glioma anlamına gelmektedir.
- U 87 MG hücreleri, epitel hücrelerine benzer bir morfolojiye sahiptir.
- U 87 MG hücrelerinin çapı 12 ila 14 µm arasında değişmektedir.
- Bu insan glioblastom hücre hattı hipodiploiddir ve hücre popülasyonunun yaklaşık %48'inde modal kromozom sayısı 44'tür. Bununla birlikte, hücre popülasyonunun %5,9'unda daha yüksek ploidiler de mevcuttur.
U-87 MG hücrelerinin kültürlenmesi hakkında bilgiler
U 87 MG hücreleriyle çalışmaya başlamadan önce, bu glioblastom hücrelerinin kültürüyle ilgili aşağıdaki önemli noktaları öğrenmelisiniz. Özellikle şunları bilmelisiniz: U 87 MG hücrelerinin popülasyon ikiye katlanma süresi nedir? U87 hücrelerinin kültürü için hangi besiyeri kullanılır? U-87 MG hücre hattının tohumlama yoğunluğu nedir?
U-87 MG Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
Popülasyon İkiye Katlanma Süresi:
U 87 MG hücrelerinin popülasyon ikiye katlanma süresi 18-38 saat arasındadır.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
U 87 MG, yapışkan bir hücre hattıdır. Hücreler uzun bir şekle sahiptir ve tek tabaka halinde büyürler.
Tohumlama Yoğunluğu:
Glioblastoma hücre hattı U 87 MG'nin 1 x 104 hücre/cm2 hücre yoğunluğunda ekilmesi önerilir. Yapışkan U87 hücreleri 1 x PBS kullanılarak yıkanır ve Accutase çözeltisi ile inkübe edilir. Ardından, ayrışmış hücreler santrifüjlenir ve geri kazanılır. Hücreler dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme besiyeri içeren yeni şişelere eklenir.
Büyüme Ortamı:
U 87 MG hücre hattı, 1,0 g/L L-glukoz, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, %1 NEAA, 1 mM sodyum piruvat ve %10 FBS çözeltisi ile zenginleştirilmiş EMEM (Eagle's minimal essential medium) içinde kültürlenir. Ortam her 2 ila 3 günde bir yenilenmelidir.
Büyüme Koşulları:
U-87 MG hücrelerinin optimum büyüme için %5 CO₂ beslemeli ve 37°C sıcaklıktaki nemlendirilmiş bir inkübatöre ihtiyacı vardır.
Saklama:
U87 hücreleri, glioblastom hücrelerinin maksimum canlılığını korumak için sıvı azotun buhar fazında veya -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda saklanır.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamları, U 87 MG hücrelerinin dondurulması için uygundur. Hücrelerin şoka maruz kalmasını önlediği ve hücre canlılığını koruduğu için yavaş dondurma işlemi önerilir.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş U-87 MG hücre hattı şişeleri, 37°C'lik su banyosunda çözülür. Hücrelere büyüme ortamı eklenir, yeniden süspansiyon haline getirilir ve yeni şişelere aktarılıp kültürlenir. Buna alternatif olarak, U87 hücreleri santrifüjlenerek dondurma ortamı uzaklaştırılabilir ve ardından kültürlenebilir.
Biyogüvenlik Seviyesi:
U 87 MG hücre kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 gereklidir.
U-87 MG hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
Bir hücre hattını düşündüğümüzde aklımıza gelen ilk soru şudur: U-87 MG hücrelerini kullanmanın avantajları nelerdir? U-87 hücrelerinin dezavantajları nelerdir?
Avantajlar
U-87 MG hücre hatları araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattıyla ilişkili bazı avantajlar şunlardır:
Avantajlar
- Yetiştirilmesi kolaydır: U-87 MG hücrelerinin kültürde bakımı kolaydır. Zahmetli veya karmaşık hücre kültürü gereklilikleri yoktur.
- Homojenlik: U-87 MG, homojen bir hücre hattıdır. Bir popülasyondaki hücrelerin çoğu aynı genetik yapıya sahiptir ve bu nedenle benzer özellikler gösterir. Bu hücreler, hücre süreçlerini incelemek, ilaç taraması yapmak ve testler gerçekleştirmek için kullanılır.
- İyi karakterize edilmiş: Bu glioblastom hücre hattı, büyüme özellikleri, morfoloji ve gen ekspresyonu açısından iyi karakterize edilmiştir; bu da onu değerli bir araştırma aracı haline getirir.
Dezavantajlar
- Sınırlı uygulanabilirlik: U-87 MG bir glioblastom hücre hattıdır, bu nedenle uygulamaları öncelikle glioblastomların ve altta yatan moleküler mekanizmaların incelenmesiyle sınırlıdır. Diğer kanser türlerini araştırmak için uygun olmayabilir.
U-87 MG hücrelerinin kullanıldığı araştırma uygulamaları
U87MG glioblastom hücre hattı, kanser çalışmalarında, özellikle de glioblastom araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. U 87 MG hücrelerinin bazı araştırma uygulamaları şunlardır:
- Kanser biyolojisi araştırmaları: U87 hücre hattı, kanserin büyümesi ve gelişimi, altta yatan moleküler mekanizmalar, sinyal yolları ve tümör mikroçevresini incelemek için kullanılır. 2020 yılında yayınlanan bir çalışmada, terapötik bir hedef olarak BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) genini araştırmak için bir glioblastom in vitro modeli olan U-87 MG hücre hattı kullanılmıştır. Bulgular, BMAL1 geninin siklin B1, metaloproteinaz-9 ve fosfo-AKT gen ekspresyonunu baskılayarak glioblastom hücrelerinin çoğalmasını, göçünü ve istilasını engellediğini göstermiştir [1]. 2019 yılında yürütülen bir başka araştırmada ise U87 hücre hattı kullanılmış ve lipopolisakkarit kaynaklı tümör nekroz faktörü-alfa (LITAF) transkripsiyon faktörünün ekspresyonunun azaltılmasının, FOXO-1 yolunun yukarı regülasyonu yoluyla gliom hücrelerinin radyosensitivitesini artırabileceği araştırılmıştır. LITAF, p53 ile indüklenen gen 7 (PIG7) olarak da bilinir [2].
- İlaç keşfi ve geliştirme: U-87 MG hücreleri, ilaç taraması ve test amaçları için kullanılabilir; bu da araştırmacıların yeni potansiyel antikanser ilaçlarını belirlemelerine ve bunların etkinliğini ve toksisitesini değerlendirmelerine olanak tanır. Bir araştırmada, Inula helenium (L.) özütünün antioksidan ve antikanser aktivitelerinin potansiyelini değerlendirmek için U87 MG glioblastom hücre hattı kullanılmıştır [3]. Benzer şekilde, başka bir yayında bitki özütlerinin sitotoksik ve apoptozik etkisini test etmek için U87 hücre hattının kullanıldığı belirtilmiştir [4]. Ayrıca, 2018 yılında yayınlanan bir araştırmada, Nuphar bitkilerinden ekstrakte edilen seskiterpen alkaloidlerin, duyarlı ve ilaca dirençli U-87 MG hücre hatları üzerindeki sitotoksik etkisi incelenmiştir [5].
U87 MG Glioma Hücre Hattınızı Hemen Sipariş Edin
U-87 MG hücre hattı: Araştırma Yayınları
İşte U87 MG hücre hattını konu alan bazı önemli araştırma yayınları.
Neuroreport dergisinin 2018 sayısında yayınlanan bu makale, hipoksinin PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α sinyal yolunu düzenleyerek insan glioblastom hücrelerinin göçünü ve istilasını artırabileceğini öne sürmüştür.
Bu çalışma, 2020 yılında Frontiers in Pharmacology dergisinde yayınlanmıştır. Araştırma bulguları, bir flavonoid olan Eriodictyol'ün U87 hücre hattı üzerinde antikanser etkileri sergilediğini ve hücre çoğalmasını ve metastazı bastırdığını belirtmektedir. Bu bileşik, PI3K/Akt/NF-κB yolunu modüle ederek antitümör özelliklerini ortaya koymaktadır.
Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) dergisinde yayınlanan bu araştırma, Xihuang hapı adı verilen bir Çin bitkisel formülün, ROS ile aktive edilen Akt/mTOR/FOXO1 kaskadını hedef alarak U87 hücrelerinde apoptozu tetikleyebileceğini ortaya koymaktadır.
LITAF, FoxO1 yolakları aracılığıyla insan gliom hücrelerinin radyosensitivitesini artırır
Bu araştırma makalesi, 2019 yılında Cellular and Molecular Neurobiology dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, LITAF adlı bir transkripsiyon faktörünün, FOXO-1 sinyal yolunu düzenleyerek glioma hücrelerinin radyo-duyarlılığını artırdığını ve bu hücrelerin sayısını azalttığını öne sürmüştür.
Bu makale, Biointerface Research in Applied Chemistry dergisinde (2019) yayınlanmıştır. Araştırmacılar, kurkumin yüklü PLGA nanopartiküllerinin sitotoksik etkisini araştırmak için U87MG hücrelerini kullanmıştır.
U-87 MG hücreleri için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
U87MG glioblastom hücre hattı, birçok kanser araştırma laboratuvarında kullanılmaktadır. Bu hücre hattını ele alan bazı kaynaklar şunlardır:
- U87 hücre hattının transfeksiyonu: Bu belge, U87MG hücreleri için bir transfeksiyon protokolünü açıklamaktadır.
- U87MG hücre hattının transfeksiyonu: Bu video, U87 hücrelerinin transfeksiyon protokolünü adım adım açıklayan bir eğitim videosudur.
U87 hücrelerinin hücre kültürü protokolüne ilişkin kaynak aşağıda listelenmiştir:
- U87 MG hücreleri: Bu bağlantı, U87MG hücre hattı hakkında temel bilgiler içerir. Kısa hücre bölme, dondurma ve hücre çözme protokollerini de içerir.
U87 MG Glioma Araştırmalarına İlişkin Bilgiler: Sıkça Sorulan Sorular
U87 glioblastoma hücreleri gibi glioma hücre hatları, tümör biyolojisi, genetiği ve ilaç yanıtlarını incelemek için kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılan insan gliomalarından türetilen kültür hücreleridir. Tümör davranışını anlamak ve terapötik stratejileri test etmek için model görevi görürler.
İzojenik hücre hattı, tek bir hücreden türetilen ve genetik homojenliği sağlayan hücreleri ifade eder. Glioma araştırmalarında, izojenik hatlar genetik değişiklikleri ve bunların tümör büyümesi ve tedavilere yanıt üzerindeki etkilerini incelemek için tutarlı bir model sağlar.
Glioma hücre hatlarının DNA profili, genetik değişikliklerin tanımlanması, tümör evriminin anlaşılması ve hedefe yönelik tedavilerin geliştirilmesi için kritik öneme sahiptir. IDH1 mutasyonları gibi genetik belirteçlere dayalı olarak tümörlerin sınıflandırılmasına yardımcı olur.
Hücre kültürü ortamındaki serum, glioma hücrelerine temel büyüme faktörleri, hormonlar ve besinler sağlar. Bununla birlikte, bileşimi deneysel tekrarlanabilirliği etkileyebilir, bu nedenle serumsuz veya tanımlanmış serum koşulları giderek daha fazla kullanılmaktadır.
Glioma hücre hatlarındaki hücre sitotoksisitesi, ilaçlarla veya doğal öldürücü (NK) hücreler gibi bağışıklık hücreleriyle tedaviden sonra hücre sağlığını, canlılığını ve ölümünü ölçen akış sitometrisi gibi testler kullanılarak değerlendirilir.
NK hücre sitotoksisitesi glioma tedavisi araştırmalarında kritik bir rol oynar çünkü NK hücreleri önceden hassaslaştırma olmadan tümör hücrelerini tanıyabilir ve öldürebilir. Glioma hücreleriyle NK hücre etkileşimlerinin incelenmesi, NK hücre aracılı tümör temizliğini artırmaya yönelik stratejilerin geliştirilmesine yardımcı olur.
Orijin tümör, orijinal biyolojik ortam ve tümörün özellikleri hakkında bağlam sağlar. Bunun anlaşılması, hücre hattı çalışmalarından elde edilen bulguların gerçek tümör davranışı ve hasta prognozu ile ilişkilendirilmesine yardımcı olur.
Elektron mikroskobu, glioma hücre hatlarında hücresel ve hücre altı yapıların ayrıntılı olarak görüntülenmesini sağlar; bu da hücre morfolojisini, organel sağlığını ve tedavileri takip eden değişiklikleri incelemek için çok önemlidir.
NKG2D ligandı tümör hücrelerinde ifade edilir ve NK hücreleri üzerindeki NKG2D reseptörüne bağlanarak sitotoksik bir yanıtı tetikler. Bu etkileşimi incelemek, gliomaya karşı bağışıklık tepkilerini anlamaya ve potansiyel olarak geliştirmeye yardımcı olur.
3D hücre kültürü modelleri, tümör mikroçevresini daha doğru bir şekilde taklit ederek glioma büyümesi, göçü ve ilaç direnci hakkında daha iyi bilgiler sağlar. Bu teknik, daha ilgili translasyonel onkoloji çalışmaları için çok önemlidir.
Kaynakça
- Gwon, D.H. ve ark., BMAL1, Siklin B1, Fosfo-AKT ve Metaloproteinaz-9'u aşağı regüle ederek U87MG Hücrelerinin Proliferasyonunu, Göçünü ve İnvazyonunu Bastırır. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C. ve ark., LITAF, FoxO1 Yolu Aracılığıyla İnsan Gliom Hücrelerinin Radyo Duyarlılığını Artırır. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871-882.
- Koc, K. ve ark., Inula helenium (L.) özütünün insan U-87 MG glioblastom hücre hattındaki antioksidan ve antikanser aktiviteleri. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh ve A. Ghasempour, Bitki özütlerinin meme kanseri, cilt kanseri ve glioblastom hücrelerinde sitotoksisite ve apoptoz indüksiyonu. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131-5142.
- Fukaya, M. ve ark., Nuphar bitkilerinden elde edilen seskiterpen alkaloidlerin duyarlı ve ilaca dirençli hücre hatlarına karşı sitotoksisitesi. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279-6286.