T98G Hücre Hattı
T98G hücreleri, genellikle biyomedikal araştırmalarda kullanılan bir insan glioblastom hücre hattını oluşturur. Özellikle bu hücreler, beyin kanseri araştırmalarında, hastalığa katkıda bulunan önemli hücreleri ve moleküler faktörleri incelemek için kullanılır. Ayrıca, araştırmacıların ilaç geliştirmeye yardımcı olabilecek yeni kanser ilaçlarını taramasına ve test etmesine yardımcı olurlar.
T98G hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
Makalenin bu bölümü, T98G hücre hattının temel özelliklerini keşfetmenize yardımcı olacaktır. Bu bölümde hücre hattının kökeni, morfolojisi, boyutu ve ploidi bilgileri yer alacaktır. Ayrıca, aşağıdaki soruları kapsamlı bir şekilde ele alacaktır: T98G hücreleri nedir? T98G ne tür bir hücredir? T98G nereden gelmiştir? T98G hücre hattının özellikleri nelerdir? Glioblastoma hücre hattı T98G U87 nedir?
- T98G hücre hattı, GH Stein tarafından oluşturulmuştur. Bu hücre hattı, glioblastoma multiforme hastası 61 yaşındaki Kafkasyalı bir erkeğin beyin dokusundan elde edilen fibroblast benzeri hücrelerden oluşmaktadır [1].
- T98G hücreleri tümör oluşturmaz; çıplak farelere enjekte edildiğinde tümör oluşturmazlar. Ancak, hücre kültüründe uygun bir tutunma ortamı sağlandığında çoğalma eğilimindedirler.
- Bu hücreler, fibroblast hücrelerine benzer bir morfolojiye sahiptir.
- Glioblastom hücre hattı T98G, hiperpentaploidi gösterir. Modal kromozom sayısı 128 ile 132 arasında değişir. Hücre popülasyonunun %1,39'unda daha yüksek ploidiler bulunabilir.
T98 ve T98G
Her ikisi de insan glioblastom hücre hatlarıdır ve benzer bir kökene sahiptir. Bu hücre hatları arasındaki tek fark kromozom sayısıdır. T98G, T98'in sahip olduğu kromozom sayısının neredeyse iki katına sahiptir. Bu nedenle, T98G, T98'in poliploid varyantı olarak bilinir.
T98G ve U87
U87 ve T98G, beyin kanseri araştırmalarında kullanılan insan glioblastom hücre hatlarıdır. U87, T98G GBM'ye kıyasla daha agresif bir fenotip sergiler.
2. T98G hücre hattı ile ilgili kültür bilgileri
Bir hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, o hücre hattına ilişkin kültürleme bilgilerini bilmek çok önemlidir. Bu bilgiler, laboratuvarda hücre hattını kolay ve rahat bir şekilde kullanmanıza yardımcı olacaktır. Şunları bilmelisiniz: T98G hücre hattının ikiye katlanma süresi nedir? T98G hücreleri için en uygun büyüme besiyeri hangisidir? T98G hücrelerinin büyüme özellikleri nelerdir? T98G hücrelerinin tohumlama yoğunluğu nedir? T98G hücreleri nasıl dondurulur?
T98G Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
T98G hücrelerinin yaklaşık ikiye katlanma süresi 40 saattir. Bu süre, kültürleme koşullarına bağlı olarak değişebilir.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
T98G hücreleri yapışkandır. Kültür kaplarının tabanına yapışarak tek tabaka oluştururlar.
Bölme Oranı:
T98G hücreleri, 1:2 ila 1:5 bölünme oranında alt kültürlenir. Bunun için hücreler önce 1X PBS tamponu ile yıkanır, ardından oda sıcaklığında 8 ila 10 dakika boyunca pasaj çözeltisi (Accutase) ile inkübe edilir. İnkübasyondan sonra, ayrılan hücreler taze büyüme ortamına eklenir ve santrifüjlenir. Ardından, toplanan hücre peleti dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler, büyüme ortamı içeren bir kültür şişesine aktarılır.
Büyüme Ortamı:
T98G hücrelerinin kültürü için %10 fetal sığır serumu, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 ve EBSS içeren EMEM besiyeri kullanılır. Besiyeri haftada 3 ila 4 kez değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:
T98G hücreleri, 37°C'ye ayarlanmış ve CO₂ kaynağına bağlı nemlendirilmiş bir inkübatörde muhafaza edilir.
Saklama:
Dondurulmuş hücreler, hücrelerin canlılığını uzun vadede korumak için -150°C'nin altında veya sıvı azotun buhar fazında saklanabilir.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
T98G hücrelerinin CM-1 veya CM-ACF hücre dondurma ortamlarında dondurulması önerilir. Bunun için, sıcaklığın dakikada sadece 1 °C düşmesine izin veren yavaş bir dondurma işlemi önerilir. Bu, hücrelerin şoka maruz kalmasını önler ve canlılıklarını korur.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş hücreler, 37 derece Celsius'a önceden ısıtılmış bir su banyosuna 40 ila 60 saniye süreyle yerleştirilerek nazikçe çözülür. Daha sonra taze büyüme ortamında yeniden süspansiyon haline getirilir ve yeni bir şişeye aktarılır. 24 saatlik inkübasyondan sonra, dondurma ortamı bileşenlerini ortadan kaldırmak için ortam değiştirilir.
Biyogüvenlik Seviyesi:
T98G kültürleri, biyogüvenlik seviye 1 laboratuvarında muhafaza edilir.
Yayın tarihi: 2023 | Son gözden geçirme tarihi: Mayıs 2026
- T98G hücre hattı: Avantajlar ve dezavantajlar
- T98G hücrelerinin uygulamaları
- 2. T98G hücre hattı hakkında kültür bilgileri
- T98G Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
- T98G hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
- 5. T98G Hücrelerini Ele Alan Araştırma Yayınları
- T98G Hücreleri İçin Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- Sıkça sorulan sorular
T98G hücre hattı: Avantajlar ve dezavantajlar
T98G, yaygın olarak kullanılan, insandan elde edilmiş bir glioblastom hücre hattıdır. Diğerlerinden ayıran çeşitli avantaj ve dezavantajları vardır. Makalenin bu bölümünde bunlardan öne çıkan birkaç tanesi ele alınmaktadır.
Avantajlar
T98G hücrelerinin avantajları şunlardır:
-
İyi karakterize edilmiş
İyi kurulmuş ve iyi karakterize edilmiş bir hücre hattıdır. Literatürde kapsamlı bir şekilde incelenmiş ve belgelenmiştir.
-
İn vitro model
En agresif beyin tümörü olan glioblastomun özelliklerini temsil eder. Hastalığın araştırılması, biyolojisinin anlaşılması ve tedavi geliştirilmesi için değerli bir araçtır.
Dezavantajlar
T98G hücreleriyle ilişkili dezavantajlar şunlardır:
-
Heterojenlik
T98G hücre popülasyonundaki genetik heterojenlik, deney sonuçlarında tutarsızlığa yol açabilir ve verilerin yorumlanmasını zorlaştırabilir.
T98G hücrelerinin uygulamaları
T98G hücre hattı, kanser araştırmalarında kullanılan değerli bir araçtır. T98G hücrelerinin başlıca araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:
- Kanser araştırması: T98G hücre hattı, glioblastom tümörlerinin biyolojisini araştırmak için değerli bir araçtır. Bu hücreler, esas olarak glioblastom hastalığının gelişimi ve ilerlemesinin altında yatan karmaşık moleküler yolakları incelemek için kullanılır. Ayrıca, bu hücreler tümör büyümesini tetikleyen genetik mutasyonları ve diğer kanser hücresi mekanizmalarını tanımlamak için de kullanılmaktadır. Yang Chen ve meslektaşları bu hücreler üzerinde çalışmış ve miRNA-21'in aşırı ekspresyonunun T98G hücrelerinde PDCD4 (Programlanmış hücre ölümü proteini 4) düzeylerini düşürdüğünü bulmuşlardır. Bu durum, PDCD4 aracılı T98G hücre apoptozunun inhibisyonuna yol açmaktadır. Dolayısıyla bu çalışma, miRNA-21'i tedavi geliştirme açısından potansiyel bir hedef olarak önermektedir [2]. Bu çalışmaya benzer şekilde, Fanqiang Kong ve meslektaşları, T98G glioblastom hücrelerinin çoğalması ve yayılmasında mikroRNA-15a'nın rolünü incelemiştir. miRNA-15a-5p'nin, hücre adezyon molekülü 1'i (CADM1) hedef alarak bu hücresel süreçleri teşvik ettiğini bulmuşlardır [3].
- İlaç Testleri ve Tedavi Geliştirme: T98G, yeni ilaçların taranması ve potansiyel kanser tedavilerinin etkinliğini değerlendirmek için bir platform sunması açısından mükemmel bir glioblastom in vitro modeli olarak işlev görmektedir. Araştırmacılar ayrıca, en umut verici anti-glioblastom özelliklerine sahip ilaç adaylarını belirlemek ve keşfetmek amacıyla çeşitli bileşikleri ve tedavileri test etmektedir. Bu durum, glioblastom hastalarına umut veren yeni ilaçların ve tedavi stratejilerinin geliştirilmesine yol açmaktadır. Bu tür bir çalışmada, temozolomide dirençli T98G GBM hücre hattında corilagin adlı doğal bir bileşiğin anti-kanser potansiyeli araştırılmıştır. Çalışma bulguları, corilagin'in temozolomid ile birlikte kullanıldığında hücrelerde daha yüksek düzeyde antiproliferatif ve antiapoptotik etkiler yarattığını ortaya koymuştur [4].
5. T98G Hücrelerini Konu Alan Araştırma Yayınları
Aşağıda, glioblastom hücre hattı olan T98G ile ilgili ilginç ve sıkça atıf yapılan bazı araştırma yayınları yer almaktadır.
REV-ERB agonisti olan SR9009'un insan glioblastoma T98G hücreleri üzerindeki kemoterapötik etkisi
ASN Neuro dergisinde (2019) yayınlanan bu makale, SR9009 adlı bir REV-ERB agonistinin T98G glioblastom hücreleri üzerindeki antikanser etkilerini araştırmıştır.
Neurochemical Research dergisinde (2019) yayınlanan bu araştırma makalesi, sodyum butirat ve quercetin'in T98G hücrelerinde koruyucu otofajiyi sinerjik olarak inhibe ettiğini ve hücre apoptozisini artırdığını öne sürmüştür.
Genes dergisinde (2023) yayınlanan bu çalışma, hipoksiye adapte olmuş T98G hücre hattını RNA dizilemesine tabi tutmuş ve IRE1'i (İnositol gerektiren enzim 1) umut vaat eden bir terapötik hedef olarak önermiştir.
Bu makale Oncology Letters (2017) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, miRNA-548c-3p'nin T98G onkogenlerini (c-Myb) hedef alarak T98G hücrelerinin çoğalmasını ve göçünü engellediğini araştırmıştır.
Journal of Medicinal Plants Research dergisinde (2011) yayınlanan bu makale, Dracocephalum tanguticum kloroform ekstraktının, kaspaz-3, Bax ve P21 genlerini modüle ederek T98G hücreleri üzerinde antiproliferatif etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.
T98G Hücreleri İçin Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
T98G hücre kültürü ve transfeksiyon protokollerini içeren mevcut kaynaklar burada belirtilmiştir.
- T98G transfeksiyonu: Bu araştırma makalesi, T98G transfeksiyonu protokolünü içermektedir. Makalede, yöntem ve gerekli reaktifler kısaca açıklanmaktadır.
Aşağıdaki bağlantılar, T98G hücre kültürü protokolünü öğrenmenize ve bu protokolü kullanarak çalışmanızı kolaylaştırmanıza büyük ölçüde yardımcı olacaktır.
- T98G hücreleri: Bu web sitesi, alt kültürleme ve proliferatif ile kriyoprezervatif kültürlerin işlenmesi dahil olmak üzere T98G hücre kültürü protokolleriyle ilgili önemli bilgiler içerir. Ayrıca, hücre büyüme ortamlarını, koşullarını ve ikiye katlanma süresini öğrenmenize de yardımcı olacaktır.
Kaynakça
- Haehl, E., Glioblastomda endotel hücrelerinin neden olduğu radyorezistans. 2021, Tübingen Üniversitesi.
- Chen, Y. ve ark., MikroRNA-21, insan glioblastom hücresi T98G'de tümör baskılayıcı PDCD4'ün ekspresyonunu aşağı doğru düzenler. Cancer Letters, 2008. 272(2): s. 197-205.
- Kong, F. ve ark., MikroRNA-15a-5p, hücre adezyon molekülü 1’i hedef alarak T98G glioblastom hücrelerinin proliferasyonunu ve invazyonunu teşvik eder. Oncology Letters, 2021. 21(2): s. 1-1.
- Milani, R. ve ark., Corilagin, temozolomide dirençli T98G glioma hücre hattında yüksek düzeyde apoptozu indükler. Oncol Res, 2018. 26(9): s. 1307-1315.