P19 Hücreleri - P19 Hücrelerini Kullanarak Embriyonal Karsinom Araştırması
P19, bir fare embriyonal karsinom hücre hattıdır. Biyomedikal araştırmalarda, özellikle gelişim biyolojisi, kök hücre biyolojisi, hücre farklılaşması ve ilaç taraması çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. P19 hücreleri farklılaşma yeteneğine sahip oldukları için, doku oluşumu ve erken embriyonik gelişim gibi karmaşık biyolojik süreçlerin araştırılmasında faydalı olabilirler. Bu makalede, fareden elde edilen P19 hücrelerinin temel özelliklerini ele alacağız.
- Büyüme Ortamı
- %5 fetal sığır serumu içeren DMEM/Ham's F12 besiyeri, 3,1 g/L glikoz, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM sodyum piruvat, 15 mM HEPES ve 1,2 g/L NaHCO3 içeren DMEM/Ham's F12 besiyeri, P19 hücrelerinin kültürlenmesi için kullanılır.
- Çiftlenme Süresi
- P19 hücre hattı için bildirilen ikiye katlanma süresi yaklaşık 2 ila 3 gündür.
- Büyüme Tipi
- P19 embriyonik karsinom hücre hattı yapışkandır.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Satın alınabileceği yer
- Cytion — P19 Siparişi
- P19 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
- P19 Hücrelerinin Kültivasyon Bilgileri
- P19 hücre hattı: Avantajlar ve Dezavantajlar
- P19 hücrelerinin araştırma uygulamaları
- P19 Hücre Hattınızı Bugün Satın Alın
- P19 hücreleri: Araştırma yayınları
- P19 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- P19 Hücre Hattını Keşfetmek: Sık Sorulan Sorular
- Kaynakça
- Sıkça sorulan sorular
P19 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
Bir hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, o hücre hattının genel özelliklerini ve kökenini bilmek çok önemlidir. Bu bölümde şu konular ele alınacaktır: P19 hücre hattı nedir? P19 hücresinin boyutu nedir? P19 hücrelerinin kökeni nedir?
- P19, aslen C3H/He faresinde gelişen teratokarsinomdan elde edilen bir tür pluripotent embriyonal karsinom hücresidir. Hücre hattı ilk olarak 1982 yılında McBurney ve Rogers tarafından kurulmuştur.
- P19 hücreleri, serum ilaveli kültür ortamında sürekli olarak büyüyebilir. Retinoik asit ve dimetil sülfoksit (DMSO) gibi toksik olmayan ilaçlara maruz kaldıklarında diğer hücre tiplerine farklılaşabilirler [1].
- Bu fare karsinom hücreleri, epitel benzeri bir morfolojiye sahiptir.
- P19 hücre hattı, euploid erkek karyotipine sahiptir (n=40; XY).
P19 Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Bilgiler
P19 hücre hattı, benzersiz özellikleri nedeniyle araştırma laboratuvarlarında yaygın olarak kültürlenmektedir. Kültürlenmesi kolay ve yönetilebilir bir süreçtir. Bu bölümde, P19 hücre kültürünü sürdürmek ve büyütmek için ihtiyacınız olan tüm temel bilgiler yer almaktadır. Şunları öğreneceğiz: P19 hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? P19 hücre hattı nasıl kültürlenir? P19, yapışkan bir hücre hattı mıdır?
P19 Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
P19 hücre hattı için bildirilen ikiye katlanma süresi yaklaşık 2 ila 3 gündür.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
P19 embriyonik karsinom hücre hattı yapışkandır.
Alt kültürleme oranı:
P19 hücreleri her 48 saatte bir alt kültürlenmeli ve bu hücreler için 1:10'luk bir bölme oranı korunmalıdır. Yapışkan hücreler, 1 X fosfat tamponlu salin ile yıkanır ve hücreler ayrışana kadar Accutase ile inkübe edilir. Hücrelere kültür besiyeri eklenir ve santrifüj yoluyla hasat edilir. Toplanan hücreler dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve yeni şişelere aktarılır.
Büyüme Ortamı:
%5 fetal sığır serumu, 3,1 g/L glikoz, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM sodyum piruvat, 15 mM HEPES ve 1,2 g/L NaHCO3 içeren DMEM/Ham's F12 besiyeri, P19 hücrelerinin kültürlenmesi için kullanılır.
Büyüme Koşulları:
P19 embriyonik karsinom hücre hattının büyümesi ve kültürü için 37°C'ye ayarlanmış ve %5 CO₂ beslemesi olan nemlendirilmiş bir inkübatör gereklidir.
Saklama:
Dondurulmuş P19 hücre şişeleri, hücrelerin canlılığını uzun süre korumak için -150°C'nin altındaki bir dondurucuda veya sıvı azotun buhar fazında saklanmalıdır.
Dondurma Süreci ve Ortam:
P19 hücrelerini, hücreleri şoktan koruyan ve canlılıklarını muhafaza eden yavaş dondurma yöntemi kullanılarak dondurmak için CM-1 veya CM-ACF besiyerleri kullanılabilir.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş P19 hücreleri, şişeyi 40 ila 60 saniye boyunca hızlı bir şekilde çalkalayarak 37°C'lik bir su banyosunda çözülebilir. Hücrelere taze besiyeri eklenir ve dondurma besiyerindeki bileşenleri uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Hücre paleti tekrar süspansiyona alınır ve hücreler büyüme için yeni şişeye aktarılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:
P19 hücre hattı için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar koşulları gereklidir.
P19 hücre hattı: Avantajlar ve Dezavantajlar
Bu bölümde, P19 hücre hattının avantajları ve dezavantajları ele alınacaktır.
Avantajlar
- Farklılaşma potansiyeli: P19 hücreleri, kardiyomiyositler, nöronlar ve mikroglia hücreleri dahil olmak üzere çeşitli hücre tiplerine farklılaşabilir. Farklılaşma için retinoik asit ve dimetil sülfoksit (DMSO) gibi toksik olmayan ilaçlara ihtiyaç duyarlar. Retinoik asit, nöronların, mikroglia ve astroglia hücrelerinin gelişimini tetiklerken, DMSO ise atım yapan kardiyomiyositlerin ve düz kas hücrelerinin gelişimini başlatır. Bu nedenle, P19 hücreleri, hücre farklılaşması ve gelişim süreçlerinin incelenmesinde yararlıdır.
- Model sistemi: Pluripotent embriyonik karsinom hücre hattı P19, erken embriyonik gelişimi incelemek için değerli bir modeldir. Araştırmacılar, hücre sinyal yollarını ve bu süreçlerde rol oynayan hücresel ve moleküler mekanizmaları aydınlatmak için P19 hücrelerini kullanmaktadır.
Dezavantajlar
- Fare kökenli olması: P19, fare embriyonik karsinom hücre hattıdır. Dolayısıyla, bu hücrelerin kullanıldığı çalışmalardan elde edilen bulguların insan biyolojisi ve süreçlerine tam olarak uygulanamayabilir.
P19 hücrelerinin araştırma uygulamaları
P19 hücreleri, farklılaşma yetenekleri ve gelişim biyolojisi ile kök hücre araştırmalarıyla olan ilgileri nedeniyle çeşitli araştırma uygulamalarına sahiptir. P19 embriyonik karsinom hücrelerinin önemli araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:
- Hücre farklılaşması çalışmaları: Bildiğimiz gibi, P19 hücreleri nöronlara, mikroglia hücrelerine, düz kas hücrelerine ve kardiyomiyositlere farklılaşabilir; bu nedenle hücre farklılaşma süreçlerini incelemek için yaygın olarak kullanılır. Ayrıca, sinir ve kalp gelişimi ile bunların altında yatan mekanizmaların araştırılmasına yardımcı olur. 2018 yılında yapılan bir çalışmada, reaktif oksijen türlerinin (ROS) P19 hücrelerinin belirli hücre tiplerine farklılaşmasını yönlendirdiği ve diğerlerinin indüksiyonunu engellediği bulunmuştur [3]. Başka bir çalışmada retinoik asit aracılı sinir farklılaşma süreci incelenmiş ve PI3K/Akt/GSK3β sinyal yolunun bu süreçte rol oynadığı saptanmıştır [4].
- Gelişim biyolojisi: P19 hücreleri, erken embriyonik gelişimi incelemek için paha biçilmez bir modeldir. Araştırmacıların, embriyo gelişimi sırasında doku oluşumu gibi karmaşık biyolojik süreçleri anlamalarına yardımcı olurlar. Araştırmada P19 hücreleri kullanılmış ve ventriküler septal defekt (VSD) oluşumuna katkıda bulunan moleküler faktörler incelenmiştir. Bulgular, uzun bir kodlamayan RNA olan SNHG6'nın, miRNA-101'i negatif olarak düzenleyerek ve Wnt/β-katenin yolunu aktive ederek VSD'ye katkıda bulunduğunu ortaya koymuştur [5].
- İlaç testleri: P19 fare embriyonik karsinom hücre hattı, potansiyel ilaç adaylarını taramak için de kullanılmaktadır. Bir çalışmada, farklılaşmış P19 hücre nöronları kullanılarak, sentetik L-Dopa ve Mucuna pruriens tohumu sulu ekstresinin nöroprotektif asetilkolinesteraz inhibe edici etkileri araştırılmıştır. Sonuçlar, bitki ekstresinin L-Dopa'ya kıyasla umut verici sonuçlar sergilediğini göstermiştir [6].
P19 Hücre Hattınızı Bugün Satın Alın
P19 hücreleri: Araştırma yayınları
Bu makale bölümü, P19 hücrelerini konu alan birkaç ilginç araştırma yayınını ele alacaktır.
Bu makale 2017 yılında Oncology Reports dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, hipofiz seks hormonlarının, P19 hücreleri de dahil olmak üzere teratokarsinom hücre hatlarının yapışmasını, çoğalmasını ve göçünü yönlendirdiğini öne sürmüştür.
Uzun kodlamayan RNA uc.4, TGF-beta sinyal yoluyla hücre farklılaşmasını etkiler
Experimental & Molecular Medicine dergisinde (2018) yayınlanan bu çalışmada P19 hücreleri kullanılarak uzun kodlamayan RNA uc.4'ün işlevi incelenmiştir. Bulgular, uc.4'ün TGF-beta sinyal yolunu modüle ederek hücre farklılaşmasını etkilediğini ortaya koymuştur.
Bu araştırma makalesi 2018 yılında Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, doğal beyin dokusu ekstresi ve 3B hücre kültürünün, P19 embriyonal karsinom hücrelerinin nöral hücrelere farklılaşmasını hızlandırabildiğini ortaya koymuştur.
Bu çalışma, 2020 yılında Journal of Ethnopharmacology dergisinde yayınlanmıştır. Çalışmada, Cichorium intybus L. yaprak özütünün, P19 embriyonal karsinom hücrelerinin insülin üreten pankreas β hücrelerine farklılaşmasını indükleyebileceği öne sürülmüştür.
Bu araştırma, Molecules dergisinde (2022) yayınlanmıştır. Bu çalışma, Mucuna pruriens tohum ekstresinin P19 hücre nöronları üzerindeki nöroprotektif ve asetilkolinesteraz inhibitör etkilerini araştırmıştır.
P19 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Aşağıda, P19 hücreleri ile ilgili birkaç kaynak yer almaktadır.
- P19 hücrelerinin nöronal farklılaşma protokolü: Bu makale, P19 hücrelerinin nöronal farklılaşma protokolünü ve P19 hücre farklılaşması hakkında diğer yararlı bilgileri içermektedir.
- P19 hücre transfeksiyonu: Bu bağlantı, P19 hücre transfeksiyon protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
Aşağıdaki bağlantı, P19 hücre kültürü protokolünü içermektedir.
- P19 hücreleri: Bu web sitesi, kültür koşulları, P19 hücre besiyerleri, hücre bölünmesi ve çok daha fazlası dahil olmak üzere P19 hücre hattı hakkında tüm yararlı bilgileri içerir.
P19 Hücre Hattını Keşfetmek: Sıkça Sorulan Sorular
Kaynakça
- McBurney, M.W., P19 embriyonal karsinom hücreleri. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): s. 135-40.
- Bressler, J. ve ark., P19 Embriyonik Karsinom Hücre Hattı: Gen-Çevre Etkileşimlerini İncelemek İçin Bir Model. Cell Culture Techniques, 2011: s. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey ve G. Rödel, Mitokondriyal ROS, fare pluripotent P19 hücrelerinin farklılaşmasını yönlendirir. Stem Cell Research, 2018. 30: s. 180-191.
- Fu, F. ve ark., All-trans-retinoid asit, P19 hücrelerinin PI3K/Akt/GSK3β sinyal yolunda rol oynayan nöronlara farklılaşmasını indükler. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): s. 4386-4396.
- Jiang, Y. ve ark., Uzun kodlamayan RNA SNHG6, miR-101’in negatif regülasyonu ve Wnt/β-katenin yolunun aktivasyonu yoluyla ventriküler septal defekt oluşumuna katkıda bulunur. Die Pharmazie-Uluslararası Farmasötik Bilimler Dergisi, 2019. 74(1): s. 23-28.
- Kamkaen, N. ve ark., Mucuna pruriens tohumlarından elde edilen sulu ekstrakt, sentetik L-dopa ile karşılaştırıldığında nöroprotektif ve asetilkolinesteraz inhibitör etkilerini artırmıştır. Molecules, 2022. 27(10): s. 3131.