NCI-H460 Hücreleri - NCI-H460 Bulguları ile Akciğer Kanseri Araştırmalarında Yol Bulmak
NCI-H460, akciğer karsinomu ve toksikoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılan, insandan elde edilmiş küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücreleridir. Bu hücre hattı, tümör gelişimi, büyümesi ve ilaç direnci gibi çeşitli kanser biyolojisi konularını incelemek için değerli bir araçtır. Ayrıca, NCI-H460 hücreleri, kanserle mücadele reaktiflerinin geliştirilmesi için uygun bir modeldir.
- Büyüme Ortamı
- NCI-H460 kültür ortamı olarak RPMI 1640 kullanılır. Bu ortama %10 fetal sığır serumu, 2,1 mM stabil glutamin ve 2,0 g/L NaHCO3 eklenir. Ortam haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
- İkiye Katlanma Süresi
- NCI-H460'ın ikiye katlanma süresi yaklaşık 33 saattir.
- Büyüme Tipi
- NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri yapışkandır.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-4
- Temin edilebilir
- Cytion — NCI-H460 siparişi
NCI-H460 hücreleri: Kökeni ve genel özellikleri
Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri, araştırma uygulamalarına büyük ölçüde katkıda bulunur. Makalenin bu bölümü, NCI-H460 akciğer kanseri hücrelerinin kökenini ve öne çıkan özelliklerini öğrenmenize yardımcı olacaktır. Şunları öğreneceksiniz: NCI-H460 hücreleri nedir? NCI-H460 hücre hattı türü nedir? NCI-H460'ın morfolojisi nedir?
- NCI-H460 hücre hattı, büyük hücreli akciğer kanseri olan Avrupalı bir erkeğin plevral efüzyonundan elde edilmiştir. 1982 yılında A.F. Gazdar ve meslektaşları tarafından oluşturulmuştur.
- NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri epitelyal bir morfolojiye sahiptir.
- NCI-H460, hipotriploid karyotipe sahip bir tümörjenik hücre hattıdır. Bu hücrelerin modal kromozom sayısı 57'dir. NCI-H460 hücreleri, benzer oranlarda 58 modal kromozom sayısına da sahiptir.
- Bu akciğer kanseri hücreleri, hücre çoğalması, büyümesi, invazyonu ve metastazında rol oynayan NCI-H460 KRAS mutasyonu gibi küçük hücreli dışı akciğer tümörlerine özgü birçok mutasyona sahiptir.
NCI-H460 Hücrelerinin Kültivasyon Bilgileri
NCI-H460 hücre hattının doğru şekilde kullanılması ve bakımı için aşağıdaki önemli noktaları bilmeniz gerekir. Bu bilgiler, NCI-H460 hücrelerinin ikiye katlanma süresi, NCI-H460 kültür ortamı ve NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri için temel hücre kültürü prosedürleri hakkında size bilgi verecektir.
NCI-H460 Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
NCI-H460 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 33 saattir.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri yapışkandır.
Alt Kültür Oranı:
NCI-H460 hücre hattı için önerilen bölme oranı 1:2 ve 1:4'tür. Eski besiyeri çıkarıldıktan sonra, yapışık hücreler 1 x fosfat tamponlu salin ile durulanır. Ardından, hücreler oda sıcaklığında 8 ila 10 dakika boyunca Accutase pasaj çözeltisi ile inkübe edilir. Ayrışan hücreler, bir kültür besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirilir ve santrifüjlenir. Toplanan hücreler tekrar süspansiyon haline getirilir ve kültürleme için yeni şişeye dökülür.
Büyüme Ortamı:
NCI-H460 kültür ortamı olarak RPMI 1640 kullanılır. Bu ortama %10 fetal sığır serumu, 2,1 mM stabil glutamin ve 2,0 g/L NaHCO3 eklenir. Ortam haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:
NCI-H460 kültürleri, sürekli %5 CO₂ beslemesi olan nemlendirilmiş bir inkübatörde 37°C sıcaklıkta tutulur.
Saklama:
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri, sıvı azotun buhar fazında veya elektrikli ultra düşük sıcaklıklı bir dondurucuda -150°C'nin altındaki sıcaklıkta uzun süre saklanabilir.
Dondurma Süreci ve Besiyeri:
NCI-H460 hücrelerinin dondurulması ve saklanması için CM-1 veya CM-ACF besiyeri kullanılır. Hücre canlılığını en üst düzeyde korumak için yavaş dondurma yöntemi önerilir.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş NCI-H460 hücreleri, küçük bir buz topakçığı kalana kadar önceden ısıtılmış su banyosunda (37°C sıcaklıkta) 40 ila 60 saniye boyunca çözdürülür. Çözülen hücrelere taze besiyeri eklenir ve dondurma besiyerinin bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Toplanan hücre peleti tekrar süspansiyona alınır ve hücreler, büyüme için besiyeri içeren yeni şişelere aktarılır. NCI-H460 hücrelerinin şişenin yüzeyine yapışması yaklaşık 24 saat sürebilir.
Biyogüvenlik Seviyesi:
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri, biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarlarda işlenir ve muhafaza edilir.
Yayın tarihi: 2023 | Son gözden geçirme tarihi: Mayıs 2026
NCI-H460 hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
NCI-H460, akciğer kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılan bir hücre hattıdır. Bu bölümde, NCI-H460 akciğer kanseri hücreleriyle ilgili genel avantajlar ve dezavantajlar ele alınacaktır.
Avantajlar
NCI-H460 küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücre hattının avantajları şunlardır:
-
Tümörün kökeni
NCI-H460 hücre hattı, bu özel akciğer kanseri tipini temsil eden büyük hücreli akciğer karsinomu hastasından elde edilmiştir. Bu hücreler, akciğer kanseri biyolojisini incelemek ve yeni ve etkili tedaviler geliştirmek için bir model olarak kullanılmaktadır. NCI-H460 hücreleri tümör oluşturma potansiyeline sahiptir ve immün yetmezliği olan farelere enjekte edilerek, tümör büyümesini, gelişimini ve potansiyel ilaçların etkinliğini incelemek için in vivo tümör modelleri oluşturulabilir.
-
Yüksek çoğalma hızları
NCI-H460, A549 gibi diğer küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücre hatlarına kıyasla daha yüksek büyüme oranları sergiler. Bu avantaj, hücrelerin kullanılabilirliğini artırır ve araştırmacıların tekrarlanabilir ve zamana duyarlı deneyler yürütmesine yardımcı olur.
Dezavantajlar
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleriyle ilişkili dezavantajlar şunlardır:
-
Homojenlik
NCI-H460 hücreleri, tek bir hastanın tümöründen elde edildiği için homojendir. Bu nedenle, genellikle hasta tümörlerinde gözlenen karmaşıklık ve heterojenlikten yoksundur.
NCI-H460 hücrelerinin araştırma uygulamaları
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri, akciğer karsinomu ile ilgili çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. NCI-H460 hücrelerinin önemli araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:
- Akciğer kanseri araştırması: NCI-H460 hücreleri, tümörün gelişimi, büyümesi ve metastazında rol oynayan hücresel ve moleküler mekanizmaların araştırılması için paha biçilmez bir modeldir. Ayrıca, akciğer kanserinin ilerlemesiyle ilişkili önemli sinyal yolları, moleküler hedefler ve çeşitli genetik mutasyonların incelenmesinde de kullanılır. Bu faktörleri etkili bir şekilde incelemek amacıyla NCI-H460 hücreleri üzerinde birçok çalışma yapılmıştır. 2019 yılında yapılan bir çalışma, aşırı eksprese edilen nükleer ubikuitin kazein ve siklin bağımlı kinaz substratı (NUCKS) geninin, PI3K/AKT sinyal yolunun düzenlenmesi yoluyla tümör hücresi büyümesinde rol oynadığını öne sürmüştür [1]. Benzer şekilde, eIF4E geninin rolünü incelemek amacıyla NCI-H460 hücreleri kullanılarak bir in vitro ve in vivo çalışma gerçekleştirilmiştir. Bulgular, eIF4E geninin akciğer karsinomu büyümesinde ve anjiyogenezde rol oynadığını ve bu genin, umut vaat eden anti-akciğer kanseri ilaçlarının geliştirilmesinde hedef alınabileceğini ortaya koymuştur [2].
- İlaç keşfi ve geliştirme: Bir insan akciğer kanseri hücre hattı olan NCI-H460, ilaç keşfi ve geliştirme çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, bu hücreleri yeni ilaç adaylarının, hedefli tedavilerin ve esas olarak NCI-H460 KRAS mutasyonlarını hedef alan tedavilerin toksisitesini ve etkinliğini araştırmak için kullanmaktadır. 2023 yılında Haoyue Hu ve meslektaşları tarafından yürütülen bir çalışmada, anlotinib ilacının antikanser etkilerini incelemek amacıyla NCI-H460 hücreleri kullanılmıştır. Sonuçlar, anlotinib'in MEK/ERK sinyal kaskadını inhibe ederek KRAS mutasyonlu akciğer kanseri hücrelerinin büyümesini kısmen etkilediğini göstermiştir [3]. Benzer şekilde, bir fenolik bileşik olan karnosik asit, NCI-H460 hücreleri kullanılarak antiproliferatif ve proapoptotik aktiviteleri açısından taranmıştır [4].
- İlaç direnci: NCI-H460 hücre hattı, akciğer karsinomunun ilaç direnci mekanizmasını incelemek için idealdir. Araştırmacılar, altta yatan genleri, moleküler faktörleri ve sinyal yollarını belirlemek amacıyla ilaç direnci modelleri geliştirmek için bu hücreleri kullanmaktadır. Örneğin, bir çalışmada, küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücrelerinde pemetrexed direncinin altta yatan moleküler mekanizmalarını incelemek amacıyla, çok hedefli bir antifolat ajanı olan pemetrexed'e dirençli NCI-H460 hücreleri geliştirilmiştir [5].
NCI-H460 Hücre Hattını Satın Alın: Akciğer Kanseri Araştırmalarına Açılan Kapınız
NCI-H460 Hücrelerini Konu Alan Araştırma Yayınları
İşte NCI-H460 akciğer karsinomu hücre hattı hakkında bazı ilginç araştırma yayınları.
Molecules (2023) dergisinde yayınlanan bu çalışma, siyah fasulyeden elde edilen doğal bir α-1,6-glukan olan BBWPW'nin, PI3K/AKT/MAPK yolunu düzenleyerek NCI-H460 hücrelerinin çoğalmasını engellediğini öne sürmüştür.
Phytomedicine (2019) dergisinde yayınlanan bu makale, yeni bir doğal bileşik olan dioscin-6′-O-asetatın, NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri üzerinde antiproliferatif bir etki gösterdiğini incelemiştir.
miRNA-425-5p, PTEN/PI3K/AKT sinyal ekseni yoluyla akciğer kanseri büyümesini artırmaktadır
BMC Pulmonary Medicine (2020) dergisinde yayınlanan bir araştırmada, mikroRNA-425-5p'nin PTEN/PI3K/AKT yolakları aracılığıyla akciğer karsinomu tümör oluşumunu artırdığı belirtilmiştir.
Molecular Medicine Reports (2017) dergisinde yayınlanan bu makale, NCI-H460 ve diğer akciğer kanseri hücrelerinde kinalizarin bileşiğinin antitümör potansiyelini ve altta yatan mekanizmalarını ortaya koymuştur.
Food and Function dergisinde (2019) yayınlanan bu araştırma, NCI-H460 hücreleri kullanılarak Eucalyptus globulus Labill. özütünün potansiyel antikanser etkisini vurgulamaktadır. Bulgular, bitki özütünün NCI-H460 p53 ekspresyonunu artırarak ve hücre döngüsü profilini düzenleyerek bu etkileri gösterdiğini ortaya koymuştur.
NCI-H460 Hücre Hattı Kaynakları: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
İşte NCI-H460 akciğer kanseri hücrelerini konu alan bazı çevrimiçi kaynaklar.
- NCI-H460 hücre transfeksiyonu: Bu video eğitimi, NCI-H460 hücrelerine plazmid DNA'sı ile transfeksiyon yapmak için adım adım bir kılavuzdur.
Aşağıdaki bağlantılar, H460 hücreleri için zorunlu hücre kültürü bilgilerini içermektedir.
- NCI-H460 hücreleri: Bu web sitesi, NCI-H460 hücre besiyerleri, alt kültür oluşturma, dondurma ve çözme prosedürleri hakkında önemli bilgiler sunmaktadır.
- NCI-H460 hücrelerinin pasajlanması: Bu belge, NCI-H460 hücre hattının pasajlanması ve alt kültürlenmesi konusunda size rehberlik edecektir. Ayrıca, NCI-H460 hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmenize de yardımcı olacaktır.
NCI-H460 Hücre Hattının İncelenmesi: Sık Sorulan Sorular ve Önemli Bilgiler
NCI-H460 hücre hattı, büyük hücreli akciğer karsinomu olan bir hastadan kaynaklanmaktadır ve bu da onu bu tür akciğer kanserini incelemek için değerli bir model haline getirmektedir.
NCI-H460 hücreleri akciğer kanseri biyolojisini araştırmak, yeni tedaviler geliştirmek ve potansiyel ilaçların etkinliğini değerlendirmek için kullanılmaktadır. Ayrıca, tümör büyümesi ve gelişimini incelemek üzere in vivo tümör modelleri oluşturmak için immün yetmezliği olan farelere enjekte edilebilirler.
Hem NCI-H460 hem de A549 hücre hatları akciğer karsinomlarından türetilmiştir, ancak NCI-H460 büyük hücreli karsinomu temsil ederken, A549 adenokarsinomu temsil etmektedir. Histolojik alt tipteki bu farklılık, özelliklerini ve davranışlarını etkilemektedir.
Evet, NCI-H460 hücreleri tümörijenik potansiyele sahiptir ve ksenograft modelleri oluşturmak için immün yetmezliği olan farelere implante edilebilir, bu da büyük hücreli akciğer karsinomunun in vivo çalışılmasını kolaylaştırır.
Paklitakselin diğer bileşiklerle birleştirilmesi, NCI-H460 hücreleri üzerindeki sitotoksik etkilerini artırarak akciğer kanserinde tedavi sonuçlarını potansiyel olarak iyileştirebilir.
Evet, NCI-H460 hücreleri nükleotid metabolizması ve hücre proliferasyonu için gerekli olan hipoksantin guanin fosforibosiltransferazı ifade eder.
NCI-H460 hücreleri, tümör büyümesini incelemek, bileşiklerin sitotoksik etkilerini değerlendirmek ve ilaç direnci mekanizmalarını araştırmak için kanser ve toksikoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.
NCI-H460 hücreleri tipik olarak hücre iskeleti yapısının korunmasında rol oynayan ve kanser hücresi göçü ve istilasında rol oynayabilen nörofilament üçlü proteinlerini ifade eder.
ΚB yolağı, diğerlerinin yanı sıra, NCI-H460 hücre proliferasyonu ve sağkalımının düzenlenmesinde rol oynar ve akciğer kanserinde terapötik müdahale için potansiyel hedefler sunar.
Evet, NCI-H460 hücreleri, paklitaksel ve karboplatin dahil olmak üzere kemoterapötik ajanların sitotoksik etkilerini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan in vitro modellerdir ve etkili kanser tedavilerinin geliştirilmesine yardımcı olurlar.
Kaynakça
- Hu, C. ve ark., NUCKS, Pi3k/Akt sinyal yoluyla akciğer kanseri hücrelerinin çoğalmasını, göçünü ve istilasını teşvik eder. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X. ve ark., Yeni bir eIF4E/eIF4G etkileşim inhibitörü olan EGPI-1, Ras/MNK/ERK/eIF4E sinyal yoluyla akciğer kanseri hücrelerinin büyümesini ve anjiyogenezi inhibe eder. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: s. 109773.
- Hu, H. ve ark., Anlotinib, MEK/ERK yolunu baskılayarak KRAS mutasyonlu akciğer kanseri hücreleri üzerinde antikanser etkiler gösterir. Kanser Yönetimi ve Araştırması, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C. ve ark., Karnosik asit, tümöral NCI-H460 ve tümörsüz IMR-90 akciğer hücrelerinde antiproliferatif ve proapoptotik etkiler sergilemektedir. Journal of Toxicology and Environmental Health, Bölüm A, 2020. 83(10): s. 412-421.
- Xu, Y.-L. ve ark., Pemetrexed dirençli NCI-H460/PMT hücrelerinin oluşturulması ve karakterizasyonu. Tıbbi Kimyada Anti-Kanser Ajanları (Eski Adı: Güncel Tıbbi Kimya-Anti-Kanser Ajanları), 2019. 19(6): s. 731-739.