KG-1 Hücre Hattı
KG-1 hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri, araştırmacının çalışmasında bu hücre hattını kullanıp kullanmayacağına karar vermesine yardımcı olur. Çalışmaya başlamadan önce bu bilgileri inceleyebilirsiniz. Bu makale bölümü, KG-1 makrofajlarının kökeni ve özellikleri hakkında bilgi vermektedir. Burada şunları öğreneceksiniz: KG-1 hücreleri nedir? KG-1a hücre hattı nedir? KG-1 hücre hattının kökeni nedir? KG-1 morfolojisi nedir?
- KG-1, akut miyelojenöz lösemi hastası 59 yaşındaki Kafkas bir erkeğin kemik iliği aspiratından elde edilen lenfoblast benzeri bir hücre hattıdır. 1978 yılında Koeffler ve Golde tarafından oluşturulmuştur. Bu hücreler çoğunlukla promiyelosit veya miyeloblast olgunlaşma aşamasındadır [1].
- KG-1 hücreleri lenfoblast benzeri bir morfolojiye sahiptir.
- KG-1 hücre hattının karyotipi, kromozomlarda psödodiploid modal sayı gösterir.
KG-1 ve KG-1a
KG-1a, ana KG-1 hücrelerinin bir alt hattıdır. KG-1 hücre hattının 35 pasajından sonra geliştirilmiştir. KG-1 hücre hattına kıyasla daha az farklılaşmıştır. Ayrıca, bu alt hat, ana hücre hattına (KG-1) kıyasla sitokimyasal, morfolojik ve işlevsel olarak daha az olgun bir yapıya sahiptir.
KG-1 hücre hattı kültürüyle ilgili bilgiler
Makalenin bu bölümü, çalışmanızı kolaylaştırabilecek KG-1 hücre kültürüyle ilgili tüm önemli bilgileri ele alacaktır. Burada şunları öğreneceksiniz: KG-1 hücre hattının ikiye katlanma süresi nedir? KG-1 makrofajlarının kültür koşulları nelerdir? KG-1 hücreleri nasıl kültürlenir?
KG-1 Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
KG-1'in ikiye katlanma süresi yaklaşık 45 saattir. Ancak bu süre, kültür koşullarına bağlı olarak değişebilir.
Yapışık mı, Süspansiyon Halinde mi:
KG-1 hücreleri süspansiyon halinde büyür.
Hücre Yoğunluğu:
KG-1 hücre hattı için optimal hücre yoğunluğu 1 ila 3 x 105 hücre/ml arasındadır. Alt kültür oluşturmak için, hücre süspansiyonu steril bir tüpe aktarılır ve santrifüjlenir. Toplanan hücrelere taze besiyeri eklenir ve dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir. Daha sonra hücreler yeni şişelere dağıtılır ve optimal hücre yoğunluğunda kültürlenir. Hücreler, 1 - 2 x 10⁶ hücre/ml maksimum hücre yoğunluğuna ulaştığında bölünebilir.
Büyüme Ortamı:
%10 FBS içeren IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium), 4,5 g/L glikoz, 4 mM L-glutamin, 1,0 mM sodyum piruvat ve 3,0 g/L NaHCO3 içeren IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) KG-1 hücrelerinin kültürü için kullanılır. Besiyeri üç gün sonra değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:
KG1 AML hücre hattı, 37°C sıcaklıkta ve %5 CO₂ beslemesi ile nemlendirilmiş bir inkübatörde kültürlenir.
Saklama:
Dondurulmuş hücreler, hücrelerin canlılığını korumak amacıyla sıvı azotun buhar fazında veya elektrikli ultra düşük sıcaklık dondurucusunda -150 °C'nin altındaki sıcaklıkta muhafaza edilir.
Dondurma Süreci ve Ortam:
CM-1 veya CM-ACF, KG-1 hücrelerinin dondurulması için uygundur. Hücreler, herhangi bir şoktan korunmak amacıyla yavaş dondurma işlemi kullanılarak dondurulur. Bu yöntem, sıcaklığın dakikada 1 °C'lik kademeli bir düşüşünü sağlar.
Çözme Süreci:
Hücreler, küçük bir buz topakçığı kalana kadar 37 °C'ye önceden ısıtılmış bir su banyosunda çözülür. Çözülmüş hücrelere taze besiyeri eklenir ve dondurma besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Hücre peleti dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme besiyeri içeren yeni şişelere dökülür.
Biyogüvenlik Seviyesi:
KG-1 hücre kültürlerinin sürdürülmesi için Biyogüvenlik seviye 1 laboratuvarı gereklidir.
Yayın tarihi: 2023 | Son gözden geçirme tarihi: Mayıs 2026
- KG-1 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
- Araştırmada KG-1 hücrelerinin uygulamaları
- KG-1 hücreleri ile ilgili yayınlar
- KG-1 hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri
- KG-1 hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
- 6. KG-1 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- Sıkça sorulan sorular
KG-1 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
Diğer hücre hatları gibi, KG-1 miyeloid lösemi hücre hattı da birçok avantaj ve sınırlamaya sahiptir. Bu bölümde, araştırmanızda bu hücre hattını kullanıp kullanmama kararını verirken önemli olabilecek bazı önemli hususlar hakkında bilgi edineceğiz.
Avantajlar
KG-1 hücrelerinin başlıca avantajları şunlardır:
-
Kültürleme Kolaylığı
KG-1 hücreleri, araştırma laboratuvarlarında kolayca kültürlenebilir ve hücre kültürü gereksinimleri karmaşık değildir. Bakım ve büyüme koşullarının kolay olması, temel hücre kültürü olanaklarına sahip çok çeşitli araştırmacılar için erişilebilirlik sağlar.
-
Akut Miyeloid Lösemi (AML) Modeli
Akut miyeloid lösemi (AML) hastası bir erkekten elde edilen KG-1 AML hücre hattı, AML'nin biyolojisini araştırmak ve potansiyel tedavi yöntemleri üzerine araştırma yapmak için değerli bir araç olarak hizmet eder; bu hastalığın altında yatan mekanizmalar ve tedavi stratejileri hakkında içgörüler sunar.
Sınırlamalar
KG1 hücre hattıyla ilişkili sınırlamalar şunlardır:
-
İn Vitro Model
KG-1 hücreleri, AML araştırmaları için değerli bir in vitro modeldir; ancak, bu hücrelerin in vivo olarak hastalığın karmaşıklığını tam olarak yansıtmayabileceğini ve AML biyolojisinin tüm yönlerini kapsamayabilecek basitleştirilmiş bir hücre modeli işlevi gördüğünü belirtmek önemlidir.
Araştırmada KG-1 hücrelerinin uygulamaları
KG-1, biyomedikal araştırmalarda birçok umut verici uygulama alanı sunmaktadır. KG1 makrofajlarının kullanıldığı önemli araştırmalardan bazıları şunlardır:
- Kanser araştırması: KG-1 hücreleri, bir akut miyeloid lösemi hastasından elde edilmiştir ve bu nedenle AML biyolojisini araştırmak için değerli bir araştırma aracı olarak kabul edilmektedir. Araştırmacılar, AML’nin gelişimini, büyümesini ve ilaç direncini tetikleyen hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için bu hücreleri kullanmaktadır. Bu, aynı zamanda AML ile ilişkili yeni biyobelirteçlerin, genetik mutasyonların ve sinyal yolaklarının tanımlanmasını ve keşfedilmesini de içermektedir. Örneğin, 2019 yılında yapılan bir çalışmada, uzun kodlamayan RNA linc00239'un, akut miyeloid lösemi hücreleri olan KG-1'de doksorubisin direncini ve malign davranışı kolaylaştırdığı araştırılmıştır. Daha sonraki çalışmalar, bu lncRNA'nın AML hücrelerinde bu etkileri göstermek için PI3K/Akt/mTOR sinyal yolunu aktive ettiğini ortaya koymuştur [2].
- Toksikoloji: KG1 hücre hattı, toksikoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, gelecekteki preklinik ve klinik değerlendirmeler için umut vaat eden ilaç adaylarını belirlemek amacıyla, kemoterapötik ilaçlar ve hedefli tedaviler dahil olmak üzere potansiyel terapötik ajanların toksisitesini ve etkinliğini KG1 miyeloid lösemi hücreleri üzerinde test etmektedir. 2018 yılında yürütülen bir araştırmada, doksorubisin içeren nano-niosomların KG1 AML hücre hattı üzerindeki toksisitesi analiz edilmiştir. Çalışma, nano-niosomun tedavinin etkinliğini artırdığı için ilaç dağıtımı için uygun bir taşıyıcı olduğunu öne sürmüştür [3]. Başka bir araştırmada ise araştırmacılar, Urtica dioica bitkisinin yapraklarından hazırlanan ısırgan otu çayının terapötik etkilerini inceledi. Çalışma, bu bitkinin sulu yaprak özütünün akut miyeloid lösemi hücreleri KG-1 ve U937 üzerinde antitümör etkiler sergilediğini ortaya koydu [4].
KG-1 hücreleri ile ilgili yayınlar
Makalenin bu bölümünde, KG-1 hücreleri ile ilgili birkaç ilginç araştırma yayını sıralanmaktadır.
Quercetin, insan miyeloid lösemi KG-1 hücrelerini TRAIL kaynaklı apoptoza karşı duyarlı hale getirir
Bu makale, Journal of Cellular Physiology dergisinde (2019) yayınlanmıştır. Çalışma, quercetin bileşiğinin KG1 AML hücre hattını TNF ile ilişkili apoptoz indükleyici ligand (TRAIL) karşısında duyarlı hale getirdiğini ve hücrelerde TRAIL kaynaklı sitotoksisitenin etkisini artırabileceğini öne sürmüştür.
KLF8, AKT/mTOR yoluyla akut miyeloid lösemi hücrelerinin büyümesini ve glikolizi artırır
Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) dergisinde yer alan bu makale, krüppel benzeri transkripsiyon faktörü 8’in ekspresyonunun azalmasının, AKT/mTOR sinyal yolunu düzenleyerek AML hücrelerinin çoğalmasını ve glikolizi bastırdığını ve böylece apoptozu teşvik ettiğini öne sürmüştür.
Cell Journal (Yakhteh) dergisinde (2020) yayınlanan bu çalışma, arsenik trioksit ve sorafenibin U937 ve KG-1 hücreleri üzerindeki potansiyel etkilerini araştırmıştır.
Medical Oncology dergisinde (2020) yayınlanan bu çalışma, AML hücre hattı KG-1'de terapötik hedefler olarak OXPHOS ve glikolizi değerlendirmiştir.
2020 yılında Drug Design, Development, and Therapy dergisinde yayınlanan bu makale, kurkumin ve talidomid bileşiklerinin, KG-1 hücrelerinde STAT3 ve Bcl-xL ekspresyonunu azaltarak sinerjik bir şekilde apoptoz etkisi yarattığını öne sürmüştür.
6. KG-1 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, videolar ve daha fazlası
Aşağıda, KG-1 hücreleri hakkında erişilebilen birkaç çevrimiçi kaynak yer almaktadır.
- Süspansiyon hücrelerinin alt kültürlenmesi: Bu videoda, KG-1 gibi süspansiyon hücre kültürlerinin alt kültürlenmesi için protokol açıklanmaktadır.
Aşağıdaki bağlantı KG-1 hücre kültürü protokolünü içermektedir:
- KG-1 hücre hattı: Bu web sitesi, KG-1 hücre hattı hakkında temel hücre kültürü bilgileriyle doludur. Hücre hattı besiyerleri ile kriyoprezervatif ve proliferatif kültürlerin alt kültürlenmesi ve işlenmesine yönelik protokoller hakkında bilgiler içerir.
Kaynakça
- Pelliccia, F., V. Ubertini ve N. Bosco, Araştırmada hücre hatlarının kullanılmasından önce moleküler sitogenetik analizin önemi: KG-1a lösemi hücre hattı örneği. Oncol Lett, 2012. 4(2): s. 237-240.
- Yang, Y. ve ark., Uzun kodlamayan RNA linc00239, akut miyeloid lösemi hücrelerinde kısmen PI3K/Akt/mTOR yolunun aktivasyonu yoluyla malign davranışları ve doksorubisine karşı kemoresistansı teşvik eder. Oncology Reports, 2019. 41(4): s. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F. ve ark., Doksorubisin içeren nano-niosomların hazırlanması ve incelenmesi ile akut miyeloblastik lösemi hücre hattı KG-1 üzerindeki toksisitesinin değerlendirilmesi. Payavard Salamat, 2018. 12(4): s. 309-323.
- Hodroj, M.H. ve ark., Isırgan otu çayı, apoptozu teşvik ederek in vitro olarak akut miyeloid lösemi hücrelerinin büyümesini engeller. Nutrients, 2020. 12(9): s. 2629.