Ana sayfaya git

BEWO Hücre Hattı

BeWo, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan, insan koryokarsinomundan türetilmiş bir hücre hattıdır. Plasenta gelişimi ve insan trofoblastlarının sinsitiyalizasyonunun karmaşık sürecini araştırmak için değerli bir in vitro model görevi görür. Araştırmacılar ayrıca bu hücreleri, trofoblast hücre davranışını, hormon üretimini ve plasenta üzerinden madde taşınımını incelemek için kullanmaktadır. Bunun yanı sıra, BeWo hücreleri toksikoloji, enfeksiyon ve hastalık bulaşma çalışmalarında da kullanılmaktadır.

Bu makale, araştırmalarınızda BeWo hücreleriyle çalışmanıza yardımcı olabilecek temel bilgileri içermektedir. Makalede şunlar yer almaktadır:

  1. BeWo hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
  2. BeWo hücre hattı: Kültüre alma bilgileri
  3. BeWo hücre hattının avantajları ve dezavantajları
  4. BeWo hücrelerinin araştırma uygulamaları
  5. BeWo Hücrelerini Ele Alan Araştırma Yayınları
  6. BeWo Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

BeWo hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni

Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri hakkında önceden bilgi sahibi olmak, araştırmanızda bu hücre hattını kullanabilmeniz için çok önemlidir. Makalenin bu bölümünde BeWo hücre hattının kökeni, karakteristik özellikleri ve daha fazlası ele alınmaktadır. Burada şunları öğreneceksiniz: BeWo koryokarsinom hücre hattı nedir? BeWo sinsitiyalizasyonu nedir? BeWo hücreleri nereden gelir? BeWo hücre morfolojisi nedir? BeWo'nun ploidi nedir?

  • Plasental hücre hattı BeWo, 1968 yılında erkek bir fetüsün plasentasındaki malign gestasyonel koriokarsinomdan elde edilmiştir [1]. Bu nedenle, plasental araştırmalar için çok değerli bir model görevi görmektedir.
  • BeWo hücreleri epitel benzeri bir morfoloji sergiler.
  • BeWo hücreleri nispeten küçüktür ve boyutları 20 ila 30 µM arasındadır [2].
  • BeWo hücreleri stabil bir karyotip sergiler. Kök hücre dizisi sayısı hipo-tetraploiddir. BeWo hücrelerinin modal kromozom sayısı 86'dır. Bu sayı 71 ile 178 arasında değişebilir.
  • BeWo hücreleri, insan koryonik somatomammotropin, insan koryonik gonadotropin (hCG) ve steroid hormonları gibi çeşitli hormonlar üretir.
  • BeWo hücreleri, CK 7, E-kadherin ve VE-kadherin dahil olmak üzere moleküler belirteçleri eksprese eder.

B30 alt hattı

B30, BeWo hücrelerinin bir alt hattıdır. Besin maddelerinin alımı ve taşınmasını araştırmak için kullanılır. Bu, gözenekli membranlar üzerinde gösterdikleri güçlü büyümeye atfedilir.

BeWo ve JEG-3

BeWo JEG-3 hücre hatları, koryokarsinomlardan türetilmiştir ve plasenta araştırmalarında kullanılır. BeWo hücreleri, insan koryonik gonadotropin (hCG) ve estradiol gibi hormonları JEG-3'ten daha düşük seviyelerde üretir.

Mikroskop altında gözlemlenen, blastosist oluşumunun aşamalarını gösteren insan yumurtasının döllenme sürecinin hızlandırılmış görüntüsü.

BeWo hücre hattı: Kültivasyon bilgileri

Önemli ayrıntıları bilmediğiniz sürece hücre kültürünü sürdürmek zor olabilir. Örneğin: BeWo'nun ikiye katlanma süresi nedir? BeWo hücre besiyeri nedir? BeWo hücre hattı nasıl kültürlenir? ve BeWo hücreleri nasıl dondurulur?

BeWo Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar

Çoğalma Süresi:

BeWo hücrelerinin popülasyon ikiye katlanma süresi yaklaşık 30 saattir.

Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:

BeWo, yapışkan bir hücre hattıdır.

Hücre ekim yoğunluğu:

BeWo hücreleri için önerilen ekim yoğunluğu 1 x 10⁴ hücre/cm²'dir. Ekim için, hücrelerden eski besiyeri uzaklaştırılır ve hücreler 1x PBS ile durulanır. Ardından, Accutase (pasajlama çözeltisi) eklenir ve hücreler ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Daha sonra, ayrılan hücrelere kültür besiyeri eklenir ve santrifüjlenir. Toplanan hücreler daha sonra yeniden süspansiyona alınır ve yeni bir şişeye dökülür.

Büyüme Ortamı:

BeWo hücrelerinin büyütülmesi için %10 FBS, 2,0 mM L-Glutamin, 2,0 mM Sodyum piruvat ve 2,5 g/L NaHCO3 içeren Ham's F12K besiyeri kullanılır. BeWo hücre besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.

Büyüme Koşulları:

BeWo hücreleri, 37 derece Celcius sıcaklığa ayarlanmış ve %5 CO₂ beslemesi olan nemlendirilmiş bir inkübatörde muhafaza edilir.

Saklama:

Dondurulmuş BeWo hücreleri, -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda elektrikli ultra düşük sıcaklık dondurucusunda veya sıvı azotun buhar fazında saklanır.

Dondurma Süreci ve Ortamı:

BeWo hücrelerinin CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamında dondurulması önerilir. Hücreler, yavaş dondurma yöntemi kullanılarak dondurulur. Bu yöntem, sıcaklığın dakikada sadece 1 derece düşmesine izin vererek hücrelerin şoka maruz kalmasını önler ve canlılıklarını korur.

Çözme Süreci:

Dondurulmuş hücreler, küçük bir buz topakçığı kalana kadar önceden ayarlanmış 37°C'lik su banyosuna 40 ila 60 saniye daldırılarak çözülür. Ardından, taze büyüme ortamı eklenir ve hücreler santrifüjlenerek dondurma ortamı bileşenleri uzaklaştırılır. Toplanan hücre peleti yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme için bir kültür şişesine aktarılır.

Biyogüvenlik Seviyesi:

BeWo hücre kültürlerinin işlenmesi ve muhafaza edilmesi için Biyogüvenlik Seviyesi 1 laboratuvarı gereklidir.

BEWo cells

Mikroskop altında 10x ve 20x büyütme oranlarında insan koryokarsinom hücre dizisi BEWO’nun epitelyal, poligonal morfolojisi ve adacık benzeri büyüme şeklinin görüntülenmesi.

Yayın tarihi: 2023 | Son güncelleme tarihi: Mayıs 2026

BeWo hücre hattının avantajları ve dezavantajları

BeWo hücreleri benzersiz özellikler sergiler ve kendine özgü avantaj ve dezavantajları vardır. Bu bölümde, bunlardan dikkate değer olan bazılarını inceleyeceğiz.

Avantaj

BeWo koryokarsinom hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:

  • İn Vitro Plasental Hücre Modeli

    BeWo hücreleri, trofoblast hücre davranışını ve plasental sinsitiyalizasyonu incelemek için in vitro bir model sağlar ve in vivo olarak gözlemlenmesi zor olan süreçleri taklit eder.

  • Hormon Üretimi

    BeWo hücreleri, hCG ve plasental laktogen gibi hormonları salgılar, bu da onları hormonal düzenleme çalışmaları ve üreme biyolojisi araştırmaları için değerli kılar.

 

Dezavantajlar

BeWo trofoblast hücrelerinin dezavantajları şunlardır:

  • Kanser hücre hattı

    BeWo hücreleri, plasental bir tümör olan koryokarsinomdan elde edilmiştir. Bu köken, normal plasental hücre işlevini tam olarak temsil etmeyebilir.

 

BeWo hücrelerinin araştırma uygulamaları

BeWo hücre hattı, plasenta araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının birkaç özel uygulaması burada belirtilmiştir:

  • Plasenta ve gebelikle ilgili araştırmalar: BeWo hücreleri, plasenta ve gebelikle ilgili araştırmalarda çok önemli bir rol oynar. Örneğin, araştırmacılar bu hücreleri, ilaçlar, besinler ve toksinler dahil olmak üzere çeşitli maddelerin plasenta bariyerinden geçişini incelemek için kullanır. Ayrıca, insan koryonik gonadotropin (hCG), plasental laktogen ve steroid hormonları dahil olmak üzere hormonların üretimi ve düzenlenmesini de araştırmaktadırlar. Bu, hamilelik sırasındaki hormonal değişiklikleri anlamak için önemlidir. 2018 yılında yapılan bir araştırmada, bromlu alev geciktiricilerin (BFR'ler) insan trofoblastik hücre hattındaki (BeWo) sülfotransferaz aktivitesi üzerindeki etkisi incelenmiştir. Bu enzim, tiroid hormonunun hücre içi seviyelerinin düzenlenmesinde rol oynar [3].
  • Enfeksiyon ve Hastalık araştırmaları: BeWo hücreleri, patojenler ve plasental hücreler arasındaki etkileşimi incelemek için de kullanılır. Bu araştırma, anneden fetüse bulaşabilen hastalıkları anlamak ve fetal sağlığı korumak için stratejiler geliştirmek açısından değerlidir. Ayrıca, bu hücre hattı, araştırmacıların preeklampsi gibi hamilelik sırasında ortaya çıkan komplikasyonları araştırmasına yardımcı olmaktadır. Örneğin, 2023 yılında Michalina Bralewska tarafından yürütülen bir çalışmada BeWo trofoblast hücre modeli kullanılmış ve hem kromogranin A (CgA) hem de ondan türetilen peptit olan kateastatin (CST)'in preeklampsi (PE) patogenezinin karmaşık sürecinde rol oynayabileceğini ortaya koymuştur [4]. Daha sonra yapılan başka bir çalışmada, BeWo koryokarsinom hücre hattı kullanılarak trikozantininin kanserle mücadele potansiyeli araştırılmıştır. Araştırmada ayrıca, deney öncesinde ve sonrasında karşılaştırmalı proteomik analizler gerçekleştirilerek biyobelirteçlerin keşfedilmesi için ek çaba sarf edilmiştir [5].

5. BeWo Hücrelerini Konu Alan Araştırma Yayınları

BeWo trofoblast hücrelerini konu alan bazı önemli araştırma yayınları aşağıda yer almaktadır.

AMPK Sinyali, İnsan Trofoblast Hücre Hattı BeWo'da Mitofaji ve Mitokondriyal ATP Üretimini Düzenler

Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) dergisinde yayınlanan bu çalışma, AMPK sinyalinin FUNDC1 ve PRKN tarafından kolaylaştırılan mitofaji yolakları aracılığıyla BeWo trofoblast hücrelerinde mitofajiyi aktive ettiğini öne sürmüştür. Sonuç olarak, mitofaji ATP üretiminin ve mitokondriyal membran potansiyelinin korunmasına yardımcı olur.

Etilparaben, Caspase-3 yoluyla insan plasenta BeWo hücrelerinde apoptozlu hücre ölümünü indükler

Bu makale Animal Cells and Systems (2020) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, etilparabenin kaspaz 3 yolunu düzenleyerek BeWo hücrelerinin apoptozuna aracılık ettiğini öne sürmüştür.

Kantitatif proteomik ile insan plasenta dokusu ve hücre hatlarının (BeWo, JEG-3, JAR ve HTR-8/SVneo) ksenobiyotik ve steroid atılım potansiyelinin karakterizasyonu

Drug Metabolism and Disposition (2023) dergisinde yayınlanan bu çalışmada, BeWo, JAR, JEG-3 ve HTR-8/SVneo dahil olmak üzere plasental hücre hatları kullanılarak hücrelerdeki ksenobiyotik ve steroid birikimi araştırılmıştır.

İnsan plasentasında apelin ve apelin reseptörü: Trofoblast JEG‑3 ve BeWo hücrelerinin proliferasyonu ve hücre döngüsünün ekspresyonu, sinyal yolu ve regülasyonu

International Journal of Molecular Medicine (2020) dergisinde yayınlanan bu araştırma makalesi, APJ reseptörünün ligandı olan Apelin'in, APJ ve ERK1/2, stat3 ve AMPK sinyal yolakları aracılığıyla BeWo hücrelerinin proliferasyonunu teşvik ettiğini öne sürmüştür. Dolayısıyla, Apelin, plasentanın gelişimini düzenleyen önemli bir adipokin olabilir.

Antiepileptik ilaçlar ve fetal besinler: insan plasenta hücre hattındaki kolin taşıyıcıları üzerindeki etkiler

Epilepsia (2021) dergisinde yayınlanan bu çalışma, fetal besinlerin ve antiepileptik ilaçların, insan kaynaklı trofoblastik hücre hattı BeWo'daki kolin taşıyıcıları üzerindeki etkilerini araştırmıştır.

BeWo Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

BeWo hücreleri hakkında mevcut bazı çevrimiçi kaynaklar şunlardır:

  • İn vitro transfeksiyon: Bu video, yapışkan hücreler için in vitro plazmid DNA transfeksiyon protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır.

Aşağıdaki bağlantı, BeWo hücreleri için hücre kültürü bilgilerini içerir:

  • BeWo hücreleri: Bu web sitesi, BeWo hücre hattı hakkında temel hücre kültürü bilgilerini içerir. Buna hücre besiyeri ve kültür koşulları ile ilgili bilgiler dahildir. Ayrıca, subkültürleme ve kriyoprezervatif ve proliferatif kültürlerin işlenmesi için protokoller de bulunmaktadır.

Referanslar

  1. Weber, M., et al., Altı insan trofoblastik hücre hattının sitogenomikleri. Placenta, 2021. 103: s. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al., Uzun süreli kültürde trofoblastların özellikleri. Deneysel Biyoloji ve Tıp Bülteni, 2017. 164: s. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt ve H.M. Stapleton, İnsan koryokarsinom plasenta hücre hattı BeWo'da bromlu alev geciktirici kimyasalların tiroid hormonu sülfotransferaz aktivitesini bozması. Chemosphere, 2018. 197: s. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha ve A. Sakowicz, Preeklampsi Ortamının Neden Olduğu HTR-8/SVneo ve BeWo Trofoblastik Hücre Hatlarında CgA Kaynaklı CST Protein Seviyesindeki Düşüş. Uluslararası Moleküler Bilimler Dergisi, 2023. 24(8): s. 7124.
  5. Hu, Y. ve ark., BeWo hücre hattına trikosantin ilavesinin karşılaştırmalı proteomik analizi. Molecules, 2022. 27(5): s. 1603.

 

Farklı bir ülkede olduğunuzu veya şu anda seçili olandan farklı bir tarayıcı dili kullandığınızı tespit ettik. Önerilen ayarları kabul etmek ister misiniz?

Kapat