Hücre Kültürü Ortamı

Kültüre alınan hücreler, başarılı büyüme ve bakım için titiz bir çevresel kontrol gerektirir. Kapsamlı bir yaklaşım sterilite, besin maddesi temini, pH stabilitesi ve sıcaklık kontrolünün sağlanmasını içerir.

Steril Koşullar ve Besin Temini

Kontaminasyonu önlemek ve hücre canlılığını sağlamak için steril bir ortam çok önemlidir. Bu, tipik olarak aseptik teknikler ve laminer akış davlumbazları gibi özel ekipmanlarla sağlanır. Besinler, aşağıdakiler de dahil olmak üzere temel bileşenlerin bir karışımını içeren kültür ortamı yoluyla sağlanır:

  • İnorganik Tuzlar: Ozmotik dengeyi korumak ve hücresel faaliyetler için gerekli iyonları sağlamak için hayati önem taşır.
  • Karbonhidratlar: Enerji kaynağı olarak hizmet eder; glikoz en yaygın kullanılan şekerdir.
  • Amino Asitler: Proteinlerin yapı taşlarıdır; bazıları esansiyeldir ve hücreler tarafından sentezlenemez.
  • Vitaminler: Enzimatik reaksiyonlar için ko-faktör görevi görür; B vitaminleri hücre metabolizması için gereklidir.
  • Yağ Asitleri ve Lipitler: Hücre zarı bütünlüğü ve işlevi için temel bileşenler.
  • Proteinler ve Peptitler: Serumsuz ortamda, bunlar tipik olarak serum tarafından sağlanan büyüme faktörlerinin ve bağlayıcı proteinlerin yerini alır.
  • Serum: Değişkenliği ve kontaminasyon risklerini azaltmak için serumsuz alternatifler popülerlik kazanıyor olsa da, genellikle büyüme faktörleri kaynağı olarak dahil edilir.
  • pH ve Sıcaklık Stabilitesi: Hücreler optimum büyüme için tipik olarak 7.2-7.4 pH aralığına ihtiyaç duyar. Bu, CO2/bikarbonat bazlı olabilen veya HEPES gibi maddeler kullanılarak kimyasal olarak elde edilebilen tamponlama sistemleri tarafından düzenlenir. Sıcaklık, fizyolojik koşulları taklit etmek için 37°C civarında tutulur.

Ortam Çeşitleri ve Optimizasyon

Yıllar içinde, belirli hücre tiplerine hitap etmek için çeşitli bazal ortamlar geliştirilmiştir:

  • Dengeli Tuz Çözeltileri: Daha karmaşık ortam formülasyonlarının temelini oluşturur.
  • Minimum Temel Ortam (MEM) gibiBazal Ortamlar, birincil kültürler ve diploid hücreler için kullanılır.
  • Karmaşık Ortamlar: RPMI 1640 gibi, daha geniş bir memeli hücresi yelpazesi için uygundurlar.
  • Serumsuz Besiyerleri: Hayvansal kaynaklı bileşenlerden kaynaklanan kontaminasyon riskini azaltarak özel uygulamalar için uyarlanmıştır.

Besiyeri Hazırlama ve Kalite Kontrol

Besiyerleri temel bileşenlerden kurum içinde hazırlanabilir veya hazır solüsyonlar olarak satın alınabilir. Kalite kontrolü, kontaminantların bulunmamasını ve bileşenlerin uygun konsantrasyonda olmasını sağlamayı içerir. Toz besiyerinin sulandırılması için yüksek kalitede su gerekir ve hazırlanan besiyerinin tipik olarak filtrasyon yoluyla sterilize edilmesi gerekir.

Serum Kullanımı ve Güvenlikle İlgili Hususlar

Serum kullanımı, özellikle de fetal sığır serumu (FBS), zengin büyüme faktörleri içeriği nedeniyle yaygındır. Ancak, BSE gibi hastalıklarla ilgili endişeler nedeniyle, güvenliği sağlamak için sıkı test ve tedarik protokolleri izlenmektedir.

Düzenleyici Yönergeler ve Trendler

Yönetmelikler, kültürlerde hayvan kaynaklı materyallere rehberlik ederek kaynak bulma ve test etmenin önemini vurgulamaktadır. Bu tür materyallerin mümkün olduğunca ortadan kaldırılmasına yönelik eğilim, serumsuz ve hayvansız besiyeri alternatiflerinin geliştirilmesine de yansımaktadır.

Sonuç olarak, hücre kültürü ortamı hücrelerin in vitro büyümesi ve bakımında temel bir rol oynamaktadır. Her bir bileşen, hücrelerin büyüme, hayatta kalma ve işlevsellik koşullarına sahip olmasını sağlayarak in vivo ortamı taklit etmek için dikkatle seçilir ve optimize edilir.

DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) biyolojik araştırmalarda çok çeşitli memeli hücrelerinin büyümesini desteklemek için tasarlanmış çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir bazal ortamdır. Primer fibroblastlar, nöronlar, glial hücreler, HUVEC'ler, düz kas hücrelerinin yanı sıra HeLa, 293, Cos-7 ve PC-12 gibi popüler hücre hatlarının kültürü için ideal bir ortam olarak hizmet eder.
DMEM'i diğer ortamlardan ayıran şey benzersiz bileşimidir. Orijinal Eagle's Minimal Essential Medium'a kıyasla amino asit ve vitamin konsantrasyonunda dört katlık etkileyici bir artış içerir. Başlangıçta düşük glikoz (1 g/L) ve sodyum piruvat ile geliştirilen DMEM, sıklıkla sodyum piruvat içeren veya içermeyen daha yüksek glikoz seviyeleri ile kullanılmaktadır. DMEM'in protein, lipid veya büyüme faktörü içermemesi, takviye gerektirmesi dikkat çekicidir. Optimum büyümeyi sağlamak için yaygın bir yaklaşım DMEM'i %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) ile desteklemektir. Ayrıca DMEM, fizyolojik pH'ı korumak için %5-10 CO2 ortamı gerektiren bir sodyum bikarbonat tampon sistemi kullanır.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), çeşitli yapışık hücre fenotiplerinin büyüme ihtiyaçlarını karşılayan, hücre ve doku kültürü için tanımlanmış ortamlar arasında oldukça saygındır. Dulbecco'nun modifikasyonu olarak bilinen gelişmiş ek formülasyon sayesinde 1950'lerde tavuk hücrelerini yetiştirmek için geliştirilen orijinal Eagle's Medium'u aşmaktadır. Bu modifikasyon, belirli amino asitlerin ve vitaminlerin içeriğini orijinal besiyerine kıyasla dört kata kadar önemli ölçüde artırır.
Hücre kültürü alanında DMEM, birincil hücreler, kök hücreler ve dönüştürülmüş hücreler dahil olmak üzere farklı hücre tipleri için büyüme ortamı olarak hayati bir rol oynamaktadır. Araştırmacılar ayrıca ilaç keşfi, doku mühendisliği ve hücre sinyal yollarının incelenmesi gibi çok çeşitli araştırma uygulamaları için DMEM'in değiştirilmiş versiyonunu kullanmaktadır.

Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.


Kompozisyon



Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
Glisin
30.00



L-Arginin HCl
84.00



L-Sistin 2 HCl
62.57



L-Glutamin
584.00



L-Histidin HClH2O
42.00



L-İzolösin
105.00



L-Lösin
105.00



L-Lizin HCl
146.00



L-Metiyonin
30.00



L-Fenilalanin
66.00



L-Serin
42.00



L-Threonine
95.00



L-Triptofan
16.00



L-Tirozin 2 Na 2H2O
103.79



L-Valine
94.00


Vitaminler
Kolin klorür
4.00



D-Kalsiyum Pantotenat
4.00



Folik Asit
4.00



miyo-İnositol
7.20



Nikotinamid
4.00



Piridoksal HCl
4.00



Riboflavin
0.40



Tiamin HCl
4.00


İnorganik Tuzlar
CaCl2 2H2O
265.00



Fe(NO3)3 9H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
4500.00



Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
15.90



Sodyum Piruvat
110.00

€25,00*
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
En yaygın kullanılan sentetik hücre kültürü ortamlarından biri Minimum Essential Medium Eagle'dır (MEM). Harry Eagle tarafından geliştirilen bu besiyeri ilk olarak 1959 yılında piyasaya sürülmüş ve o zamandan beri tek tabakalı ve yapışık hücre hatlarında yetiştirilen çeşitli hücre türleri için popüler bir seçim haline gelmiştir.
EMEM'in içinde ne var?
EMEM, Eagle'ın minimum temel besiyerinin Earle'ün Dengeli Tuz Çözeltisi, esansiyel olmayan amino asitler, L-glutamin, sodyum piruvat ve sodyum bikarbonat içeren değiştirilmiş bir versiyonudur. Bu sodyum bikarbonat seviyesinin havadaki %5 CO2'de kullanılmak üzere tasarlandığına dikkat etmek önemlidir. Etkinliğini korumak için, kullanılmadığı zamanlarda ortamın karanlıkta 2°C ila 8°C arasında saklanması önerilir.
EMEM ne için kullanılır?
Eagle's minimal essential medium (EMEM) doku kültüründe hücreleri muhafaza edebilen bir hücre kültürü ortamıdır. Ortam daha yüksek konsantrasyonlarda amino asit içerir ve kültürlenmiş memeli hücrelerinin protein bileşimine daha doğru bir şekilde yaklaşılmasını sağlar. EMEM, fibroblastlar, insan karaciğer kanseri hücre hattı (HepG2) hücreleri ve insan fetal beyin progenitör türevli astrosit hücreleri (PDA) dahil olmak üzere çeşitli hücreleri yetiştirmek için kullanılabilir. Tipik olarak fetal sığır serumu (FBS), buzağı veya at serumu varlığında kullanılır.
EMEM'in diğer hücre kültürü ortamlarından farkı nedir?
EMEM ve Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) bazı benzerlikleri paylaşırken, aynı zamanda farklıdırlar. Her iki besiyerinde de protein bulunmaz ve bir hücreye enerji sağlamak ve onu doku kültüründe tutmak için gereken amino asitleri, tuzları, glikozu ve vitaminleri içerir. Ancak DMEM formülasyonu, EMEM'e kıyasla dört kat daha fazla vitamin ve amino asit ile iki ila dört kat daha fazla glikoz içerecek şekilde modifiye edilmiştir. EMEM'in de orijinal MEM formülasyonundan farklı olduğunu belirtmek gerekir.


Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.



Kompozisyon



Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
L-Arginin HCl
126.00


L-Sistin 2 HCl
31.30


L-Glutamin
292.00


L-Histidin HClH2O
42.00


L-İzolösin
52.00


L-Lösin
52.00


L-Lizin HCl
72.50


L-Metiyonin
15.00


L-Fenilalanin
32.00


L-Threonine
48.00


L-Triptofan
10.00


L-Tirozin 2 Na 2H2O
51.90


L-Valine
46.00


Vitaminler
Kolin Klorür
1.00


Vitaminler
D-Kalsiyum Pantotenat
1.00


Folik Asit
1.00


miyo-İnositol
2.00


Nikotinamid
1.00


Piridoksal HCl
1.00


Riboflavin
0.10


Tiamin HCl
1.00


İnorganik Tuzlar
CaCl2 2H2O
265.00


İnorganik Tuzlar
KCl
400.00


MgSO4
97.67


NaCl
6800.00


NaHCO3
2200.00


NaH2PO4
122.00


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
1000.00


Diğer Bileşenler
Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
11.00

€25,00*
Ham's F12 Medium, w: 1.0 mM stabil Glutamin, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.176 g/L NaHCO3
Ham's F-12 Nutrient Mix olarak da bilinen Ham's F-12 Medium, özellikle hücre kültürü için tasarlanmış yaygın olarak kullanılan bir bazal besiyeridir. Çin Hamster Yumurtalık (CHO) hücreleri, akciğer hücreleri ve fare L hücrelerinin serumsuz, tek hücreli kaplanması için yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca Ham's F-12, Klonal Toksisite Deneyi (CTA) için tercih edilen ortamdır.
Önemli avantajlarından biri, serum takviyesine ihtiyaç duymadan hücre büyümesini destekleme yeteneğidir. Bu, serum bileşenlerinin neden olduğu potansiyel etkileşimi ortadan kaldırarak tutarlı ve güvenilir deneysel sonuçlar sağlar. Ham's F-12 Medium, serumsuz bir kültür ortamı sağlayarak araştırmacılara araştırmaları üzerinde daha fazla kontrol sunar.
Ham's F-12 Medium'un bir diğer önemli özelliği de tek hücreli kaplamaya uygun olmasıdır. Bu da onu CHO hücreleri, akciğer hücreleri ve fare L hücreleri dahil olmak üzere çeşitli hücre hatları için mükemmel bir seçim haline getirir. Besiyerinin optimize edilmiş besin bileşimi, tek tek hücrelerin verimli bir şekilde bağlanmasını ve büyümesini kolaylaştırarak, gelişmiş tekrarlanabilirliğe sahip homojen hücre kültürlerinin oluşturulmasını sağlar.
Ayrıca Ham's F-12 Medium, Klonal Toksisite Testi (CTA) için tercih edilen ortam olarak kabul görmüştür. Bu deney, maddelerin hücreler üzerindeki sitotoksik etkilerinin değerlendirilmesinde kritik bir rol oynamaktadır. Araştırmacılar, CTA'da Ham's F-12 Medium kullanarak çeşitli bileşiklerin veya tedavilerin tek tek hücreler üzerindeki etkisini doğru bir şekilde değerlendirebilir ve toksikolojik profillere ilişkin değerli bilgiler sağlayabilir.
Kalite kontrol

20-25°C'de pH = 7,2 +/
- 0,02.
Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.

Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37° C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
Besiyerini 37° C'den daha fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
Temel besiyeri dışındaki tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.

Kompozisyon




Bileşenler
mg/L


İnorganik Tuzlar
Kalsiyum klorür x 2H2O
44,00



Bakır(II) sülfat x 5H2O
0,00



Demir (II) sülfat x 7H2O
0,83



Magnezyum klorür x 6H2O
122,00



Potasyum klorür
223,65



Sodyum klorür
7599,00



di-Sodyum hidrojen fosfatsusuz
142,04



Çinko sülfat x 7H2O
0,86


Diğer Bileşenler
D(+)-Glikoz susuz
1801,60



Hipoksantin
4,08



Linoleik asit
0,08



DL-α-Lipoik asit
0,21



Fenol kırmızısı
1,20



Putresin x 2HCl
0,16



Sodyum piruvat
110,00



Timidin
0,73



NaHCO3
1176,00


Amino Asitler
L-Alanin
8,91



L-Arginin x HCl
210,70



L-Asparagin x H2O
15,01



L-Aspartik asit
13,31



L-Sistein x HCl x H2O
35,12



L-Alanil-L-Glutamin
217,30



L-Glutamik asit
14,71



Glisin
7,51



L-Histidin x HCl x H2O
20,96



L-İzolösin
3,94



L-Lösin
13,12



L-Lizin x HCl
36,54



L-Metiyonin
4,48



L-Fenilalanin
4,96



L-Proline
34,53



L-Serin
10,51



L-Threonine
11,91



L-Triptofan
2,04



L-Tirozin
5,44



L-Valine
11,71


Vitaminler
D(+)-Biyotin
0,01



D-Kalsiyum pantotenat
0,24



Kolin klorür
13,96



Folik asit
1,32



miyo-İnositol
18,02



Nikotinamid
0,04



Piridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



B12 Vitamini
1,36

€25,00*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3
DMEM: Ham's F12, biyolojik araştırmalar için hücre kültüründe yaygın olarak tanınan ve yaygın olarak kullanılan bir bazal ortamdır. Özellikle Fetal Sığır Serumu (FBS) ile desteklendiğinde, çeşitli memeli hücre hatlarının büyümesi için temel bir besin kaynağı olarak hizmet eder.

Bu benzersiz formülasyon Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ve Ham's F-12'yi (Ham's Nutrient Mixture F-12) hassas bir 1:1 oranında birleştirir. L-glutamin ilavesi bileşimini daha da geliştirir.

Eagle's Minimal Essential Medium'dan (EMEM) türetilen DMEM, selefine kıyasla daha yüksek bir amino asit ve vitamin konsantrasyonu sunar. Buna karşılık, Ham's F-12, Ham's F-10 besiyerine dayanır ve tamamlayıcı bir dizi temel bileşen sağlar.

Optimum hücre büyümesini desteklemek için DMEM:Ham's F12'yi tipik %5-10 konsantrasyonda FBS ile takviye etmek yaygın bir uygulamadır. Ortamda büyüme hormonları, lipidler ve hücresel gelişim için çok önemli proteinler bulunmadığından bu ekleme gereklidir.

DMEM:Ham's F12 bir pH tampon sistemi içerir ve genellikle bir pH göstergesi olan fenol kırmızısı ile desteklenir. DMEM:Ham's F12 veya bikarbonat tampon sistemi kullanan herhangi bir ortamda kültürlenen hücreler, uygun pH seviyelerini korumak için %5-10'luk kontrollü bir CO2 ortamı gerektirir.


Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga fırın gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.


Kompozisyon



Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
Glisin
18.75


L-Alanin
4.45


L-Arginin HCl
147.50


L-Asparagin H₂O
7.50


L-Aspartik Asit
6.65


L-Sistein HCl H₂O
17.56


L-Sistin 2 HCl
31.29


L-Glutamik Asit
7.35


L-Glutamin
365.00


L-Histidin HCl H₂O
31.48


L-İzolösin
54.47


L-Lösin
59.05


L-Lizin HCl
91.25


L-Metiyonin
17.24


L-Fenilalanin
35.48


L-Proline
17.25


L-Serin
26.25


L-Threonine
53.45


L-Triptofan
9.02


L-Tirozin Disodyum Tuzu
48.10


L-Valine
52.85


Vitaminler
D-Biotin
0.0035


Kolin Klorür
8.98


D-Kalsiyum Pantotenat
2.24


Folik Asit
2.66


miyo-İnositol
12.60


Nikotinamid
2.02


Piridoksin HCl
0.031


Piridoksal HCl
2.00


Riboflavin
0.219


Tiamin HCl
2.17


B12 Vitamini
0.68


İnorganik Tuzlar
CaCl₂ 2 H₂O
154.50



CuSO₄ 5 H₂O
0.0013



Fe(NO₃)₃ 9 H₂O
0.05



FeSO₄ 7 H₂O
0.417



KCl
311.80



MgCl₂ 6 H₂O
61.20



MgSO₄
48.84



NaCl
6996.00



NaHCO₃
1200.00



Na₂HPO₄
71.02



NaH₂PO₄
54.30



ZnSO₄ 7 H₂O
0.432


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
3151.00


Hipoksantin
2.40


HEPES
3574.50


Linoleik Asit
0.042


Lipoik Asit
0.105


Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
8.63


Putresin 2 HCl
0.081


Sodyum Piruvat
55.00


Timidin
0.365

€25,00*
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Sodyum piruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3
Biyolojik araştırmaların benzersiz gereksinimlerini karşılamak üzere tasarlanmış Ham's F-12 besiyerinin özel bir modifikasyonu olan Ham's F-12K (Kaighn's) Besiyeri ile tanışın. Bu gelişmiş besiyeri, özellikle azaltılmış serum koşullarında primer insan hepatositlerinin yanı sıra sıçan ve tavuk karaciğer hücrelerinin yetiştirilmesini geliştirerek belirgin avantajlar sunar.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, hücre kültürü koşullarını optimize etmek için özenle formüle edilmiştir. Amino asitler ve sodyum piruvat gibi temel bileşenlerin yanı sıra putresin, timidin, hipoksantin ve çinko gibi ek elementlerin yüksek seviyelerini sağlayan zenginleştirilmiş bir bileşime sahiptir. Bu eklemeler, araştırmacıların besiyerini minimal serumla veya belirli hücre tipleri için tanımlanmış bileşenlerle desteklemesini sağlayarak hassas deneysel koşulları kolaylaştırır.

Özellikle, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium protein veya büyüme faktörü içermez. Sonuç olarak, büyüme faktörleri ve Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye genellikle gereklidir, bu da araştırmacıların ortamı kendi spesifik hücre hatlarının gereksinimlerine göre uyarlamasına olanak tanır. Optimum performans için, FBS konsantrasyonu her hücre hattı için dikkatlice optimize edilmeli, böylece optimum büyüme ve işlevsellik sağlanmalıdır.

Fizyolojik pH'ı korumak için Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, bir sodyum bikarbonat tampon sistemi (2,5 g/L) kullanır ve ekim sırasında kontrollü bir %5-10 CO2 ortamı gerektirir. Bu, ortamın pH değerinin hücre büyümesi ve canlılığı için ideal aralıkta kalmasını sağlar
Kalite kontrol

20-25°C'de pH = 7,2 +/
- 0,02.
Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.

Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
Besiyerini 37°C'den fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.

Kompozisyon




Bileşenler
mg/L


İnorganik Tuzlar
Kalsiyum klorür x 2H2O
135,24



Bakır(II) sülfat x 5H2O
0,00



Demir (II) sülfat x 7H2O
0,83



Magnezyum klorür x 6H2O
105,72



Magnezyum sülfat x 7H2O
394,49



Potasyum klorür
283,29



Potasyum dihidrojen fosfat
58,52



Sodyum klorür
7597,20



di-Sodyum hidrojen fosfatsusuz
115,02



Çinko sülfat x 7H2O
0,14


Diğer Bileşenler
D(+)-Glikoz susuz
1260,00



Hipoksantin
4,08



DL-α-Lipoik asit
0,21



Fenol kırmızısı
3,00



Putresin x 2HCl
0,32



Sodyum piruvat
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidin
0,73


Amino Asitler
L-Alanin
17,82



L-Arginin x HCl
421,40



L-Asparagin x H2O
30,02



L-Aspartik asit
26,62



L-Sistein x HCl x H2O
70,24



L-Glutamin
292,20



L-Glutamik asit
29,42



Glisin
15,01



L-Histidin x HCl x H2O
41,92



L-İzolösin
7,87



L-Lösin
26,24



L-Lizin x HCl
73,04



L-Metiyonin
8,95



L-Fenilalanin
9,91



L-Proline
69,06



L-Serin
21,02



L-Threonine
23,82



L-Triptofan
4,08



L-Tirozin
10,87



L-Valine
23,42


Vitaminler
D(+)-Biyotin
0,07



D-Kalsiyum pantotenat
0,48



Kolin klorür
13,96



Folik asit
1,32



miyo-İnositol
18,02



Nikotinamid
0,04



Piridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



B12 Vitamini
1,36

€108,00*
McCoys 5A besiyeri (modifiye), w: 3,0 g/L Glukoz, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Sodyum piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
McCoy's 5A Medium, birincil hücre kültürlerinde virüslerin büyümesini ve çoğalmasını kolaylaştırmak için tasarlanmış, şiddetle tavsiye edilen ve özel bir besiyeridir. Çeşitli biyolojik araştırma uygulamalarında olağanüstü performansı ile önemli bir tanınırlık kazanmıştır. McCoy's 5A Medium'un öne çıkan uygulamalarından biri, insan kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde kullanılmasıdır. Özellikle, lösin bakımından zengin tekrar içeren G-protein-bağlı reseptör (LGR5) ve kolon kanserinin metastazındaki rolü üzerine yapılan çalışmalarda kullanılmıştır. Bu besiyeri, HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ve TENN dahil olmak üzere çeşitli kolon karsinomu hücre hatlarının kültürlenmesinde etkili bir şekilde kullanılmıştır ve araştırmacıların kolon kanseri metastazının altında yatan mekanizmaları daha derinlemesine incelemelerini sağlamıştır. Kanser araştırmalarındaki uygulamasına ek olarak, McCoy's 5A Ortamı osteoblastların incelenmesinde de vazgeçilmez olduğu kanıtlanmıştır. Standart hücre kültürü ortamlarında kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatitin iyon reaktivitesini araştıran araştırmacılar, osteoblastları kültürlemek için bu ortamı kullanmıştır. Bu uygulama, osteoblastlar ve kalsiyum eksikliği olan hidroksiapatit arasındaki etkileşimlerin daha iyi anlaşılmasını kolaylaştırarak kemik araştırmaları alanındaki ilerlemelere katkıda bulunmuştur. McCoy's 5A Ortamı, karaciğer tümör hücrelerine optimal destek sağlamak için Basal Medium Eagle'da bulunan amino asitleri modifiye ederek titizlikle formüle edilmiştir. Bu zenginleştirilmiş formülasyon, çeşitli yerleşik hücre hatlarının yanı sıra birincil hücreler için de uygun olmasını sağlayarak, çeşitli araştırma ortamlarında çok yönlülüğünü ve uygulanabilirliğini daha da artırmaktadır. McCoy's 5A Medium, biyokimyasal ve fizyolojik etkilerini karaciğer tümör hücrelerinin ötesine genişletir. Kemik iliği, deri, diş eti, böbrek, omentum, adrenal, akciğer, dalak, sıçan embriyosu ve diğer hücre tiplerinin birincil kültürlerinde büyümeyi desteklemek için başarıyla kullanılmıştır. Bu geniş uygulama yelpazesi, kapsamlı biyolojik araştırmalar için çeşitli hücre tiplerinin büyümesini ve bakımını desteklemede McCoy's 5A Medium'un geniş kullanım alanını kanıtlamaktadır. Formülasyon Bu McCoy's 5A ortamı (modifiye), 3,0 g/L glikoz, stabil glutamin, 2,0 mM sodyum piruvat ve 2,2 g/L NaHCO3 içerir. Kalite kontrol pH = 7,2 +/
- 0,02, 20-25 °C'de.  Her parti sterillik ve mikoplazma ve bakteri bulunmadığı konusunda test edilmiştir. Saklama Karanlıkta +2°C ila +8°C arasında buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37°C'ye kadar ısıtma, ürünün kalitesini en aza indirir.  Ortamı 37°C'nin üzerine ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga fırınlar) kullanmayın.  Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın. Temel besiyeri hariç tüm besiyerlerinin raf ömrü, açılma tarihinden itibaren 6 ila 8 haftadır. Bileşim Bileşenler mg/L İnorganik TuzlarKalsiyum klorür x 2H2O132,00 Magnezyum sülfat97,67 Potasyum klorür400 Sodyum klorür6.460 Disodyum hidrojen fosfat (susuz)504,00 Diğer BileşenlerD(+)-Glikoz (susuz)3.000 Glutatyon (indirgenmiş)0 Et Peptonu600 Fenol kırmızısı sodyum tuzu11 Amino AsitlerL-Alanin13 L-Arginin x HCl42,1 L-Asparagin x H2O45,03 L-Aspartik asit19,97 L-Sistein x HCl x H2O31,75 L-Glutamin (kararlı)21 L-Glutamik asit22 Glisin7,51 L-Histidin x HCl x H2O20,96 L-Hidroksiprolin19,67 L-İzolösin39,3 L-Lösin39,36 L-Lizin x HCl36,54 L-Metiyonin14,92 L-Fenilalanin16,52 L-Prolin17,27 L-Serin26,28 L-Treonin17,87 L-Triptofan3,06 L-Tirozin disodyum tuzu26,10 L-Valin17,57 Vitaminlerp-Aminobenzoik asit1 Askorbik asit0,56 D(+)-Biotin0 D-Kalsiyum pantotenat0,2 Kolin klorür5 Folik asit10 Miyo-inositol36 Nikotinamid0,5 Nikotinik asit0 Piridoksal HCl0,5 Piridoksin HCl0,5 Riboflavin0 Tiamin HCl0 B12 vitamini2

€30,00*
IMDM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Sodyum piruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) hücre kültürü için kompleks ve zenginleştirilmiş bir büyüme ortamıdır. IMDM, selenyum içeren DMEM'in bir modifikasyonudur ve DMEM'e kıyasla ek amino asitler, vitaminler ve inorganik tuzlara sahiptir. Demir içermez ve Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye gerektirir. IMDM bir sodyum bikarbonat tampon sistemi kullanır ve fizyolojik pH'ı korumak için %5-10 CO2 ortamı gerektirir.
IMDM, Jurkat, COS-7 ve makrofaj hücreleri dahil olmak üzere hızla çoğalan, yüksek yoğunluklu hücre kültürleri için çok uygundur. Bir dizi hücre kültürü uygulaması için mevcut olan çeşitli IMDM modifikasyonları, ortam seçici aracı kullanılarak bulunabilir. Sıvı besiyerleri tüm hücre kültürü uygulamaları için gerekli besinleri sağlar. Yüksek kaliteli hücre kültürü ortamlarımızın her biri, kültür ortamının tutarlı performansı ve stabilitesi için gerekli olan ilk yayınlanan formüle veya modifikasyonlara göre üretilmektedir.
IMDM ve DMEM
IMDM ferrik nitrat yerine potasyum nitrat, HEPES ve sodyum piruvat içerir. IMDM'deki ek bileşenler onu özel hücre tipleri ve spesifik uygulamalar için DMEM'den daha uygun hale getirir.
IMDM vs RPMI
IMDM ve RPMI, PMA/iyonomisin stimülasyonu ile ilgili olabilecek farklı formülasyonlara sahiptir. Önemli bir fark Ca2+ konsantrasyonudur. RPMI 0,42 mM Ca2+ içerirken IMDM 1,49 mM içerir.
Kalite kontrol

20-25°C'de pH = 7,2 +/
- 0,02.
Her parti sterilite ve mikoplazma ve bakteri yokluğu açısından test edilmiştir.

Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Dondurma ve +37° C'ye kadar ısıtma ürünün kalitesini en aza indirir.
Besiyerini 37° C'den daha fazla ısıtmayın veya kontrol edilemeyen ısı kaynakları (örn. mikrodalga cihazlar) kullanmayın.
Besiyerinin sadece bir kısmı kullanılacaksa, bu miktarı şişeden çıkarın ve oda sıcaklığında ısıtın.
Temel besiyeri dışındaki tüm besiyerlerinin raf ömrü üretim tarihinden itibaren 8 haftadır.
Kompozisyon




Bileşenler
mg/L


İnorganik Tuzlar
Kalsiyum klorür x 2 H2O
219,00



Potasyum klorür
330,00



Potasyum nitrat
0.076



Magnezyum sülfat susuz
97,73



Sodyum klorür
4,505.00



Sodyum dihidrojen fosfat susuz
109,00



Sodyum selenit
0,02


Diğer Bileşenler
D(+)-Glikoz susuz
4,500.00



HEPES
5,958.00



Sodyum piruvat
110,00



Fenol kırmızısı
15,00


Amino Asitler
L-Alanin
25,00



L-Arginin x HCl
84,00



L-Asparagin x H2O
25,00



L-Aspartik asit
30,00



L-Sistin x 2HCl
91,24



L-Glutamin
584,00



L-Glutamik asit
75,00



Glisin
30,00



L-Histidin x HCl x H2O
42,00



L-İzolösin
104,80



L-Lösin
104,80



L-Lizin x HCl
146,20



L-Metiyonin
30,00



L-Fenilalanin
66,00



L-Proline
40,00



L-Serin
42,00



L-Threonine
95,20



L-Triptofan
16,00



L-Tirozin x 2Na
104,20



L-Valine
93,60


Vitaminler
D(+)-Biyotin
0.013



D-Kalsiyum pantotenat
4,00



Kolin klorür
4,00



Folik asit
4,00



miyo-İnositol
7,20

€25,00*
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI ortamı olarak da bilinen RPMI 1640 Ortamı, çeşitli memeli hücrelerini yetiştirmek için biyolojik araştırmalarda yaygın olarak kullanılan çok yönlü bir hücre kültürü ortamıdır. George E. Moore, Robert E. Gerner ve H. Addison Franklin tarafından 1966 yılında ünlü Roswell Park Kapsamlı Kanser Merkezi'nde geliştirilen bu besiyeri, adını Roswell Park Memorial Enstitüsü'ndeki (RPMI) kökeninden almıştır.
Başlangıçta hem süspansiyon hem de tek tabakalı kültürlerde insan lösemik hücrelerinin büyümesini desteklemek için tasarlanan RPMI 1640 Besiyeri, araştırmacılar ve ticari tedarikçiler tarafından yapılan modifikasyonlarla çok çeşitli memeli hücreleri için uygun hale gelmiştir. HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrositler ve karsinomlar gibi hücre hatlarıyla son derece uyumludur.
RPMI 1640 Medium, benzersiz bileşimi nedeniyle diğer hücre kültürü ortamlarından ayrılır. Önemli miktarda fosfat, amino asit ve vitamin içerir. Özellikle, Eagle's Minimal Essential Medium veya Dulbecco's Modified Eagle Medium'da bulunmayan biyotin, B12 vitamini ve PABA içerir. Ayrıca, RPMI 1640 Medium önemli ölçüde yüksek konsantrasyonlarda inositol ve kolin vitaminleri sergiler. Ancak protein, lipid veya büyüme faktörü içermez. Sonuç olarak, hücre büyümesi için en uygun koşulları sağlamak üzere genellikle %10 Fetal Sığır Serumu (FBS) ile takviye gereklidir.
RPMI 1640 Medium'un tamponlama sistemi sodyum bikarbonata dayanır ve fizyolojik olarak uygun bir pH'ı korumak için %5-10 CO2 ortamı gerektirir. İndirgeyici ajan glutatyonun dahil edilmesi, bu ortamı diğerlerinden daha da ayırır.
Kalite Kontrol

Steril filtreli


Depolama ve Raf Ömrü

2°C ila +8°C arasında, ışıktan koruyarak saklayın.
Açıldıktan sonra 4°C'de saklayın ve 6-8 hafta içinde kullanın.


Nakliye Koşulları

Ortam sıcaklığı


Bakım

2°C ila +8°C arasında karanlıkta buzdolabında saklayın. Ürün kalitesini düşürdüğü için dondurmaktan ve sık sık +37°C'ye kadar ısıtmaktan kaçının.
Besiyerini 37°C'nin üzerinde ısıtmayın veya mikrodalga cihazlar gibi kontrolsüz ısı kaynakları kullanmayın.
Ortamın sadece bir kısmı kullanılacaksa, gerekli miktarı çıkarın ve kullanmadan önce oda sıcaklığına kadar ısıtın.



Kompozisyon




Kategori
Bileşenler
Konsantrasyon (mg/L)


Amino Asitler
Glisin
10.00



L-Alanil-L-Glutamin
434.40



L-Arginin
200.00



L-AsparaginH2O
56.82



L-Aspartik Asit
20.00



L-Sistin 2HCl
65.20



L-Glutamik Asit
20.00



L-Histidin HClH2O
20.27



L-Hidroksi-L-Prolin
20.00



L-İzolösin
50.00



L-Lösin
50.00



L-Lizin HCl
40.00



L-Metiyonin
15.00



L-Fenilalanin
15.00



L-Proline
20.00



L-Serin
30.00



L-Threonine
20.00



L-Triptofan
5.00



L-Tirozin 2Na 2H2O
28.83



L-Valine
20.00


Vitaminler
p-Amino Benzoik Asit
1.00



D-Biotin
0.20



Kolin Klorür
3.00



D-Kalsiyum Pantotenat
0.25



Folik Asit
1.00



miyo-İnositol
35.00



Nikotinamid
1.00



Piridoksin HCl
1.00



Riboflavin
0.20



Tiamin HCl
1.00



B12 Vitamini
0.005


İnorganik Tuzlar
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Diğer Bileşenler
D-Glikoz
2000.00



İndirgenmiş L-Glutatyon
1.00



Fenol Kırmızı Sodyum Tuzu
5.30

€25,00*

Farklı bir ülkede olduğunuzu veya şu anda seçili olandan farklı bir tarayıcı dili kullandığınızı tespit ettik. Önerilen ayarları kabul etmek ister misiniz?

Kapat