U87MG Hücreleri - U87MG Kullanılarak Yapılan Glioblastoma Araştırmaları ve Beyin Kanseri Çalışmalarına Etkisi
İnsan primer glioblastoma hücre hattı olanU-87 MG, biyolojik araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler özellikle nörobilim ve immüno-onkoloji alanlarında kullanılmaktadır.
U-87 MG hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
Bu bölümde U87 hücre hattının kökeni ve genel özellikleri ele alınacaktır. U-87 MG hücrelerinin ne olduğunu öğreneceksiniz? U87 hücresi nereden gelmektedir? U-87 MG'nin tam şekli nedir? U87 hücreleri ne kadar büyüktür? U87 hücre hattının morfolojisi nedir?
- U87 hücre hattı bir glioblastoma, astrositoma hücre hattıdır. Uppsala Üniversitesi'nde 1966 yılında kurulmuştur. Hücreler, glioblastoma hastalığından muzdarip 44 yaşındaki Kafkasyalı bir erkekten elde edilmiştir. Bu hücre hattı resmi olarak Uppsala 87 Malign Glioma anlamına gelen U 87 MG olarak adlandırılır.
- U 87 MG hücreleri epitelyal hücre benzeri morfolojiyi temsil etmektedir.
- U 87 MG hücrelerinin çapı 12 ila 14 µm arasında değişmektedir.
- Bu insan glioblastoma hücre hattı hipodiploiddir ve yaklaşık %48 hücre popülasyonunda 44 modal kromozom sayısına sahiptir. Bununla birlikte, %5,9 hücre popülasyonunda daha yüksek ploidiler de mevcuttur.
U-87 MG hücreleri kültürleme bilgileri
U 87 MG hücreleri ile çalışmadan önce, bu glioblastoma hücrelerini kültüre etmek için aşağıdaki önemli noktaları öğrenmelisiniz. Özellikle şunları bilmelisiniz: U 87 MG hücrelerinin popülasyon ikiye katlanma süresi nedir? U87 hücrelerini kültüre etmek için hangi ortam kullanılır? U 87 MG hücre hattının ekim yoğunluğu nedir?
U-87 MG Hücrelerinin Kültüre Alınması için Önemli Noktalar
|
Nüfus İkiye Katlanma Süresi: |
U 87 MG hücreleri 18-38 saat arasında değişen bir popülasyon ikiye katlama süresine sahiptir. |
|
Yapışık veya Süspansiyon Halinde: |
U 87 MG yapışık bir hücre hattıdır. Hücreler uzun bir şekle sahiptir ve tek tabaka halinde büyürler. |
|
Tohumlama Yoğunluğu: |
Glioblastoma hücre hattı U 87 MG'nin 1 x104 hücre/cm2 hücre yoğunluğunda tohumlanması önerilir. Yapışık U87 hücreleri 1 x PBS kullanılarak yıkanır ve Accutase solüsyonu ile inkübe edilir. Daha sonra, ayrışmış hücreler santrifüjlenir ve geri kazanılır. Hücreler dikkatlice yeniden süspanse edilir ve büyüme ortamı içeren yeni flasklara eklenir. |
|
Büyüme Ortamı: |
U 87 MG hücre hattı, 1,0 g/L L-glukoz, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, %1 NEAA, 1 mM sodyum piruvat ve %10 FBS solüsyonu ile zenginleştirilmiş EMEM (Eagle's minimal essential medium) içinde kültüre edilir. Ortam her 2 ila 3 günde bir yenilenmelidir. |
|
Büyüme Koşulları: |
U-87 MG hücreleri optimum büyüme için %5 CO2 beslemeli ve 37°C sıcaklıkta nemlendirilmiş bir inkübatör gerektirir. |
|
Depolama: |
U87 hücreleri, glioblastoma hücrelerinin maksimum canlılığını korumak için ya sıvı nitrojenin buhar fazında ya da -150°C sıcaklığın altında tutulur. |
|
Dondurma İşlemi ve Ortam: |
CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı U 87 MG hücrelerinin dondurulması için uygundur. Hücrelerin herhangi bir şok yaşamasını önlediği ve hücre canlılığını koruduğu için yavaş bir dondurma işlemi önerilir. |
|
Çözdürme İşlemi: |
Dondurulmuş U-87 MG hücre hattı şişeleri 37°C su banyosunda çözdürülür. Hücrelere büyüme ortamı eklenir, yeniden süspanse edilir ve yeni flasklarda kültüre edilmek üzere dağıtılır. Bunun aksine, U87 hücreleri santrifüjlenerek dondurucu ortamdan uzaklaştırılabilir ve ardından kültüre edilebilir. |
|
Biyogüvenlik Seviyesi: |
U 87 MG hücre kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 gereklidir. |
U-87 MG hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
Bir hücre hattı düşündüğümüzde aklımıza gelen ilk şey şudur: U-87 MG hücrelerini kullanmanın avantajları nelerdir? U87 hücrelerinin dezavantajları nelerdir?
Avantajlar
U 87 MG hücre hatları araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattıyla ilişkili birkaç avantaj şunlardır:
Avantajları
- Büyütmesi kolay: U 87 MG hücrelerinin kültürde bakımı kolaydır. Telaşlı veya karmaşık hücre kültürü gereksinimleri gerektirmezler
- Homojenlik: U-87 MG homojen bir hücre hattıdır. Bir popülasyondaki çoğu hücre aynı genetik yapıya sahiptir ve bu nedenle benzer özellikleri paylaşır. Bu hücreler hücre süreçlerini incelemek, ilaç taraması yapmak ve test etmek için kullanılır
- İyi karakterize edilmiştir: Bu glioblastoma hücre hattı, büyüme özellikleri, morfolojisi ve gen ekspresyonu ile iyi karakterize edilmiştir ve bu da onu değerli bir araştırma aracı haline getirmektedir
Dezavantajları
- Sınırlı uygulanabilirlik: U 87 MG bir glioblastoma hücre hattıdır, bu nedenle uygulamaları öncelikle glioblastomaları ve altta yatan moleküler mekanizmaları incelemekle sınırlıdır. Diğer kanser türlerinin araştırılması için uygun olmayabilir.
U-87 MG hücrelerini içeren araştırma uygulamaları
U87MG glioblastoma hücre hattı kanser çalışmalarında, özellikle de glioblastoma araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. U 87 MG hücrelerinin araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:
- Kanser biyolojisi araştırmaları: U87 hücre hattı, kanser büyümesini ve gelişimini, altta yatan moleküler mekanizmaları, sinyal yolaklarını ve tümör mikroçevresini incelemek için kullanılır. 2020'de yayınlanan bir çalışmada, BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) genini terapötik bir hedef olarak araştırmak için bir glioblastoma in vitro modeli olan U-87 MG hücre hattı kullanılmıştır. Bulgular, BMAL1 geninin siklin B1, metalloproteinaz-9 ve fosfo-AKT gen ekspresyonunu baskılayarak glioblastoma hücre proliferasyonunu, migrasyonunu ve invazyonunu inhibe ettiğini göstermiştir [1]. 2019'da yapılan bir başka araştırmada U87 hücre hattı kullanılmış ve Lipopolisakkarit ile indüklenen tümör nekroz faktörü-alfa faktörü (LITAF) transkripsiyon faktörü ekspresyonunun aşağı regüle edilmesinin FOXO-1 yolağı yukarı regülasyonu yoluyla glioma hücrelerinin radyosensitivitesini artırabileceği araştırılmıştır. LITAF aynı zamanda p53-indüklenmiş gen 7 (PIG7) olarak da bilinir [2].
- İlaç keşfi ve geliştirilmesi: U-87 MG hücreleri, araştırmacıların yeni potansiyel antikanser ilaçları tanımlamasına ve bunların etkinlik ve toksisitesini değerlendirmesine olanak tanıyan ilaç tarama ve test amaçları için kullanılabilir. Araştırmada, Inula helenium (L.) ekstraktının antioksidan ve antikanser aktivitelerinin antikanser ve antioksidan potansiyelini değerlendirmek için U 87 MG glioblastoma hücre hattı kullanılmıştır [3]. Benzer şekilde, başka bir yayında bitki özlerinin sitotoksik ve apoptotik etkisini test etmek için U87 hücre hattının kullanıldığından bahsedilmiştir [4]. Ayrıca, 2018 yılında yayınlanan bir araştırma, Nuphar bitkilerinden ekstrakte edilen seskiterpen alkaloidlerin hassas ve ilaca dirençli U 87 MG hücre hatları üzerindeki sitotoksik etkisini incelemiştir [5].
U87 MG Glioma Hücre Hattınızı Bugün Sipariş Edin
U-87 MG hücre hattı: Araştırma Yayınları
İşte U 87 MG hücre hattını içeren bazı önemli araştırma yayınları.
Neuroreport 2018'de yayınlanan bu makale, hipoksinin PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α sinyal yolunu düzenleyerek insan glioblastoma hücrelerinin migrasyonunu ve invazyonunu artırabileceğini öne sürdü.
Bu çalışma 2020 yılında Frontiers in Pharmacology dergisinde yayımlandı. Araştırma bulguları, bir flavonoid olan Eriodictyol'ün U87 hücre hattı üzerinde antikanser etkiler gösterdiğini ve hücre proliferasyonunu ve metastazı baskıladığını belirtmektedir. Bileşik, PI3K/Akt/NF-κB yolağını modüle ederek antitümör özelliklerine aracılık eder.
Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) dergisinde yer alan bu araştırma, Xihuang hapı adı verilen bir Çin bitkisel formülünün ROS ile aktive olan Akt/mTOR/FOXO1 kaskadını hedef alarak U87 hücrelerinde apoptozu indükleyebildiğini göstermektedir.
LITAF, FoxO1 yolağı aracılığıyla insan glioma hücrelerinin radyosensitivitesini artırır
Bu araştırma makalesi 2019 yılında Cellular and Molecular Neurobiology dergisinde yayımlandı. Çalışma, bir transkripsiyon faktörü olan LITAF'ın FOXO-1 sinyal yolunu düzenleyerek glioma hücrelerinin radyosensitivitesini azalttığını ve artırdığını ileri sürmüştür.
Bu makale Biointerface Research in Applied Chemistry (2019) dergisinde yayımlanmıştır. Araştırmacılar, curcumin yüklü PLGA nanopartiküllerinin sitotoksik etkisini araştırmak için U 87 MG hücrelerini kullandılar.
U-87 MG hücreleri için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
U87MG glioblastoma hücre hattı birçok kanser araştırma laboratuvarında kullanılmaktadır. Bu hücre hattını içeren birkaç kaynak şunlardır:
- U87 hücre hattının transfeksiyonu: Bu belge size U 87 MG hücreleri için bir transfeksiyon protokolünü açıklayacaktır.
- U 87 MG hücre hattı transfeksiyonu: Bu video, U87 hücrelerinin transfeksiyon protokolünü adım adım açıklayan bir öğreticidir.
U87 hücrelerinin hücre kültürü protokolü için kaynak aşağıda listelenmiştir:
- U87 MG hücreleri: Bu bağlantı U 87 MG hücre hattı hakkında temel bilgiler içermektedir. Kısa hücre bölme, dondurma ve hücre çözme protokollerini içerir.
U87 MG Glioma Araştırmalarına İlişkin Bilgiler: Sıkça Sorulan Sorular
Referanslar
- Gwon, D.H., ve diğerleri, BMAL1, Cyclin B1, Phospho-AKT ve Metalloproteinase-9'u Aşağı Düzenleyerek U87MG Hücrelerinin Proliferasyonunu, Migrasyonunu ve İstilasını Bastırır. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., ve diğerleri, LITAF, FoxO1 Yolağı Üzerinden İnsan Glioma Hücrelerinin Radyosensitivitesini Artırır. Hücre Mol Nörobiyol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., insan U-87 MG glioblastoma hücre hattında Inula helenium (L.) ekstraktının antioksidan ve antikanser aktiviteleri. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, ve A. Ghasempour, Bitki özleri ile meme kanseri, cilt kanseri ve glioblastoma hücrelerinde sitotoksisite ve apoptoz indüksiyonu. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Nuphar bitkilerinden elde edilen seskiterpen alkaloidlerin hassas ve ilaca dirençli hücre hatlarına karşı sitotoksisitesi. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.