BEAS-2B Hücreleri - Solunum Hastalıkları Araştırmalarında BEAS-2B Hücreleri: Kapsamlı Bir Kılavuz
BEAS-2B, immortalize edilmiş ve tümörijenik olmayan bir insan akciğer epitel hücre hattıdır. Akciğer hücrelerinin çeşitli karsinojenlere ve toksik maddelere tepkisini incelemek için yaygın olarak kullanılan bir in vitro modeldir. Ayrıca, COVID-19 ve akciğer karsinomları gibi farklı solunum yolu enfeksiyonlarını ve hastalıklarını incelemek için değerli bir araştırma aracıdır.
Bu makalede, BEAS-2B akciğer hücre hattının kökeni, hücre kültürü bilgileri, avantajları, dezavantajları ve araştırmadaki uygulamaları dahil olmak üzere neredeyse tüm yönlerini tartışacağız. Özellikle, biz üzerinden geçeceğiz:
- BEAS-2B hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri
- BEAS-2B hücre hattı: Kültürleme bilgileri
- BEAS-2B hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
- BEAS-2B hücre hattının araştırma alanındaki uygulamaları
- BEAS-2B hücreleri: Araştırma yayınları
- Hücre kültürü protokolleri
1. BEAS-2B hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri
Bir hücre hattında aradığınız ilk şey kökeni ve genel özellikleridir. Burada, BEAS-2B insan bronş epitel hücrelerinin göze çarpan özelliklerini ve kökenini öğreneceksiniz. Çalışacaksınız: BEAS-2B akciğer hücre hattı nedir? Beas 2B ne tür hücrelerdir? BEAS-2B hücrelerinin kökeni nedir?
- Bronş epiteli hücre hattı olan BEAS-2B, 1988 yılında Curtis C. Harris'in grubu tarafından kanserli olmayan bir insan akciğer dokusundan geliştirilmiştir [1].
- BEAS-2B hücreleri epitel benzeri bir morfolojiye sahiptir.
HBEpC ve BEAS-2B
HBEpC insan bronş epitel primer hücreleridir. BEAS-2B'ye benzer şekilde, normal insan bronş epitel hücreleridir. Ancak, ölümsüzleştirilmiş BEAS-2B'ye kıyasla sınırlı bir yaşam süresine sahiptirler. Her iki hücre hattı da pulmoner biyoloji, toksikoloji ve hastalık modellemesini incelemek için kullanılabilir.
2.bEAS-2B hücre hattı: Kültürleme bilgileri
Bir hücre hattından bilgi kültürlemek, onunla çalışmanızı kolaylaştırabilir. Bu makale bölümünde, BEAS-2B akciğer hücre hattını kültüre etmek için tüm temel bilgileri öğreneceksiniz. Özellikle, şunları öğreneceğiz: BEAS-2B iki katına çıkma süresi nedir? BEAS-2B ortamı nedir? BEAS-2B hücre hattı yapışık mıdır? BEAS-2B hücrelerini nasıl kültüre alırsınız?
BEAS-2B Hücrelerini Kültürlemek için Önemli Noktalar
|
İki Katına Çıkma Süresi: |
BEAS-2B popülasyonunun iki katına çıkma süresi yaklaşık 26 saattir. |
|
Yapışık veya Süspansiyon Halinde: |
BEAS-2B epitel benzeri yapışık bir hücre hattıdır. |
|
Hücre yoğunluğu: |
BEAS-2B hücre hattı için önerilen hücre yoğunluğu 1 ila 2 ×104 hücre/cm2'dir. Yapışık BEAS-2B hücreleri fosfat tampon salin ile durulanır ve birkaç dakika boyunca ortam sıcaklığında Accutase ile inkübe edilir. Hücreler ayrıştıktan sonra taze ortam eklenir ve hücreler santrifüj yoluyla toplanır. Toplanan hücreler dikkatlice yeniden süspanse edilir ve büyüme için yeni şişeye dökülür. |
|
Büyüme Ortamı: |
BEAS-2B akciğer hücre hattının kültürü için %10 fetal sığır serumu içeren BEGM (Bronşiyal Epitel Hücre Büyüme Ortamı) ortamı kullanılır. Ortam her 2 ila 3 günde bir değiştirilmelidir. |
|
Büyüme Koşulları: |
BEAS-2B kültürü 37°C'de nemlendirilmiş bir inkübatörde sürekli %5 CO2 kaynağı ile muhafaza edilir. |
|
Depolama: |
Dondurulmuş BEAS-2B hücre şişeleri sıvı nitrojenin buhar fazında veya -150°C sıcaklığın altındaki bir elektrikli dondurucuda saklanabilir. |
|
Dondurma İşlemi ve Ortamı: |
BEAS-2B akciğer hücre hattını dondurmak için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı kullanılır. Hücreler, hücre canlılığını korumak için dakikada sadece 1°C sıcaklık düşüşüne izin verilerek dondurulur. Bu tür yönteme yavaş dondurma denir. |
|
Çözdürme İşlemi: |
Dondurulmuş veya kriyoprezerve edilmiş BEAS-2B kültürleri 40 ila 60 saniye boyunca antimikrobiyal bir ajan içeren 37°C su banyosunda çözdürülür. Daha sonra, hücreler besiyeri ile eklenir ve doğrudan yeni şişelerde kültürlenebilir veya donmuş besiyeri bileşenlerini çıkarmak için santrifüjlenebilir. Daha sonra toplanan hücreler yeniden süspanse edilir ve kültürlenir. İlk durumda, dondurucu ortam 24 saat sonra çıkarılır. |
|
Biyogüvenlik Seviyesi: |
BEAS-2B kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarlar gereklidir. |
3.bEAS-2B hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
Diğer hücre hatları gibi BEAS-2B hücrelerinin de bazı artıları ve eksileri vardır. Bunlardan bazıları aşağıda ele alınmıştır.
Avantajlar
BEAS-2B hücre hattının avantajları şunlardır:
|
İmmortalize hücre hattı |
BEAS-2B insan bronş epitel hücre hattı immortalize edilmiştir. Bu nedenle yaşlanmaya girmeden büyümeye devam eder. Bu BEAS-2B hücre özelliği, daha kısa ömürlü birincil insan akciğer epitel hücrelerinin tekrar tekrar çıkarılması ihtiyacını ortadan kaldırır. |
|
Kolay kültür |
BEAS-2B kültürlerinin bakımı kolaylıkla yapılabilir. Hücreler standart kültür koşullarında zahmetsizce büyür ve çoğalır. Telaşlı veya karmaşık hücre kültürü gereksinimleri yoktur. |
|
İnsan kökenli |
BEAS-2B hücre hattı insan kökenli ve insanla ilişkilidir. Bu nedenle, insan hava yolu epitel hücre tepkilerini, davranışlarını ve süreçlerini incelemek için ideal bir in vitro modeldir. |
Dezavantajları
BEAS-2B akciğer hücre hattı ile ilişkili dezavantajlar şunlardır:
|
Dönüştürülmüş insan akciğer epitel hücreleri |
BEAS-2B hücreleri, orijinal insan akciğer dokusundan türetilmiş bronş epitel hücrelerine kıyasla davranışlarını ve tepkilerini değiştirebilecek Ad12-SV40 2B virüsü ile dönüştürülmüştür. |
4.bEAS-2B hücre hattının araştırma alanındaki uygulamaları
BEAS-2B hücre hattı biyomedikal araştırmalarda çeşitli uygulamalar sunmaktadır. BEAS-2B hücrelerinin bazı yaygın uygulamaları şunlardır:
- Toksikoloji: BEAS-2B hücreleri sıklıkla çeşitli toksinlerin, çevresel kirleticilerin ve kimyasalların genotoksisitesini ve sitotoksisitesini araştırmak için kullanılır. Araştırmacılar bu maddelerin akciğer sağlığı üzerindeki zararlı etkilerini değerlendirmek için bu bronşiyal epitel hücre hattını kullanmaktadır. Ayrıca, altta yatan moleküler mekanizmaları da inceliyorlar. Örneğin, 2021 yılında yapılan bir çalışmada BEAS-2B hücre hattında kadmiyum metalinin toksisitesi değerlendirilmiştir. Araştırma bulguları, kadmiyumun BEAS-2B akciğer hücre hattında MAPK sinyal yolunun modülasyonu yoluyla hücre ölümüne ve mitokondriyal hasara neden olduğunu ortaya koymuştur [2]. Başka bir çalışmada, oksidatif stres altında çinko oksit nanopartiküllerinin toksisitesini değerlendirmek için BEAS-2B hücre hattı kullanılmıştır [3].
- Solunum hastalıkları modellemesi: BEAS-2B hücre hattı, kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH), astım, akciğer kanseri ve SARS-CoV-2 gibi viral enfeksiyonlar gibi solunum yolu hastalıklarını incelemek için harika bir araştırma aracı ve in vitro modeldir. Araştırmacılar, BEAS-2B hücre hattında hastalıkla ilgili koşulları indükleme ve altta yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları inceleme eğilimindedir. Bu, potansiyel ilaç hedeflerinin belirlenmesine ve kişiselleştirilmiş tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olur. 2022'de yapılan araştırmada BEAS-2B hücre hattı kullanılmış ve SARS-CoV-2 enfeksiyonunda östrojen ve reseptörlerinin rolü incelenmiştir. Bulgular, GPER1 östrojen reseptörünün daha yüksek ekspresyonunun BEAS-2B SARS-CoV-2 viral yükünü azalttığını ortaya koymuştur. Bu nedenle, SARS-CoV-2 viral enfeksiyonu veya replikasyonunda rol oynayabilir [4].
5.bEAS-2B hücreleri: Araştırma yayınları
Aşağıda BEAS-2B hücrelerini içeren bazı ilginç ve en çok atıf alan araştırma çalışmaları yer almaktadır.
Normal insan akciğer hücrelerinde grafenin toksisitesi (BEAS-2B)
Bu çalışma 2011 yılında Journal of Biomedical Nanotechnology dergisinde yayınlanmıştır. Araştırma, grafit oksidin normal bronş epitel hücre hattında (BEAS-2B) apoptoz ve sitotoksisiteyi indüklediğini öne sürmüştür.
Bu araştırma makalesi Journal of Microbiology and Biotechnology (2014) dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışmada, bir flavonoid olan naringenin'in BEAS-2B hücre hattındaki terapötik potansiyeli araştırılmıştır. Bulgular naringenin'in BEAS-2B akciğer hücrelerini paraquat kaynaklı toksisiteye veya oksidatif hasara karşı koruduğunu göstermiştir.
Bu çalışma Inhalation Toxicology (2011) dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışmada araştırmacılar, BEAS-2B hücre hattında amorf silika kaplamalı manyetik nanopartiküllerin toksisite etkisini in vitro olarak değerlendirmişlerdir.
Biomedicine & Pharmacotherapy'deki (2022) bu makale, ursodeoksikolik asidin hava yolu epitel hücrelerinin anormal göçünü engelleyebileceğini ve SARS-CoV-2 spike proteini ve ACE-2 etkileşiminin neden olduğu hasarı önleyebileceğini öne sürmüştür. Böylece, epitelyal bazal tabakanın yenilenmesine yardımcı olabilir.
Radonun insan bronş epitel BEAS-2B hücrelerinde miR-34a ile indüklenen apoptoz üzerindeki etkileri
Bu çalışma 2019 yılında Journal of Toxicology and Environmental Health dergisinde yayımlanmıştır. Araştırma bulguları, radona kronik maruziyetin mikroRNA-34a'yı aktive ederek insan bronş epitel hücrelerinde (BEAS-2B) karsinogenezi teşvik edebileceğini belirtmektedir.
6.hücre kültürü protokolleri
BEAS-2B hücreleri için hücre kültürü protokolü burada belirtilmiştir.
- BEAS-2B alt kültürleme: Bu belge BEAS-2B ortamı ve alt kültürleme prosedürleri hakkında bilgi edinmenize yardımcı olacaktır.
- BEAS-2B hücre hattı: Bu web sitesi, BEAS-2B hücre hattı ile çalışmaya başlamak için ihtiyaç duyduğunuz, çoğalan ve kriyoprezerve kültürlerin işlenmesine yönelik ortam ve protokoller de dahil olmak üzere tüm temel bilgileri içerir.
Referanslar
- Han, X., ve diğerleri, İnsan akciğer epitelyal BEAS-2B hücreleri mezenkimal kök hücrelerin özelliklerini sergiler. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmiyum, MAPK sinyal yolağı aracılığıyla BEAS-2B hücrelerinde apoptoz ve mitokondri hasarına neden oldu. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Çinko oksit (ZnO) nanopartiküllerinin insan bronş epitel hücreleri (BEAS-2B) üzerindeki toksisitesi oksidatif stres ile vurgulanmaktadır. Gıda ve Kimyasal Toksikoloji, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, AJ, ve diğerleri, Östrojen reseptörü GPER1'in aşırı ekspresyonu ve G1 tedavisi BEAS-2B bronşiyal hücrelerinde SARS-CoV-2 enfeksiyonunu azaltır. Moleküler ve Hücresel Endokrinoloji, 2022. 558: p. 111775.