BEAS-2B Hücreleri - Solunum Hastalıkları Araştırmalarında BEAS-2B Hücreleri: Kapsamlı Bir Kılavuz
BEAS-2B, ölümsüzleştirilmiş ve tümör oluşturmayan bir insan akciğer epitel hücre hattıdır. Akciğer hücrelerinin çeşitli kanserojen ve toksik maddelere verdiği tepkiyi incelemek için yaygın olarak kullanılan bir in vitro modeldir. Ayrıca, COVID-19 ve akciğer kanserleri gibi farklı solunum yolu enfeksiyonları ve hastalıklarını incelemek için değerli bir araştırma aracıdır.
- Büyüme Ortamı
- BEAS-2B akciğer hücre hattının kültürlenmesi için %10 fetal sığır serumu içeren BEGM (Bronşiyal Epitel Hücre Büyüme Ortamı) ortamı kullanılır. Ortam 2 ila 3 günde bir değiştirilmelidir.
- İkiye Katlanma Süresi
- BEAS-2B popülasyonunun ikiye katlanma süresi yaklaşık 26 saattir.
- Büyüme Tipi
- BEAS-2B, epitel benzeri yapışkan bir hücre hattıdır.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Temin Edilebilir
- Cytion — BEAS-2B Siparişi
Bu makalede, BEAS-2B akciğer hücre hattının kökeni, hücre kültürü bilgileri, avantajları, dezavantajları ve araştırmadaki uygulamaları dahil olmak üzere neredeyse tüm yönlerini ele alacağız. Özellikle şu konuları ele alacağız:
- BEAS-2B hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri
- BEAS-2B hücre hattı: Kültür bilgileri
- BEAS-2B hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
- Araştırmada BEAS-2B hücre hattının uygulamaları
- BEAS-2B hücreleri: Araştırma yayınları
- Hücre kültürü protokolleri
1. BEAS-2B hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri
Bir hücre hattında ilk olarak bakmanız gereken şey, kökeni ve genel özellikleridir. Burada, BEAS-2B insan bronşiyal epitel hücrelerinin öne çıkan özelliklerini ve kökenini öğreneceksiniz. Şunları inceleyeceksiniz: BEAS-2B akciğer hücre hattı nedir? BEAS-2B ne tür bir hücredir? BEAS-2B hücrelerinin kökeni nedir?
- Bronşiyal epitel hücre hattı olan BEAS-2B, 1988 yılında Curtis C. Harris'in grubu tarafından kanserli olmayan bir insan akciğer dokusundan geliştirilmiştir [1].
- BEAS-2B hücreleri, epitel benzeri bir morfolojiye sahiptir.
HBEpC ve BEAS-2B
HBEpC, insan bronşiyal epitel primer hücreleridir. BEAS-2B'ye benzer şekilde, bunlar normal insan bronşiyal epitel hücreleridir. Ancak, ölümsüzleştirilmiş BEAS-2B'ye kıyasla sınırlı bir ömre sahiptirler. Her iki hücre hattı da pulmoner biyoloji, toksikoloji ve hastalık modellemesi çalışmalarında kullanılabilir.
BEAS-2B hücre hattı: Kültür bilgileri
Bir hücre hattına ilişkin kültürleme bilgileri, bu hücre hattıyla çalışmanızı kolaylaştırabilir. Bu makale bölümünde, BEAS-2B akciğer hücre hattını kültürlemek için gerekli tüm temel bilgileri öğreneceksiniz. Özellikle şu konulara değineceğiz: BEAS-2B'nin ikiye katlanma süresi nedir? BEAS-2B besiyeri nedir? BEAS-2B hücre hattı yapışkan mıdır? BEAS-2B hücreleri nasıl kültürlenir?
BEAS-2B Hücrelerini Kültüre Etmenin Önemli Noktaları
Çoğalma Süresi:
BEAS-2B popülasyonunun ikiye katlanma süresi yaklaşık 26 saattir.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
BEAS-2B, epitel benzeri yapışkan bir hücre hattıdır.
Hücre Yoğunluğu:
BEAS-2B hücre hattı için önerilen hücre yoğunluğu 1 ila 2 × 104 hücre/cm2'dir. Yapışkan BEAS-2B hücreleri fosfat tamponlu salin ile durulanır ve oda sıcaklığında birkaç dakika Accutase ile inkübe edilir. Hücreler ayrıştıktan sonra taze besiyeri eklenir ve hücreler santrifüj yoluyla toplanır. Toplanan hücreler dikkatlice yeniden süspansiyona alınır ve büyüme için yeni şişeye dökülür.
Büyüme Ortamı:
BEAS-2B akciğer hücre hattının kültürlenmesi için %10 fetal sığır serumu içeren BEGM (Bronşiyal Epitel Hücre Büyüme Ortamı) ortamı kullanılır. Ortam 2 ila 3 günde bir değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:
BEAS-2B kültürü, %5 CO2'nin sürekli olarak sağlandığı nemlendirilmiş bir inkübatörde 37°C'de tutulur.
Saklama:
Dondurulmuş BEAS-2B hücre şişeleri, sıvı azotun buhar fazında veya -150°C'nin altındaki bir elektrikli dondurucuda saklanabilir.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
BEAS-2B akciğer hücre hattının dondurulması için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamları kullanılır. Hücrelerin canlılığını korumak için, hücreler dakikada sadece 1°C'lik bir sıcaklık düşüşüne izin verilerek dondurulur. Bu tür bir yönteme yavaş dondurma denir.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş veya kriyoprezervasyonlu BEAS-2B kültürleri, antimikrobiyal ajan içeren 37°C'lik bir su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca çözdürülür. Daha sonra hücrelere besiyeri eklenir ve yeni şişelerde doğrudan kültürlenebilir veya dondurma besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenebilir. Ardından toplanan hücreler yeniden süspansiyon haline getirilir ve kültürlenir. İlk durumda, dondurma besiyeri 24 saat sonra uzaklaştırılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:
BEAS-2B kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarlar gereklidir.
BEAS-2B hücrelerinin avantajları ve dezavantajları
Diğer hücre hatları gibi, BEAS-2B hücrelerinin de bazı artıları ve eksileri vardır. Bunlardan bazıları aşağıda ele alınmaktadır.
Avantajlar
BEAS-2B hücre hattının avantajları şunlardır:
Ölümsüzleştirilmiş hücre hattı
BEAS-2B insan bronşiyal epitel hücre hattı ölümsüzleştirilmiştir. Bu nedenle, yaşlanma aşamasına girmeden büyümeye devam eder. Bu BEAS-2B hücre özelliği, ömrü daha kısa olan birincil insan akciğer epitel hücrelerinin tekrar tekrar ekstraksiyonuna olan ihtiyacı ortadan kaldırır.
Kültürlenmesi kolay
BEAS-2B kültürleri kolayca korunabilir. Hücreler, standart kültür koşullarında zahmetsizce büyür ve çoğalır. Zahmetli veya karmaşık hücre kültürü gereksinimleri yoktur.
İnsan kökenli
BEAS-2B hücre hattı insan kökenlidir ve insanlarla ilgilidir. Bu nedenle, insan hava yolu epitel hücrelerinin tepkilerini, davranışlarını ve süreçlerini incelemek için ideal bir in vitro modeldir.
Dezavantajlar
BEAS-2B akciğer hücre hattıyla ilişkili dezavantajlar şunlardır:
Dönüştürülmüş insan akciğer epitel hücreleri
BEAS-2B hücreleri, Ad12-SV40 2B virüsü ile dönüştürülmüştür; bu da, orijinal insan akciğer dokusundan elde edilen bronşiyal epitel hücrelerine kıyasla davranışlarını ve tepkilerini değiştirebilir.
Araştırmada BEAS-2B hücre hattının uygulamaları
BEAS-2B hücre hattı, biyomedikal araştırmalarda çeşitli uygulamalar sunar. BEAS-2B hücrelerinin bazı yaygın uygulamaları şunlardır:
- Toksikoloji: BEAS-2B hücreleri, çeşitli toksinlerin, çevresel kirleticilerin ve kimyasalların genotoksisitesini ve sitotoksisitesini araştırmak için sıklıkla kullanılır. Araştırmacılar, bu maddelerin akciğer sağlığı üzerindeki zararlı etkilerini değerlendirmek için bu bronşiyal epitel hücre hattını kullanmaktadır. Ayrıca, altta yatan moleküler mekanizmaları da incelemektedirler. Örneğin, 2021 yılında yapılan bir çalışmada BEAS-2B hücre hattında kadmiyum metalinin toksisitesi değerlendirilmiştir. Araştırma bulguları, kadmiyumun MAPK sinyal yolunu modüle ederek BEAS-2B akciğer hücre hattında hücre ölümüne ve mitokondriyal hasara neden olduğunu ortaya koymuştur [2]. Başka bir çalışmada ise BEAS-2B hücre hattı, oksidatif stres altında çinko oksit nanopartiküllerinin toksisitesini değerlendirmek için kullanılmıştır [3].
- Solunum hastalıkları modellemesi: BEAS-2B hücre hattı, kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH), astım, akciğer kanseri ve SARS-CoV-2 gibi viral enfeksiyonlar gibi solunum hastalıklarını incelemek için harika bir araştırma aracı ve in vitro modeldir. Araştırmacılar, BEAS-2B hücre hattında hastalıkla ilişkili durumları indükleme ve altta yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları inceleme eğilimindedir. Bu, potansiyel ilaç hedeflerini belirlemeye ve kişiselleştirilmiş tedaviler geliştirmeye yardımcı olur. 2022 yılında yürütülen bir araştırmada BEAS-2B hücre hattı kullanılmış ve SARS-CoV-2 enfeksiyonunda östrojen ve reseptörlerinin rolü incelenmiştir. Bulgular, GPER1 östrojen reseptörünün daha yüksek ekspresyonunun BEAS-2B SARS-CoV-2 viral yükünü azalttığını ortaya koymuştur. Bu nedenle, SARS-CoV-2 viral enfeksiyonu veya replikasyonunda rol oynayabilir [4].
5. BEAS-2B hücreleri: Araştırma yayınları
Aşağıda, BEAS-2B hücrelerini konu alan ilginç ve en çok atıf alan bazı araştırma çalışmaları yer almaktadır.
Normal insan akciğer hücrelerinde (BEAS-2B) grafenin toksisitesi
Bu çalışma 2011 yılında Journal of Biomedical Nanotechnology dergisinde yayınlanmıştır. Araştırma, grafit oksidin normal bronşiyal epitel hücre dizisinde (BEAS-2B) apoptozu ve sitotoksisiteyi tetiklediğini öne sürmüştür.
Bu araştırma makalesi, Journal of Microbiology and Biotechnology dergisinde (2014) yayınlanmıştır. Bu çalışma, BEAS-2B hücre dizisinde bir flavonoid olan naringeninin terapötik potansiyelini araştırmıştır. Bulgular, naringeninin BEAS-2B akciğer hücrelerini paraquat kaynaklı toksisiteye veya oksidatif hasara karşı koruduğunu göstermiştir.
Bu çalışma, Inhalation Toxicology (2011) dergisinde yayınlanmıştır. Burada araştırmacılar, in vitro BEAS-2B hücre hattında amorf silika kaplamalı manyetik nanopartiküllerin toksisite etkisini değerlendirmiştir.
Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) dergisinde yayınlanan bu makale, ursodeoksikolik asidin hava yolu epitel hücrelerinin anormal göçünü engelleyebileceğini ve SARS-CoV-2 spike proteini ile ACE-2 etkileşiminin neden olduğu hasarı önleyebileceğini öne sürmüştür. Böylece, epitel bazal tabakasının onarılmasına yardımcı olabilir.
Radonun insan bronşiyal epitel BEAS-2B hücrelerinde miR-34a'nın neden olduğu apoptoza etkileri
Bu çalışma 2019 yılında Journal of Toxicology and Environmental Health dergisinde yayınlanmıştır. Araştırma bulguları, radona kronik maruz kalmanın mikroRNA-34a'yı aktive ederek insan bronşiyal epitel hücrelerinde (BEAS-2B) karsinojenezi teşvik edebileceğini belirtmektedir.
Hücre kültürü protokolleri
BEAS-2B hücreleri için hücre kültürü protokolü burada belirtilmiştir.
- BEAS-2B alt kültürü: Bu belge, BEAS-2B besiyeri ve alt kültür prosedürleri hakkında bilgi edinmenize yardımcı olacaktır.
- BEAS-2B hücre hattı: Bu web sitesi, BEAS-2B hücre hattıyla çalışmaya başlamak için ihtiyacınız olan tüm temel bilgileri içerir; buna, besiyerleri ve çoğalan ve kriyoprezervasyon kültürlerinin işlenmesi için protokoller de dahildir.
Referanslar
- Han, X., et al., İnsan akciğer epitel BEAS-2B hücreleri, mezenkimal kök hücrelerin özelliklerini sergiler. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmiyum, MAPK sinyal yolunu kullanarak BEAS-2B hücrelerinde apoptozu ve mitokondri hasarını tetiklemektedir. Chemosphere, 2021. 263: s. 128346.
- Heng, B.C., et al., İnsan bronşiyal epitel hücreleri (BEAS-2B) üzerinde çinko oksit (ZnO) nanopartiküllerinin toksisitesi, oksidatif stres tarafından daha da belirgin hale gelir. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): s. 1762-1766.
- Costa, A.J. ve ark., Östrojen reseptörü GPER1'in aşırı ekspresyonu ve G1 tedavisi, BEAS-2B bronşiyal hücrelerinde SARS-CoV-2 enfeksiyonunu azaltır. Moleküler ve Hücresel Endokrinoloji, 2022. 558: s. 111775.