SiHa Hücreleri - Rahim Ağzı Kanseri Araştırmalarına Işık Tutuyor

SiHa hücreleri biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan servikal kanser hücreleridir. Mükemmel transfeksiyon konakçılarıdır ve bu nedenle gen ekspresyonu çalışmaları için uygundurlar. İnsan kökenli olmaları ve serviks kanseri ile ilgili olmaları nedeniyle bu hücreler temel olarak kanser biyolojisi, viroloji ve ilaç geliştirme çalışmalarında kullanılmaktadır.

SiHa hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni

Bir hücre hattının kökenini ve genel özelliklerini anlamak, araştırmanızdaki kullanımını etkilediği için çok önemlidir. Bu makale bölümünde SiHa hücre hattının kökeni, ayırt edici özellikleri ve çok daha fazlası hakkında bilgi edineceksiniz: SiHa kanser hücre hattı nedir? SiHa hücreleri HPV nedir? SiHa hücre hattının kökeni nedir? SiHa'nın morfolojisi nedir?

  • Servikal karsinom hücre hattı SiHa, skuamöz hücreli kanseri olan Asyalı bir kadının (55 yaşında) primer uterus biyopsisinin parçalarından türetilmiştir [1].
  • SiHa hücre hattı hipertriploid bir karyotip sergilemektedir. Hücrelerin çoğu 69 ile 72 arasında ortalama kromozom sayısına sahiptir. Bununla birlikte, hücrelerin yaklaşık %24'ü 71 modal kromozom sayısına sahiptir.
  • SiHa hücreleri insan papilloma virüsü 16 pozitiftir. Hücre başına HPV genomunun yaklaşık 1 ila 2 kopyasının entegrasyonunu sergilerler [2].
  • Bu servikal kanser hücreleri epitelyal bir morfoloji sergiler.

HeLa servikal kanser hücrelerinin mikroskop altında bölünmesi.

SiHa hücre hattı: Kültürleme bilgileri

Bir hücre hattı kültürünü sürdürmek, onu kültürlemek için tüm kilit noktaları bilmediğiniz sürece kolay değildir. Bilmeniz gerekenler: SiHa'nın ikiye katlanma süresi nedir? SiHa hücre ortamı nedir? SiHa hücre hattını nasıl kültürlersiniz?

SiHa Hücrelerinin Kültüre Alınması için Önemli Noktalar

İki Katına Çıkma Süresi:

SiHa hücreleri için ikiye katlanma süresi yaklaşık 17 saattir.

Yapışık veya Süspansiyon Halinde:

SiHa yapışık bir hücre hattıdır.

Alt Kültivasyon Oranı:

SiHa hücreleri için alt kültürleme oranı 1:2 ila 1:4'tür. Pasajlama için ve yapışık hücreler 1x PBS ile durulanır. Akkutaz solüsyonu eklenir ve hücreler ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Ardından, kültür ortamı eklenir ve hücreler santrifüjlenir. Hücre peleti yeniden süspanse edilir ve hücreler kültürleme için yeni şişeye dökülür.

Büyüme Ortamı:

SiHa hücrelerinin ideal büyümesi için %10 FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 ve Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) içeren Eagle's minimum essential medium (EMEM) kullanılır. Ortam haftada 2 ila 3 kez değiştirilir.

Büyüme Koşulları:

SiHa hücreleri %5 CO2 beslemeli 37°C nemlendirilmiş bir inkübatörde muhafaza edilir.

Depolama:

Dondurulmuş SiHa serviks kanseri hücre hattı flakonları -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda elektrikli dondurucuda veya sıvı nitrojenin buhar fazında daha uzun süre saklanır.

Dondurma İşlemi ve Ortamı:

SiHa hücre dondurma işlemi için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı kullanılır. Hücreler, hücrelerin canlılığını korumak için dakikada sadece 1 °C'lik bir düşüşe izin veren yavaş dondurma yöntemi kullanılarak dondurulur.

Çözdürme İşlemi:

Dondurulmuş hücreler, küçük bir buz kümesi kalana kadar 37°C su banyosunda 40 ila 60 saniye tutulur. Daha sonra taze büyüme ortamı eklenir ve hücreler santrifüjlenerek donmuş ortam bileşenleri uzaklaştırılır. Hücre peleti yeniden süspanse edilir ve hücreler büyüme için bir kültür şişesine dağıtılır.

Biyogüvenlik Seviyesi:

SiHa hücre kültürlerinin işlenmesi ve bakımı için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar gereklidir.

10× ve 20× büyütmede SiHa hücrelerinden oluşan yapışık bir tabaka.

SiHa hücre hattının Avantajları ve Dezavantajları

Diğer insan karsinom hücre dizileri gibi SiHa da belirli avantaj ve dezavantajlarla ilişkili bazı farklı özelliklere sahiptir. Bu yazıda, önemli olan birkaç tanesini ele aldık.

SiHa Rahim Ağzı Kanseri Hücre Hattının Avantajları

  • Rahim Ağzı Kanseri Modeli
    • Servikal skuamöz hücreli karsinomdan elde edilmiştir.
    • Serviks kanserinin mekanizmalarını, büyümesini ve gelişimini incelemek için kullanılır.
    • DNA onarımı, hücre döngüsü düzenlemesi ve tümör baskılaması ile ilgili olan p53+ ve pRB+ genlerini ifade eder.
  • Tümörijenik Potansiyel
    • SiHa hücreleri tümörijeniktir ve çıplak farelerde az farklılaşmış derece III epidermoid tümörleri indükleyebilir.
    • İn vivo kanser araştırmaları ve anti-kanser tedavilerinin test edilmesi için kullanılır.

SiHa Hücrelerin Dezavantajları

  • Çoğalma Oranı
    • SiHa hücreleri hızla çoğalarak aşırı büyümeye yol açar.
    • Sık pasajlama gerektirir, bu da zaman içinde hücre davranışını etkileyebilecek genetik kararsızlık riskini artırır.

SiHa hücrelerinin araştırma uygulamaları

SiHa hücre hattı, servikal kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının belirtilen birkaç uygulaması burada tartışılmaktadır.

  • İnsan papilloma virüsü (HPV) ile ilgili çalışmalar: SiHa hücreleri HPV 16 pozitiftir, bu nedenle insan papilloma virüsü enfeksiyonunu, moleküler mekanizmalarını ve servikal kanserin gelişimi ve ilerlemesindeki rolünü incelemek için değerli varlıklardır. Araştırmacılar ayrıca viral replikasyon, entegrasyon ve konak hücre süreçleri üzerindeki etkisini araştırmak için bu hücreleri kullanmaktadır. 2020'de yapılan bir çalışmada, HPV E6/E7 onkoproteinlerinin CRISPR teknolojisi ile hedeflenerek servikal kanser gelişimindeki rolünü incelemek için SiHa hücre hattı kullanıldı. Bulgular, E6/E7 genlerinin nakavt edilmesinin SiHa hücre büyümesinin engellenmesine ve apoptoza neden olduğunu ortaya koymuştur. Bu nedenle, bu viral genler HPV ile ilişkili rahim ağzı kanserine karşı tedaviler geliştirmek için önemli ilaç hedefleri olarak hizmet edebilir [3].
  • Kanser biyolojisi: SiHa hücreleri, kanser gelişimi, ilerlemesi, metastazı ve istilası dahil olmak üzere serviks kanseri biyolojisini incelemek için paha biçilmez bir model olarak hizmet eder. Araştırmacılar, genetik mutasyonları ve rahim ağzı kanseri gelişimine ve büyümesine katkıda bulunan altta yatan moleküler yolları keşfetmek için bu hücreleri kullanmaktadır; örneğin, bir çalışmada SiHa hücreleri kullanılmış ve yukarı doğru düzenlenmiş SEC61G'nin (SEC61 translocon subunit gamma) MAPK kaskadının aktivasyonu yoluyla rahim ağzı kanseri hücre proliferasyonunu teşvik ettiği bulunmuştur [4].
  • İlaç taraması ve testi: SiHa, HPV ile ilişkili servikal kansere özgü potansiyel anti-kanser ilaçlarının etkinliğini değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan bir servikal kanser hattıdır. Araştırmacılar bu hücreleri kullanarak ilaçların antiproliferatif, apoptotik ve anti-metastatik potansiyelini araştırmaktadır. Vatica diospyroides Symington Type SS meyve özütlerinin SiHa servikal kanser hücre hattı üzerindeki sitotoksik potansiyelini araştıran 2019 yılında yapılan bir çalışma gibi [5].

Araştırmanız için SiHa hücreleri!

SiHa Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları

SiHa servikal skuamöz karsinom hücre hattını içeren bazı önemli ve sıkça atıfta bulunulan araştırma yayınları.

Aloe-emodinin servikal kanser hücreleri üzerindeki anti-tümör etkisi insan papilloma virüsü E6/E7 ve glukoz metabolizması ile ilişkilendirildi

OncoTargets and Therapy'deki (2019) bu yayın, doğal bir bileşik olan aloe-emodinin SiHa serviks kanseri hücrelerinde HPV E6/E7 ve glikoz metabolizması ile ilişkili apoptotik etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.

Excoecaria agallocha (L.) yaprak ekstraktının insan serviks kanseri (SiHa) hücre hattı üzerindeki anti-kanser potansiyelinin değerlendirilmesi ve altta yatan etki mekanizmasının değerlendirilmesi

Bu makale Future Journal of Pharmaceutical Sciences dergisinde 2022 yılında yayımlanmıştır. Bu çalışmada, Excoecaria agallocha (L.) bitki yaprağı ekstraktının SiHa serviks kanseri hücre hattındaki anti-tümör aktiviteleri araştırılmıştır.

SiHa serviks kanseri hücre hattında sülfatlanmış ZnO nanopartiküllerine bağlı 1, 10-Fenantrolinin antiproliferatif etkisi

Journal of Sol-Gel Science and Technology'de (2022) yayınlanan bu çalışma, 1, 10-Fenantrolin molekülünün çinko sülfat nanopartikülleri ile birleştikten sonra SiHa hücrelerinde önemli antiproliferatif etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.

Astragaloside IV, TGF-β1 aracılı PI3K ve MAPK yolakları yoluyla SiHa servikal kanser hücrelerinin invazyonunu ve metastazını inhibe eder

Bu araştırma 2019 yılında Oncology Reports'ta yayımlanmıştır. Çalışma, doğal bir ürün olan Astragaloside IV'ün TGF-β1 aracılı PI3K ve MAPK sinyal yolaklarını modüle ederek SiHa hücrelerinin göçünü ve istilasını baskıladığını ortaya koymuştur.

IFI16, STING-TBK1-NF-kB yolağı aracılığıyla immünomikroçevrede PD-L1'i yukarı düzenleyerek servikal kanser progresyonunu teşvik eder

Biomedicine & Pharmacotherapy'deki (2020) bu çalışma, IFI16'nın (interferon-gama ile indüklenebilir protein 16) SiHa serviks kanseri hücre büyümesini teşvik etmek için STING-TBK1-NF-kB yolunu aktive ederek PD-L1 genini düzenlediğini ortaya koydu.

SiHa Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

İşte SiHa hücrelerini içeren bazı çevrimiçi kaynaklar.

  • SiHa hücre transfeksiyonu: Bu araştırma makalesi SiHa rahim ağzı kanseri hücrelerinin bakımı ve SiHa hücre transfeksiyonu için bir protokol içermektedir.

Aşağıdaki bağlantı SiHa hücreleri için hücre kültürü bilgilerini içermektedir.

  • SiHa hücre hattı: Bu web sitesi SiHa hücre hattı hakkında çok değerli veriler içermektedir. Bu, büyüme ortamı, kültürleme koşulları, SiHa hücrelerinin alt kültürleme protokolleri ve proliferatif ve kriyoprezerve kültürlerinin işlenmesi hakkında bilgiler içerir.

SiHa Servikal Karsinom Hücreleri için SSS

Referanslar

  1. Melzer, C., J. von der Ohe ve R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Kök hücreler, 2018. 36(7): p. 951-968.
  2. Ostrowska, K.M., et al., Yüksek riskli insan papilloma virüsünün servikal kanser hücrelerinin biyokimyasal bileşimi üzerindeki etkisinin titreşimsel spektroskopi kullanılarak araştırılması. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
  3. Chen, Y., ve diğerleri, CRISPR/Cas13a sistemi ile insan papilloma virüsü E6/E7 mRNA'larının bölünmesi yoluyla insan servikal kanser hücrelerinin in vitro ve in vivo büyüme inhibisyonu. Antiviral Araştırma, 2020. 178: p. 104794.
  4. Fan, Y., et al., SEC61G, MAPK sinyal yolunu aktive ederek servikal kanser proliferasyonunu teşvik eder. Hastalık Belirteçleri, 2022. 2022.
  5. Chothiphirat, A., et al., Vatica diospyroides symington type SS'den elde edilen meyve özlerinin antikanser potansiyeli ve servikal kanser hücre hatlarının program hücre ölümü üzerindeki etkisi. The Scientific World Journal, 2019. 2019.

Farklı bir ülkede olduğunuzu veya şu anda seçili olandan farklı bir tarayıcı dili kullandığınızı tespit ettik. Önerilen ayarları kabul etmek ister misiniz?

Kapat