NCI-H460 Hücreleri - NCI-H460 İçgörüleri ile Akciğer Kanseri Araştırmalarında Yol Gösterici
NCI-H460, akciğer karsinomu ve toksikoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılan insan kaynaklı küçük hücreli olmayan akciğer kanseri hücreleridir. Bu hücre hattı, tümör gelişimi, büyümesi ve ilaç direncini içeren çeşitli kanser biyolojisi yönlerini incelemek için değerli bir araçtır. Ayrıca, NCI-H460 hücreleri anti-kanser reaktifleri geliştirmek için uygun bir modeldir.
NCI-H460 hücreleri: Kökeni ve genel özellikleri
Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri, araştırma uygulamalarına büyük ölçüde katkıda bulunur. Makalenin bu bölümü, NCI-H460 akciğer kanseri hücrelerinin kökenini ve göze çarpan özelliklerini öğrenmenize yardımcı olacaktır. Öğreneceksiniz: NCI-H460 hücreleri nedir? NCI-H460 hücre hattı tipi nedir? NCI-H460'ın morfolojisi nedir?
- NCI-H460 hücre hattı, büyük hücreli akciğer kanseri olan Avrupalı bir erkeğin plevral efüzyonundan kaynaklanmıştır. A.F. Gazdar ve meslektaşları tarafından 1982 yılında kurulmuştur.
- NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri epitelyal morfolojiye sahiptir.
- NCI-H460 hipotriploid karyotipe sahip tümörijenik bir hücre hattıdır. Bu hücreler için modal kromozom sayısı 57'dir. NCI-H460 hücreleri ayrıca karşılaştırılabilir oranlarda 58 modal kromozom sayısına sahiptir.
- Bu akciğer kanseri hücreleri, küçük hücreli olmayan akciğer tümörleri gibi, hücre çoğalması, büyümesi, istilası ve metastazında rol oynayan NCI-H460 KRAS mutasyonu gibi birçok NCI-NCI-H460 mutasyonuna sahiptir.
NCI-H460 Hücreleri Kültürleme Bilgileri
NCI-H460 hücre hattının doğru kullanımı ve bakımı için aşağıdaki önemli noktaları bilmelisiniz. NCI-H460 ikiye katlama süresi, NCI-H460 kültür ortamı ve NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri için temel hücre kültürü prosedürleri hakkında sizi bilgilendirecektir.
NCI-H460 Hücrelerinin Kültürü için Önemli Noktalar
|
İki Katına Çıkma Süresi: |
NCI-H460 ikiye katlanma süresi yaklaşık 33 saattir. |
|
Yapışık veya Süspansiyon Halinde: |
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri yapışıktır. |
|
Alt Kültivasyon Oranı: |
NCI-H460 hücre hattı için önerilen bölme oranı 1:2 ve 1:4'tür. Eski besiyeri çıkarıldıktan sonra, yapışık hücreler 1 x fosfat tampon salin ile durulanır. Daha sonra hücreler Accutase pasajlama solüsyonu ile ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Ayrışmış hücreler bir kültür ortamında yeniden süspanse edilir ve santrifüjlenir. Hasat edilen hücreler tekrar süspanse edilir ve kültürleme için yeni şişeye dökülür. |
|
Büyüme Ortamı: |
NCI-H460 kültür ortamı olarak RPMI 1640 kullanılır. 10 fetal sığır serumu, 2,1 mM stabil Glutamin ve 2,0 g/L NaHCO3 ile desteklenir. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir. |
|
Büyüme Koşulları: |
NCI-H460 kültürleri, sürekli %5 CO2 beslemesi olan nemlendirilmiş bir inkübatörde 37°C sıcaklıkta muhafaza edilir. |
|
Depolama: |
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri sıvı nitrojenin buhar fazında veya -150°C'nin altında bir sıcaklıkta elektrikli ultra düşük sıcaklıklı dondurucuda uzun süreli olarak saklanabilir. |
|
Dondurma İşlemi ve Ortam: |
NCI-H460 hücrelerini dondurmak ve saklamak için CM-1 veya CM-ACF ortamı kullanılır. Maksimum hücre canlılığını korumak için yavaş dondurma yöntemi önerilir. |
|
Çözdürme İşlemi: |
Dondurulmuş NCI-H460 hücreleri önceden ısıtılmış su banyosunda (37°C sıcaklıkta) 40 ila 60 saniye boyunca küçük bir buz kümesi kalana kadar çözdürülür. Çözdürülen hücrelere taze besiyeri eklenir ve donmuş besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Toplanan hücre peleti tekrar süspanse edilir ve hücreler büyüme için ortam içeren yeni şişelere dağıtılır. NCI-H460 hücrelerinin şişenin yüzeyine tutunması neredeyse 24 saat sürebilir. |
|
Biyogüvenlik Seviyesi: |
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarlarında işlenir ve muhafaza edilir. |
NCI-H460 hücrelerinin Avantajları ve Dezavantajları
NCI-H460 akciğer kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılan bir hücre hattıdır. Bu bölümde NCI-H460 akciğer kanseri hücreleriyle ilgili genel avantaj ve dezavantajlar ele alınacaktır.
Avantajlar
NCI-H460 küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücre hattının avantajları şunlardır:
-
Tümör kökeni
NCI-H460 hücre hattı, bu özel akciğer kanseri türünü temsil eden büyük hücreli bir akciğer karsinomu hastasından elde edilmiştir. Akciğer kanseri biyolojisini incelemek ve yeni ve etkili tedaviler geliştirmek için bir model olarak kullanılırlar. NCI-H460 hücreleri tümörijenik potansiyele sahiptir ve tümör büyümesi, gelişimi ve potansiyel ilaçların etkinliğini incelemek üzere in vivo tümör modelleri oluşturmak için immün yetmezliği olan farelere enjekte edilebilir.
-
Yüksek çoğalma oranları
NCI-H460, A549 gibi diğer küçük hücreli olmayan akciğer kanseri hücre hatlarından daha yüksek büyüme oranları sergiler. Bu avantaj, kullanılabilirliklerini artırır ve araştırmacıların tekrarlanabilir ve zamana duyarlı deneyler yapmalarına yardımcı olur.
Dezavantajlar
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri ile ilişkili dezavantajlar şunlardır:
-
Homojenlik
NCI-H460 hücreleri tek bir hasta tümöründen elde edildikleri için homojendir. Bu nedenle, genellikle hasta tümörlerinde gözlenen karmaşıklık ve heterojenlikten yoksundurlar.
NCI-H460 hücrelerinin araştırma uygulamaları
NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri, akciğer karsinomu ile ilgili çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. İşte NCI-H460 hücrelerinin önemli araştırma uygulamalarından bazıları:
- Akciğer kanseri araştırmaları: NCI-H460 hücreleri tümör gelişimi, büyümesi ve metastazında rol oynayan hücre ve moleküler mekanizmaların araştırılması için paha biçilmez bir modeldir. Ayrıca, zorunlu sinyal yollarını, moleküler hedefleri ve akciğer kanseri ilerlemesiyle ilişkili çeşitli genetik mutasyonları incelemek için kullanılır. Bu faktörleri etkili bir şekilde incelemek için NCI-H460 hücreleri üzerinde çeşitli çalışmalar yapılmıştır. 2019'da yapılan bir çalışma, aşırı eksprese edilen nükleer her yerde bulunan kazein ve sikline bağımlı kinaz substratının (NUCKS) PI3K/AKT sinyal yolağının düzenlenmesi yoluyla tümör hücresi büyümesinde rol oynadığını öne sürmüştür [1]. Benzer şekilde, in vitro ve in vivo bir çalışmada eIF4E geninin rolünü incelemek için NCI-H460 hücreleri kullanılmıştır. Bulgular, eIF4E geninin akciğer karsinomu büyümesi ve anjiyogenezinde rol oynadığını ve umut verici akciğer kanseri karşıtı ilaçlar geliştirmek için hedeflenebileceğini ortaya koymuştur [2].
- İlaç keşfi ve geliştirilmesi: Bir insan akciğer kanseri hücre hattı olan NCI-H460, ilaç keşfi ve geliştirme çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar bu hücreleri yeni ilaç adaylarının, hedefe yönelik tedavilerin ve esas olarak NCI-H460 KRAS mutasyonlarını hedef alan tedavilerin toksisitesini ve etkinliğini araştırmak için kullanmaktadır. Haoyue Hu ve meslektaşları tarafından 2023 yılında yapılan bir çalışmada, anlotinib ilacının anti-kanser etkilerini incelemek için NCI-H460 hücreleri kullanılmıştır. Sonuçlar, anlotinibin MEK/ERK sinyal kaskadını inhibe ederek KRAS mutant akciğer kanseri hücrelerinin büyümesini kısmen etkilediğini göstermiştir [3]. Benzer şekilde, fenolik bir bileşik olan karnosik asit, NCI-H460 hücreleri kullanılarak antiproliferatif ve proapoptotik aktiviteler açısından taranmıştır [4].
- İlaç direnci: NCI-H460 hücre hattı, akciğer karsinomunun ilaç direnci mekanizmasını incelemek için idealdir. Araştırmacılar bu hücreleri, altta yatan genleri, moleküler faktörleri ve sinyal yolaklarını tanımlamak üzere ilaç direnci modelleri geliştirmek için kullanmaktadır. Örneğin, bir çalışmada küçük hücreli olmayan akciğer kanseri hücrelerinde pemetreksed direncinin altında yatan moleküler mekanizmaları incelemek için çok hedefli bir antifolat ajan olan Pemetreksed'e dirençli NCI-H460 hücreleri geliştirilmiştir [5].
NCI-H460 Hücre Hattını Satın Alın: Akciğer Kanseri Araştırmalarına Açılan Kapınız
NCI-H460 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları
İşte NCI-H460 akciğer karsinomu hücre hattı hakkında bazı ilginç araştırma yayınları.
Molecules (2023) dergisinde yayımlanan bu çalışmada, siyah fasulyeden elde edilen doğal bir α-1,6-glukan olan BBWPW'nin PI3K/AKT/MAPK yolağını düzenleyerek NCI-H460 hücrelerinin çoğalmasını engellediği öne sürülmüştür.
Phytomedicine'deki (2019) bu makale, yeni bir doğal bileşik olan dioscin-6′-O-asetatın NCI-H460 akciğer kanseri hücreleri üzerinde antiproliferatif bir etki gösterdiğini incelemiştir.
miRNA-425-5p, PTEN/PI3K/AKT sinyal ekseni aracılığıyla akciğer kanseri büyümesini artırıyor
BMC Pulmonary Medicine (2020) araştırması, mikroRNA-425-5p'nin PTEN/PI3K/AKT yolağı aracılığıyla akciğer karsinomu tümörigenezini artırdığını belirtiyor.
Molecular Medicine Reports'da (2017) yayınlanan bu makale, NCI-H460 ve diğer akciğer kanseri hücrelerinde quinalizarin bileşiğinin antitümör potansiyelini ve altında yatan mekanizmaları ortaya koymuştur.
Food and Function (2019) dergisinde yayımlanan bu araştırma, NCI-H460 hücreleri kullanılarak elde edilen Eucalyptus globulus labill. özütünün potansiyel anti-kanser etkisini vurgulamaktadır. Bulgular, bitki özütünün bu etkileri NCI-H460 p53 ekspresyonunu artırarak ve hücre döngüsü profilini modüle ederek gösterdiğini ortaya koymuştur.
NCI-H460 Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
İşte NCI-H460 akciğer kanseri hücrelerini içeren bazı çevrimiçi kaynaklar.
- NCI-H460 hücre transfeksiyonu: Bu eğitim videosu, NCI-H460 hücrelerinin plazmid DNA ile transfekte edilmesine yönelik adım adım bir kılavuzdur.
Aşağıdaki bağlantılar H460 hücreleri için zorunlu hücre kültürü bilgilerini içerir.
- NCI-H460 hücreleri: Bu web sitesi NCI-H460 hücre ortamı, alt kültürleme, dondurma ve çözme prosedürleri hakkında önemli bilgiler sağlayacaktır.
- NCI-H460 hücrelerinin pasajlanması: Bu belge, NCI-H460 hücre hattının pasajlanması ve alt kültürlenmesi hakkında size rehberlik edecektir. Ayrıca, NCI-H460 hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmenize de yardımcı olacaktır.
NCI-H460 Hücre Hattını Keşfetmek: SSS ve İçgörüler
Referanslar
- Hu, C., ve diğerleri, NUCKS, Pi3k/Akt Sinyal Yolağı Aracılığıyla Akciğer Kanseri Hücrelerinin Proliferasyonunu, Göçünü ve İstilasını Teşvik Ediyor. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X., et al., Yeni bir eIF4E/eIF4G etkileşim inhibitörü olan EGPI-1, Ras/MNK/ERK/eIF4E sinyal yolu aracılığıyla akciğer kanseri hücre büyümesini ve anjiyogenezi inhibe eder. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib, MEK/ERK yolağını baskılayarak KRAS mutasyonlu akciğer kanseri hücresi üzerinde anti-kanser etkiler gösterir. Kanser Yönetimi ve Araştırması, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, ABC ve diğerleri, Karnosik asit, tümöral NCI-H460 ve tümöral olmayan IMR-90 akciğer hücrelerinde antiproliferatif ve proapoptotik etkiler sergiler. Toksikoloji ve Çevre Sağlığı Dergisi, Bölüm A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., ve diğerleri, Pemetreksed dirençli NCI-H460/PMT hücrelerinin oluşturulması ve karakterizasyonu. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (Formerly Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.