MX-1 Hücre Hattı

MX-1, atimik farelerde meme kanseri ksenograft modelinden türetilen bir insan meme adenokarsinom hücre hattıdır. İnsan meme adenokarsinom hücreleri 29 yaşında Kafkas bir kadının meme tümöründen oluşturulmuştur. MX1 hücreleri, ilaç direnci, hücre sinyali, ilaç yanıt mekanizması vb. konulardaki araştırmalar için yaygın olarak kullanılan üçlü negatif meme kanseridir (TNBC).

MX-1 Hücrelerinin Kökeni ve Genel Bilgiler

Bu hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, bu hattın temel özelliklerini öğrenmelisiniz. MX-1 hücre hattıyla ilgili neredeyse tüm genel bilgileri gözden geçireceğiz.

Ölümsüz MX-1 hücre hattı, bir tümör ksenograftından oluşturulan tümörijenik bir hücre hattıdır. MX-1 hücreleri üçlü-negatif meme kanseri (TNBC) türü olarak kabul edilir [1]. Ayrıca, bu hücreler östrojen reseptörü ve p53 negatiftir, çünkü bu genleri ifade etmezler.

MX-1 hücreleri - Üçlü Negatif Meme Kanseri için Bir Model Sistem

MX-1 hücre hattının kültür koşulları telaşlı değildir. Bu hücreler kolayca çoğaltılabilir ve transfeksiyon çalışmaları için çeşitli araştırma laboratuvarlarında kullanılabilir. Geçici transfeksiyon yöntemi yaygın olarak bu hücre hattında altta yatan hücresel mekanizmaları ve gen ifade modellerini inceler [2, 3].

Bu hücre hattı meme karsinomları için sağlam bir model sistemdir. Hastalığın ilerlemesinin arkasındaki moleküler mekanizmaları anlamak ve hastalıkla mücadele etmek için ilaçları taramak ve geliştirmek için kullanılabilir. Daha spesifik olarak, insan MX-1 meme adenokarsinom hücre hattı, östrojen reseptörü negatif olduğu için TNBC hücrelerine bir alternatif olabilir [4].

MX-1 hücre hattı: Kültürleme bilgileri

• İki Katına ÇıkmaSüresi: INS-1 hücrelerinin popülasyon iki katına çıkma süresi yaklaşık 44 saattir.
• Yapışık veya Süspansiyon Halinde: INS-1 hücreleri hem süspansiyon hem de yapışık formda büyür.
• Alt Kültivasyon Oranı: INS-1 hücreleri 1:3 bölünme oranında alt kültüre alınır. Kısaca, süspansiyon halindeki hücreler toplanır. Yapışık hücreler PBS ile durulanır ve Accutase solüsyonu ile inkübe edilir. Hücreler ayrıldıktan sonra taze besiyeri eklenir. Daha sonra hem süspansiyon halindeki hem de yapışık hücreler santrifüjlenir ve toplanır. Hücreler dikkatlice yeniden süspanse edilir ve büyüme için yeni flasklara dağıtılır.
• Büyüme Ortamı: INS-1 sıçan insülinoma hücre hattını kültürlemek için RPMI 1640 kullanılır. Ortam %10 ısıyla inaktive edilmiş fetal sığır serumu, 2,1 mM stabil Glutamin, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 ve 1 mM sodyum piruvat ile desteklenir.
• Büyüme Koşulları: INS-1 hücreleri 37°C sıcaklığa ayarlanmış nemlendirilmiş bir inkübatörde ve sürekli %5 CO2 kaynağı ile tutulur.
• Depolama: INS-1 beta hücreleri sıvı nitrojenin buhar fazında veya -150°C'nin altındaki sıcaklıkta elektrikli bir dondurucuda uzun süreli olarak saklanabilir.
• Dondurma İşlemi ve Ortam: INS-1 hücrelerini yavaş bir dondurma işlemiyle dondurmak için CM-1 veya CM-ACF ortamı kullanılır. Hücre canlılığını korumak için dakikada sadece 1°C sıcaklık düşüşüne izin verir.
• Çözdürme İşlemi: Dondurulmuş INS-1 hücreleri 40 ila 60 saniye boyunca 37 santigrat derece sıcaklıkta önceden ayarlanmış bir su banyosunda çözdürülür. Çözüldükten sonra hücreler taze besiyerine eklenir ve büyüme için doğrudan yeni bir şişeye dökülür. 24 saat sonra donan ortam bileşenlerini ortadan kaldırmak için ortam değiştirilir.
• Biyogüvenlik Seviyesi: INS-1 sıçan insülinoma hücrelerini kültürlemek için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar gereklidir.

MX-1 hücreleri: Araştırma Uygulamaları

Bu insan meme adenokarsinomu MX-1 hücre hattı, meme kanseri çalışmalarında MDA-MB-231 veya MCF-7 gibi hücrelerin yerine yaygın olarak kullanılmaktadır. İşte bu hücre hattının kanser araştırmalarındaki birkaç özel uygulaması.

İlaç direnci mekanizmaları

MX-1 hücreleri, meme kanseri ilaçlarına karşı direnç gelişimine aracılık eden moleküler faktörleri incelemek için kullanılır. Çalışmalar, ilaca dirençli modeller oluşturmak için MX-1 hücrelerini yaygın olarak kullanmıştır. 2021'de yayınlanan bir çalışmada, doksorubisine dirençli bir meme kanseri hücre hattı oluşturmak için MX-1 hücrelerinin kullanıldığı bildirilmiştir. Geliştirilen hücre modeli, ABC taşıyıcısı ABCB1 ve epitelyal-mezenkimal geçişin (EMT) kemorezistansın kazanılmasındaki rolünü doğrulamıştır [5].

Gen ifadesi/hücre sinyal yolu

MX-1 hücre hattı, gen ifade modellerini ve hücre sinyal yollarını aydınlatmak için geçici olarak transfekte edilebilir. Çalışmalar, meme kanseri hücrelerinin çoğalması ve büyümesi üzerindeki etkilerini araştırmak için shRNA (kısa saç tokası RNA) ve kodlamayan RNA transfeksiyonu için MX-1 hücrelerini kullanmıştır. Ayrıca, ilişkili gen sinyal yolakları da aydınlatılmıştır [2, 6].

Potansiyel inhibitörlerin taranması

MX-1 hücreleri, kanser hücresi mikroçevresini taklit ettikleri için meme kanserine karşı potansiyel ilaçların taranması için kullanılabilir. Bir araştırma çalışması, MX-1 hücrelerinde hücre ölümünü ve poliploidiyi tetikleyen bir mikrotübül toksini olan Vinorelbine'in terapötik aktivitesini göstermiştir [4].

MX-1 Hücre Hattınızı Bugün Sipariş Edin

MX-1 hücre hattı Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

Kültürleme ve transfeksiyon yöntemleri ile ilgili sınırlı kaynak mevcuttur, ancak sizin için mümkün olduğunca fazla bilgi topladık.

Hücre kültürü protokolleri

MX-1 hücreleri birçok geçici transfeksiyon analizi çalışmasında kullanılmaktadır. Burada, transfeksiyon protokollerinde size yardımcı olacak birkaç kaynak listeledik.

• MX-1 hücreleri transfeksiyonu: Bu yayın, bir gen nakavt modeli geliştirmek için MX-1 hücrelerinde siRNA ile transfeksiyon protokolünü açıklamaktadır.
• Memeli hücre transfeksiyonu: Bu makale, memeli hücre hatlarında kullanılan transfeksiyon yöntemleri hakkında tüm temel bilgileri içermektedir.

Bu makalenin size MX-1 hücre hattı hakkında değerli bilgiler verdiğini ve bu hücreleri araştırmanızda nasıl kültürleyeceğinizi, koruyacağınızı ve kullanacağınızı daha iyi anladığınızı umuyoruz. MX-1 hücre hattıyla çalışmakla ilgileniyorsanız, araştırma yolculuğunuza başlamak için bizden sipariş vermekten çekinmeyin!

MX-1 Meme Karsinomu Hücre Hattı Hakkında Sıkça Sorulan Sorular

Referanslar

1. Stefanski, C.D. ve J.R. Prosperi, Üçlü negatif meme kanserinde CHK1 direnciyle mücadele: Potansiyel kombinasyonel tedavi olarak EGFR inhibisyonu. Kanser İlaç Direnci, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., cGAMP analoğu c-di-AMP, östrojen reseptörü negatif meme kanseri hücrelerinde STING aracılı hücre ölüm yolunu aktive eder. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Apoptoz proteinbenzeriprotein-2 inhibitörününmeme kanseri hücre proliferasyonu üzerindeki proteomik analizi. Moleküler Tıp Raporları, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa ve J. Magae , Bir Mikrotübül Toksini Olan Vinorelbin, İnsan Üçlü Negatif Meme Kanseri Hücre Hattı MX-1'de Apoptoz ve Poliploidiyi İndükler. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Nongenotoksik ABCB1 aktivatörü tetrafenilfosfonyum, MX-1 meme kanseri hücre hattında doksorubisin direncine katkıda bulunabilir. Bilimsel raporlar, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., ve diğerleri, Meme kanserinin miksomik analizi: Uzun kodlamayan RNA linc01561, meme kanserinin ilerlemesinde rol oynayan ceRNA olarak işlev görür. Uluslararası Biyokimya ve Hücre Biyolojisi Dergisi, 2018. 102: p. 1-9.