MX-1 Hücre Hattı

MX-1, atimik farelerde bir meme kanseri ksenograft modelinden elde edilen bir insan meme adenokarsinomu hücre hattıdır. İnsan meme adenokarsinomu hücreleri, 29 yaşındaki Kafkas kökenli bir kadının meme tümöründen elde edilmiştir. MX-1 hücreleri, ilaç direnci, hücre sinyalleşmesi, ilaç yanıt mekanizması vb. konularındaki araştırmalarda yaygın olarak kullanılan üçlü negatif meme kanseri (TNBC) hücreleridir.

MX-1 Hücrelerinin Kökeni ve Genel Bilgiler

Bu hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, temel özelliklerini öğrenmelisiniz. MX-1 hücre hattıyla ilgili neredeyse tüm genel bilgileri gözden geçireceğiz.

Ölümsüz MX-1 hücre hattı, bir tümör ksenograftından elde edilmiş tümörjenik bir hücre hattıdır. MX-1 hücreleri, üçlü negatif meme kanseri (TNBC) türü olarak kabul edilir [1]. Ayrıca, bu hücreler östrojen reseptörü ve p53 negatif olup, bu genleri eksprese etmezler.

MX-1 Hücreleri - Üçlü Negatif Meme Kanseri için Bir Model Sistem

MX-1 hücre hattının kültür koşulları çok titiz değildir. Bu hücreler kolayca çoğaltılabilir ve çeşitli araştırma laboratuvarlarında transfeksiyon çalışmaları için kullanılabilir. Geçici transfeksiyon yöntemi, genellikle bu hücre hattındaki temel hücresel mekanizmaları ve gen ekspresyon modellerini incelemek için kullanılır [2, 3].

Bu hücre hattı, meme karsinomları için sağlam bir model sistemdir. Hastalığın ilerlemesinin ardındaki moleküler mekanizmaları anlamak ve hastalıkla mücadeleye yönelik ilaçları taramak ve geliştirmek için kullanılabilir. Daha spesifik olarak, insan MX-1 meme adenokarsinom hücre hattı, östrojen reseptörü negatif olduğu için TNBC hücrelerine bir alternatif olabilir [4].

Yayın tarihi: 2023 | Son gözden geçirme tarihi: Mayıs 2026

MX-1 hücre hattı: Kültivasyon bilgileri

• Çoğalma Süresi: INS-1 hücrelerinin popülasyon çoğalma süresi yaklaşık 44 saattir.
• Yapışık veya Süspansiyon Halinde: INS-1 hücreleri hem süspansiyon hem de yapışık formda büyür.
• Alt Kültür Oranı: INS-1 hücreleri 1:3 bölme oranında alt kültüre alınır. Kısaca, süspansiyon halindeki hücreler toplanır. Yapışık hücreler PBS ile durulanır ve Accutase çözeltisi ile inkübe edilir. Ayrılma işleminden sonra hücrelere taze besiyeri eklenir. Daha sonra, hem süspansiyon halindeki hem de yapışık hücreler santrifüjlenir ve toplanır. Hücreler dikkatlice yeniden süspansiyona alınır ve büyüme için yeni şişelere dağıtılır.
• Büyüme Ortamı: INS-1 sıçan insülinom hücre hattının kültürlenmesi için RPMI 1640 kullanılır. Besiyerine %10 ısı ile inaktive edilmiş fetal sığır serumu, 2,1 mM stabil glutamin, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 ve 1 mM sodyum piruvat eklenir.
• Büyüme Koşulları: INS-1 hücreleri, 37°C sıcaklığa ayarlanmış ve sürekli %5 CO₂ beslemesi yapılan nemlendirilmiş bir inkübatörde tutulur.
• Saklama: INS-1 beta hücreleri, sıvı azotun buhar fazında veya elektrikli bir dondurucuda -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda uzun süre saklanabilir.
• Dondurma Süreci ve Ortamı: INS-1 hücrelerini yavaş dondurma işlemiyle dondurmak için CM-1 veya CM-ACF besiyerleri kullanılır. Bu işlem, hücre canlılığını korumak amacıyla dakikada sadece 1°C'lik bir sıcaklık düşüşüne izin verir.
• Çözme Süreci: Dondurulmuş INS-1 hücreleri, önceden 37 derece Celsius sıcaklığa ayarlanmış bir su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca çözülür. Çözüldükten sonra, hücrelere taze besiyeri eklenir ve büyüme için doğrudan yeni bir şişeye aktarılır. 24 saat sonra, dondurma besiyerindeki bileşenleri ortadan kaldırmak için besiyeri değiştirilir.
• Biyogüvenlik Seviyesi: INS-1 sıçan insülinoma hücrelerinin kültürlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar gereklidir.

MX-1 Hücreleri: Araştırma Alanındaki Uygulamalar

Bu insan meme adenokarsinomu MX-1 hücre hattı, MDA-MB-231 veya MCF-7 gibi hücrelerin yerine meme kanseri çalışmalarında yaygın olarak kullanılır. İşte bu hücre hattının kanser araştırmalarındaki birkaç özel uygulaması.  

İlaç direnci mekanizmaları

MX-1 hücreleri, meme kanseri ilaçlarına karşı direnç gelişimine aracılık eden moleküler faktörleri incelemek için kullanılır. Çalışmalarda, ilaca dirençli modeller oluşturmak için MX-1 hücreleri yaygın olarak kullanılmıştır. 2021 yılında yayınlanan bir çalışmada, doksorubisine dirençli bir meme kanseri hücre hattı oluşturmak için MX-1 hücrelerinin kullanıldığı bildirilmiştir. Geliştirilen hücre modeli, kemoterapi direncinin kazanılmasında ABCB1 ABC taşıyıcısının ve epitelyal-mezenkimal geçişin (EMT) rolünü doğrulamıştır [5].

Gen ekspresyonu/hücre sinyal yolu

MX-1 hücre hattı, gen ekspresyon modellerini ve hücre sinyal yolaklarını aydınlatmak amacıyla geçici olarak transfekte edilebilir. Çeşitli çalışmalarda, meme kanseri hücrelerinin çoğalması ve büyümesi üzerindeki etkilerini araştırmak amacıyla MX-1 hücreleri, shRNA (kısa saç tokası RNA) ve kodlamayan RNA transfeksiyonu için kullanılmıştır. Ayrıca, ilgili gen sinyal yolları da aydınlatılmıştır [2, 6].

Potansiyel inhibitörlerin taranması

MX-1 hücreleri, kanser hücresi mikroortamını taklit ettikleri için meme kanserine karşı potansiyel ilaçların taranmasında kullanılabilir. Bir araştırma çalışması, MX-1 hücrelerinde hücre ölümünü ve poliploidi tetikleyen bir mikrotübül toksini olan Vinorelbine’in terapötik aktivitesini göstermiştir [4].

MX-1 Hücre Hattınızı Hemen Sipariş Edin

MX-1 hücre hattı Kaynakları: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

Kültürleme ve transfeksiyon yöntemleri ile ilgili kaynaklar sınırlıdır, ancak sizin için mümkün olduğunca fazla bilgi topladık.

Hücre kültürü protokolleri

MX-1 hücreleri, birçok geçici transfeksiyon analizi çalışmasında kullanılmaktadır. Burada, transfeksiyon protokollerinde size yardımcı olacak birkaç kaynağı listeledik.

• MX-1 hücrelerinin transfeksiyonu: Bu yayın, bir gen nakavt modeli geliştirmek amacıyla MX-1 hücrelerinde siRNA ile transfeksiyon protokolünü açıklamaktadır.
• Memeli hücre transfeksiyonu: Bu makale, memeli hücre hatlarında kullanılan transfeksiyon yöntemleri hakkında tüm temel bilgileri içermektedir.

Bu makalenin size MX-1 hücre hattı hakkında değerli bilgiler sağladığını ve bu hücreleri araştırmalarınızda nasıl kültürleyeceğiniz, koruyacağınız ve kullanacağınız konusunda daha iyi bir anlayış kazandığınızı umuyoruz. MX-1 hücre hattıyla çalışmakla ilgileniyorsanız, araştırma yolculuğunuza başlamak için bizden sipariş vermekten çekinmeyin!

MX-1 Meme Karsinomu Hücre Hattı Hakkında Sıkça Sorulan Sorular

Kaynakça

1. Stefanski, C.D. ve J.R. Prosperi, Üçlü negatif meme kanserinde CHK1 direnciyle mücadele: Potansiyel bir kombinasyon tedavisi olarak EGFR inhibisyonu. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): s. 229.
2. Vasiyani, H. ve ark., cGAMP'nin analogu olan c-di-AMP, östrojen reseptörü negatif meme kanseri hücrelerinde STING aracılı hücre ölümü yolunu aktive eder. Apoptosis, 2021. 26: s. 293-306.
3. Xiang, S. ve ark., Meme kanseri hücre proliferasyonu üzerinde apoptoz inhibitörü protein benzeri protein-2’nin proteomik analizi. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): s. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa ve J. Magae, Mikrotübül toksini olan vinorelbin, insan üçlü negatif meme kanseri hücre hattı olan MX-1'de apoptozu ve poliploidi indükler. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): s. 447-451.
5. Kubiliute, R. ve ark., Nojenotoksik olmayan ABCB1 aktivatörü tetrafenilfosfonyum, MX-1 meme kanseri hücre hattında doksorubisin direncine katkıda bulunabilir. Scientific reports, 2021. 11(1): s. 1-11.
6. Jiang, R. ve ark., Meme kanserinin miksomik analizi: Uzun kodlamayan RNA linc01561, meme kanserinin ilerlemesinde rol oynayan bir ceRNA olarak işlev görür. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: s. 1-9.