KG-1 Hücre Hattı
KG-1 hücreleri, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan insan kaynaklı bir lösemi hücre hattını oluşturmaktadır. İmmünoloji, kanser ve toksikoloji araştırmalarında çeşitli uygulamalar sunarlar. Araştırmacılar bu hücreleri hastalık mekanizmalarını incelemek ve potansiyel tedavileri test etmek için kullanmaktadır. Bu makale, çalışmalarınızda size yardımcı olabilecek KG-1 hücre hattı hakkında kapsamlı bilgi sağlayacaktır. Özellikle, tartışılacaktır:
- KG-1 hücre hattının genel özellikleri ve kökeni
- KG-1 hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri
- KG-1 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
- KG-1 hücrelerinin araştırma alanındaki uygulamaları
- KG-1 hücreleri üzerine yayınlar
- KG-1 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
1. KG-1 hücresinin genel özellikleri ve kökeni hattı
Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri, bir araştırmacının çalışmalarında kullanımına karar vermesine yardımcı olur. Üzerinde çalışmaya başlamadan önce bu bilgileri araştırabilirsiniz. Bu makale bölümü KG-1 makrofajlarının kökeni ve özellikleri hakkındadır. Burada şunları öğreneceksiniz: KG-1 hücreleri nedir? KG-1a hücre hattı nedir? KG-1 hücre hattının kökeni nedir? KG-1 morfolojisi nedir?
- KG-1, akut miyelojenöz lösemili Kafkasyalı bir erkeğin (59 yaşında) kemik iliği aspiratından elde edilen lenfoblast benzeri bir hücre hattıdır. Koeffler ve Golde tarafından 1978 yılında kurulmuştur. Bu hücreler esas olarak promiyelosit veya miyeloblast olgunlaşma aşamasındadır [1].
- KG-1 hücreleri lenfoblast benzeri bir morfolojiye sahiptir.
- KG-1 hücre hattı karyotipi psödodiploid modal kromozom sayısı sergilemektedir.
KG-1 ve KG-1a
KG-1a, ebeveyn KG-1 hücrelerinin bir alt hattıdır. KG1 hücre hattının 35 pasajından sonra geliştirilmiştir. KG-1 hücre hattına kıyasla daha az farklılaşmıştır. Ayrıca bu alt hat, ana hücre hattına (KG-1) kıyasla sitokimyasal, morfolojik ve işlevsel olarak daha az olgunlaşmıştır.
2. KG-1 hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri
Makalenin bu bölümü, KG-1 hücre kültürü hakkında işinizi kolaylaştırabilecek tüm zorunlu bilgileri kapsayacaktır. Burada öğreneceksiniz: KG 1 hücre hattının ikiye katlanma süresi nedir? KG-1 makrofajlarının kültür koşulları nelerdir? KG-1 hücrelerini nasıl kültürlersiniz?
KG-1 Hücrelerinin Kültürü için Önemli Noktalar
|
İki Katına Çıkma Süresi: |
KG-1'in iki katına çıkma süresi yaklaşık 45 saattir. Ancak kültürleme koşullarına bağlı olarak değişebilir. |
|
Yapışık veya Süspansiyon Halinde: |
KG-1 hücreleri süspansiyon halinde büyür. |
|
Hücre yoğunluğu: |
KG1 hücre hattı için optimum hücre yoğunluğu 1 ila 3 x105 hücre/ml arasındadır. Alt kültür için hücre süspansiyonu steril bir tüpe aktarılır ve santrifüjlenir. Hasat edilen hücreler daha sonra taze besiyeri ile eklenir ve dikkatlice yeniden süspanse edilir. Daha sonra hücreler yeni şişelere dağıtılır ve optimum hücre yoğunluğunda kültürlenir. Hücreler 1 - 2 x106 hücre/ml maksimum hücre yoğunluğuna ulaştıklarında ayrılabilir. |
|
Büyüme Ortamı: |
KG-1 hücrelerini kültürlemek için %10 FBS, 4,5 g/L Glukoz, 4 mM L-Glutamin, 1,0 mM Sodyum piruvat ve 3,0 g/L NaHCO3 içeren IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) kullanılır. Ortam üç gün sonra değiştirilmelidir. |
|
Büyüme Koşulları: |
KG1 AML hücre hattı 37°C sıcaklıkta ve %5 CO2 beslemeli nemlendirilmiş bir inkübatörde kültürlenir. |
|
Depolama: |
Dondurulmuş hücreler, hücrelerin canlılığını korumak için sıvı nitrojenin buhar fazında veya elektrikli ultra düşük sıcaklıklı bir dondurucuda -150 °C sıcaklığın altında tutulur. |
|
Dondurma İşlemi ve Ortam: |
KG-1 hücrelerinin dondurulması için CM-1 veya CM-ACF uygundur. Hücreler, hücreleri herhangi bir şoktan korumak için yavaş bir dondurma işlemi kullanılarak dondurulur. Bu yöntem dakikada 1 °C'lik kademeli bir sıcaklık düşüşüne izin verir. |
|
Çözdürme İşlemi: |
Hücreler, küçük bir buz kümesi kalana kadar 37 °C'de önceden ısıtılmış bir su banyosunda çözdürülür. Çözülmüş hücreler taze besiyerine eklenir ve donmuş besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Hücre peleti dikkatlice yeniden süspanse edilir ve büyüme ortamı içeren yeni flasklara dökülür. |
|
Biyogüvenlik Seviyesi: |
Biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarı, KG-1 hücre kültürlerinin bakımı için gereklidir. |
3. KG-1 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
Diğer hücre hatları gibi KG-1 miyeloid lösemi hücre hattı da birçok avantaj ve sınırlama ile ilişkilidir. Bu bölümde, araştırmanızda kullanımına karar vermenizde önemli olabilecek bazı önemli avantajlar hakkında bilgi edineceğiz.
Avantajlar
KG-1 hücrelerinin başlıca avantajları şunlardır:
-
Kültürleme Kolaylığı
KG-1 hücreleri, karmaşık olmayan hücre kültürü gereksinimleriyle araştırma laboratuvarlarında kolayca kültüre alınabilir. Kolay bakım ve büyüme koşulları, temel hücre kültürü tesislerine sahip geniş bir araştırmacı yelpazesi için erişilebilirlik sağlar.
-
Akut Miyeloid Lösemi (AML) Modeli
Akut miyeloid lösemili (AML) bir erkek hastadan türetilen KG-1 AML hücre hattı, AML biyolojisini araştırmak ve potansiyel terapötikler üzerinde araştırma yapmak için değerli bir araç olarak hizmet etmekte ve bu hastalığın altında yatan mekanizmalar ve tedavi stratejileri hakkında içgörüler sunmaktadır.
sınırlamalar
KG1 hücre hattı ile ilgili sınırlamalar şunlardır:
-
İn Vitro Model
KG-1 hücreleri AML araştırmaları için değerli bir in vitro modeldir; ancak, AML biyolojisinin tüm yönlerini kapsamayabilecek basitleştirilmiş bir hücre modeli olarak hizmet ederek, hastalığın karmaşıklığını in vivo olarak tam olarak kopyalayamayabileceklerini belirtmek önemlidir.
4. KG-1 hücrelerinin araştırma alanındaki uygulamaları
KG-1 biyomedikal araştırmalarda birçok umut verici uygulama sunmaktadır. KG1 makrofajlarının kullanıldığı önemli araştırmalardan bazıları şunlardır:
- Kanser araştırmaları: KG-1 hücreleri bir akut miyeloid lösemi hastasından türetilmiştir ve bu nedenle AML biyolojisini araştırmak için değerli bir araştırma aracı olarak kabul edilir. Araştırmacılar bu hücreleri AML gelişimi, büyümesi ve ilaç direncini yönlendiren hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanmaktadır. Bu aynı zamanda AML ile ilişkili yeni biyobelirteçlerin, genetik mutasyonların ve sinyal yolaklarının tanımlanmasını ve keşfedilmesini de içerir. Örneğin, 2019 yılında yapılan bir çalışmada, uzun kodlamayan RNA linc00239'un KG-1 akut miyeloid lösemi hücrelerinde doksorubisin direncini ve malign davranışı kolaylaştırdığı araştırılmıştır. Daha ileri bir çalışma, lncRNA'nın AML hücrelerinde bu etkileri göstermek için PI3K/Akt/mTOR sinyalini aktive ettiğini ortaya koymuştur [2].
- Toksikoloji: KG1 hücre hattı toksikoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, gelecekteki preklinik ve klinik değerlendirmeler için umut verici ilaç adaylarını belirlemek amacıyla KG1 miyeloid lösemi hücreleri üzerinde kemoterapötik ilaçlar ve hedefe yönelik tedaviler dahil olmak üzere potansiyel terapötik ajanların toksisitesini ve etkinliğini test etmektedir. 2018'de yapılan araştırma, doksorubisin içeren nano-niyozomların KG1 AML hücre hattı üzerindeki toksisitesini analiz etti. Çalışma, nano-niyozomun tedavinin etkinliğini artırdığı için ilaç dağıtımı için uygun bir taşıyıcı olduğunu öne sürmüştür [3]. Bir başka araştırmada, araştırmacılar Urtica dioica bitkisinin yapraklarından hazırlanan ısırgan otu çayının terapötik etkilerini incelemişlerdir. Çalışma, bitkinin bu sulu yaprak ekstresinin akut miyeloid lösemi hücrelerinde, KG-1 ve U937'de anti-tümör etkiler gösterdiğini ortaya koymuştur [4].
5. KG-1 hücreleri üzerine yayınlar
Makalenin bu bölümünde KG-1 hücreleriyle ilgili birkaç ilginç araştırma yayını sıralanmaktadır.
Quercetin, insan miyeloid lösemi KG-1 hücrelerini TRAIL ile indüklenen apoptoza karşı hassaslaştırır
Bu makale Journal of Cellular Physiology (2019) dergisinde yayımlanmıştır. Çalışma, kuersetin bileşiğinin KG1 AML hücre hattını TNF ile ilişkili apoptoz indükleyici liganda (TRAIL) karşı hassaslaştırdığını ve hücrelerde TRAIL ile indüklenen sitotoksisitenin etkisini artırabileceğini öne sürmüştür.
KLF8, AKT/mTOR yolağı aracılığıyla akut miyeloid lösemi hücre büyümesini ve glikolizi artırır
Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) dergisindeki bu makale, krüppel benzeri transkripsiyon faktörü 8'in aşağı regülasyonunun AML hücre proliferasyonunu ve glikolizi baskıladığını ve AKT/mTOR sinyal yolunu düzenleyerek apoptozu teşvik ettiğini öne sürmüştür.
Cell Journal'da (Yakhteh) (2020) yer alan bu çalışmada, arsenik Trioksit ve sorafenibin U937 ve KG-1 hücreleri üzerindeki potansiyel etkileri araştırılmıştır.
Medical Oncology'de (2020) yayınlanan bu çalışma, OXPHOS ve glikolizi AML hücre hattı KG-1'de terapötik hedefler olarak değerlendirdi.
Bu İlaç Tasarımı, Geliştirme ve Terapi yayını, 2020, curcumin ve talidomid bileşiklerinin KG-1 hücrelerinde STAT3 ve Bcl-xL ekspresyonunu azaltarak sinerjik olarak apoptotik etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.
6. KG-1 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Aşağıda KG-1 hücreleri hakkında birkaç çevrimiçi kaynak bulunmaktadır.
- Süspansiyon hücrelerinin alt kültürlenmesi: Bu video, KG-1 gibi süspansiyon hücre kültürlerinin alt kültürleme protokolünü açıklamaktadır.
Aşağıdaki bağlantı KG-1 hücre kültürü protokolünü içermektedir:
- KG-1 hücre hattı: Bu web sitesi KG-1 hücre hattı hakkında temel hücre kültürü bilgileriyle doludur. Hücre hattı ortamı ve alt kültürleme ve kriyoprezerve ve proliferatif kültürlerin işlenmesi için protokoller hakkında bilgi içerir.
Referanslar
- Pelliccia, F., V. Ubertini ve N. Bosco, Araştırmalarda hücre hatlarını kullanmadan önce moleküler sitogenetik analizin önemi: KG-1a lösemi hücre hattı örneği. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., UzunkodlamayanRNA linc00239, akut miyeloid lösemi hücrelerinde PI3K/Akt/mTOR yolağının aktivasyonu yoluyla kısmen doksorubisine karşı malign davranışları ve kemorezistansı teşvik eder. Onkoloji Raporları, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Doksorubisin içeren nano-niyozomların hazırlanması ve incelenmesi ve akut miyeloblastik lösemi hücre hattı KG-1 üzerindeki toksisitesinin değerlendirilmesi. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Isırgan otu çayı, apoptozu teşvik ederek akut miyeloid lösemi hücrelerinin in vitro büyümesini inhibe eder. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.