Hep3B Hücreleri: Hepatoselüler Karsinom Araştırmaları ve Keşfi

HEP3B, ölümsüzleştirilmiş insan kaynaklı bir hepatosit karsinom hücre hattıdır. Hepatotoksisite ve ilaç metabolizması araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. HEP3B transfeksiyon verimliliği önemlidir; bu nedenle, bu hücreler karaciğer kanseri gelişimi, ilerlemesi ve terapötik müdahaleleri incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu makale, HEP3B hücre hattı ile çalışmanıza yardımcı olmak için gerekli tüm bilgileri kapsamaktadır. Temel olarak şunları içerecektir:

HEP3B hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
HEP3B hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri
HEP3B hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
HEP3B hücrelerinin araştırma alanındaki uygulamaları
HEP3B hücre hattı ile ilgili yayınlar
HEP3B hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1.hEP3B hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni

Bir hücre hattı hakkında ihtiyacınız olan birincil bilgi, kökeni ve genel özellikleridir. Araştırmanızda kullanımına karar vermenize ve onunla başa çıkmanıza yardımcı olabilir. Bu makale bölümü, HEP3B'nin kökeni ve özellikleri hakkında tüm temel bilgileri kapsamaktadır. Burada öğreneceksiniz: Hep 3B hücre hatları nedir? Hep3B hücrelerinin kökeni nedir? HEP3B hücrelerinin morfolojisi nedir?

Sürekli bir insan hepatoma hücre hattı olan HEP3B, hepatosellüler karsinomlu (HCC) 8 yaşındaki Afrikalı bir çocuğun karaciğer dokusundan köken almıştır. Aden ve meslektaşları tarafından 1979 yılında Barbara B. Knowles'ın laboratuvarında, Wistar Enstitüsü, Philadelphia, ABD'de kurulmuştur [1].
HEP3B hücreleri, kromozomunda hepatit B virüsü (HBV) genomunun entegrasyonuna sahiptir.
Bu hepatosit karsinom hücreleri epitelyal bir morfoloji sergiler.
HEP3B hücreleri 60 modal kromozom sayısına sahiptir. HepG2'nin aksine, yeniden düzenlenmiş bir kromozom 1'e sahip değildirler.

HepG2 ve Hep3B arasındaki fark nedir?

HepG2 ve HEP3B hücre başına düşen kromozom sayısı bakımından farklılık gösterir. HEP3B 60 kromozom içerirken, HepG2 hücreleri ortalama 55 kromozoma sahiptir. Ayrıca, HepG2 tümörijenik değildir ve hepatit B negatiftir, oysa HEP3B tümörijeniktir ve HBV pozitiftir.

Mikroskop altında yüksek büyütmede karaciğer karsinomu.

2.hEP3B hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri

Bir hücre hattının kültürleme bilgileri hakkında bilgi sahibi olmak, bu konuda size kolaylık sağlayabilir. Bu bölüm, HEP3B HBV hücre hattının kültüre alınmasıyla ilgili tüm önemli noktaları kapsamaktadır: Hep3B hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? HEP3B kültür koşulları nelerdir? HEP3B HCC hücrelerini nasıl kültüre alırsınız?

HEP3B Hücrelerinin Kültüre Alınması için Önemli Noktalar

İki Katına Çıkma Süresi:	HEP3B hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 36 saattir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	Bu hepatoma hücre hattı yapışıktır.
Bölünme oranı:	HEP3B hücreleri 1:2 ila 1:4 oranında alt kültüre alınır. Yapışık HEP3B hücreleri 1 x PBS ile durulanır ve ardından Accutase ayrıştırma solüsyonu ile inkübe edilir. 8 ila 10 dakika sonra taze ortam eklenir ve hücreler santrifüjlenir. Hasat edilen hücreler daha sonra dikkatlice yeniden süspanse edilir ve önerilen bölünme oranında kültür ortamı içeren flasklara dökülür.
Büyüme Ortamı:	HEP3B hücrelerini kültürlemek için %10 FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamin ve Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) içeren EMEM ortamı kullanılır.
Büyüme Koşulları:	HEP3B hücreleri sürekli %5 CO2 beslemeli 37°C nemlendirilmiş inkübatörde kültürlenir.
Depolama:	Dondurulmuş HEP3B hücreleri -150°C'nin altında bir sıcaklıkta elektrikli dondurucuda veya sıvı nitrojenin buhar fazında saklanır.
Dondurma İşlemi ve Ortamı:	HEP3B hücreleri için önerilen dondurma ortamı CM-1 veya CM-ACF'dir. Hücreler, hücre canlılığını korumak için dakikada sadece 1°C sıcaklık düşüşüne izin veren yavaş bir dondurma işlemi kullanılarak dondurulur.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş hücreler 40 ila 60 saniye boyunca 37°C'de önceden ayarlanmış bir su banyosunda çözdürülür. Daha sonra bu hücreler taze büyüme ortamına eklenir ve donmuş ortam öğelerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Toplanan hücreler yeniden süspanse edilir ve büyüme için yeni flasklara dağıtılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:	HEP3B hücre kültürü için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarı gereklidir.

10× ve 20× büyütmede Hep3B hücrelerinin yapışık yarı akıcı tabakası.

3.hEP3B hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar

HEP3B yaygın olarak kullanılan bir hepatoselüler karsinom hücre hattıdır. Bu bölüm, bu hepatoma hücrelerinin bazı temel avantajlarına ve sınırlamalarına odaklanacaktır.

Avantajlar

HEP3B hücrelerinin başlıca avantajları şunlardır:

Kültürü kolay	HEP3B hücrelerinin telaşlı hücre kültürü gereksinimleri yoktur, bu da onları bir araştırma laboratuvarında kullanımı ve bakımı kolay hale getirir. Bu, deneysel prosedürleri basitleştirir.
Yüksek transfeksiyon verimliliği	HEP3B hücreleri, genetik manipülasyon ve gen ifadesiyle ilgili çalışmalarda yaygın olarak kullanılmalarını sağlayan dikkate değer bir transfeksiyon verimliliği sergiler.
Tümörijenisite	HEP3B, bağışıklık sistemi baskılanmış bir fareye enjekte edildiğinde tümör oluşturabilen tümörijenik bir hepatoselüler karsinom hücre hattıdır. Bu, HEP3B ksenograft modelleri kullanılarak kanser ilerlemesi ve gelişiminin incelenmesine yardımcı olur.
HEP3B P53 durumu	HEP3B hücreleri, hepatoselüler karsinom (HCC) ve diğer kanserlere benzer bir P53 gen mutasyonuna sahiptir, bu da onları P53 mutasyonunun kanser büyümesi, gelişimi ve ilerlemesi üzerindeki etkilerini incelemek için uygun hale getirir.

Sınırlamalar

HEP3B hücre hattı ile ilgili sınırlama şudur:

İn vitro hücre modeli

HEP3B hücre hattı, hepatosellüler karsinom (HCC) hücrelerinin in vitro modeli olarak hizmet vermektedir. Bununla birlikte, canlı organizmalarda bulunan HCC'nin karmaşıklığını tam olarak temsil etmeyebilir. Sonuç olarak, in vitro deneysel sonuçlar in vivo gözlemlenenlerden farklı olabilir.

4.hEP3B hücrelerinin araştırma alanındaki uygulamaları

HEP3B hücre hattı biyomedikal araştırmalarda çeşitli araştırma uygulamaları sunmaktadır. HEP3B hücrelerinin temel araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:

Kanser biyolojisi: HEP3B bir insan hepatoselüler karsinom hücre hattıdır. HCC gelişimi ve ilerlemesinin altında yatan hücre ve moleküler mekanizmaları araştırmak için çok değerli bir hücre modelidir. Araştırmacılar bu hücreleri genetik mutasyonları, hücresel süreçleri ve karaciğer kanseri ile ilişkili hücre sinyal yolaklarını incelemek için kullanmaktadır. Örneğin bir çalışmada HEP3B hücreleri kullanılmış ve mikroRNA-223-3p'nin NLRP3 inflamazom bileşenlerini düzenlediği, proliferasyonu inhibe ettiği ve HEP3B hepatokarsinom hücrelerinin apoptozunu artırdığı bulunmuştur [2].
İlaç tarama ve geliştirme: HEP3B hücre hattı, karaciğer karsinomuna karşı yeni terapötikleri test etmek, taramak ve geliştirmek için de kullanılır. Ayrıca, farklı antikanser ilaçların ve tedavilerin toksisitesini ve etkinliğini değerlendirmek için kullanılır. Araştırmacılar bu hepatoma hücrelerini ilaç metabolizmasını incelemek için de kullanmışlardır. Araştırmacılar HEP3B hücrelerini kullanmış ve Cotinus coggygria bitki özütünün HEP3B hepatosit karsinom hücreleri üzerindeki sitotoksik potansiyelini değerlendirmişlerdir [3].
Viral enfeksiyonlar: HEP3B, hepatit B virüsü pozitif bir hücre hattıdır; bu nedenle, HBV ve HCV gibi karaciğer kanseri gelişimine yol açabilecek viral enfeksiyonları incelemek için kullanılır. Bu, viral enfeksiyonların daha iyi anlaşılmasına ve potansiyel antiviral tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olabilir. Örneğin, bir çalışmada HEP3B hepatosit kanser hücreleri kullanılmış ve hepatit c virüsü yayılımı için ubikitinasyonun önemi araştırılmıştır. Bulgular, ubikitin-spesifik proteaz 15'in (USP15) lipid damlacık oluşumu ve HCV RNA çevirisi de dahil olmak üzere hepatosit spesifik fonksiyonları düzenleyerek HCV'nin yayılmasında rol oynadığını göstermiştir [4].

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 305141

5.hEP3B hücre hattı ile ilgili yayınlar

Makalenin bu bölümünde HEP3B hücreleri ile ilgili birkaç ilginç araştırma yayını ele alınacaktır.

İnsan hepatosellüler kanseri Hep3B hücrelerinde luteolin ile apoptoz ve otofajinin düzenlenmesi

Biochemical and Biophysical Research Communications'daki (2019) bu yayın, luteolin bileşiğinin indüklediği endoplazmik retikulum stresinin P53-null HEP3B hücrelerinde P53'ten bağımsız bir şekilde anti-tümör etkiler gösterebileceğini öne sürmüştür.

Avicennia marina'dan izole edilen lupeol ile Hep3B karaciğer kanseri hücrelerinin potansiyel hedeflenmesi

Archiv der Pharmazie'deki (2021) bu çalışmada, HEP3B hücrelerine karşı potansiyel bir antikanser ajan olarak bir pentasiklik triterpenoid olan lupeol önerilmiştir.

Cnidium monnieri (L.) Cusson 'dan elde edilen etanol ekstresi, HepG2 ve Hep3B hepatoselüler karsinom hücrelerinde p53'ten bağımsız yolağın düzenlenmesi yoluyla hücre döngüsü durmasını ve apoptozu indükler

Bu makale Molecular Medicine Reports (2017) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma bulguları, Cnidium monnieri (L.) Cusson etanol ekstresinin, p53 ve Akt/GSK-3β sinyal yolağının düzenlenmesi yoluyla Hepatokarsinoma HepG2 ve HEP3B hücrelerinde hücre ölümünü (apoptoz) ve hücre döngüsü durmasını indüklediğini belirtmektedir.

Auranofin, PI3K/Akt sinyal yolunun inaktivasyonu yoluyla hepatoselüler karsinom Hep3B hücrelerinde sülforafan aracılı apoptozu artırır

Biomolecules and Therapeutics (2020) dergisinde yayınlanan bu araştırma, auranofinin sinerjik aktivite sergilediğini ve PI3K/AKT yolağı aktivasyonu yoluyla HEP3B hücrelerinin sülforafan aracılı apoptozunu desteklediğini öne sürmüştür.

Dairesel RNA-0072309, mikroRNA-665'i hedefleyerek Hep3B hücre hattında antitümör etkilere sahiptir

BioFactors'daki (2023) bu araştırma makalesi, dairesel RNA-0072309'un miRNA-665'i hedefleyerek hepatoselüler karsinom hücreleri HEP3B'de antitümör etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.

6.hEP3B hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

Aşağıda HEP3B hücreleri hakkında birkaç kaynak bulunmaktadır:

HEP3B transfeksiyonu: Bu video HEP3B hücreleri için transfeksiyon protokolünü açıklayacaktır.
HEP3B transfeksiyon verimliliği: Bu bağlantı, HEP3B DMEM ortam bileşimi, hücre pasajı ve HEP3B hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır. Ayrıca, transfeksiyon protokolünüzde HEP3B lipofectamine 3000 reaktifini optimize etmek için bilgi sağlar.

Aşağıdaki bağlantı HEP3B hücre kültürü protokolünü içerir:

HEP3B kültür koşulları: Bu bağlantı, Huh7 ve HEP3B kültürlerinin kullanımı ve bakımı için protokolü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
HEP3B hücreleri: Bu web sitesinde, HEP3B ortamı, hücre bölme protokolü, çözdürme ve proliferatif ve kriyoprezerve kültürlerin kullanımı dahil olmak üzere HEP3B hücreleri hakkında birçok bilgi bulunmaktadır.

Referanslar

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Hepatoselüler karsinom hücre hatlarının kökeni ve özellikleri. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p, apoptozu teşvik etmek ve hep3B hücrelerinin proliferasyonunu inhibe etmek için NLRP3'ü düzenler. Deneysel ve terapötik tıp, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. ve S. Selen-Isbilir, Cotinus coggygria ekstraktının Hep3B kanser hücre hattı üzerindeki sitotoksik etkisi. Doğal Ürün Araştırmaları, 2022: s. 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15, viral RNA translasyonu ve lipid damlacık oluşumunun düzenlenmesi yoluyla hepatit C virüsünün yayılmasına katılır. Viroloji Dergisi, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.