Ana sayfaya git

Hep3B Hücreleri: Hepatoselüler Karsinom Araştırmaları ve Keşifleri

HEP3B, insan kaynaklı ölümsüzleştirilmiş bir hepatosit karsinomu hücre hattıdır. Hepatotoksisite ve ilaç metabolizması araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. HEP3B transfeksiyon verimliliği oldukça yüksektir; bu nedenle, bu hücreler genellikle karaciğer kanserinin gelişimi, ilerlemesi ve terapötik müdahaleleri incelemek için kullanılır. Bu makale, HEP3B hücre hattıyla çalışmanıza yardımcı olmak için gerekli tüm bilgileri içermektedir. Makale başlıca şu konuları ele almaktadır:

📋 HEP3B Hücre Hattı — Önemli Bilgiler
Büyüme Ortamı
HEP3B hücrelerini kültürlemek için %10 FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamin ve Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) içeren EMEM besiyeri kullanılır.
Çiftleşme Süresi
HEP3B hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 36 saattir.
Büyüme Tipi
Bu hepatoma hücre hattı yapışkandır.
Biyogüvenlik Seviyesi
BSL-1
Satın Alınabileceği Yer
Cytion — HEP3B Sipariş Et
  1. HEP3B hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
  2. HEP3B hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri
  3. HEP3B hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
  4. Araştırmada HEP3B hücrelerinin uygulamaları
  5. HEP3B hücre hattı ile ilgili yayınlar
  6. HEP3B hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

HEP3B hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni

Bir hücre hattı hakkında ihtiyacınız olan temel bilgiler, kökeni ve genel özellikleridir. Bu bilgiler, araştırmanızda hücre hattını nasıl kullanacağınıza karar vermenize ve hücre hattıyla çalışmanıza yardımcı olabilir. Bu makale bölümü, HEP3B'nin kökeni ve özellikleri hakkında tüm temel bilgileri içermektedir. Burada öğrenecekleriniz: Hep 3B hücre hatları nedir? Hep3B hücrelerinin kökeni nedir? HEP3B hücrelerinin morfolojisi nedir?

  • Sürekli bir insan hepatoma hücre hattı olan HEP3B, hepatosellüler karsinom (HCC) hastası 8 yaşındaki Afrikalı bir çocuğun karaciğer dokusundan elde edilmiştir. 1979 yılında Aden ve meslektaşları tarafından ABD'nin Philadelphia kentindeki Wistar Enstitüsü'nde, Barbara B. Knowles'un laboratuvarında kurulmuştur [1]. 
  • HEP3B hücrelerinin kromozomunda hepatit B virüsü (HBV) genomu entegre edilmiştir.
  • Bu hepatosit karsinom hücreleri epitelyal bir morfoloji sergiler.
  • HEP3B hücrelerinin modal kromozom sayısı 60'tır. HepG2'den farklı olarak, yeniden düzenlenmiş 1. kromozoma sahip değildirler.

HepG2 ve Hep3B arasındaki fark nedir?

HepG2 ve HEP3B, hücre başına kromozom sayısı bakımından farklılık gösterir. HEP3B 60 kromozom içerirken, HepG2 hücreleri ortalama 55 kromozoma sahiptir. Ayrıca, HepG2 tümör oluşturmaz ve hepatit B negatifken, HEP3B tümör oluşturur ve HBV pozitiftir.

Mikroskop altında yüksek büyütmede karaciğer karsinomu.

HEP3B hücre hattının kültürleme bilgileri

Bir hücre hattının kültürleme bilgileri hakkında bilgi sahibi olmak, bu işlemi kolaylaştırır. Bu bölüm, HEP3B HBV hücre hattının kültürlenmesi için tüm önemli noktaları ele almaktadır. Bunlar arasında şunlar yer almaktadır: Hep3B hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? HEP3B kültür koşulları nelerdir? HEP3B HCC hücreleri nasıl kültürlenir?

HEP3B Hücrelerini Kültüre Etmenin Önemli Noktaları

Çoğalma Süresi:

HEP3B hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 36 saattir.

Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:

Bu hepatoma hücre hattı yapışkandır.

Bölünme oranı:

HEP3B hücreleri 1:2 ila 1:4 oranında alt kültürlenir. Yapışkan HEP3B hücreleri 1 x PBS ile durulanır ve ardından Accutase ayrıştırma çözeltisi ile inkübe edilir. 8 ila 10 dakika sonra taze besiyeri eklenir ve hücreler santrifüjlenir. Toplanan hücreler daha sonra dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve önerilen bölünme oranında kültür besiyeri içeren şişelere dökülür.

Büyüme Ortamı:

HEP3B hücrelerini kültürlemek için %10 FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamin ve Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) içeren EMEM besiyeri kullanılır.

Büyüme Koşulları: 

HEP3B hücreleri, sürekli %5 CO2 beslemesi olan 37°C nemlendirilmiş inkübatörde kültürlenir.

Saklama: 

Dondurulmuş HEP3B hücreleri, elektrikli dondurucuda veya sıvı azotun buhar fazında -150°C'nin altındaki sıcaklıkta saklanır.

Dondurma Süreci ve Ortamı:

HEP3B hücreleri için önerilen dondurma ortamı CM-1 veya CM-ACF'dir. Hücreler, hücre canlılığını korumak için dakikada sadece 1°C'lik bir sıcaklık düşüşüne izin veren yavaş dondurma işlemi kullanılarak dondurulur.

Çözme Süreci:

Dondurulmuş hücreler, önceden 37°C'ye ayarlanmış bir su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca çözdürülür. Daha sonra bu hücreler taze büyüme ortamına eklenir ve dondurma ortamı bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Toplanan hücreler yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme için yeni şişelere dağıtılır.

Biyogüvenlik Seviyesi:

HEP3B hücre kültürü için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarı gereklidir.

 

Hep3b cells

10× ve 20× büyütmede Hep3B hücrelerinin yapışık, kısmen birleşmiş tabakası.

HEP3B hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar

HEP3B, yaygın olarak kullanılan bir hepatosellüler karsinom hücre hattıdır. Bu bölümde, bu hepatoma hücrelerinin bazı temel avantajları ve sınırlamaları ele alınacaktır.

Avantajlar

HEP3B hücrelerinin başlıca avantajları şunlardır:

Kültürlenmesi kolay

HEP3B hücrelerinin hücre kültürü gereksinimleri çok titiz değildir, bu da araştırma laboratuvarlarında kullanım ve bakımlarını kolaylaştırır. Bu da deney prosedürlerini basitleştirir.

Yüksek transfeksiyon verimliliği

HEP3B hücreleri, olağanüstü transfeksiyon verimliliği sergilerler, bu da onları genetik manipülasyon ve gen ekspresyonu ile ilgili çalışmalarda yaygın olarak kullanılmalarını sağlar.

Tümörijeniklik

HEP3B, bağışıklık sistemi zayıflamış bir fareye enjekte edildiğinde tümör oluşturabilen, tümörjenik bir hepatoselüler karsinom hücre hattıdır. Bu, HEP3B ksenograft modelleri kullanılarak kanserin ilerlemesi ve gelişiminin incelenmesine yardımcı olur.

HEP3B P53 durumu

HEP3B hücreleri, hepatosellüler karsinom (HCC) ve diğer kanserlere benzer bir P53 gen mutasyonuna sahiptir; bu da onları, P53 mutasyonunun kanser büyümesi, gelişimi ve ilerlemesi üzerindeki etkilerini incelemek için uygun hale getirir.

 

Sınırlamalar

HEP3B hücre hattıyla ilişkili sınırlama şudur:

İn vitro hücre modeli

HEP3B hücre hattı, hepatosellüler karsinom (HCC) hücrelerinin in vitro modeli olarak hizmet eder. Ancak, canlı organizmalarda görülen HCC'nin karmaşıklığını tam olarak yansıtmayabilir. Sonuç olarak, in vitro deney sonuçları, in vivo gözlemlenenlerden farklı olabilir.

 

Araştırmada HEP3B hücrelerinin uygulamaları

HEP3B hücre hattı, biyomedikal araştırmalarda çeşitli araştırma uygulamaları sunar. HEP3B hücrelerinin başlıca araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:

  • Kanser biyolojisi: HEP3B, bir insan hepatosellüler karsinom hücre hattıdır. HCC'nin gelişimi ve ilerlemesinin altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları araştırmak için paha biçilmez bir hücre modelidir. Araştırmacılar, bu hücreleri karaciğer kanseriyle ilişkili genetik mutasyonları, hücresel süreçleri ve hücre sinyal yollarını incelemek için kullanır. Örneğin, HEP3B hücrelerini kullanan bir çalışmada, mikroRNA-223-3p'nin NLRP3 inflammasom bileşenlerini düzenlediği, proliferasyonu inhibe ettiği ve HEP3B hepatosellüler karsinom hücrelerinin apoptozunu arttırdığı bulunmuştur [2].
  • İlaç taraması ve geliştirme: HEP3B hücre hattı, karaciğer karsinomuna karşı yeni terapötiklerin test edilmesi, taranması ve geliştirilmesi için de kullanılır. Ayrıca, farklı antikanser ilaçlarının ve tedavilerinin toksisitesini ve etkinliğini değerlendirmek için de kullanılır. Araştırmacılar ayrıca bu hepatom hücrelerini ilaç metabolizmasını incelemek için de kullanmıştır. Araştırmacılar, HEP3B hücrelerini kullanarak Cotinus coggygria bitki özütünün HEP3B hepatosit karsinom hücreleri üzerindeki sitotoksik potansiyelini değerlendirmiştir [3].
  • Viral enfeksiyonlar: HEP3B, hepatit B virüsü pozitif bir hücre hattıdır; bu nedenle, karaciğer kanseri gelişimine yol açabilecek viral enfeksiyonları, yani HBV ve HCV'yi incelemek için kullanılır. Bu, viral enfeksiyonları daha iyi anlamaya ve potansiyel antiviral tedaviler geliştirmeye yardımcı olabilir. Örneğin, bir çalışmada HEP3B hepatosit kanser hücreleri kullanılmış ve hepatit C virüsünün yayılmasında ubikuitinasyonun önemi araştırılmıştır. Bulgular, ubikuitin spesifik proteaz 15'in (USP15), lipit damlacık oluşumu ve HCV RNA translasyonu dahil olmak üzere hepatosit spesifik fonksiyonları düzenleyerek HCV'nin yayılmasında rol oynadığını göstermiştir [4].

5. HEP3B hücre hattı üzerine yayınlar

Makalenin bu bölümü, HEP3B hücreleri ile ilgili birkaç ilginç araştırma yayınını ele alacaktır.

İnsan hepatoselüler kanser Hep3B hücrelerinde luteolin tarafından apoptoz ve otofajinin düzenlenmesi

Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) dergisinde yayınlanan bu makale, luteolin bileşiğinin neden olduğu endoplazmik retikulum stresinin, P53-bağımsız bir şekilde P53-negatif HEP3B hücrelerinde antitümör etkileri gösterebileceğini öne sürmüştür.

Avicennia marina'dan izole edilen lupeol ile Hep3B karaciğer kanseri hücrelerinin potansiyel hedeflenmesi

Archiv der Pharmazie (2021) dergisinde yayınlanan bu çalışma, pentasiklik triterpenoid lupeolün HEP3B hücrelerine karşı potansiyel bir antikanser ajanı olabileceğini öne sürmüştür.

Cnidium monnieri (L.) Cusson'dan elde edilen etanol ekstresi, HepG2 ve Hep3B hepatoselüler karsinom hücrelerinde p53'ten bağımsız yolun düzenlenmesini yoluyla hücre döngüsünün durmasını ve apoptozu indükler

Bu makale, Molecular Medicine Reports (2017) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma bulguları, Cnidium monnieri (L.) Cusson etanol ekstraktının, p53 ve Akt/GSK-3β sinyal yolunu düzenleyerek HepG2 ve HEP3B hepatosellüler karsinom hücrelerinde hücre ölümünü (apoptozu) ve hücre döngüsü durmasını indüklediğini belirtmektedir.

Auranofin, PI3K/Akt sinyal yolunu inaktive ederek hepatosellüler karsinom Hep3B hücrelerinde sülforafan aracılı apoptozu güçlendirir

Biomolecules and Therapeutics (2020) dergisinde yayınlanan bu araştırma, auranofinin sinerjik aktivite sergilediğini ve PI3K/AKT yolunun aktivasyonu yoluyla HEP3B hücrelerinde sülforafan aracılı apoptozu teşvik ettiğini öne sürmüştür.

Dairesel RNA-0072309, mikroRNA-665'i hedef alarak Hep3B hücre hattında antitümör etkiler gösterir

BioFactors (2023) dergisinde yayınlanan bu araştırma makalesi, sirküler RNA-0072309'un miRNA-665'i hedef alarak hepatosellüler karsinom hücreleri HEP3B üzerinde antitümör etkiler sergilediğini öne sürmüştür.

HEP3B hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

HEP3B hücreleri hakkında mevcut kaynaklardan bazıları şunlardır:

  • HEP3B transfeksiyonu: Bu videoda HEP3B hücreleri için transfeksiyon protokolü açıklanmaktadır.
  • HEP3B transfeksiyon verimliliği: Bu bağlantı, HEP3B DMEM besiyeri bileşimi, hücre pasajı ve HEP3B hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır. Ayrıca, transfeksiyon protokolünüzde HEP3B lipofectamine 3000 reaktifini optimize etmek için bilgiler de sağlar.

Aşağıdaki bağlantı, HEP3B hücre kültürü protokolünü içerir:

  • HEP3B kültür koşulları: Bu bağlantı, Huh7 ve HEP3B kültürlerinin işlenmesi ve bakımı için protokolü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
  • HEP3B hücreleri: Bu web sitesinde, HEP3B besiyeri, hücre bölme, çözme ve proliferatif ve kriyoprezervatif kültürlerin işlenmesi protokolleri dahil olmak üzere HEP3B hücreleri hakkında birçok bilgi bulunmaktadır.

Referanslar

  1. Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Hepatosellüler karsinom hücre hatlarının kökeni ve özellikleri. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): s. 1040.
  2. Wan, L., et al., miRNA-223-3p, NLRP3'ü düzenleyerek apoptozu teşvik eder ve hep3B hücrelerinin proliferasyonunu inhibe eder. Deneysel ve terapötik tıp, 2018. 15(3): s. 2429-2435.
  3. Danjolli-Hashani, D. ve S. Selen-Isbilir, Cotinus coggygria özütünün Hep3B kanser hücre hattı üzerindeki sitotoksik etkisi. Doğal Ürün Araştırmaları, 2022: s. 1-4.
  4. Kusakabe, S. ve ark., USP15, viral RNA translasyonunu ve lipit damlacık oluşumunu düzenleyerek hepatit C virüsünün yayılmasına katkıda bulunur. Journal of Virology, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.

 

Farklı bir ülkede olduğunuzu veya şu anda seçili olandan farklı bir tarayıcı dili kullandığınızı tespit ettik. Önerilen ayarları kabul etmek ister misiniz?

Kapat