HT22 Hücre Hattı
HT22, sinirbilim araştırmalarında yaygın olarak kullanılan bir fare nöronal hücre hattıdır. Nörodejeneratif bozuklukları incelemek ve potansiyel nöroprotektif tedavileri veya terapileri test etmek için değerlidir. Ayrıca, HT22 hücreleri glutamata duyarlıdır, bu nedenle glutamatın neden olduğu toksisiteyi veya nöronal hasarı araştırmak için kullanılır.
- Büyüme Ortamı
- HT22 hücrelerinin kültürlenmesi için DMEM besiyeri kullanılır. Optimum hücre büyümesi için %10 FBS, 4,5 g/L glikoz, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM sodyum piruvat ile takviye edilir.
- İkiye Katlanma Süresi
- HT22 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 15 saattir.
- Büyüme Tipi
- HT22 hücreleri yapışkandır.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Temin Edilebilir
- Cytion — HT22 Siparişi
Bu makale, araştırma çalışmalarınızda size yardımcı olabilecek HT22 hücrelerinin önemli özelliklerini vurgulamaktadır. Makalede başlıca şu konular ele alınacaktır:
- HT22 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
- HT22 hücre hattı kültürü bilgileri
- HT22 hücre hattının avantajları ve dezavantajları
- HT22 hücre hattının araştırma uygulamaları
- HT22 hücrelerini konu alan araştırma yayınları
- HT22 Hücreleri için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
HT22 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
Makalenin bu bölümü, HT22 hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri hakkında bilgi verecektir. Bir hücre dizisi üzerinde çalışmaya başlamadan önce bu bilgileri bilmek gereklidir. Burada şunları öğreneceksiniz: HT22 hücreleri nedir? HT22 hipokampal hücrelerinin morfolojisi nedir? HT22 hücrelerinin boyutu nedir?
HT22, fare beyninin hipokampus bölgesinden elde edilen sürekli bir hücre hattıdır. Sıcaklığa duyarlı bir poliomavirüs olan simian virüs 40 (SV40) T antijeni aracılığıyla fare nöronal dokularının ölümsüzleştirilmesi yoluyla geliştirilen ana HT-4 hücre hattının bir alt klonudur.
Bu hücreler, hipokampal kökenli olgun nöronlar gibi glutamat ve kolinerjik reseptörlere sahip olmadıkları için olgun hipokampal hücrelerden farklıdır. Bu nedenle, hafıza ile ilgili araştırma çalışmaları için uygun değildirler [1].
HT22 hücreleri, epitel hücresi benzeri bir görünüme sahiptir.
HT22 hücre hattı kültürü bilgileri
HT22 hücreleri, sinirbilim araştırma laboratuvarlarında kullanılır. Bu hücreleri kültürlemeden önce, araştırmacılar çalışmalarını kolay ve verimli hale getirecek temel hücre kültürü bilgilerini ararlar. Bu bölüm, HT22 hücrelerinin kültürlenmesi için tüm önemli noktaları ele almaktadır. Şunları öğreneceksiniz: HT22 hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? HT22 hücreleri nasıl kültürlenir? HT22 hücre kültürü protokolü nedir? HT22 hücre besiyeri nedir?
HT22 Hücrelerinin Kültürüyle İlgili Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
HT22 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 15 saattir.
Yapışkan mı, Süspansiyon Halinde mi:
HT22 hücreleri yapışkandır.
Alt Kültür Oranı:
HT22 hipokampal hücreleri için alt kültür oranı 1:3 ila 1:6 arasındadır. Kısaca, besiyeri çıkarılır ve yapışkan hücreler 1 x PBS ile durulanır. Accutase ayrıştırma çözeltisi şişeye eklenir ve hücreler ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Ardından, taze kültür besiyeri eklenir ve hücreler santrifüjleme için bir şişeye toplanır. Elde edilen hücre peleti dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler büyüme için bir kültür şişesine aktarılır.
Büyüme Ortamı:
HT22 hücrelerinin kültürlenmesi için DMEM besiyeri kullanılır. Optimum hücre büyümesi için %10 FBS, 4,5 g/L glikoz, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM sodyum piruvat ile takviye edilir.
Büyüme Koşulları:
HT22 hücre kültürleri, %5 CO2 beslemesi olan nemlendirilmiş bir inkübatörde (37 °C sıcaklık) tutulur.
Saklama:
Dondurulmuş HT22 hücreleri, uzun süreli saklama için -150 °C'nin altındaki sıcaklıkta, sıvı azotun buhar fazında veya ultra düşük sıcaklıklı elektrikli dondurucuda saklanabilir.
Dondurma Süreci ve Ortam:
HT22 hücreleri, yavaş dondurma yöntemi kullanılarak CM-1 veya CM-ACF ortamlarında dondurulabilir. Bu işlem, numunenin sıcaklığının dakikada sadece 1 °C düşmesini sağlar, hücreleri şoktan korur ve canlılıklarını korumaya yardımcı olur.
Çözme Süreci:
Hücreler, küçük bir buz topakçığı kalana kadar 37 °C'lik su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca çözdürülür. Ardından, hücrelere kültür ortamı eklenir ve dondurma ortamı bileşenlerini ortadan kaldırmak için santrifüjlenir. Hücre peleti yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler, kültür ortamı içeren yeni şişeye dökülür. Bunun ardından hücreler, en az 24 saat boyunca 37 °C'lik bir inkübatörde inkübe edilir.
Biyogüvenlik Seviyesi:
HT22 hücrelerini kültürlemek için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar ortamı zorunludur.
HT22 hücre hattının avantajları ve dezavantajları
HT22 hipokampal hücreleri, diğer nöronal hücre hatlarından ayıran bazı artı ve eksilerle ilişkilidir. Hücre hattının bazı önemli avantaj ve dezavantajları burada belirtilmiştir.
Avantajlar
HT22 fare nöronal hücre hattının avantajları şunlardır:
-
Hızlı Büyüme Hızı
HT22 hücrelerinin ikiye katlanma süresi 15 saattir, bu da hızlı ve verimli deneyler yapılmasını sağlar ve zamanında araştırma sonuçları elde edilmesine yardımcı olur.
-
Ölümsüzleştirme
HT22, uzun süreler boyunca sürekli büyümeyi sağlayan ölümsüzleştirilmiş bir hücre hattıdır. Bu, hücrelerin tutarlı bir şekilde temin edilebilmesini sağlar, zaman ve maliyeti azaltır ve tutarlı sonuçlar veren uzun vadeli deneyleri kolaylaştırır.
Dezavantajlar
HT22 hücrelerinin dezavantajları şunlardır:
-
Fare Kökenli
HT22 hücre hattı, fare beyin hipokampus dokusundan elde edilmiştir; bu, insan nöron hücrelerinin fizyolojisi ve davranışlarının karmaşıklığını tam olarak yansıtmayabilir ve bu da hücrelerin translasyonel alaka düzeyini sınırlayabilir.
4. HT22 hücre hattının araştırma uygulamaları
HT22 hücreleri, nörobiyoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının birkaç umut verici uygulaması, makalenin bu bölümünde ele alınmaktadır:
- Nörobilim araştırmaları: HT22 hücreleri, nörodejeneratif hastalık araştırmalarında, yani Alzheimer ve Parkinson hastalığı araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler, bu hastalıklarla ilgili nörotoksisite ve oksidatif stres mekanizmalarını incelemek için değerli bir araştırma aracı olarak kabul edilmektedir. 2020 yılında yapılan bir araştırma, PI3K/AKT/CREB yolunun HT22 hücrelerinde hipergliseminin neden olduğu nöral toksisitede rol oynadığını ortaya koymuştur [2]. Benzer şekilde, yakın zamanda yapılan bir çalışmada, Nrf2/HO-1 yolunun ve NF-κB sinyal ekseninin HT22 amiloid beta toksisitesinde önemli roller oynadığı öne sürülmüştür [3].
- İlaç taraması: HT22 hücreleri, ilaç testi ve tarama amaçları için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücreler, araştırmacıların nörodejeneratif hastalıklarla mücadele için nöroprotektif etkiler sergileyen potansiyel terapötik ajanları tanımlamasına yardımcı olmaktadır. 2019 yılında yapılan bir çalışmada, glutamat ile muamele edilmiş HT22 hipokampal hücrelerinde tetrahidro kurkumin bileşiğinin nöroprotektif potansiyeli araştırılmıştır. Burada, glutamat HT22 hücrelerinde oksidatif stresi indükler ve mitojenle aktive olan protein kinazları aktive ederek hücre ölümüne neden olur [4].
5. HT22 hücrelerini konu alan araştırma yayınları
HT22 hücre hattını ele alan bazı ilginç araştırma makaleleri şunlardır:
International Journal of Molecular Medicine (2019) dergisinde yayınlanan bu çalışma, L-glutamat hasarı görmüş HT22 hücrelerinde Crocus sativus L.'den izole edilen bir bileşik olan krokinin nöroprotektif potansiyelini ortaya koymuştur.
Neuropharmacology (2018) dergisinde yayınlanan bu makale, oksindol türevlerinin oksidatif stresin neden olduğu HT22 hücre ölümüne karşı koruma sağladığını bildirmiştir.
Bu araştırma makalesi 2019 yılında Journal of Ginseng Research dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, HT22 hücre hattını kullanarak doğal bir ürün olan ginsenosid Rb2'nin nöroprotektif etkilerini araştırmıştır. Çalışma, ginsenosid rb2'nin fare hipokampal hücreleri HT22'de glutamatın neden olduğu oksidatif stresi ve hücre ölümünü etkili bir şekilde azalttığını ortaya koymuştur.
Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) dergisinde yayınlanan bu çalışma, HT22 hücre hattında gümüş nanopartiküllerin sitotoksik potansiyelini değerlendirmiştir.
Ferrostatin-1, HT-22 hücrelerini oksidatif toksisiteden korur
Bu araştırma makalesi 2020 yılında Neural regeneration research dergisinde yayınlanmıştır. Makalede, ferroptosis inhibitörü olan ferrostatin-1'in HT22 hipokampal hücrelerinde oksidatif toksisiteyi önlediği öne sürülmüştür.
HT22 Hücreleri için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
HT22 hücreleri ile ilgili bazı çevrimiçi kaynaklar, bu hücrelerin transfeksiyon, farklılaşma ve hücre kültürü protokollerini açıklamaktadır:
- HT22 transfeksiyonu: Bu belge, 24 ve 96 kuyulu hücre kültürü plakalarında HT22 transfeksiyonu için optimize edilmiş bir protokol içerir.
- HT22 hücre farklılaşması: Bu makale, HT22 farklılaşma protokolü hakkında kapsamlı bir rehber niteliğindedir.
Aşağıdaki bağlantı HT22 hücre kültürü protokolünü içerir:
- HT22 hücre alt kültürü: Bu bağlantı, HT22 hücre hattı için alt kültür protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır. Ayrıca, hücrelerde nörotoksisiteyi indükleme protokolünü öğrenmenize de yardımcı olacaktır.
- HT22 hipokampal hücreleri: Bu web sitesi, HT22 hücre çoğalma süresi, besiyeri ve hücre kültürü protokolleri hakkında birçok yararlı bilgi içerir.
Referanslar
- He, M., et al., Farklılaşma, HT22 nöronlarında eksitotoksisiteye yatkınlık yaratır. Neural Regen Res, 2013. 8(14): s. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin, PI3K/Akt/CREB sinyal yolunu kullanarak HT22 hücrelerinin yüksek glikoz kaynaklı nörotoksisiteye maruz kalmasını önler. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: s. 241.
- Zhang, R.-l., ve ark., Berberinin Nrf2/HO‐1 yoluyla HT22 hücrelerinde β-amiloid kaynaklı nörotoksisiteye karşı koruyucu etkileri. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: s. 106-210.
- Park, C.-H., et al., Hipokampal HT22 hücrelerinde glutamatın neden olduğu oksidatif strese karşı tetrahidrokurkuminin nöroprotektif etkileri. Molecules, 2019. 25(1): s. 144.