HT22 Hücre Hattı

HT22, sinirbilim araştırmalarında yaygın olarak kullanılan bir murin nöronal hücre hattıdır. Nörojeneratif bozuklukları incelemek ve potansiyel nöroprotektif terapileri veya tedavileri test etmek için değerlidir. Ayrıca, HT22 hücreleri glutamata duyarlıdır, bu nedenle glutamat kaynaklı toksisiteyi veya nöronal hasarı araştırmak için kullanılır.

Bu makale, HT22 hücrelerinin araştırma çalışmalarınızda size yardımcı olabilecek zorunlu yönlerini vurgulamaktadır. Temel olarak tartışılacaktır:

HT22 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
HT22 hücre hattı kültürleme bilgileri
HT22 hücre hattının avantajları ve dezavantajları
HT22 hücre hattının araştırma uygulamaları
HT22 hücrelerini içeren araştırma yayınları
HT22 Hücreleri için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1. HT22 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni

Makalenin bu bölümü HT22 hücrelerinin kökeni ve genel özelliklerine ışık tutacaktır. Bir hücre hattı üzerinde çalışmaya başlamadan önce bu bilgiyi bilmek gereklidir. Burada şunları öğreneceksiniz: HT22 hücreleri nedir? HT22 hipokampal hücrelerinin morfolojisi nedir? HT22 hücre boyutu nedir?

HT22, fare beyninin hipokampus bölgesinden türetilen sürekli bir hücre hattıdır. Sıcaklığa duyarlı poliomavirüs simian virüs 40 (SV40) T antijeni aracılığıyla murin nöronal dokularının ölümsüzleştirilmesiyle geliştirilen ebeveyn HT-4 hücre hattının bir alt klonudur.

Bu hücreler, hipokampal kökenli olgun nöronlar gibi glutamat ve kolinerjik reseptörlerden yoksun oldukları için olgun hipokampal hücrelerden farklıdır. Bu nedenle, hafıza ile ilgili araştırma çalışmaları için uygun değildirler [1].

HT22 hücreleri epitel hücre benzeri bir görünüme sahiptir.

Alzheimer hastalığında nöronlar arasında oluşan Amiloid Plaklar.

2. HT22 hücre hattı kültürleme bilgileri

HT22 hücreleri nörobilim araştırma laboratuvarlarında kullanılmaktadır. Araştırmacılar bu hücreleri kültüre etmeden önce çalışmalarını kolay ve verimli hale getirecek temel hücre kültürü bilgilerini ararlar. Bu bölüm HT22 hücrelerinin kültüre alınmasıyla ilgili tüm önemli noktaları kapsamaktadır. Şunları öğreneceksiniz HT22 hücresinin ikiye katlanma süresi nedir? HT22 hücrelerini nasıl kültüre alırsınız? HT22 hücre kültürü protokolü nedir? HT22 hücre ortamı nedir?

HT22 Hücrelerini Kültürlemek için Önemli Noktalar

İki Katına Çıkma Süresi:	HT22 hücresinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 15 saattir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	HT22 hücreleri yapışıktır.
Alt Kültivasyon Oranı:	HT22 hipokampal hücreleri için alt kültürleme oranı 1:3 ila 1:6'dır. Kısaca, ortam çıkarılır ve yapışık hücreler 1 x PBS ile durulanır. Akkutaz ayrıştırıcı çözeltisi şişeye eklenir ve hücreler ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Daha sonra taze kültür ortamı eklenir ve hücreler santrifüj için bir şişede toplanır. Elde edilen hücre peleti dikkatlice yeniden süspanse edilir ve hücreler büyüme için bir kültür şişesine dağıtılır.
Büyüme Ortamı:	HT22 hücrelerini kültürlemek için DMEM ortamı kullanılır. Optimum hücre büyümesi için %10 FBS, 4,5 g/L Glukoz, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM Sodyum piruvat ile desteklenir.
Büyüme Koşulları:	HT22 hücre kültürleri nemlendirilmiş bir inkübatörde (37 °C sıcaklık) %5_{CO2 kaynağı}ile tutulur.
Depolama:	Dondurulmuş HT22 hücreleri -150 °C'nin altındaki sıcaklıklarda sıvı nitrojenin buhar fazında ya da ultra düşük sıcaklıktaki elektrikli dondurucuda uzun süreli olarak saklanabilir.
Dondurma İşlemi ve Ortamı:	HT22 hücreleri yavaş dondurma yöntemi kullanılarak CM-1 veya CM-ACF ortamında dondurulabilir. Bu işlem numunenin sıcaklığında dakikada sadece 1 °C'lik bir düşüşe izin verir, hücreleri şoktan korur ve canlılıklarının korunmasına yardımcı olur.
Çözdürme İşlemi:	Hücreler 37 °C su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca küçük bir buz kümesi kalana kadar çözdürülür. Daha sonra hücrelere kültür ortamı eklenir ve donan ortam bileşenlerini ortadan kaldırmak için santrifüjlenir. Hücre peleti yeniden süspanse edilir ve hücreler kültür ortamı içeren yeni şişeye dökülür. Bunu takiben, hücreler en az 24 saat boyunca bir inkübatörde 37 °C'de inkübe edilir.
Biyogüvenlik Seviyesi:	HT22 hücrelerini kültürlemek için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar ortamları zorunludur.

hücre kültüründe HT22 hücrelerinin %30 ve %90 oranında birleşmiş monolayerleri.

3. HT22 hücre hattının avantajları ve dezavantajları

HT22 hipokampal hücreleri, onları diğer nöronal hücre hatlarından ayıran bazı artılar ve eksilerle ilişkilidir. Hücre hattının bazı önemli avantaj ve dezavantajları burada belirtilmiştir.

Avantajlar

HT22 murin nöronal hücre hattının avantajları şunlardır:

Hızlı Büyüme Oranı
HT22 hücreleri 15 saatlik bir ikiye katlanma süresine sahiptir, bu da hızlı ve verimli deneylere olanak tanır ve zamanında araştırma sonuçlarına yardımcı olur.
Ölümsüzleştirme
HT22, uzun süreler boyunca sürekli büyümeyi sağlayan ölümsüzleştirilmiş bir hücre hattıdır. Bu, hücrelerin tutarlı bir şekilde bulunmasını sağlar, zaman ve maliyeti azaltır ve tutarlı sonuçlarla uzun vadeli deneyleri kolaylaştırır.

Dezavantajlar

HT22 hücrelerinin dezavantajları şunlardır:

Murin Kökenli
HT22 hücre hattı, insan nöron hücresi fizyolojisi ve davranışının karmaşıklığını tam olarak temsil edemeyen fare beyni hipokampus dokusundan türetilmiştir ve bu da translasyonel alaka düzeyini sınırlamaktadır.

4. HT22 hücre hattının araştırma uygulamaları

HT22 hücreleri nörobiyoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Makalenin bu bölümünde bu hücre hattının birkaç umut verici uygulaması tartışılmaktadır:

Sinirbilim araştırmaları: HT22 hücreleri, Alzheimer ve Parkinson hastalığı gibi nörodejeneratif hastalık araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hastalıklarla ilgili nörotoksisite ve oksidatif stres mekanizmalarını incelemek için değerli bir araştırma aracı olarak kabul edilirler. 2020 yılında yapılan bir araştırma, PI3K/AKT/CREB yolağının HT22 hücrelerinde hiperglisemi kaynaklı nöral toksisiteye dahil olduğunu ortaya koymuştur [2]. Benzer şekilde, yakın zamanda yapılan bir çalışma, Nrf2/HO-1 yolağının ve NF- κB sinyal ekseninin HT22 amiloid beta toksisitesinde önemli roller oynadığını öne sürmüştür [3].
İlaç taraması: HT22 hücreleri ilaç testi ve taraması amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacıların nörodejeneratif hastalıklarla mücadele için nöroprotektif etkiler sergileyen potansiyel terapötik ajanları belirlemelerine yardımcı olurlar. 2019'da yapılan bir çalışmada, glutamatla muamele edilmiş HT22 hipokampal hücrelerinde tetrahidro kurkumin bileşiğinin nöroprotektif potansiyeli araştırılmıştır. Burada, glutamat HT22 hücrelerinde oksidatif stresi indüklemekte ve mitojenle aktive olan protein kinazları aktive ederek hücre ölümüne neden olmaktadır [4].

€800,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 305158

5. HT22 hücrelerini içeren araştırma yayınları

İşte HT22 hücre hattını içeren bazı ilginç araştırma makaleleri:

HT22 hücrelerinde ve Alzheimer hastalığı olan farelerde antioksidan aktiviteler yoluyla krosinin nöroprotektif etkilerinin araştırılması

International Journal of Molecular Medicine'de (2019) yer alan bu çalışma, Crocus sativus L.'den izole edilen bir bileşik olan krosinin,L-glutamathasarlıHT22 hücrelerindenöroprotektif potansiyelini ortaya koymuştur.

Yeni oksindol türevleri fare hipokampal HT22 hücrelerinde oksidatif stres kaynaklı hücre ölümünü önlüyor

Neuropharmacology'deki (2018) bu yayın, oksindol türevlerinin oksidatif stresin neden olduğu HT22 hücre ölümüne karşı koruma sağladığını bildirmiştir.

Ginsenosid Rb2, HT22 hücrelerinde glutamat aracılı oksidatif stresi ve nöronal hücre ölümünü baskılar

Bu araştırma makalesi 2019 yılında Journal of Ginseng Research dergisinde yayımlanmıştır. Bu çalışmada, HT22 hücre hattı kullanılarak doğal bir ürün olan ginsenosid Rb2'nin nöroprotektif etkileri araştırılmıştır. Çalışma, ginsenosid rb2'nin fare hipokampal hücreleri HT22'de glutamat kaynaklı oksidatif stresi ve hücre ölümünü etkili bir şekilde azalttığını buldu.

Gümüş nanopartiküller, PI3K/AKT/mTOR sinyal yolu üzerinden otofaji ve apoptoz yoluyla HT22 hücrelerinde sitotoksisiteyi indükledi

Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) dergisinde yayımlanan bu çalışmada, HT22 hücre hattında gümüş nanopartiküllerin sitotoksik potansiyeli değerlendirilmiştir.

Ferrostatin-1 HT-22 hücrelerini oksidatif toksisiteden korur

Bu araştırma makalesi 2020 yılında Neural regeneration research dergisinde yayımlanmıştır. Bir ferroptoz inhibitörü olan ferrostatin-1'in HT22 hipokampal hücrelerinde oksidatif toksisiteyi önlediğini öne sürmüştür.

6. HT22 Hücreleri için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

HT22 hücreleriyle ilgili bazı çevrimiçi kaynaklar transfeksiyon, farklılaşma ve hücre kültürü protokollerini açıklamaktadır:

HT22 transfeksiyonu: Bu belge 24 ve 96 kuyulu hücre kültürü plakalarında HT22 transfeksiyonu için optimize edilmiş bir protokol içerir.
HT22 hücre farklılaşması: Bu makale HT22 farklılaştırma protokolü hakkında size kapsamlı bir şekilde rehberlik edecektir.

Aşağıdaki bağlantı HT22 hücre kültürü protokolünü içerir:

HT22 hücre alt kültürleme: Bu bağlantı, HT22 hücre hattı için alt kültürleme protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır. Ayrıca, hücrelerde nörotoksisiteyi indükleme protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
HT22 hipokampal hücreler: Bu web sitesi HT22 hücre ikiye katlama süresi, medya ve hücre kültürü protokolleri hakkında birçok yararlı bilgi içermektedir.

Referanslar

He, M., ve diğerleri, Farklılaşma HT22 nöronlarında eksitotoksisiteye karşı duyarlılık yaratır. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
Zhang, S., et al., Fisetin, HT22 hücrelerini PI3K/Akt/CREB sinyal yolu aracılığıyla yüksek glikoz kaynaklı nörotoksisiteden korur. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
Zhang, R.-l., et al., Berberinin HT22 hücrelerinde β-amiloid kaynaklı nörotoksisiteye karşı Nrf2/HO-1 yolağı üzerinden koruyucu etkileri. Biyoorganik Kimya, 2023. 133: p. 106-210.
Park, C.-H., et al., Hipokampal HT22 hücrelerinde glutamat kaynaklı oksidatif strese karşı tetrahidrokuminin nöroprotektif etkileri. Moleküller, 2019. 25(1): p. 144.