Ana sayfaya git

HT-29 Hücre Hattı

HT-29, çok çeşitli kanser ve toksikoloji araştırma uygulamalarına sahip bir insan kolorektal kanser hücre hattıdır. Örneğin, bu hücreler kolorektal kansere karşı standart kemoterapi tedavilerine duyarlıdır. Ayrıca, HT-29 hücre hattı, bağırsak epitelinin bakteriyel enfeksiyona verdiği yanıtı araştırmak için iyi karakterize edilmiş bir in vitro modeldir. HT-29 hücreleri, olgun bağırsak hücrelerinin, yani enterositlerin özelliklerini taklit eder ve bu nedenle bağlanma ve mekanistik çalışmalar için uygundur.

📋 HT-29 Hücre Hattı — Önemli Bilgiler
Büyüme Ortamı
Ürün sayfasına bakın
İkiye Katlanma Süresi
Ürün sayfasına bakın
Büyüme Tipi
Yapışkan
Biyogüvenlik Seviyesi
BSL-1

HT-29 hücreleri: Köken ve genel bilgiler

Herhangi bir hücre hattını kullanmadan önce, hücre hattının genel özellikleri ve kökeni hakkında bilgi sahibi olmalısınız. Bu bölümde şunları öğreneceksiniz: HT-29 hücreleri nedir? HT-29 bir kolorektal kanser hücre hattı mıdır? HT-29 hücrelerinin morfolojisi nedir?

HT-29 hücre hattı nedir? HT-29, 1964 yılında Trempe ve Fogh tarafından oluşturulan bir kolorektal adenokarsinom hücre hattıdır. Hücreler, başlangıçta kolorektal adenokarsinomlu 44 yaşındaki Kafkasyalı bir kadının primer tümöründen elde edilmiştir [1]. Oluşturulduğundan bu yana, bu hücre hattı kanserlerin biyolojisini incelemek için kullanılmaktadır.

HT-29 hücrelerinin morfolojisi: HT-29 hücre hattı genellikle epitel benzeri bir morfolojiye sahiptir. Farklılaşmış hücreler tek tabakalı olarak büyür, sıkı hücre-hücre bağlantıları oluşturur ve apikal fırça kenarına sahiptir. Bu hücreler glikoz eksikliği olan ortamda yetiştirilirse veya butirat veya asit gibi indükleyiciler verilirse, enterosit benzeri özellikler sergilerler.

Hücre boyutu: HT-29 kolorektal kanser hücre hattının çapı 11 μm'dir.

Genom ve ploidi: HT-29 hücre hattı için modal kromozom sayısı 71'dir. Bu sayı 68-72 arasında değişebilir. Ayrıca, HT-29 hücreleri için basitleştirilmiş kromozom sayısı hiper-triploiddir ve 2S bileşeni %2,4 oranında görülür.

HT29 MTX nedir? HT29 MTX, 10 µM Metotreksata adaptasyon yoluyla orijinal HT-29 insan kolon kanseri hücre hattından izole edilen metotreksata dirençli bir hücre hattıdır. Bu hücreler, mukus salgılayan olgun goblet hücrelerinin özelliklerini gösterir.

Mikroskop altında kolorektal kanser hücrelerinin bölünmesi ve hareketi.

HT-29 hücre hattının hücre kültürü bilgileri

Bir hücre hattının temel kültür gereksinimlerini bilmek, bu hücre hattıyla çalışmanızı kolaylaştırabilir. Şunları bilmelisiniz: HT-29 hücre hattının ikiye katlanma süresi nedir? HT-29 hücrelerinin ekim yoğunluğu nedir? HT-29 hücreleri için hangi besiyeri kullanılır?

Çoğalma süresi

HT-29 hücre hattının ortalama ikiye katlanma süresi 24 saattir.

Yapışkan/süspansiyon

HT-29, yapışkan bir hücre hattıdır. 

Tohumlama yoğunluğu

HT-29 hücreleri için önerilen tohumlama yoğunluğu 3 x 104 hücre/cm2'dir. Büyütülmüş hücreler 1X PBS ile yıkanır ve Accutase ile 8-10 dakika inkübe edildikten sonra ayrıştırılır. Taze besiyeri eklenir ve hücreler santrifüjlenir. Hücre peleti yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler önerilen hücre yoğunluğunda yeni şişelere dağıtılır.

Büyüme ortamı

HT-29 hücrelerinin optimal kültürü için 2,5 mM L-glutamin ve %10 FBS ile takviye edilmiş Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) kullanılır. Ortam haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.

Büyüme koşulları

HT-29 hücrelerinin büyümesi için 37°C sıcaklıkta ve %5 CO2 beslemeli nemlendirilmiş bir inkübatör gereklidir.

Saklama

Bu hücreler, -195°C'nin altındaki sıvı azotun buhar fazında saklanır.  

 

Dondurma ortamı ve süreci

HT-29 hücre hattı için kullanılan dondurma ortamı CM-1 veya CM-ACF'dir. Hücreler, sıcaklıkta 1 °C'lik bir düşüşe neden olan ve hücrelerin canlılığını etkili bir şekilde koruyan yavaş dondurma işlemiyle dondurulur.

Çözme işlemi

Dondurulmuş HT-29 hücreleri, 37°C sıcaklığa ayarlanmış bir su banyosunda çözülür. Bu hücreler yeniden süspansiyon haline getirilebilir ve doğrudan taze büyüme ortamı şişesine aktarılabilir. Bunun aksine, çözülmüş hücreler santrifüjlenerek dondurma ortamı bileşenleri giderilebilir, taze ortamda yeniden süspansiyon haline getirilebilir ve şişelerde kültürlenebilir.

Biyogüvenlik seviyesi

HT-29 hücre hattının işlenmesi ve muhafaza edilmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 kullanılır.

Ht 29 cells

10x ve 20x büyütmede HT-29 hücreleri.

HT-29 hücreleri: Avantajlar ve Sınırlamalar

Her hücre hattının, onu diğer hücre hatlarından ayıran kendine özgü artıları ve eksileri vardır. Bu bölümde, HT-29 hücreleriyle ilgili başlıca avantajlar ve sınırlamalar ele alınacaktır.

Avantajlar

HT-29 hücrelerinin başlıca avantajları şunlardır:

  • Kültürlenmesi Kolay

    HT-29 hücre hattı, kültüre edilme konusunda karmaşık gereksinimler içermeyen, kullanımı ve bakımı kolay bir hücre hattıdır. Araştırma laboratuvarlarında yaygın olarak kültüre edilmektedir.

  • Bağırsak Hücrelerinin İn Vitro Modeli

    HT-29 hücreleri, belirli kültür koşulları altında olgun bağırsak hücrelerine (enterositler ve mukus üreten hücreler) farklılaşabilir. Gıda sindirimi ve biyoyararlanımı incelemek için hücresel model olarak kullanılırlar.

  • Yüksek Transfeksiyon Verimliliği

    HT-29 kolon kanseri hücreleri, yüksek transfeksiyon verimliliği sunar, bu da onları gen ekspresyonu ve regülasyon çalışmaları için uygun hale getirir. Hem geçici hem de stabil transfeksiyon deneyleri çeşitli yöntemler kullanılarak gerçekleştirilebilir.

  • İlaç Duyarlılığı

    HT-29 hücreleri, kolon kanseri tedavisinde yaygın olarak kullanılan fluorourasil ve oksaliplatin gibi kemoterapötik ilaçlara duyarlıdır. İlaç direncini incelemek ve kolorektal karsinom için potansiyel terapötik ilaçları taramak amacıyla kullanılırlar.

Sınırlamalar

  • Heterojenlik

    HT-29 hücreleri, diğer kanser hücre hatları gibi, heterojenlik gösterir ve tek tip bir hücre popülasyonu oluşturmayabilir. Bu durum, belirli testlerde sonuçların tekrarlanabilirliğini etkileyebilir ve deney sonuçlarında küçük farklılıklara yol açabilir.

  • Sınırlı Farklılaşma

    HT-29 hücrelerinin farklılaşma potansiyeli sınırlıdır. Bağırsak veya kolon hücrelerine tam olarak farklılaşmazlar, ancak sadece birkaç karakteristik özellik sergilerler. Bu sınırlama, daha karmaşık biyolojik süreçlerin incelenmesinde kullanımlarını kısıtlayabilir.

HT-29 hücreleri: Uygulamalar

HT-29 hücre hattı, geniş uygulama yelpazesi nedeniyle araştırma laboratuvarlarında yaygın olarak kültürlenmektedir. Bu bölümde, HT-29 hücrelerinin sadece birkaç önemli uygulaması ele alınacaktır.

Kanser araştırması: HT-29, kolorektal adenokarsinom hücre hattıdır, bu nedenle kanserin ilerlemesi, gelişimi ve altta yatan moleküler mekanizmaların incelenmesinde kullanılır. 2018 yılında yapılan bir çalışmada, metastazdan sorumlu hücre moleküllerini araştırmak için HT-29 hücre hattı kullanılmıştır. Bu çalışmada, vimentin ve CXCR4 genlerinin hücre metastazını düzenlediği gözlemlenmiştir. Oysa mikroRNA-193a-5p mimik transfüzyonu, bu genlerin mRNA seviyelerini düşürebilir ve kanser hücresi metastazını başarılı bir şekilde azaltabilir [2].

Toksikoloji araştırması: HT-29 hücre hattı, toksikoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu kolorektal karsinom hücreleri, farklı testler kullanılarak farklı ilaç adaylarının toksisitesini değerlendirmek için kullanılır. Örneğin, bir çalışmada Syzygium cumini bitkisinin etanol özütünün HT-29 hücre hattı üzerindeki toksisite potansiyeli araştırılmıştır. Sonuçlar, HT-29 hücre büyümesinde önemli bir baskılanma olduğunu göstermiş ve bu da ekstraktın umut verici anti-kanser özelliklerine işaret etmiştir [3].

Mikrobiyoloji: HT-29, potansiyel mikropların, yani bakterilerin ve virüslerin patogenezini araştırmak için bir konak hücre sistemi olarak kullanılabilir. Araştırmacılar, virülanslarını ve konakçı yanıtını araştırmak için HT-29 hücrelerini mikroplarla enfekte edebilirler. Bu tür bir çalışmada, laktik asit bakterilerinin probiyotik özelliklerini araştırmak için HT-29 hücreleri kullanılmıştır [4]. Başka bir çalışmada ise bakteriyofaj tedavilerinin etkinliğini ve güvenliğini değerlendirmek için HT-29 hücreleri kullanılmıştır [5].

5. HT-29 hücreleri üzerine araştırma yayınları

Bu bölüm, araştırma çalışmanızı tasarlamanıza yardımcı olacak HT-29 hücreleri ile ilgili bazı önemli yayınları ele alacaktır.

Syzygium cumini Etanol Ekstresinin HT-29 Kolorektal Hücre Hattı Üzerindeki Anti-kanser Etkisinin Değerlendirilmesi

Bu çalışma, Syzygium cumini etanol ekstresini kolorektal kanser hücre hattı HT-29'a karşı potansiyel bir anti-kanser ajanı olarak önermiştir. Ekstrakt, kanser hücrelerinin büyümesini önemli ölçüde bastırmıştır.

Tetrandrine, Bcl-2/Caspase 3/PARP yolakları ve G1/S fazı aracılığıyla kolon karsinomu HT-29 hücrelerinin büyümesini inhibe eder

Bioscience Reports dergisinde yayınlanan bu makale, Tetradrine adlı bir bileşiğin HT-29 hücreleri üzerindeki anti-kanser aktivitesini test etmiştir. Sonuçlar, tetrandrinin hücre sinyal yolaklarını düzenleyerek kanser hücrelerinin çoğalmasını ve büyümesini engellediğini ortaya koymuştur.

mikroRNA-193a-5p, metastaz yolunu baskılayarak insan HT-29 kolon kanseri hücrelerinin göçünü engeller

Bu çalışma, miRNA-193a-5p'nin metastazla ilişkili genleri düzenleyerek HT-29 hücrelerinin metastazını potansiyel olarak düzenleyebileceğini öne sürmüştür.

Bakteriyofajlar, bakteri kültüründe olduğundan daha insan hücreli bakterilere karşı daha virülenttir; HT-29 hücrelerinden elde edilen bilgiler

Bu makale 2018 yılında Nature Scientific Reports dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, önerilen bakteriyofaj tedavisinin etkinliğini değerlendirmek için bağırsak hücre modeli olarak HT-29 tümörjenik hücre hattını kullanmıştır.

Laktobasillerin probiyotik özellikleri ve enteropatojenik bakterilerin Caco-2 ve HT-29 hücrelerine yapışmasını engelleme yetenekleri

Bu çalışmada araştırmacılar, laktik asit bakterilerinin probiyotik aktivitelerini araştırmak için HT-29 hücrelerini kullanmıştır. İlginç bir şekilde, çalışma laktobasillerin patojenik bakterilerin kolon hücrelerine yapışmasını engellediğini göstermiştir.

HT-29 hücreleri Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

Bu bölümde, HT-29 hücrelerinin bakımı, kültürü ve transfeksiyon protokollerini öğrenmeye yardımcı olacak bazı çevrimiçi kaynaklar ele alınacaktır.

Hücre kültürü protokolleri

Aşağıdaki kaynaklar, HT-29 hücrelerinin alt kültürünün oluşturulması konusunda size rehberlik edecektir.

Transfeksiyon protokolleri

HT-29 hücre hattı, yüksek transfeksiyon verimliliğine sahiptir ve gen ekspresyonu çalışmalarında sıklıkla kullanılır. Aşağıdaki kaynaklar, bu hücreler için olası transfeksiyon protokollerini açıklamaktadır.

HT-29 hücre hattı ile ilgili videolar

İşte bu tümörjenik hücre hattının kültürü ve bakımı ile ilgili bazı videolar.

Bu makaledeki bilgilerin, HT-29 hücre hattının kullanımı ve bakımı konusunda size değerli ve yeterli bir kaynak olmasını umuyoruz. Çalışmanızda HT-29 hücrelerini kullanmayı planlıyorsanız, bizden sipariş verin.

Kaynakça

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ve I. Recio, HT29 hücre hattı. Gıda Biyoaktiflerinin Sağlık Üzerindeki Etkisi: in vitro ve ex vivo modeller, 2015: s. 113-124.
  2. Shirafkan, N. ve ark., microRNA‐193a‐5p, metastaz yolunu baskılayarak insan HT‐29 kolon kanseri hücrelerinin göçünü engeller. Hücre biyokimyası dergisi, 2019. 120(5): s. 8775-8783.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean ve R. Safaralizadeh, Syzygium cumini etanolik ekstraktının HT-29 kolorektal hücre hattı üzerindeki anti-kanser etkisinin değerlendirilmesi. Gastrointestinal kanser dergisi, 2021. 52: s. 575-581.
  4. Fonseca, H.C. ve ark., Laktobasillerin probiyotik özellikleri ve enteropatojenik bakterilerin Caco-2 ve HT-29 hücrelerine yapışmasını engelleme yetenekleri. Probiyotikler ve antimikrobiyal proteinler, 2021. 13: s. 102-112.
  5. Shan, J., ve ark., Bakteriyofajlar, bakteri kültüründe olduğundan daha insan hücreleri içeren bakterilere karşı daha virülenttir; HT-29 hücrelerinden elde edilen bilgiler. Bilimsel raporlar, 2018. 8(1): s. 5091.

 

Farklı bir ülkede olduğunuzu veya şu anda seçili olandan farklı bir tarayıcı dili kullandığınızı tespit ettik. Önerilen ayarları kabul etmek ister misiniz?

Kapat