HL-60 Hücreleri: Akut Miyeloid Lösemi Araştırmalarının Temel Unsurları
HL-60, ölümsüz bir insan lösemi hücre hattıdır. Kanser biyolojisini incelemek ve kanser ilaçlarının etkinliğini araştırmak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca, lösemi hücrelerinin çoğalması ve farklılaşmasında rol oynayan çeşitli hücresel ve moleküler mekanizmaları anlamak için de kullanılabilir.
- Büyüme Ortamı
- Ürün sayfasına bakın
- Çiftleşme Süresi
- Ürün sayfasına bakın
- Büyüme Tipi
- Yapışkan
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Satış Yeri
- Cytion — HL-60 Siparişi
- HL-60 hücre hattı: Köken ve genel bilgiler
- HL-60 hücre kültürü bilgileri
- HL-60 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar
- Araştırmada HL-60 Hücre Hattının Uygulamaları: Kanserden İmmünolojiye ve Ötesi
- Araştırmalarınız için HL-60 Hücre Hattı
- HL-60 hücreleri: Araştırma yayınları
- HL-60 hücre hattı Kaynakları: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- HL-60 Hücre Hattı: Araştırmacılar için Temel SSS
- Kaynakça
- Sıkça sorulan sorular
HL-60 hücre hattı: Kökeni ve genel bilgiler
HL-60 hücre hattı, hematoloji araştırmalarında önemli bir model olarak hizmet eder ve akut promyelositik löseminin doğası ve tedavisi hakkında derinlemesine bilgiler sunar. Bu blog yazısı, HL-60 hücre hattının kökenlerini ve ayırt edici özelliklerini inceleyerek, tıbbi araştırma ve terapötik gelişmelerdeki önemli rolünü aydınlatmaktadır.
HL-60, ilk olarak akut promyelositik lösemi teşhisi konulan 36 yaşındaki beyaz bir kadının lösemi hücrelerinden oluşturulmuştur. Bu öncü çalışma, S.J. Collins ve ekibi tarafından gerçekleştirilmiştir ve HL-60, süspansiyon içinde başarıyla izole edilip kültürlenen ilk miyeloid lösemi hücre hattı olması nedeniyle önemli bir dönüm noktası olmuştur. Bu başarı, lösemi ve diğer ilgili hastalıkların araştırılmasında sayısız araştırma fırsatını kolaylaştırmıştır. Fiziksel özellikler açısından, HL-60 hücreleri lenfoblastik bir morfoloji sergiler ve süspansiyon halinde büyüdükleri bilinir; şekil olarak yuvarlak görünürler. Bu hücrelerin boyutu değişkenlik gösterir; çapları 9 ila 25 μm arasında değişir ve bu da heterojenliklerini yansıtır. Genomik düzeyde, HL-60 hücre hattı ağırlıklı olarak psödodiploiddir ve modal kromozom sayısı 43'tür. İlginç bir şekilde, hücrelerin küçük bir yüzdesi (%6,2) 2S bileşeni gösterir ve bu da genetik yapılarına bir başka karmaşıklık katmanı ekler [1].
HL-60 hücrelerinin bu temel özelliklerini anlamak, sadece hücresel düzeyde lösemi hakkındaki bilgimizi artırmakla kalmaz, aynı zamanda yeni tedavi yöntemlerini ortaya çıkarmak için devam eden araştırma çabalarını da destekler. Aşağıdaki bölümlerde, HL-60 hücre hattının benzersiz özelliklerinin tıbbi araştırmalardaki önemli ilerlemelere nasıl katkıda bulunduğunu inceleyeceğiz.
HL-60 hücre kültürü bilgileri
HL-60 hücre kültürü basit ve kolaydır. Bu bölümde, HL-60 hücre hattının ikiye katlanma süresi nedir? HL-60 yapışkan mı yoksa süspansiyon kültürü mü? HL-60 hücre hattının tohumlama yoğunluğu nedir? HL-60'ın büyümesi için hangi besiyeri kullanılır?
Çiftleşme süresi:
HL-60 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 36 ila 48 saattir.
Yapışkan mı yoksa süspansiyon mu:
HL-60 hücreleri süspansiyon kültürleri olarak büyür.
Tohumlama yoğunluğu:
Bu hücreler, alt kültür yapıldığında 1 x 106 hücre/ml yoğunluğunda, yeni bir kültür başlatıldığında ise 2 x 105 hücre/ml yoğunluğunda ekilir.
Büyüme ortamı:
HL-60 hücrelerini kültürlemek için %10 FBS ve 2,5 mM L-glutamin ilave edilmiş RPMI 1640 büyüme ortamı kullanılır. Ortam haftada 2 ila 3 kez yenilenmelidir.
Büyüme koşulları:
HL-60 hücreleri, 37 °C sıcaklıkta ve %5 CO2 beslemesi ile nemlendirilmiş bir inkübatörde büyütülür.
Saklama:
HL-60 hücreleri, maksimum sayıda hücrenin canlı kalmasını sağlamak için -150 °C'nin altındaki sıcaklıkta veya sıvı azotun buhar fazında saklanır.
Dondurma ortamı ve süreci:
HL-60 hücrelerinin dondurulması için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamları kullanılır. HL-60 hücrelerinin dondurulması için yavaş dondurma yöntemi tercih edilir.
Çözme işlemi:
Dondurulmuş HL-60 hücre şişesi, 37 °C sıcaklığa ayarlanmış bir su banyosunda hızlı bir şekilde çalkalanır. Ardından, hücreler santrifüjlenerek dondurma ortamı uzaklaştırılır. Yeni kültür ortamı eklenir ve hücreler, büyüme için bir şişeye aktarılmak üzere yeniden süspansiyon haline getirilir.
Biyogüvenlik seviyesi:
HL-60 kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 önerilir.
HL-60 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar
Herhangi bir hücre dizisiyle çalışmaya başlamadan önce, onun avantaj ve dezavantajlarını bilmek isteyebilirsiniz. Bu makale bölümünde, HL-60 hücrelerini kullanmanın birkaç artısı ve eksisi ele alınacaktır.
Avantajlar
HL-60 hücre hattının öne çıkan avantajlarından bazıları şunlardır:
- Çok yönlülük: HL-60 hücreleri, uygun büyüme koşulları altında monositler, makrofajlar ve granülositler dahil olmak üzere birçok hücre tipine farklılaşabilme özelliğine sahiptir. Bu özellik, hücresel farklılaşma ve diğer hücre süreçlerini incelemek için bu hücreleri kullanışlı kılar.
- Kültürlenmesi kolay: HL-60 hücreleri, süspansiyon kültürlerinde yetiştirilmesi ve bakımı kolaydır, bu da onları birçok hücre sürecini incelemek için kullanışlı bir araç haline getirir.
- Leukemi in vitro modeli: Bu hücreler, akut miyeloid lösemi hastasından elde edilmiştir ve bu nedenle hastalığa benzer genetik ve moleküler özelliklere sahiptir.
Dezavantajlar
HL-60 hücre hattının dezavantajları şunlardır:
- Sınırlı farklılaşma potansiyeli: HL-60, uyarıcılara yanıt olarak bazı miyeloid soylarına farklılaşabilir, ancak farklılaşma potansiyelleri birincil hücrelere kıyasla sınırlıdır.
Araştırmada HL-60 Hücre Hattının Uygulamaları: Kanserden İmmünolojiye ve Ötesi
Akut promyelositik lösemi hastasından elde edilen HL-60 hücre hattı, çok yönlülüğü ve kültürleme kolaylığı nedeniyle tıbbi araştırmalarda bir mihenk taşı haline gelmiştir. Bakımı kolay olan bu kültürler, sayısız araştırma uygulamasında hayati öneme sahiptir ve biz de kapsamlı bir genel bakış sunmak amacıyla geniş bir araştırma anahtar kelime yelpazesini kullanarak en önemli olanlardan bazılarını incelemeyi amaçlıyoruz.
Kanser Araştırması
Onkoloji alanında, HL-60 hücre hattı, kanser hücresi sinyal iletiminin inceliklerini ortaya çıkarmada, onkogen ekspresyonu hakkındaki anlayışımızı ilerletmede ve yeni terapötik hedeflerin keşfini hızlandırmada önemli bir rol oynamıştır. Bu hücre hattı, yeni kemoterapötik ajanların taranmasında kullanılan lösemi hücre hattı panelinin bir parçasını oluşturur. Bunun çarpıcı bir örneği, deniz organizmalarından ekstrakte edilen bileşiklerin antileukemik özelliklerini belirlemek için HL-60 hücrelerinin kullanılmasıdır; bu, hem antiproliferatif hem de proapoptotik etkileri ortaya çıkarmıştır [2]. Ayrıca, bu hücre hattı, JAK/STAT gibi önemli sinyal yollarının ve bunların lösemi hücrelerinin çoğalması üzerindeki etkisinin incelenmesini kolaylaştırmış ve aynı zamanda Timokinon gibi biyoaktif bileşiklerin terapötik potansiyelinin değerlendirilmesine de katkıda bulunmuştur [3].
İmmünoloji
HL-60 hücreleri, kemotaksi gibi karmaşık süreçler ve anahtar immün aracıların ekspresyonunun düzenlenmesi dahil olmak üzere çeşitli immün yanıtları araştırmak için sağlam bir in vitro sistemdir. Bu hücreler, makrofajlar ve nötrofillere benzer miyeloid hücrelere farklılaşabilir ve enflamatuar yolakları araştırmak için çok yönlü bir model görevi görür. Örneğin, HL-60 kaynaklı makrofaj benzeri hücreler, Brassica cinsinden elde edilen fitokimyasalların anti-inflamatuar potansiyelini araştırmak için kullanılmıştır [4]. Başka bir çalışmada, HL-60 hücrelerinin nötrofil benzeri hücrelere farklılaşması, araştırmacıların hücresel farklılaşma ve ilgili bağışıklık fonksiyonları için hayati öneme sahip genleri tanımlamasına olanak sağlamıştır [5].
İlaç Keşfi
HL-60'ın miyeloid farklılaşma yetenekleri, ilaç keşfinde de, özellikle lösemi tedavisinde hayati öneme sahip farklılaşma yolunu potansiyel olarak modüle edebilecek adayların tanımlanmasında kullanılmıştır. Bu durum, doğal ürünlerin antikanser potansiyelini değerlendirmek için HL-60 hücre hattını kullanan çalışmalarla örneklenebilir [6].
Ek olarak, HL-60 hücre hattı, retinoik asit gibi ajanlarla tedavinin monositik farklılaşmaya nasıl yol açabileceğini veya bu hücrelerin hücre dışı tuzaklar oluştururken birincil nötrofilleri nasıl taklit ettiğini anlamak gibi miyeloid hücre hattı biyolojisinin çeşitli yönlerini incelemek için kullanılmaktadır. Hematolojik malignitelerin moleküler olaylarını aydınlatmada modelin kullanımı, mutasyon hücre paneli çalışmalarında, özellikle de lösemi p53 hotspot analizi bağlamında uygulanmasıyla daha da genişletilmiştir.
Hücresel mekanizmaları, HL-60'ın ikiye katlanma süresini ve mikroakışkan kanallarda elektroporasyona verdikleri yanıtı araştıranlar için bu hücre hattı, araştırma için güvenilir bir platform sunmaktadır.
Araştırmalarınız için HL-60 Hücre Hattı
HL-60 hücreleri: Araştırma yayınları
HL-60 hücreleri hakkında birçok araştırma çalışması bulunmaktadır. Burada, bazı önemli örnekleri listeledik:
Bu araştırma makalesi, Stigmast-5-en-3-ol adlı bir bileşiğin HL-60 lösemi hücreleri ve MCF7 meme kanseri hücreleri üzerindeki antitümör etkisini ortaya koymuştur.
Bu çalışma, HL-60 hücrelerinin çoğalmasında JAK/STAT sinyal yolunun rolünü açıklamaktadır. Ayrıca, araştırmacılar bu lösemi hücre hattını kullanarak Thymoquinone bileşiğinin terapötik potansiyelini araştırmaktadır. Bileşik, JAK/STAT kaskadının negatif düzenleyicilerinin ekspresyonunu yeniden canlandırarak hücre çoğalmasını inhibe eder ve hücre ölümünü indükler.
Bu çalışmada, Brassica bitki bileşiklerinin anti-inflamatuar aktivitesini araştırmak amacıyla HL-60 hücreleri kullanılarak bir makrofaj benzeri hücre modeli türetilmiştir.
International Immunopharmacology dergisinde yayınlanan bu çalışmada, dimetil sülfoksit kullanılarak HL-60 hücre hattından nötrofil hücre taklidi geliştirilmiştir. Çalışmada, ERK geninin bu hücrelerin farklılaşmasında rol oynadığı gözlemlenmiştir.
Bu araştırma makalesi, bitki polifenolik bileşiklerinin, yani gallik asit ve ellagik asidin, ilaca duyarlı ve dirençli HL-60 lösemi hücreleri üzerindeki antikanser potansiyelini araştırmaktadır.
HL-60 hücre hattı Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
HL-60 hücre hattı hakkında çok sayıda çevrimiçi eğitim kaynağı mevcuttur. Bu bölümde, bu hücre hattının kültürlenmesi ve transfeksiyonunu açıklayan birkaç kaynak ele alınacaktır.
Hücre kültürü protokolleri
HL-60 hücre kültürü yöntemlerini açıklayan kaynaklar şunlardır:
- HL-60'ın çoğaltılması: Bu belge, HL-60 hücrelerinin alt kültürlenmesi hakkında bilgi sağlar.
- HL-60 hücre hattı: Bu web sitesi, hücrelerin kültürü, dondurulması ve çözülmesi dahil olmak üzere HL-60 hücreleri ve protokolleriyle ilgili temel bilgileri içerir.
Transfeksiyon protokolleri
HL-60 hücreleri için tercih edilen transfeksiyon yöntemlerini açıklayan bazı kaynaklar şunlardır.
- HL-60 hücrelerinin transfeksiyonu: Bu bağlantı, HL-60 lösemi hücreleri için ayrıntılı bir transfeksiyon prosedürü içerir.
- HL-60 hücrelerinin geçici transfeksiyonu: Bu belge, hücre hattı hakkında yararlı bilgiler içerir ve HL-60 hücrelerinin geçici transfeksiyonu için ayrıntılı bir protokol sunar.
HL-60 hücre hattı ile ilgili videolar
HL-60 hücreleri ile ilgili video kaynakları oldukça sınırlıdır.
- HL-60 hücrelerinin pasajlanması: Bu video, HL-60 hücrelerinin alt kültürlenmesi için protokolü açıklamaktadır.
Bu makalenin, HL-60 hücre hattının kültürlenmesi ve bakımı hakkında temel bilgiler sunmasını umuyoruz. Ayrıca, araştırmalarda bu lösemi hücrelerini kullanmanın avantajları hakkındaki bilgilerinizi de artırabilir. Bu hücre hattını kullanmayı planlıyorsanız, bizden sipariş verin.
HL-60 Hücre Hattı: Araştırmacılar İçin Temel Sık Sorulan Sorular
HL-60 hücre hattı, akut promiyelositik lösemi hastasından elde edilen bir promiyelositik lösemi hücre hattıdır. Bu hücre hattı, miyeloid hücre farklılaşması ve onkogen ekspresyonunu incelemek amacıyla araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır.
Retinoik asit, HL-60 hücre dizisinde farklılaşmayı tetikleyerek hücrelerin granülosit benzeri hücrelere dönüşmesini sağlar. Bu süreç, miyeloid farklılaşmanın altında yatan mekanizmaların incelenmesi açısından hayati öneme sahiptir.
Serum, hematopoietik hücre besiyerinin hayati bir bileşenidir ve kültür ortamındaki HL-60 hücrelerinin çoğalması ve hayatta kalması için gerekli olan temel büyüme faktörlerini ve besin maddelerini sağlar.
Evet, HL-60 hücre hattı, kimyasal uyaranlara tepki olarak hücrelerin hareket etmesini ifade eden kemotaksis gösterebilir. Bu özellik, bu hücrelerin kemotaksis testlerinde ve hücre göçünü anlamada yararlı olmasını sağlar.
Hücresel onkogen ekspresyonu sergileyen HL60 hücre hattı, onkogenlerin ekspresyonunun düzenlenmesini ve löseminin oluşumundaki rollerini araştırmak için bir model sistem işlevi görür.
HL-60 hücre hattı, hücre biyolojisi çalışmalarında, özellikle hücre döngüsünün, hücresel farklılaşma süreçlerinin ve lösemiye yol açan moleküler olayların araştırılmasında paha biçilmez bir öneme sahiptir.
Lösemi hücre hattı panelleri, çeşitli lösemi hücre hatlarının genetik yapısı, mutasyon profilleri, ilaçlara yanıtı ve MAPK yolakları gibi löseminin oluşumunda rol oynayan moleküler yolaklar dahil olmak üzere karşılaştırmalı çalışmalar yapılmasına olanak tanır.
Analiz ve menşe sertifikaları genellikle HL-60 hücre hattını sağlayan tedarikçiden veya veri tabanından indirilebilir veya talep edilebilir; bu sayede araştırmacılar, çalışmalarında doğrulanmış ve kontaminasyon içermeyen hücrelere ulaşabilirler.
HL-60 hücre hattı, hücre dışı tuzaklar oluşturma yeteneği de dahil olmak üzere birincil nötrofillere benzer özellikler kazanacak şekilde farklılaştırılabilir; bu da araştırmacıların bu hücreleri nötrofil davranışını ve işlevini incelemek için bir vekil model olarak kullanmalarına olanak tanır.
HL-60 hücreleri, akut promyelositik lösemi, miyeloid hücre dizisi biyolojisi ve çeşitli bileşiklerin farklılaşma ve çoğalma üzerindeki etkilerini incelemek için bir in vitro model olarak kullanılmaktadır. Ayrıca, kemotaksi, onkogen ekspresyonu ve mutasyonların hücresel süreçler üzerindeki etkisi gibi hücresel tepkileri araştıran deneylerde de kullanılmaktadır.
"HL-60" kısaltması, "İnsan Lösemi 60" anlamına gelir. Bu kısaltma, geliştirildiği dönemde lösemi hastalarından oluşturulan 60. hücre hattını ifade eder. "HL" kısaltması ise insan lösemi hücrelerine odaklandığını belirtir.
HL-60 hücrelerinin ikiye katlanma süresi, optimal büyüme koşullarında yaklaşık 36 ila 48 saattir. Ancak bu süre, kültür koşullarına ve hücrelerin pasaj sayısına bağlı olarak değişiklik gösterebilir.
HL-60 hücreleri Phorbol 12-miristat 13-asetat (PMA) ile işlendiğinde, genellikle makrofajlara veya monositlere benzeyen bir hücre tipine farklılaşırlar. Bu farklılaşma, monositik farklılaşma yolaklarının incelenmesi ve miyeloid hücre farklılaşmasının mekanizmalarının anlaşılması kapsamında yer almaktadır.
Kaynakça
- Fleck, R., S. Romero-Steiner ve M. Nahm, Pnömokok antikorlarının opsonik kapasitesini ölçmek için HL-60 hücre hattının kullanımı. Klinik ve Aşı İmmünolojisi, 2005. 12(1): s. 19-27.
- Fernando, I.S. ve ark., Dendronephthya gigantea'dan elde edilen Stigmast-5-en-3-ol'ün insan lösemi HL-60 ve insan meme kanseri MCF-7 hücreleri üzerindeki apoptoz ve antiproliferatif etkileri. Toxicology in Vitro, 2018. 52: s. 297-305.
- Almajali, B. ve ark., Timokinon, JAK/STAT negatif düzenleyicilerinin yeniden ekspresyonu yoluyla HL60 lösemi hücrelerinin hücre proliferasyonunu baskılar ve apoptozu artırır. Asya Pasifik Kanser Önleme Dergisi: APJCP, 2021. 22(3): s. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J. ve ark., HL-60 hücrelerinden türetilen insan makrofaj benzeri bir hücre modelinde Brassica biyoaktif bileşiklerinin anti-inflamatuar potansiyelinin analizi. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: s. 112804.
- Wang, D., ve ark., ERK, enflamatuar nötrofilleri taklit eden dimetil sülfoksit ile indüklenen HL-60 nötrofil benzeri hücrelerin farklılaşması ve işlevinde rol oynar. International Immunopharmacology, 2020. 84: s. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á. ve ark., HL-60 miyeloid lösemi hücrelerinde Brassica kaynaklı biyoaktif bileşiklerin anti-lösemik aktivitesi. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): s. 13400.