HL-60 Hücreleri: Akut Miyeloid Lösemi Araştırma Esasları

HL-60 ölümsüz bir insan lösemi hücre hattıdır. Kanser biyolojisini incelemek ve anti-kanser ilaçlarının etkinliğini araştırmak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca, lösemik hücre proliferasyonu ve farklılaşmasında rol oynayan farklı hücresel ve moleküler mekanizmaları anlamak için de kullanılabilir.

HL-60 hücre hattı: Kökeni ve genel bilgiler

HL-60 hücre hattı, hematolojik araştırmalarda önemli bir model olarak hizmet etmekte ve akut promyelositik löseminin doğası ve tedavisi hakkında derin bilgiler sunmaktadır. Bu blog yazısı, HL-60 hücre hattının kökenlerini ve ayırt edici özelliklerini inceleyerek tıbbi araştırmalar ve terapötik gelişmelerdeki önemli rolüne ışık tutmaktadır.

HL-60 ilk olarak akut promyelositik lösemi teşhisi konulan 36 yaşındaki Kafkasyalı bir kadının lösemik hücrelerinden oluşturulmuştur. S.J. Collins ve ekibi tarafından yürütülen bu öncü çalışma, HL-60'ın başarılı bir şekilde izole edilen ve süspansiyon halinde kültüre edilen ilk miyeloid lösemi hücre hattı olması nedeniyle önemli bir atılımı işaret etmektedir. Bu başarı , lösemi ve diğer ilgili hastalıkların incelenmesinde çok sayıda araştırma fırsatını kolaylaştırmıştır. Fiziksel özellikler açısından, HL-60 hücreleri lenfoblastik bir morfoloji sergiler ve süspansiyonda büyüdüğü ve yuvarlak şekilli göründüğü bilinmektedir. Bu hücrelerin boyutu, heterojenliklerini yansıtan 9 ila 25 μm arasında değişen çaplarla değişir. Genomik düzeyde, HL-60 hücre hattı ağırlıklı olarak psödodiploiddir ve modal kromozom sayısı 43'tür. İlginç bir şekilde, hücrelerin küçük bir yüzdesi (%6,2) 2S bileşeni göstermekte ve genetik yapılarına başka bir karmaşıklık katmanı eklemektedir [1].

HL-60 hücrelerinin bu temel yönlerini anlamak sadece hücresel düzeyde lösemi bilgimizi artırmakla kalmaz, aynı zamanda yeni tedavi yöntemlerini ortaya çıkarmak için devam eden araştırma çabalarını da destekler. Aşağıdaki bölümlerde, HL-60 hücre hattının benzersiz özelliklerinin tıbbi araştırmalarda önemli ilerlemelere nasıl katkıda bulunduğunu inceleyeceğiz.

Mikroskop altında tek hücreli lösemi dokusu.

HL-60 hücre kültürü bilgileri

HL-60 hücre kültürü basit ve kolaydır. Bu bölüm size HL-60 hücre hattının ikiye katlanma süresi nedir gibi temel bilgileri verecektir HL-60 yapışık mı yoksa süspansiyon kültürü mü? HL-60 hücre hattının ekim yoğunluğu nedir? HL-60 büyümesi için hangi ortam kullanılır?

İki katına çıkma süresi:	HL-60 hücreleri için iki katına çıkma süresi yaklaşık 36 ila 48 saattir.
Yapışık veya süspansiyon halinde:	HL-60 hücreleri süspansiyon kültürleri olarak büyür.
Tohumlama yoğunluğu:	Bu hücreler alt kültüre alındığında 1 x¹⁰⁶ hücre/ml yoğunlukta ve yeni bir kültür başlatıldığında 2 x¹⁰⁵ hücre/ml yoğunlukta ekilir.
Büyüme ortamı:	HL-60 hücrelerini kültürlemek için %10 FBS ve 2,5 mM L-glutamin eklenmiş RPMI 1640 büyüme ortamı kullanılır. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez yenilenmelidir.
Büyüme koşulları:	HL-60 hücreleri 37 °C sıcaklıkta ve %5_CO2 beslemeli nemlendirilmiş inkübatörde büyütülür.
Depolama:	HL-60 hücreleri, maksimum sayıda hücreyi canlı tutmak için -150 °C'nin altındaki sıcaklıkta veya sıvı nitrojenin buhar fazında saklanır.
Dondurma ortamı ve işlemi:	HL-60 hücrelerinin dondurulması için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamları kullanılır. HL-60 hücre dondurma işlemi için yavaş dondurma yöntemi tercih edilir.
Çözdürme işlemi:	Dondurulmuş HL-60 hücre şişesi 37 °C sıcaklığa ayarlanmış bir su banyosunda hızla çalkalanır. Daha sonra hücreler santrifüjlenerek dondurucu ortamdan uzaklaştırılır. Yeni kültür ortamı eklenir ve hücreler büyümek üzere bir şişeye dağıtılmak üzere yeniden süspanse edilir.
Biyogüvenlik seviyesi:	HL-60 kültürlerinin işlenmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 önerilir.

10x ve 20x büyütmede HL-60 süspansiyon hücreleri.

HL-60 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar

Herhangi bir hücre hattıyla çalışmadan önce, avantajları ve dezavantajları hakkında bilgi sahibi olmak isteyebilirsiniz. Bu makale bölümü, HL-60 hücrelerini kullanmanın birkaç artı ve eksisini ele alacaktır.

Avantajlar

HL-60 hücre hattının öne çıkan birkaç avantajı şunlardır:

Çok yönlülük: HL-60 hücreleri, uygun büyüme koşulları altında monositler, makrofajlar ve granülositler dahil olmak üzere birden fazla hücre tipine farklılaşma yeteneğine sahiptir. Bu da onları hücresel farklılaşma ve diğer hücre süreçlerini incelemek için kullanışlı hale getirir
Kültürü kolaydır: HL-60 hücrelerinin süspansiyon kültürlerinde büyütülmesi ve bakımı kolaydır, bu da onları çoklu hücre süreçlerini incelemek için uygun bir araç haline getirir
Löseminin in vitro modeli: Bu hücreler akut miyeloid lösemili bir hastadan elde edilmiştir ve bu nedenle hastalığa benzer genetik ve moleküler özelliklere sahiptir

Dezavantajlar

HL-60 hücre hattının dezavantajları şunlardır:

Sınırlı farklılaşma potansiyeli: HL-60, uyaranlara yanıt olarak bazı miyeloid soylara farklılaşabilir, ancak farklılaşma potansiyelleri birincil hücrelere kıyasla sınırlıdır.

Araştırmalarda HL-60 Hücre Hattı Uygulamaları: Kanserden İmmünolojiye ve Ötesine

Akut promyelositik lösemili bir hastadan elde edilen HL-60 hücre hattı, çok yönlülüğü ve kültür kolaylığı nedeniyle tıbbi araştırmalarda bir köşe taşı haline gelmiştir. Bu az bakım gerektiren kültürler sayısız araştırma uygulamasında çok önemlidir ve kapsamlı bir genel bakış sağlamak için çok çeşitli araştırma anahtar kelimelerini bir araya getirerek en önemlilerinden bazılarını keşfetmeyi amaçlıyoruz.

Kanser Araştırmaları

Onkoloji alanında HL-60 hücre hattı, kanser hücresi sinyalizasyonunun inceliklerini çözmede, onkogen ekspresyonu anlayışımızı ilerletmede ve yeni terapötik hedeflerin keşfini teşvik etmede etkili olmuştur. Bu hücre hattı, yeni kemoterapötik ajanların taranması için kullanılan lösemi hücre hattı panelinin bir parçasını oluşturmaktadır. Deniz organizmalarından elde edilen bileşiklerin anti-lösemik özelliklerini tespit etmek için HL-60 hücrelerinin kullanılması ve hem antiproliferatif hem de pro-apoptotik etkilerin ortaya çıkarılması bunun çarpıcı bir örneğidir [2]. Ayrıca, hücre hattı, JAK/STAT gibi önemli sinyal yollarının ve bunların lösemik hücre çoğalması üzerindeki etkilerinin incelenmesini ve Thymoquinone gibi biyoaktif bileşiklerin terapötik vaatlerinin değerlendirilmesini kolaylaştırmıştır [3].

İmmünoloji

HL-60 hücreleri, karmaşık kemotaksis süreci ve temel bağışıklık aracılarının ifadesinin düzenlenmesi de dahil olmak üzere çeşitli bağışıklık tepkilerini araştırmak için sağlam bir in vitro sistemdir. Bu hücreler makrofajlara ve nötrofillere benzer miyeloid hücrelere farklılaşabilir ve enflamatuar yolların araştırılması için çok yönlü bir model olarak hizmet eder. Örneğin, Brassica cinsinden fitokimyasalların anti-enflamatuar potansiyelini araştırmak için HL-60 türevi makrofaj benzeri hücreler kullanılmıştır [4]. Başka bir çalışmada, HL-60 hücrelerinin nötrofil benzeri hücrelere farklılaşması, araştırmacıların hücresel farklılaşma ve ilgili bağışıklık fonksiyonları için çok önemli genleri tanımlamalarını sağlamıştır [5].

İlaç Keşfi

HL-60'ın miyeloid farklılaşma yetenekleri, özellikle lösemi tedavisinde çok önemli olan farklılaşma yolunu potansiyel olarak modüle edebilecek adayların belirlenmesinde ilaç keşfinde de kullanılmıştır. Bu durum, doğal ürünlerin antikanser potansiyelini değerlendirmek için HL-60 hücre hattını kullanan çalışmalarla örneklendirilmiştir [6].

Ek olarak, HL-60 hücre hattı, retinoik asit gibi ajanlarla tedavinin monositik farklılaşmaya nasıl yol açabileceğini veya bu hücrelerin hücre dışı tuzaklar oluşturmada birincil nötrofilleri nasıl taklit ettiğini anlamak gibi miyeloid hücre hattı biyolojisinin çeşitli yönlerini incelemek için kullanılır. Modelin hematolojik malignitelerin moleküler olaylarının aydınlatılmasındaki kullanımı, özellikle lösemi p53 sıcak nokta analizi bağlamında mutasyon hücre paneli çalışmalarındaki uygulamasıyla daha da genişletilmiştir.

Hücresel mekaniği, HL-60'ın ikiye katlanma süresini ve mikroakışkan kanallarda elektroporasyona verdikleri yanıtı araştıranlar için hücre hattı, araştırma için güvenilir bir platform sunmaktadır.

Araştırmalarınız için HL-60 Hücre Hattı

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300209

HL-60 hücreleri: Araştırma yayınları

HL-60 hücreleri üzerinde çeşitli araştırma çalışmaları mevcuttur. Burada, bazı kayda değer örnekleri listeledik:

Dendronephthya gigantea'dan elde edilen Stigmast-5-en-3-ol'ün insan lösemi HL-60 ve insan meme kanseri MCF-7 hücreleri üzerindeki apoptotik ve antiproliferatif etkileri

Bu araştırma makalesi, Stigmast-5-en-3-ol adlı bir bileşiğin HL-60 lösemi hücreleri ve MCF7 meme kanseri hücreleri üzerindeki anti-tümör etkisini ortaya koymuştur.

Timokinon, JAK/STAT negatif düzenleyicilerinin yeniden ekspresyonu yoluyla hücre çoğalmasını baskılar ve HL60 lösemi hücrelerinin apoptozunu artırır

Bu çalışma, HL-60 hücrelerinin çoğalmasında JAK/STAT sinyalizasyonunun rolünü açıklamaktadır. Buna ek olarak, araştırmacılar bu lösemi hücre hattını kullanarak Thymoquinone bileşiğinin terapötik potansiyelini araştırmaktadır. Bileşik, JAK/STAT kaskadının negatif düzenleyicilerinin ekspresyonunu canlandırarak hücre çoğalmasını engeller ve hücre ölümünü indükler.

HL-60 hücrelerinden türetilen insan makrofaj benzeri bir hücre modelinde Brassica biyoaktif bileşiklerinin anti-enflamatuar potansiyelinin analizi

Bu çalışmada, Brassica bitki bileşiklerinin anti-enflamatuar aktivitesini araştırmak üzere makrofaj benzeri bir hücre modeli türetmek için HL-60 hücreleri kullanılmıştır.

ERK, enflamatuar nötrofilleri taklit eden dimetil sülfoksit ile indüklenmiş HL-60 nötrofil benzeri hücrelerin farklılaşmasında ve işlevinde rol oynar

International Immunopharmacology dergisinde yayınlanan bu çalışmada dimetil sülfoksit kullanılarak HL-60 hücre hattından nötrofil hücre taklidi geliştirildi. Çalışma, ERK geninin bu hücrelerin farklılaşmasında rol oynadığını gözlemledi.

Seçilmiş bitki polifenolleri olan gallik asit ve ellagik asidin duyarlı ve çoklu ilaca dirençli lösemi HL60 hücreleri üzerindeki antitümör etkileri

Bu araştırma makalesi, gallik asit ve ellagik asit gibi bitki polifenolik bileşiklerinin ilaca duyarlı ve dirençli HL-60 lösemi hücreleri üzerindeki anti-kanser potansiyelini araştırmaktadır.

HL-60 hücre hattı Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

HL-60 hücre hattı hakkında çok sayıda çevrimiçi eğitim kaynağı mevcuttur. Bu bölüm, bu hücre hattının kültürlenmesi ve transfeksiyonunu açıklayan birkaç kaynağı kapsayacaktır.

Hücre kültürü protokolleri

HL-60 hücre kültürleme yöntemlerini açıklayan kaynaklar şunlardır:

HL-60'ın çoğaltılması: Bu belge HL-60 hücrelerinin alt kültürlenmesi hakkında bilgi sağlayacaktır.
HL-60 hücre hattı: Bu web sitesi HL-60 hücreleri ve hücrelerin kültürlenmesi, dondurulması ve çözülmesi dahil olmak üzere protokoller hakkında temel bilgileri içerir.

Transfeksiyon protokolleri

İşte HL-60 hücreleri için tercih edilen transfeksiyon yöntemlerini açıklayan bazı kaynaklar.

HL-60 hücrelerinin transfeksiyonu: Bu bağlantıda HL-60 lösemi hücreleri için ayrıntılı bir transfeksiyon prosedürü bulunmaktadır.
HL-60 hücreleri geçici transfeksiyonu: Bu belge hücre hattı hakkında yararlı bilgiler içerir ve HL-60 hücrelerinin geçici transfeksiyonu için ayrıntılı bir protokol verir.

HL-60 hücre hattı ile ilgili videolar

HL-60 hücreleri hakkında çok sınırlı video kaynağı bulunmaktadır.

HL-60 hücrelerini pasajlama: Bu video, HL-60 hücrelerini alt kültüre alma protokolünü açıklamaktadır.

Bu makalenin size HL-60 hücre hattının kültürü ve bakımı hakkında temel bilgiler sağlamasını bekliyoruz. Ayrıca, bu lösemi hücrelerini araştırmalarda kullanmanın avantajları hakkında bilginizi artırabilir. Bu hücre hattını kullanmayı planlıyorsanız, bizden sipariş verin.

HL-60 Hücre Hattı: Araştırmacılar için Temel SSS

Referanslar

Fleck, R., S. Romero-Steiner, ve M. Nahm, Pnömokok antikorlarının opsonik kapasitesini ölçmek için HL-60 hücre hattının kullanımı. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
Fernando, I.S., et al., Dendronephthya gigantea'dan elde edilen Stigmast-5-en-3-ol'ün insan lösemi HL-60 ve insan meme kanseri MCF-7 hücreleri üzerindeki apoptotik ve antiproliferatif etkileri. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Almajali, B., et al., Thymoquinone, JAK/STAT negatif düzenleyicilerinin yeniden ekspresyonu yoluyla hücre proliferasyonunu baskılar ve HL60 lösemi hücrelerinin apoptozunu artırır. Asya Pasifik Kanser Önleme Dergisi: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, AJ, ve diğerleri, HL-60 hücrelerinden türetilen insan makrofaj benzeri bir hücre modelinde Brassica biyoaktif bileşiklerinin anti-enflamatuar potansiyelinin analizi. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D., ve diğerleri, ERK, enflamatuar nötrofilleri taklit eden dimetil sülfoksit ile indüklenen HL-60 nötrofil benzeri hücrelerin farklılaşmasında ve işlevinde rol oynar. Uluslararası İmmünofarmakoloji, 2020. 84: p. 106510.
Núñez-Sánchez, M.Á., et al., HL-60 Miyeloid Lösemi Hücrelerinde Brassica Kaynaklı Biyoaktif Bileşiklerin Anti-Lösemik Aktivitesi. Uluslararası Moleküler Bilimler Dergisi, 2022. 23(21): p. 13400.