Yayın tarihi: 2023 | Son güncelleme tarihi: Mayıs 2026
HCT116 Hücre Hattı: Kolorektal Kanser Araştırmalarının Temel Taşı
HCT116 hücre hattı , kolorektal kanser araştırmalarında bir mihenk taşı görevi görür ve hastalığın patogenezi ile potansiyel tedavi yolları hakkında paha biçilmez bilgiler sunar. Kanser araştırmaları ve farmakolojik değerlendirmelerdeki kullanışlılığıyla tanınan HCT116, tümör davranışı ve ilaç etkinliği üzerine yapılan önemli çalışmaları kolaylaştırır.
- Büyüme Ortamı
3,0 g/L L-glukoz, 1,5 mM L-glutamin, 3,0 g/L NaHCO3 ve %10 fetal sığır serumu ile takviye edilmiş McCoys 5a besiyeri, HCT116 hücre kültivasyonu için idealdir. Ortamın haftada 1 ila 2 kez yenilenmesi tavsiye edilir. - İkiye Katlanma Süresi
HCT116 kanser hücrelerinin ikiye katlanma süresi 25 ila 35 saat arasında değişmektedir. - Büyüme Tipi
HCT116 kolon kanseri hücre hattı yapışkandır ve hücreler tek tabaka halinde büyür. - Biyogüvenlik Seviyesi
BSL-1 - Temin Edilebilir
Cytion — HCT116 Siparişi
- HCT116 Hücrelerinin Kökenleri ve Temel Özellikleri
- HCT116 Hücreleri Hakkında Sık Sorulan Sorular
- HCT116 hücrelerinin kullanımı
- Referanslar
- HCT116 hücre hattının avantajları
- Doğrulanmış HCT116 hücre hattımızla keşiflerinizi ilerletin
- HCT116 hücre hattının araştırma uygulamaları
- HCT116 hücreleri: Araştırma yayınları
- HCT116 hücreleri için kaynaklar
- Sık sorulan sorular
HCT116 Hücrelerinin Kökenleri ve Temel Özellikleri
HCT116 hücrelerinin kökenlerini ve morfolojik özellikleri, genetik yapısı ve hücresel boyutları gibi temel özelliklerini anlamak, bu hücre hattını kullanarak çalışmalara başlayan araştırmacılar için çok önemlidir.
Köken ve Genetik Yapı: Kolorektal kanser teşhisi konmuş 48 yaşındaki Kafkasyalı bir erkeğin kolonundan elde edilen HCT116 hücreleri, RAS/RAF/MEK/ERK sinyal yolunun bir parçası olan KRAS geninin kodon 13'ündeki (G13D) mutasyonla dikkat çeker. Bu özel mutasyon, bu hücrelerin onkojenik dönüşümünde çok önemli bir rol oynar ve kanser araştırmalarındaki önemini vurgular.
Morfoloji ve Büyüme Özellikleri: Epitel benzeri bir morfoloji sergileyen HCT116 hücreleri, tipik olarak tek tabakalı kültürlerde büyür, ancak 150-400 µm çapında sferoidler de oluşturabilir. Büyüme modellerindeki bu uyarlanabilirlik, çeşitli deney düzeneklerinde çok yönlülüklerini vurgular.
Kromozomal Profil: HCT116 hücrelerinin kromozomal bileşimi neredeyse diploiddir ve hücre popülasyonunun yaklaşık %70'i 45 kromozom barındırır. Özellikle, 8, 10, 16 ve 17 numaralı kromozomların uzun kollarında tekrarlayan bir amplifikasyon varken, Y kromozomu yoktur ve bu da hücrelerin benzersiz genomik imzalarına katkıda bulunur.
Karşılaştırmalı Analiz: HCT116 ve HT29 Hücre Hatları
HCT116 ile başka bir insan kolorektal karsinom hücre hattı olan HT29 karşılaştırıldığında, onkojenik potansiyel ve farklılaşma kapasiteleri açısından belirgin farklılıklar ortaya çıkmaktadır:
Onkojenik Agresiflik ve Farklılaşma: HCT116 hücreleri, yüksek onkojenik agresiflikleri ve sınırlı farklılaşma potansiyelleriyle karakterize edilir, bu da onları agresif tümör fenotiplerini incelemek için bir model haline getirir. Buna karşılık, HT29 hücreleri, enterosit benzeri ve müsin üreten soylar halinde farklılaşma yeteneği sergilerler ve bu da kolorektal kanser biyolojisinin çeşitli yönlerini taklit eden kontrastlı bir model sağlar.
HCT116 ve HT29 hücre hatlarına ilişkin bu karşılaştırmalı anlayış, araştırmacıların kullanabileceği araç setini zenginleştirerek, kolorektal kanserin çok yönlü doğası hakkında daha ayrıntılı araştırmalar yapılmasına olanak tanır.
HCT116 hücrelerinin işlenmesi
Çoğalma Süresi:
HCT116 kanser hücrelerinin ikiye katlanma süresi 25 ila 35 saat arasında değişmektedir.
Yapışkan veya Süspansiyon Halinde:
HCT116 kolon kanseri hücre hattı yapışkandır ve hücreler tek tabaka halinde büyür.
Tohumlama Yoğunluğu:
HCT116 hücre kültürü için 2 x 104 hücre/cm2 tohumlama yoğunluğu önerilir. Alt kültürleme için, hücreler 1x PBS ile yıkandıktan sonra Accutase çözeltisi kullanılarak ayrılmalıdır. Santrifüjlemeden sonra, hücre peleti taze büyüme ortamında yeniden süspansiyon haline getirilir ve yeni bir şişeye aktarılır.
Büyüme Ortamı:
3,0 g/L L-glukoz, 1,5 mM L-glutamin, 3,0 g/L NaHCO3 ve %10 fetal sığır serumu ile takviye edilmiş McCoys 5a besiyeri, HCT116 hücre kültivasyonu için en uygun besiyeridir. Ortamın haftada 1 ila 2 kez yenilenmesi tavsiye edilir.
Büyüme Koşulları (Sıcaklık, CO2):
Kültür, %5 CO2 atmosferinde 37°C'de nemlendirilmiş bir inkübatörde gerçekleştirilir.
Saklama:
HCT116 hücreleri, sıvı azotun buhar veya sıvı fazında -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda saklanabilir.
Dondurma Süreci ve Ortam:
Kriyoprezervasyon için CM-1 veya CM-ACF besiyeri kullanın. Hücre canlılığını korumaya yardımcı olan, dakikada 1°C'lik kademeli bir sıcaklık düşüşüne izin veren kontrollü hızda dondurma yöntemi önerilir.
Çözme Süreci:
HCT116 hücrelerini 37°C'lik su banyosunda çözdürün. Büyüme ortamı ekledikten sonra, santrifüjleyerek dondurma ortamı kalıntılarını giderin. Hücre peletini taze ortamda yeniden süspansiyon haline getirin ve yeni şişelerde kültürleyin.
Biyogüvenlik Seviyesi:
Seviye 1
HCT116 hücre hattının avantajları
Bu bölümde HCT116 hücre hattı ele alınmakta, kanser araştırmalarında, özellikle kolorektal kanser çalışmalarında oynadığı önemli rol vurgulanmakta ve bu hücre hattının kendine özgü avantajları tartışılmaktadır.
HCT116 hücre hattı, birkaç önemli avantajı nedeniyle kanser araştırmalarında öne çıkmaktadır:
Kolorektal Kanser Modeli: Küresel olarak en yaygın üçüncü kanser türü olan kolorektal kanser için yaygın olarak kabul gören bir in vitro model görevi görür. İnsan kolorektal kanserini taklit etme özelliği, kanser biyolojisini anlamak ve tedavi stratejilerini test etmek için paha biçilmez bir değer sağlar.
Homojenlik: Dikkat çekici bir şekilde, HCT116 hücrelerinin yaklaşık %70'i tutarlı genetik profiller sergiler ve nispeten homojen bir popülasyon sunar. Bu tekdüzelik, deneysel sonuçlarda tutarlılık ve güvenilirlik sağladığı için gen ekspresyonu, hücresel sinyal yolları ve ilaç tedavilerinin etkinliğinin değerlendirilmesine odaklanan çalışmalar için çok önemlidir.
Transfeksiyon Verimliliği: HCT116 hücrelerinin ayırt edici özelliklerinden biri, özellikle viral vektörlerle transfeksiyona yüksek oranda yatkın olmalarıdır. Bu özellik, gen terapisi araştırmalarında özellikle faydalıdır; genetik materyalin verimli ve hassas bir şekilde eklenmesini sağlayarak, ileri düzey genetik manipülasyonları ve fonksiyonel çalışmaları kolaylaştırır.
Doğrulanmış HCT116 hücre hattımızla araştırmalarınızı bir adım öteye taşıyın
HCT116 hücre hattının araştırma alanındaki uygulamaları
HCT116 hücre hattı, kanser araştırmalarında geniş bir uygulama yelpazesine sahiptir. Bazı öne çıkan uygulamalar şunlardır:
Kanser biyolojisi
HCT116 kolon kanseri hücre hattı, kolon kanserinin ilerlemesi ve gelişimini incelemek için kullanılır. Ayrıca, kanserin çoğalması, yayılması ve istilası ile ilgili altta yatan mekanizmaların ve sinyal yollarının aydınlatılmasına yardımcı olur. Bir çalışmada, ilaç direnci gelişiminde rol oynayan genleri incelemek için HCT116 hücreleri kullanılmıştır. Araştırmacılar, kolon kanseri hücrelerinde MDR1 genini aşırı eksprese etmiş ve NOX (NADPH oksit) izoformları ile Nrf2'nin ekspresyonunu gözlemlemiştir. Çalışma, NOX2 ve Nrf2'nin yukarı regülasyonunun kanser hücrelerinde kemoresistansa neden olduğunu ortaya koymuştur; dolayısıyla, bu genler kanser tedavisi sırasında direnç gelişimini aşmak için hedef alınabilir [1]. Benzer şekilde, 2021 yılında yapılan bir araştırma, NF-κB sinyal yolunun kolon kanseri proliferasyonu ve göçünün düzenlenmesinde rol oynadığını bildirmiştir. Dolayısıyla, bu yol, kolorektal karsinoma karşı yeni ve etkili terapötikler geliştirmek için hedef alınabilir [2].
Onkoloji alanında, hücre döngüsü, proliferasyon ve büyüme ile apoptozun karmaşık süreçlerini anlamak temel önemdedir. Bu biyolojik fonksiyonlar, insan hücre hatlarının, özellikle de insan kolon kanseri hücreleri ve pankreas kanseri modelleri gibi malign hücrelerden türetilenlerin incelenmesinde hayati öneme sahiptir. Örneğin, HCT116 ve SW620 hücre hatları, sırasıyla kolon ve pankreas kanserinin altında yatan mekanizmaların araştırılmasında önemli bir rol oynamaktadır. Akış sitometrisi ve klonojenik testler gibi teknikler sayesinde, araştırmacılar tümörler içindeki bağımsız hücrelerin gen ekspresyon profillerini ve davranışlarını aydınlatabilir ve kanserin hücre dışı matris içinde nasıl iletişim kurduğuna ışık tutabilirler.
Kanser İlerlemesinde Apoptozun Rolü
Apoptoz, yani programlanmış hücre ölümü, hücresel homeostazın korunmasında kritik bir rol oynar ve kanser araştırmalarında önemli bir çalışma alanıdır. İlişkili olmayan apoptoz ile kolon kanseri hücre ölümü gibi kanser bağlamında spesifik olarak indüklenen apoptoz arasındaki ayrım çok önemlidir. Bu süreç sadece hücrelerin ortadan kaldırılmasıyla ilgili değildir, aynı zamanda tümör büyümesini ve metastazı etkileyebilecek karmaşık bir sinyal etkileşimini de içerir. Bilim insanları, apoptozu ve hücre ölümünü metastaz baskılayıcılar ve tümör baskılayıcı aktivite ile birlikte inceleyerek, kanserin ilerlemesini ve metastaz potansiyelini düzenleyen yolaklar hakkında bilgi edinebilirler.
Kanserde Metastaz ve Moleküler Belirteçler
Metastaz, kanserin en zorlu yönlerinden biri olmaya devam etmektedir ve hematogen metastaz, malign hücrelerin yayılmasında önemli bir endişe kaynağıdır. Metastaz araştırması, kanser hücrelerinin hareket ve istila yeteneklerini veya hücre hareketini ve hücrelerin hücre dışı matriks dahil olmak üzere çevreleriyle nasıl etkileşime girdiğini incelemeyi içerir. CD133 ekspresyonu ve epidermal büyüme faktörü reseptörü gibi moleküler belirteçler, pozitif kolon karsinomu hücrelerinin ve diğer kanser türlerinin davranışını tanımlamak ve anlamak açısından kritik öneme sahiptir. Örneğin, SIRT6 yolu, tümör büyümesini ve metastatik kolon kanserini modüle etmedeki potansiyel rolü nedeniyle ilgi çekici bir alan olarak ortaya çıkmıştır.
Toksikoloji/ilaç geliştirme
HCT116 hücre hattı, yeni kanser ilaçları için bir tarama modeli olarak kullanılmaktadır. Doğal ürünler ve kimyasal olarak sentezlenmiş nanopartiküller dahil olmak üzere antikanser ilaçlarının etkinliğini ve toksisitesini değerlendirmek için çeşitli çalışmalar yapılmıştır. Bu bağlamda, araştırmada bitkisel bir ilaç olan Caesalpinia pulcherrima özlerinden sentezlenen gümüş nanopartiküllerin HCT116 hücrelerinde sitotoksisitesi değerlendirilmiştir [3]. Bir çalışmada, araştırmacılar kakao çayı suyu ekstresinin antikanser potansiyelini değerlendirmek için HCT116 kanser hücre hattını kullanmıştır. Kakao çayı ekstresinin kolon kanseri proliferasyonunu azalttığını ve hücre ölümünü tetiklediğini bulmuşlardır [4]. Başka bir çalışmada HCT116 kanser hücreleri kullanılmış ve hava patatesi (Dioscorea bulbifera) özlerinin, JNK sinyal kaskadının aktivasyonu ve ERK1/2 geninin baskılanması yoluyla kolorektal karsinom hücrelerinde pro-apoptotik aktivite sergilediği keşfedilmiştir [5].
Metforminin kanser hücreleri üzerindeki etkileri, özellikle kolon ve pankreas kanseri bağlamında, kanser hücrelerinin biyolojik işlevlerini anlamanın potansiyel tedavi stratejilerine nasıl yol açabileceğini örneklemektedir. Metformin gibi ajanlarla veya epidermal büyüme faktörü reseptörü gibi belirli yolakları hedefleyen tedavilerle kanser hücrelerinin klonojenik hayatta kalması veya klon oluşturma yeteneği üzerine yapılan araştırmalar, etkili kanser tedavileri konusunda değerli bilgiler sağlayabilir. Ek olarak, bu çalışmalarda HCT116 klonlarının ve HCT116 hücre popülasyonlarının kullanılması, kanser hücrelerinin farklı terapötik müdahalelere nasıl tepki verdiğinin incelikli bir şekilde anlaşılmasını sağlar ve kanser tedavisine daha kişiselleştirilmiş yaklaşımların önünü açar.
HCT116 hücreleri: Araştırma yayınları
Bu bölümde, HCT116 hücre hattını ele alan birkaç önemli ve en çok atıf alan son yayınlar ele alınacaktır.
Bu çalışma, Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2017) dergisinde yayınlanmıştır. Araştırmacılar, piper nigrum tohumuyla sentezlenen kalay oksit nanopartiküllerinin sitotoksik etkilerini değerlendirmek için HCT116 kolon kanseri ve A549 akciğer kanseri hücre hatlarını kullanmıştır.
Cancer Letters (2018) dergisinde yayınlanan bu araştırma, lncRNA SNHG15'in HCT116 dahil olmak üzere kolorektal kanser hücre hatlarında kolon kanseri hücrelerinin göçünü teşvik ettiğini öne sürmektedir.
Uzun kodlamayan RNA TUG1'in aşırı ekspresyonu, kolon kanserinin ilerlemesini teşvik eder
Bu makale 2016 yılında Medical Science Monitor dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, onkojenik LncRNA TUG1'in HCT116 kolon kanseri hücrelerinin çoğalmasını ve göçünü teşvik ettiğini ortaya koymuştur.
İlaç direnci, HCT116 kolon kanseri hücrelerinde H2S üreten enzimlerin yukarı regülasyonunu indükler
Biochemical Pharmacology dergisinde (2018) yayınlanan bu araştırma, ilaç direncinin gelişmesinin HCT116 kolon kanseri hücrelerinde H2S üreten enzimlerin seviyelerini artırdığını öne sürmektedir.
International Journal of Environmental Health Research (2023) dergisinde yayınlanan bu araştırma makalesi, Inula viscosa L. ekstraktının mikroRNA'ları düzenleyerek HCT116 kolorektal kanser hücreleri üzerinde antikanser etkisi gösterdiğini öne sürmektedir.
HCT116 hücreleri için kaynaklar
Aşağıda HCT116 hücreleri ile ilgili birkaç kaynak bulunmaktadır.
- HCT116'nın transfeksiyonu: Bu video, HCT116 kanser hücrelerinin transfeksiyonu için adım adım bir kılavuzdur.
- HCT116 hücre hattının kültürlenmesi: Bu video, HCT116 kolon kanseri hücre hattı için alt kültürleme protokolünü göstermektedir.
- HCT116 hücre hattının alt kültürü: Bu web sitesi, HCT116 kültür ortamı hakkında birçok yararlı bilgi içerir. Ayrıca, hücrelerin dondurulması, çözülmesi ve alt kültürünün oluşturulması için prosedürler de sunar.
HCT116 Hücreleri Hakkında Sıkça Sorulan Sorular
Kaynakça
- Waghela, B.N., F.U. Vaidya ve C. Pathak: NOX-2 ve Nrf-2'nin yukarı regülasyonu, insan kolon karsinomu (HCT-116) hücrelerinde 5-florourasil direncini artırır. Biochemistry (Moscow), 2021, 86, s. 262-274.
- Yang, M. ve ark., Astragalin, NF-κB sinyal yolunu düzenleyerek insan kolon kanseri HCT116 hücrelerinin çoğalmasını ve göçünü engeller. Frontiers in Pharmacology, 2021, 12: s. 639256.
- Deepika, S., C.I. Selvaraj ve S.M. Roopan, Caesalpinia pulcherrima L. swartz'ın biyoaktivitelerinin ve HCT116 hücre hattı üzerinde özütle sentezlenen gümüş nanopartiküllerin sitotoksisitesinin taranması. Malzeme Bilimi ve Mühendisliği, C, 2020, 106, s. 110279.
- Gao, X. ve ark., Kakao çayı (Camellia ptilophylla), ROS oluşumu ve PI3K/Akt sinyal yolu aracılığıyla HCT116 hücrelerinde mitokondriye bağlı apoptozu indükler. Food Research International, 2020, 129, s. 108854.
- Hidayat, A.F.A. ve ark., Dioscorea bulbifera, HCT116 insan kolorektal karsinom hücrelerinde ERK 1/2'nin inhibisyonu ve JNK sinyal yolaklarının aktivasyonu yoluyla apoptozu indüklemiştir. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2018. 104: s. 806-816.
