DU-145 Hücreleri - Bir Araştırmacının Kapsamlı Kılavuzu

DU-145, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak uygulanan bir insan prostat karsinom hücre hattıdır. Bu hücreler prostat kanseri biyolojisi, ilaç testleri ve gelişimini incelemek için çok değerli bir model olarak hizmet vermektedir. Ayrıca, araştırmacılar prostat kanseri gelişimi, büyümesi ve ilerlemesinin altında yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için DU-145 hücrelerini de kullanmaktadır.

Bu makale size DU-145 prostat kanseri hücreleri hakkında değerli bilgiler verecektir. Özellikle şunları kapsayacaktır:

DU-145 hücre hattının genel bilgileri ve kökeni
DU-145 hücrelerinin kültürlenmesi
DU-145 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
DU-145 hücrelerinin araştırma uygulamaları
DU-145 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları
DU-145 Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1. DU-145 hücre hattının genel bilgileri ve kökeni

Bir hücre hattının temel özelliklerini ve kökenini anlamak, onunla çalışmaya başlamadan önce çok önemlidir. Bu bölüm DU-145 hücre hattı özellikleri ve kökeni hakkında kapsamlı bir anlayış sağlayacaktır. Şunları öğreneceksiniz: DU145 kanser hücreleri nedir? DU145 hücrelerinin morfolojisi nedir? PC-3 ve DU145 arasındaki fark nedir?

Bir insan prostat kanseri hücre hattı olan DU-145, metastatik prostat karsinomu olan Kafkasyalı bir erkeğin (69 yaşında) beyninden türetilmiştir. Bu hücreler ilk olarak 1978 yılında K.R. Stone ve meslektaşları tarafından depolanmıştır.
PC-3 prostat kanseri hücreleri gibi DU-145 de androjen reseptörlerini ifade eder. Bununla birlikte, bu hücreler androjen ligand tedavisine tabi tutulduğunda, androjen reseptörüne yanıt veren genlerin herhangi bir aktivitesini göstermezler, bu nedenle androjenden bağımsız hücreler olarak kabul edilirler.
DU-145 hücreleri epitelyal bir morfolojiye sahiptir.
DU-145 hücreleri hipotriploiddir ve 64 modal kromozom sayısına sahiptir. Del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) ve del (9) (p11) gibi çeşitli işaret kromozomları sergilerler.

PC-3 DU145'e Karşı

Her iki prostat kanseri hücre hattı da androjen reseptöründen bağımsızdır. Tümörijenik ve metastatik potansiyelleri açısından farklılık gösterirler. Bağışıklık sistemi baskılanmış bir fareye enjekte edildiğinde, PC-3 hücre hattı yüksek derecede metastatik derece IV adenokarsinom oluşturur. Buna karşılık, DU-145 hücre hattı orta derecede metastatik potansiyele sahip prostat kanseri geliştirir [1].

İnsan prostat kanseri hücreleri PC-3'te mikrofilamentlerin bozulması.

2. dU-145 hücrelerinin kültürlenmesi

DU-145 hücre hattı prostat kanseri araştırma laboratuvarlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Kolay ve verimli kültürünü kolaylaştırmak için aşağıdaki önemli noktaları öğrenmelisiniz. Bu bölümde DU145 ortamı, ikiye katlama süresi, hücre kültürü koşulları ve protokoller hakkında bilgiler yer alacaktır.

DU-145 Hücrelerinin Kültüre Alınması için Önemli Noktalar

Nüfus İki Katına Çıkma Süresi:	DU-145 ikiye katlanma süresi 30 ila 40 saat arasında değişmektedir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	DU-145 yapışık bir hücre hattıdır.
Tohumlama Yoğunluğu:	DU-145 hücreleri önerilen 2 x¹⁰⁴^hücre/cm2 hücre yoğunluğunda ekilir. Bu yoğunlukta, hücreler neredeyse 4 gün içinde birleşik bir tek tabaka oluşturur. Tohumlama için hücreler 1 x fosfat tampon salin ile yıkanır ve pasajlama solüsyonu Accutase ile inkübe edilir. Oda sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübasyondan sonra hücrelere taze kültür ortamı eklenir ve santrifüjlenir. Toplanan hücre peleti dikkatlice yeniden süspanse edilir ve hücreler büyüme için yeni kültür şişelerine dökülür.
Büyüme Ortamı:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), ortam takviyeleri, yani %10 Fetal Sığır Serumu (FBS), 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 ve EBSS. Ortam haftada 2 ila 3 kez yenilenir.
Büyüme Koşulları:	DU-145 kültürleri %5 CO2 kaynağı ile 37°C nemlendirilmiş inkübatörde tutulur.
Depolama:	DU-145 hücreleri, hücre canlılığını daha uzun süre korumak için sıvı nitrojenin buhar fazında veya elektrikli bir dondurucuda -150°C'nin altındaki sıcaklıkta saklanır.
Dondurma İşlemi ve Ortamı:	DU-145 prostat kanseri hücreleri için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı önerilir. Hücreleri dondurmak için sıcaklığın kademeli olarak 1 °C düşmesini sağlayan yavaş dondurma yöntemi tercih edilir. Bu, hücrelerin herhangi bir şok yaşamasını önler ve canlılıklarının korunmasına yardımcı olur.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş DU-145 hücre şişeleri 37°C su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca hızla çözdürülür. Daha sonra hücrelere kültür ortamı eklenir ve dondurucu ortam bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Hasat edilen hücreler bir büyüme ortamında yeniden süspanse edilir ve büyüme için şişeye dökülür. Dondurma geri kazanımı neredeyse 24 saat sürer.
Biyogüvenlik Seviyesi:	DU145 androjen reseptöründen bağımsız hücre hattını kültürlemek için biyogüvenlik seviyesi 1 ayarları gereklidir.

DU-145 prostat kanseri hücreleri 10x ve 20x büyütmede.

3. dU-145 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar

Diğer hücre dizileri gibi DU-145 prostat kanseri hücre dizisinin de bazı artıları ve eksileri vardır. Bu özellikler, araştırmanızda kullanımına karar vermenize yardımcı olabilir. DU-145 hücrelerinin başlıca avantajları ve dezavantajları aşağıda belirtilmiştir.

Avantajlar

DU-145 hücrelerinin avantajları şunlardır:

Tümörijenisite	DU-145, orta derecede metastatik potansiyele sahip agresif bir tümörijenik prostat kanseri hücre hattıdır. Prostat kanseri biyolojisi, gelişimi ve büyümesini in vitro ve in vivo olarak incelemek için bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde DU145 ksenograft modelini geliştirmek için kullanılır.
Androjen Reseptör Bağımsızlığı	DU-145 prostat kanseri hücreleri androjen reseptöründen bağımsızdır. Büyüme için androjenlere güvenmezler ve androjenlerle tedavi edildiklerinde hücre ve moleküler seviyelerde yanıt göstermezler. Hormondan bağımsız prostat kanseri mekanizmalarını araştırmak için idealdir.

Sınırlamalar

DU-145 hücre hattının sınırlamaları şunlardır:

İn Vitro model

DU-145 metastatik prostat karsinomunun in vitro bir hücre modelidir, bu nedenle primer prostat tümörlerinin karmaşıklığını tam olarak temsil etmeyebilir. Ayrıca, androjen reseptör bağımsızlığı gibi spesifik özellikler nedeniyle tüm prostat kanseri tiplerini ve alt tiplerini ifade etmeyebilir.

4. dU-145 hücrelerinin araştırma uygulamaları

DU-145 prostat kanseri hücre hattı çok çeşitli araştırma uygulamalarına sahiptir. Burada birkaç umut verici uygulama listelenmiştir.

Prostat kanseri biyolojisi: DU-145, prostat kanseri biyolojisini incelemek için uygun bir modeldir. Araştırmacılar bu hücreleri kanser gelişimi, ilerlemesi ve metastazını yönlendiren moleküler mekanizmaları araştırmak için kullanmaktadır. Ayrıca, yaygın olarak prostat kanseri ile ilişkili genetik değişiklikler de araştırılmaktadır. 2021'de gerçekleştirilen araştırma, etkili teşhis ve tedavi uygulamaları için potansiyel biyobelirteçleri belirlemek üzere DU-145 hücrelerini inceledi. Çalışma, kanser hücresi proliferasyonunu teşvik ettiği ve MAPK/ERK yolağı aktivasyonu yoluyla metastazı düzenlediği için aktin gama 1'i (ACTG1) potansiyel bir prostat kanseri biyobelirteci olarak önermiştir [2].
İlaç tarama ve geliştirme: DU-145 prostat kanseri hücreleri, potansiyel anti-kanser ilaçlarının sitotoksisitesini ve etkinliğini test etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu, araştırmacıların yeni ilaçları tanımlamasına, ilaç direncini ve altta yatan moleküler mekanizmaları anlamasına yardımcı olur. 2022'de yapılan bir çalışmada, reçineli bir karışım olan propolis veya arı tutkalının prostat kanseri hücre hattı PC-3 ve DU-145'teki sitotoksik etkisi araştırılmıştır. Çalışma, bu doğal maddenin her iki hücre hattında da büyümeyi engelleyici etkilerini göstermiş ve anti-kanser potansiyelini ortaya koymuştur [3]. Doğal bir bileşik olan Betain'in DU-145 prostat kanseri hücrelerindeki anti-proliferatif etkilerini araştıran bir başka çalışma 2019 yılında gerçekleştirilmiştir. Araştırma, betainin DU-145 hücrelerinde oksidatif stres aracılı hücre ölümünü ve enflamasyonu artırarak anti-proliferatif aktiviteler gösterdiğini ortaya koymuştur [4].

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300168

5.dU-145 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları

Aşağıda DU-145 hücre hattıyla ilgili bazı araştırma yayınları yer almaktadır.

Çinko sülfatın DU-145 insan prostat kanseri hücre hattı üzerindeki konsantrasyona bağlı etkileri: oksidatif, apoptotik, enflamatuar ve morfolojik analizler

Biological Trace Element Research, 2020'deki bu çalışma, çinko sülfatın (_ZnSo4) DU-145 hücrelerinde apoptoz, morfolojik değişiklikler, oksidatif hasar ve inflamasyonu indükleyerek anti-proliferatif etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.

Annona muricata L. kabuğu ekstresi ve fitokimyasal annonasin tarafından indüklenen DU-145 prostat kanseri hücrelerinde seçici sitotoksik ve anti-metastatik aktivite

Bu araştırma makalesi 2020 yılında BMC Complementary Medicine and Therapies dergisinde yayımlanmıştır. Bu çalışmada, bir bitki olan Annona muricata L. kabuğu ekstraktının ve biyoaktif annonasinin DU-145 hücre hattındaki sitotoksik ve anti-metastatik potansiyeli araştırılmıştır.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFRile ilişkili yolak prostat kanseri DU-145 hücrelerinin doksorubisin direncini düzenler

IUBMB Life'daki (2019) bu yayın, uzun kodlamayan RNA LOXL1-AS1'in miR-let-7a-5p ve EGFR yolağı ile etkileşiminin DU-145 prostat kanseri hücrelerinde doksorubisin direncini düzenlediğini öne sürmüştür.

DDR1'in aşağı regülasyonu, DU-145 ve Lncap-FGC prostat kanseri hücre hatlarında Pyk2/MKK7 fosforilasyonu yoluyla apoptozu indükler ve EMT'yi inhibe eder

Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry'deki (2020) bu makalede, Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) geninin aşağı regülasyonunun DU-145 hücrelerinin ölümüne neden olduğu ve Pyk2/MKK7 yolağını aktive ederek epitelden mezenkimal geçişi (EMT) engellediği belirtildi.

Casticin, Ras/Akt/NF-κB sinyal yolakları aracılığıyla insan prostat kanseri DU 145 hücre göçünü ve istilasını inhibe eder

Journal of Food Biochemistry'de (2019) yer alan bu çalışmada, bir polimetoksiflavon olan Casticin'in Ras/Akt/NF-κB sinyalizasyonunu düzenleyerek DU-145 hücrelerinin göçünü ve istilasını engellediği öne sürülmüştür.

6. dU-145 Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

DU-145 prostat kanseri hücre hattı hakkında birçok çevrimiçi kaynak mevcuttur. Bu bölümde bu hücreler için kullanım, bakım ve transfeksiyon protokolünü açıklayan birkaç kaynaktan bahsedilecektir:

DU-145 transfeksiyonu: Bu video eğitimi, DU-145 hücrelerinin transfeksiyon protokolünü öğrenmek için adım adım bir kılavuzdur.

DU-145 hücre kültürü protokolü burada belirtilmiştir.

DU-145 alt kültürleme: Bu bağlantı, DU-145 hücrelerini alt kültüre alma veya alt kültürleme protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
DU-145 hücreleri: Bu web sitesi DU145 ortamı, alt kültürleme protokolü ve proliferatif ve kriyoprezerve kültürlerin işlenmesi dahil olmak üzere DU-145 hücre hattı hakkında birçok yararlı bilgi içermektedir.

Referanslar

Lima, A.R., et al., GC-MS ile insan prostat normal ve kanser hücresi ekzometabolomu arasında ayrım. Bilimsel raporlar, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., ACTG1 ifadesinin susturulması, MAPK/ERK sinyal yolağı aracılığıyla prostat kanseri epitelyal mezenkimal geçişini indükler. DNA ve Hücre Biyolojisi, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Soğuk ayrıştırma yöntemi ile elde edilen propolis ekstraktlarının PC-3 ve DU-145 prostat kanseri hücre hatları üzerindeki antikanser etkileri. Molecules, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betain, DU-145 insan prostat kanseri hücre hattında oksidatif stres aracılı apoptoz ve inflamasyonu artırarak hücre çoğalmasını baskılar. Hücre Stresi ve Şaperonlar, 2019. 24: p. 871-881.