DU-145 Hücreleri - Araştırmacılar İçin Kapsamlı Kılavuz

DU-145, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan bir insan prostat karsinomu hücre hattıdır. Bu hücreler, prostat kanseri biyolojisi, ilaç testleri ve geliştirme çalışmalarında çok değerli bir model görevi görür. Ayrıca araştırmacılar, prostat kanserinin gelişimi, büyümesi ve ilerlemesinin altında yatan moleküler mekanizmaları araştırmak için de DU-145 hücrelerini kullanır.

📋 DU-145 Hücre Hattı — Önemli Bilgiler

Büyüme Ortamı: Orta takviyeli EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), yani %10 Fetal Sığır Serumu (FBS), 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 ve EBSS. Ortam haftada 2 ila 3 kez yenilenir.
İkiye Katlanma Süresi: DU-145'in ikiye katlanma süresi 30 ila 40 saat arasındadır.
Büyüme Tipi: DU-145, yapışkan bir hücre hattıdır.
Biyogüvenlik Seviyesi: BSL-1
Temin Edilebilir: Cytion — DU-145 Siparişi

📋 İçindekiler

DU-145 hücre hattının genel bilgileri ve kökeni
DU-145 hücrelerinin kültürü
DU-145 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
DU-145 hücrelerinin araştırma uygulamaları
5. DU-145 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları
DU-145 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Sıkça sorulan sorular

DU-145 hücre hattı hakkında genel bilgiler ve kökeni

Bir hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, bu hücre hattının temel özelliklerini ve kökenini anlamak çok önemlidir. Bu bölüm, DU-145 hücre hattının özellikleri ve kökeni hakkında kapsamlı bir bilgi sunacaktır. Şunları öğreneceksiniz: DU145 kanser hücreleri nedir? DU145 hücrelerinin morfolojisi nedir? PC-3 ve DU145 arasındaki fark nedir?

İnsan prostat kanseri hücre hattı olan DU-145, metastatik prostat karsinomu olan 69 yaşındaki Kafkasyalı bir erkeğin beyninden elde edilmiştir. Bu hücreler ilk olarak 1978 yılında K.R. Stone ve meslektaşları tarafından depolanmıştır.
PC-3 prostat kanseri hücreleri gibi, DU-145 de androjen reseptörlerini eksprese eder. Ancak, bu hücreler androjen ligandı tedavisine tabi tutulduğunda, androjen reseptörüne duyarlı genlerin herhangi bir aktivitesini göstermezler, bu nedenle androjenden bağımsız hücreler olarak kabul edilirler.
DU-145 hücreleri epitelyal bir morfolojiye sahiptir.
DU-145 hücreleri hipotriploiddir ve modal kromozom sayısı 64'tür. Del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) ve del (9) (p11) gibi çeşitli marker kromozomları sergilerler.

PC-3 ve DU145

Her iki prostat kanseri hücre hattı da androjen reseptöründen bağımsızdır. Bu hücreler, tümör oluşturma ve metastaz potansiyeli açısından farklılık gösterir. Bağışıklık sistemi zayıflamış bir fareye enjekte edildiğinde, PC-3 hücre hattı yüksek derecede metastaz yapan derece IV adenokarsinom oluşturur. Buna karşılık, DU-145 hücre hattı, orta derecede metastatik potansiyele sahip prostat kanseri geliştirir [1].

İnsan prostat kanseri hücreleri PC-3'te mikrofilamentlerin bozulması.

DU-145 Hücrelerinin Kültürü

DU-145 hücre hattı, prostat kanseri araştırma laboratuvarlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Kolay ve verimli bir şekilde kültürlenmesini sağlamak için aşağıdaki önemli noktaları öğrenmelisiniz. Bu bölümde DU145 besiyeri, ikiye katlanma süresi, hücre kültürü koşulları ve protokoller hakkında bilgiler yer alacaktır.

DU-145 Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar

Popülasyon Çiftlenme Süresi:: DU-145'in ikiye katlanma süresi 30 ila 40 saat arasındadır.
Yapışkan veya Süspansiyon Halinde:: DU-145, yapışkan bir hücre hattıdır.
Tohumlama Yoğunluğu:: DU-145 hücreleri, önerilen hücre yoğunluğu olan 2 x 10⁴hücre/cm²'de ekilir. Bu yoğunlukta, hücreler yaklaşık 4 gün içinde konfluent bir tek tabaka oluşturur. Tohumlama için hücreler 1 x fosfat tamponlu salin ile yıkanır ve pasaj çözeltisi Accutase ile inkübe edilir. Oda sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübasyondan sonra, hücrelere taze kültür ortamı eklenir ve santrifüjlenir. Toplanan hücre peleti dikkatlice yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler büyüme için yeni kültür şişelerine dökülür.
Büyüme Ortamı:: Orta takviyeleri içeren EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), yani %10 Fetal Sığır Serumu (FBS), 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 ve EBSS. Ortam haftada 2 ila 3 kez yenilenir.
Büyüme Koşulları:: DU-145 kültürleri, %5 CO2 kaynağı bulunan 37°C nemlendirilmiş inkübatörde tutulur.
Saklama:: DU-145 hücreleri, hücre canlılığını daha uzun süre korumak için sıvı azotun buhar fazında veya elektrikli bir dondurucuda -150°C'nin altındaki bir sıcaklıkta saklanır.
Dondurma Süreci ve Ortamı:: DU-145 prostat kanseri hücreleri için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamları önerilir. Hücreleri dondurmak için sıcaklığın kademeli olarak 1 °C düşmesine izin veren yavaş dondurma yöntemi tercih edilir. Bu, hücrelerin şok yaşamasını önler ve canlılıklarının korunmasına yardımcı olur.
Çözme Süreci:: Dondurulmuş DU-145 hücre şişeleri, 37°C'lik bir su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca hızla çözülür. Daha sonra, hücrelere kültür ortamı eklenir ve dondurma ortamı bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Toplanan hücreler, bir büyüme ortamında yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme için şişeye dökülür. Dondurma sonrası toparlanma süresi yaklaşık 24 saattir.
Biyogüvenlik Seviyesi:: DU145 androjen reseptöründen bağımsız hücre hattını kültürlemek için biyogüvenlik seviyesi 1 ayarları gereklidir.

Du145 cells

10x ve 20x büyütmede DU-145 prostat kanseri hücreleri.

DU-145 hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar

Diğer hücre hatları gibi, prostat kanseri hücre hattı DU-145'in de bazı artıları ve eksileri vardır. Bu özellikler, araştırmanızda bu hücre hattını kullanıp kullanmayacağınıza karar vermenize yardımcı olabilir. DU-145 hücrelerinin başlıca avantajları ve dezavantajları aşağıda belirtilmiştir.

Avantajlar

DU-145 hücrelerinin avantajları şunlardır:

Tümörijeniklik: DU-145, orta derecede metastaz potansiyeline sahip agresif bir tümörjenik prostat kanseri hücre hattıdır. İmmün sistemi zayıflamış farelerde DU145 ksenograft modelini geliştirmek için kullanılır ve prostat kanserinin biyolojisi, gelişimi ve büyümesini in vitro ve in vivo olarak inceler.
Androjen Reseptör Bağımsızlığı: DU-145 prostat kanseri hücreleri androjen reseptöründen bağımsızdır. Büyümeleri için androjenlere ihtiyaç duymazlar ve androjenlerle tedavi edildiklerinde hücresel ve moleküler düzeyde herhangi bir tepki göstermezler. Hormon bağımsız prostat kanseri mekanizmalarını araştırmak için idealdir.

Sınırlamalar

DU-145 hücre hattının sınırlamaları şunlardır:

İn Vitro model: DU-145, metastatik prostat karsinomunun bir in vitro hücre modelidir, bu nedenle primer prostat tümörlerinin karmaşıklığını tam olarak yansıtmayabilir. Ayrıca, androjen reseptör bağımsızlığı gibi belirli özellikleri nedeniyle tüm prostat kanseri türlerini ve alt tiplerini temsil etmeyebilir.

DU-145 hücrelerinin araştırma uygulamaları

DU-145 prostat kanseri hücre hattının çok çeşitli araştırma uygulamaları vardır. Burada birkaç umut verici uygulama listelenmiştir.

Prostat kanseri biyolojisi: DU-145, prostat kanseri biyolojisini incelemek için uygun bir modeldir. Araştırmacılar, kanserin gelişmesini, ilerlemesini ve metastazını tetikleyen moleküler mekanizmaları araştırmak için bu hücreleri kullanır. Ayrıca, prostat kanseriyle sıklıkla ilişkili genetik değişiklikler de incelenir. 2021 yılında yürütülen bir araştırmada, verimli tanı ve tedavi uygulamaları için potansiyel biyobelirteçleri belirlemek amacıyla DU-145 hücreleri incelenmiştir. Çalışma, kanser hücresi çoğalmasını teşvik ettiği ve MAPK/ERK yolunun aktivasyonu yoluyla metastazı düzenlediği için aktin gama 1'i (ACTG1) potansiyel bir prostat kanseri biyobelirteci olarak önermiştir [2].
İlaç taraması ve geliştirme: DU-145 prostat kanseri hücreleri, potansiyel anti-kanser ilaçlarının sitotoksisitesini ve etkinliğini test etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu, araştırmacıların yeni ilaçları tanımlamasına, ilaç direncini ve altta yatan moleküler mekanizmaları anlamasına yardımcı olmaktadır. 2022 yılında yapılan bir çalışmada, reçineli bir karışım olan propolis veya arı tutkalının, prostat kanseri hücre dizisi PC-3 ve DU-145 üzerindeki sitotoksik etkisi araştırılmıştır. Çalışma, bu doğal maddenin her iki hücre dizisinde de büyümeyi inhibe edici etkileri olduğunu göstermiş ve anti-kanser potansiyelini ortaya koymuştur [3]. 2019 yılında yapılan bir başka çalışmada, DU-145 prostat kanseri hücrelerinde doğal bir bileşik olan betainin anti-proliferatif etkileri araştırılmıştır. Araştırma, betainin DU-145 hücrelerinde oksidatif stres aracılı hücre ölümü ve iltihabı artırarak anti-proliferatif aktiviteler sergilediğini göstermiştir [4].

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300168

5. DU-145 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları

Aşağıda, DU-145 hücre hattı ile ilgili bazı araştırma yayınları yer almaktadır.

DU-145 insan prostat kanseri hücre hattı üzerinde çinko sülfatın konsantrasyona bağlı etkileri: oksidatif, apoptotik, inflamatuar ve morfolojik analizler

Biological Trace Element Research dergisinde 2020 yılında yayınlanan bu çalışma, çinko sülfatın (ZnSo₄) apoptozu, morfolojik değişiklikleri, oksidatif hasarı ve inflamasyonu tetikleyerek DU-145 hücrelerinde anti-proliferatif etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.

Annona muricata L. kabuğu ekstresi ve fitokimyasal annonacin tarafından DU-145 prostat kanseri hücrelerinde indüklenen seçici sitotoksik ve anti-metastatik aktivite

Bu araştırma makalesi, 2020 yılında BMC Complementary Medicine and Therapies dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, bir bitki olan Annona muricata L. kabuğu ekstresi ve biyoaktif annonacin'in DU-145 hücre hattındaki sitotoksik ve anti-metastatik potansiyelini araştırmıştır.

LncRNA LOXL1‐AS1/miR‐let‐7a‐5p/EGFR ile ilişkili yolak, prostat kanseri DU‐145 hücrelerinin doksorubisin direncini düzenler

IUBMB Life (2019) dergisinde yayınlanan bu makale, uzun kodlamayan RNA LOXL1-AS1'in miR-let-7a-5p ve EGFR yoluyla etkileşiminin, DU-145 prostat kanseri hücrelerinde doksorubisin direncini düzenlediğini öne sürmüştür.

DDR1'in aşağı regülasyonu, DU-145 ve Lncap-FGC prostat kanseri hücre hatlarında Pyk2/MKK7'nin fosforilasyonu yoluyla apoptozu indükler ve EMT'yi inhibe eder

Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) dergisinde yayınlanan bu makale, Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) geninin aşağı regülasyonunun DU-145 hücrelerinin ölümüne neden olduğunu ve Pyk2/MKK7 yolunu aktive ederek epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) inhibe ettiğini belirtmiştir.

Casticin, Ras/Akt/NF-κB sinyal yolakları aracılığıyla insan prostat kanseri DU 145 hücrelerinin göçünü ve istilasını inhibe eder

Journal of Food Biochemistry (2019) dergisinde yayınlanan bu çalışma, bir polimetoksiflavon olan Casticin'in, Ras/Akt/NF-κB sinyalini düzenleyerek DU-145 hücrelerinin göçünü ve istilasını engellediğini öne sürmüştür.

DU-145 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

DU-145 prostat kanseri hücre hattı hakkında birçok çevrimiçi kaynak mevcuttur. Bu bölümde, bu hücrelerin kullanımı, bakımı ve transfeksiyon protokolünü açıklayan birkaç kaynaktan bahsedilecektir:

DU-145 transfeksiyonu: Bu video eğitimi, DU-145 hücrelerinin transfeksiyon protokolünü öğrenmek için adım adım bir kılavuzdur.

DU-145 hücre kültürü protokolü burada belirtilmiştir.

DU-145 alt kültürü: Bu bağlantı, DU-145 hücrelerinin alt kültürü veya alt kültivasyonu protokolünü öğrenmenize yardımcı olacaktır.
DU-145 hücreleri: Bu web sitesi, DU145 besiyeri, alt kültürleme protokolü ve proliferatif ve kriyoprezervatif kültürlerin işlenmesi dahil olmak üzere DU-145 hücre hattı hakkında birçok yararlı bilgi içerir.

Kaynakça

Lima, A.R. ve ark., GC-MS ile insan prostat normal ve kanser hücreleri ekzometabolomunun ayırt edilmesi. Bilimsel raporlar, 2018. 8(1): s. 5539.
Xiao, L., et al., ACTG1 ekspresyonunun susturulması, MAPK/ERK sinyal yolunu kullanarak prostat kanseri epitelyal-mezenkimal geçişini indükler. DNA ve Hücre Biyolojisi, 2021. 40(11): s. 1445-1455.
Gogacz, M. ve ark., Soğuk ayırma yöntemi ile elde edilen propolis özütlerinin PC-3 ve DU-145 prostat kanseri hücre hatları üzerindeki antikanser etkileri. Moleküller, 2022. 27(23): s. 8245.
Kar, F., et al., Betain, DU-145 insan prostat kanseri hücre hattında oksidatif stres aracılı apoptozu ve inflamasyonu artırarak hücre proliferasyonunu baskılar. Hücre Stresi ve Şaperonlar, 2019. 24: s. 871-881.