B16 Hücreleri - Onkolojik Araştırmalarda B16 Melanom Hücreleri için Temel Kılavuz

B16, murin kökenli deri kanseri (melanom) hücre hattıdır. Bu hücre hattı, insan deri kanserlerini incelemek için etkili bir in vitro modeldir. Kanser hücrelerinin katı tümör oluşumunu ve metastazını araştırmak için sıklıkla kullanılır.

Bu makale, B16 melanom hücre hattının temellerini anlamanıza yardımcı olacaktır. Spesifik olarak, aşağıdakileri gözden geçirecektir:

1.b16 hücre hattının genel özellikleri ve kökeni

Makalenin bu bölümünde B16 melanom hücre hattının karakteristik özellikleri ele alınacaktır. Aşağıdaki sık sorulan soruların cevaplarını öğreneceksiniz. Örneğin B16 kanser hücre hattı nedir? B16 hücreleri nereden elde edilir? B16 hücrelerinin boyutu nedir?

B16 hücre hattı 1954 yılında kurulmuştur. Bu hücreler Maine'deki Jackson Laboratuvarlarında kendiliğinden derisinde tümör oluşan C57BL/6J farelerinden elde edilmiştir.
Bunlar dalak, karaciğer ve akciğerlerde metastaz yapma yeteneğine sahip melanin üreten epitel hücreleridir.
Melanom B16 hücreleri tek tabaka halinde büyür ve epitel benzeri ve iğ şeklinde hücre morfolojisi sergiler.
B16 hücre hattının boyutu yaklaşık 15,4 μm'dir.
B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 ve B16F10 dahil olmak üzere B16 hücrelerinin farklı alt klonları vardır. Bu alt klonlar ana B16 hücrelerinden farklıdır ve bazı spesifik özellikleri muhafaza ederler. Örneğin, morfoloji, hücre boyutu ve diğer özellikler bakımından farklılık gösterirler. B16F10 yüksek akciğer metastatik yeteneğine sahiptir ve B164A5, B16F10, B16-GMCSF ve B16FLT3 ile karşılaştırıldığında en agresif cilt kanseri hücre hattıdır [1].

çevreleyen dokuyu iltihaplandıran malign melanom gibi büyüyen bir cilt kanserinin yakın çekim 3D animasyonu.

2.b16 hücre hattının kültürleme bilgileri

Bir hücre hattının bakımını veya kültürünü yapmadan önce, ikiye katlama süresi, hücre tipi, büyüme ortamı, kültür koşulları vb. hakkında temel bilgileri arayabilirsiniz. İşte bu bölüm B16 hücrelerinin kültüre alınması için gerekli tüm bilgileri içermektedir.

B16 Hücrelerinin Kültüre Alınması için Önemli Noktalar

Popülasyon İkiye Katlanma Süresi:	B16 hücreleri için ortalama popülasyon ikiye katlanma süresinin 24 saat olduğu tahmin edilmektedir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	B16 hücreleri yapışıktır ve tek tabakalar halinde büyür.
Tohumlama Yoğunluğu:	B16 hücrelerinin 1 ila 2 x¹⁰⁴ ^hücre/cm2 hücre yoğunluğunda tohumlanması önerilir. Yapışık B16 hücreleri 1 x PBS ile durulanır ve Accutase solüsyonu kullanılarak yüzeyden ayrıştırılır. Hücreler santrifüjlenir ve hücre peleti büyüme ortamında yeniden süspanse edilir. Daha sonra bu hücreler büyüme için yeni bir şişeye dağıtılır.
Büyüme Ortamı:	B16 hücreleri %10 fetal sığır serumu (FBS) içeren EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) ortamında kültüre edilir. Büyüme ortamı haftada 2-3 kez yenilenmelidir.
Büyüme Koşulları:	B16 hücre hattını büyütmek için %5_CO2 beslemeli ve 37 °C sıcaklığa sahip nemlendirilmiş bir inkübatör kullanılır.
Depolama:	Bu hücreler, hücre canlılığını korumak için -150 °C sıcaklığın altında veya sıvı nitrojenin buhar fazında saklanır.
Dondurma İşlemi ve Ortam:	B16 hücrelerini yavaş dondurma işlemi kullanarak dondurmak için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı kullanılır.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş B16 hücreleri 37 °C'de antimikrobiyal ajan içeren bir su banyosunda çözdürülür. Çözdürülen hücreler, büyüme ortamı içeren flasklara dağıtılarak doğrudan kültürlenebilir. Ayrıca bu hücreler, dondurucu ortam bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenebilir ve ardından yeni ortamda kültüre alınabilir.
Biyogüvenlik Seviyesi:	B16 hücre hattı biyogüvenlik seviyesi bir laboratuvarda kullanılmalı veya muhafaza edilmelidir.

10x ve 20x büyütme altında B16 melanom hücrelerinin yarı akıcı tabakası.

3. b16 hücre hattı: Avantajlar ve dezavantajlar

Diğer hücre dizileri gibi B16 da avantaj ve dezavantajların benzersiz bir karışımına sahiptir. Bu melanom hücre hattının bazı önemli artıları ve eksileri bu bölümde listelenmiştir.

Avantajlar

B16, sunduğu avantajlar nedeniyle metastaz araştırmalarında yaygın olarak kullanılan ilk etkili murin aracıdır. Bu cilt kanseri hücre hattının bazı avantajları şunlardır:

Büyümesi kolay	B16 hücre hattının araştırma laboratuvarlarında kültürü kolaydır. Kanser hücresi biyolojisi, sinyal yolları ve daha fazlasını incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır.
Hızlı büyüyen	B16 melanom hücre hattı yüksek bir çoğalma oranı sergileyerek hücre bölünmesi ve büyüme süreçlerini incelemek için uygun hale gelir.
Tümörijenisite	B16, invazyon, migrasyon ve proliferasyon gibi tümör benzeri özelliklere sahip tümörijenik bir hücre hattıdır. Tümör oluşumu, ilerlemesi ve metastazını incelemek için değerlidir.

Dezavantajlar

B16 hücre hattı ile ilişkili dezavantajlar şunlardır:

İnsanla ilgili olmaması	B16'nın bir fare melanom hücre hattı olması nedeniyle insan cilt kanseri biyolojisini tam olarak temsil etmeyebilir ve araştırma bulgularının aktarılabilirliğini sınırlayabilir.
Heterojenlik	B16 hücreleri heterojendir, aynı kültür içinde çeşitli genetik ve fenotipik özellikler gösterir. Bu durum sonuç güvenilirliğini ve tekrarlanabilirliğini etkileyebilir.

4. b16 hücrelerinin uygulamaları

B16 hücre hattı araştırma çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının birkaç umut verici uygulaması şunlardır:

Tümör biyolojisi: Bu fare deri kanseri hücre hattı tümörijeniktir ve tümör biyolojisini anlamak için yaygın olarak kullanılmaktadır. B16 hücreleri kullanılarak tümör hücresi büyümesi, proliferasyonu ve metastazının arkasındaki hücresel mekanizmaları keşfetmek için çeşitli çalışmalar yapılmıştır. 2020'de yapılan bir araştırmada, melanom oluşumu, büyümesi ve metastazında uzun kodlamayan RNA, LncRNA MEG3'ün rolünü araştırmak için B16 hücreleri kullanılmıştır. Bu araştırma, kodlamayan RNA'nın bu hücresel olayları uyarmak için miRNA-21/E-Cadherin eksenini modüle ettiğini bulmuştur [2]. Bunun gibi, B16 hücreleri kullanılarak tümör kaynaklı immünosupresyonda Notch1 sinyalinin potansiyel rolünü araştırmak için araştırmalar yapılmıştır [3].
İlaç keşfi: B16 hücreleri, ilaç adaylarının potansiyel terapötik etkilerini doğrulamak ve test etmek için kullanılır. Bir çalışmada, B16 hücre hattı kullanılarak doğal bir bileşik olan neogambogik asidin anti-tümör etkisi değerlendirilmiştir. Çalışma sonuçları, bu bileşiğin kanser hücresi ölümüne neden olmak için PI3K/Akt/mTOR sinyal yolunu modüle ettiğini ortaya koymuştur [4]. Bir başka çalışmada, B16 hücre hattı kullanılarak bir saponin olan Ginsenoside Rg3'ün anti-melanom etkisi araştırılmıştır. Araştırma, bu doğal bileşiğin ERK ve Akt yolaklarını aşağı regüle ederek anti-tümör aktiviteye neden olduğunu öne sürmüştür [5].

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 305154

5.b16 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları

İşte B16 melanom hücre hattını içeren bazı önemli araştırma yayınları.

LncRNA MEG3, miR-21/E-cadherin eksenini modüle ederek melanom büyümesini, metastazını ve oluşumunu teşvik eder

Cancer Cell International dergisindeki (2020) bu yayın, uzun kodlamayan RNA MEG3'ün miRNA-21/E-Cadherin eksenini modüle ederek B16 melanom hücrelerinin oluşumunu, büyümesini ve metastazını artırdığını öne sürdü.

Yeni bir psoralen türevi-MPFC, B16 hücrelerinde p38 MAPK ve PKA sinyal yolaklarının aktivasyonu yoluyla melanogenezi artırır

Bu makale 2018 yılında International Journal of Molecular Medicine'de yayımlanmıştır. Bu çalışmada, bir psoralen türevi olan 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] kromen-2-on'un (MPFC) B16 hücrelerindeki melanojenik etkisi ve mekanizmaları araştırılmıştır. Çalışma, bu türevin PKA ve p38 MAPK hücre sinyalizasyonunu uyararak melanogenezi teşvik ettiğini öne sürmüştür.

Melanom hücrelerinde Notch1 sinyali, TGF-β1'in yukarı regülasyonu yoluyla tümör kaynaklı immünosupresyonu teşvik etti

Bu araştırma 2018 yılında Journal of Experimental & Clinical Cancer Research dergisinde yayımlanmıştır. Çalışma bulguları, B16 hücrelerinde Notch1 sinyalizasyonunun aktivasyonunun, TGF-β1 geninin ekspresyonunu artırarak antitümör bağışıklığı önleyebileceğini göstermektedir.

Neogambogik asit, PI3K/Akt/mTOR sinyal yolu üzerinden melanom B16 hücrelerinin apoptozunu indükler

Bu çalışma 2020 yılında Chunlan Wu ve meslektaşları tarafından yürütülmüş ve Acta Biochimica Polonica dergisinde yayımlanmıştır. Bu araştırma, doğal bir bileşik olan neogambogik asidin PI3K/Akt/mTOR sinyalizasyon kaskadını modüle ederek B16 melanom hücre ölümüne neden olabileceğini belirtmektedir.

Güçlü bir antikanser ajan olarak bir iridyum (III) kompleksi, AKT/mTOR yolağının inhibisyonu yoluyla B16 hücrelerinde apoptoz ve otofajiyi indükler

Bu araştırma makalesi 2018 yılında European Journal of Medicinal Chemistry'de yayımlandı. Bu çalışmada araştırmacılar, B16 melanom hücrelerini kullanarak bir bileşik olan iridyum (III) kompleksinin anti-kanser aktivitesini araştırdılar.

Ailanthone, melanom B16 ve A375 hücrelerinde hücre döngüsü durmasını ve apoptozu indükler

Bu çalışma, bir bitki biyoaktifi olan Ailanthone'un, B16 ve A375 melanom hücrelerinde apoptoz ve hücre döngüsü durmasını indükleyebildiği için antikanser potansiyeline sahip olduğunu ileri sürmüştür. Bu makale 2019 yılında Biomolecules dergisinde yayımlanmıştır.

6. b16 Hücre hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

B16 hücre hattında kültürleme ve transfeksiyon protokollerini açıklayan sınırlı kaynak vardır.

Melanom hücrelerinin kültüre alınması: Bu video melanom hücre hatlarının kültüre alınması için değerli ipuçları sunmaktadır.
Bir hücre hattını alt kültüre alma: Bu videoda bir hücre hattı için genel bir alt kültürleme protokolü açıklanmaktadır.
B16F10 hücre hattının transfeksiyonu: Bu video, B16 melanom hücrelerinin bir alt hattı için transfeksiyon protokolünü açıklamaktadır. B16 hücreleri için transfeksiyon protokolünü optimize etmenize yardımcı olabilir.

Aşağıda B16 hücreleri için bazı hücre kültürü protokolleri verilmiştir.

B16 hücrelerinin kültüre alınması: Bu web sitesi, büyüme ortamı, alt kültürleme, çözme ve hücrelerin dondurulması dahil olmak üzere B16 hücrelerinin kültürlenmesi için gerekli tüm bilgileri içerir.

Referanslar

Danciu, C., ve diğerleri, Dört farklı B 16 murin melanom hücre alt dizisinin davranışı: C57 BL/6J derisi. Uluslararası deneysel patoloji dergisi, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3, miR-21/E-cadherin eksenini modüle ederek melanom büyümesini, metastazını ve oluşumunu teşvik eder. Uluslararası kanser hücresi, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., ve diğerleri, Melanom hücrelerinde Notch1 sinyali, TGF-β1'in yukarı regülasyonu yoluyla tümör kaynaklı immünosupresyonu teşvik etti. Deneysel ve Klinik Kanser Araştırmaları Dergisi, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogambogic acid, PI3K/Akt/mTOR sinyal yolu üzerinden melanoma B16 hücrelerinin apoptozunu indükler. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., ERK ve Akt yolaklarının aşağı regülasyonu yoluyla melanomda ginsenosid Rg3'ün antitümör aktivitesi. Uluslararası Onkoloji Dergisi, 2019. 54(6): p. 2069-2079.