Ana sayfaya git

B16 Hücreleri - Onkoloji Araştırmalarında B16 Melanom Hücrelerine İlişkin Temel Kılavuz

B16, fare kökenli bir cilt kanseri (melanom) hücre hattıdır. Bu hücre hattı, insan cilt kanserlerini incelemek için etkili bir in vitro modeldir. Sık sık, katı tümör oluşumu ve kanser hücrelerinin metastazını araştırmak için kullanılır.

📋 B16 Hücre Hattı — Önemli Bilgiler
Büyüme Ortamı
B16 hücreleri, %10 fetal sığır serumu (FBS) içeren EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) besiyerinde kültürlenir. Büyüme besiyeri haftada 2-3 kez yenilenmelidir.
Çiftlenme Süresi
B16 hücreleri için ortalama popülasyon ikiye katlanma süresinin 24 saat olduğu tahmin edilmektedir.
Büyüme Tipi
B16 hücreleri yapışkandır ve tek tabaka halinde büyür.
Biyogüvenlik Seviyesi
BSL-1
Temin edilebilir
Cytion — B16 Siparişi

Bu makale, B16 melanom hücre hattının temellerini anlamanıza yardımcı olacaktır. Özellikle, aşağıdaki konuları ele alacaktır:

B16 hücre hattının genel özellikleri ve kökeni

Makalenin bu bölümünde, B16 melanom hücre hattının karakteristik özellikleri ele alınacaktır. Aşağıdaki sık sorulan soruların yanıtlarını öğreneceksiniz. Örneğin, B16 kanser hücre hattı nedir? B16 hücreleri nereden elde edilir? B16 hücrelerinin boyutu nedir?

  • B16 hücre hattı 1954 yılında kurulmuştur. Bu hücreler, Maine'deki Jackson Laboratories'de derilerinde kendiliğinden tümör oluşan C57BL/6J farelerinden elde edilmiştir.
  • Bunlar, dalak, karaciğer ve akciğerlere metastaz yapma yeteneğine sahip, melanin üreten epitel hücreleridir.
  • Melanom B16 hücreleri tek tabaka halinde büyür ve epitel benzeri ve iğ şeklinde hücre morfolojisi sergiler.
  • B16 hücre hattının boyutu yaklaşık 15,4 μm'dir.
  • B16 hücrelerinin B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 ve B16F10 dahil olmak üzere farklı alt klonları vardır. Bu alt hatlar, ana B16 hücrelerinden farklıdır ve bazı spesifik özellikleri korurlar. Örneğin, morfoloji, hücre boyutu ve diğer özellikler açısından farklılıklar gösterirler. B16F10, yüksek akciğer metastaz yeteneğine sahiptir ve B164A5, B16F10, B16-GMCSF ve B16FLT3 ile karşılaştırıldığında en agresif cilt kanseri hücre hattıdır [1].

Çevresindeki dokuyu iltihaplandıran malign melanom gibi büyüyen bir cilt kanserinin yakın plan görüntüsünü gösteren 3D animasyon.

B16 hücre hattının kültürleme bilgileri

Bir hücre hattını muhafaza etmeden veya kültürlemeden önce, ikiye katlanma süresi, hücre tipi, büyüme ortamı, kültürleme koşulları vb. hakkında önemli bilgileri araştırmanız gerekebilir. Bu bölüm, B16 hücrelerinin kültürlenmesi için gerekli tüm bilgileri içermektedir.

B16 Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar

Popülasyon Çiftleşme Süresi:

B16 hücreleri için ortalama popülasyon ikiye katlanma süresinin 24 saat olduğu tahmin edilmektedir.

Yapışkan veya Süspansiyon Halinde:

B16 hücreleri yapışkandır ve tek tabaka halinde büyür.

Tohumlama Yoğunluğu:

B16 hücrelerinin 1 ila 2 x 104 hücre/cm2 hücre yoğunluğunda ekilmesi önerilir. Yapışmış B16 hücreleri 1 x PBS ile durulanır ve Accutase çözeltisi kullanılarak yüzeyden ayrıştırılır. Hücreler santrifüjlenir ve hücre peleti büyüme ortamında yeniden süspansiyon haline getirilir. Daha sonra bu hücreler, büyüme için yeni bir şişeye aktarılır.

Büyüme Ortamı:

B16 hücreleri, %10 fetal sığır serumu (FBS) içeren EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) besiyerinde kültürlenir. Büyüme besiyeri haftada 2-3 kez yenilenmelidir.

Büyüme Koşulları:

B16 hücre hattının büyümesi için %5 CO2 beslemesi ve 37 °C sıcaklığa sahip nemlendirilmiş bir inkübatör kullanılır.

Saklama:

Bu hücreler, hücre canlılığını korumak için -150 °C'nin altındaki sıcaklıkta veya sıvı azotun buhar fazında saklanır.

Dondurma Süreci ve Ortamı:

B16 hücrelerini yavaş dondurma işlemiyle dondurmak için CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı kullanılır.

Çözme Süreci:

Dondurulmuş B16 hücreleri, antimikrobiyal ajan içeren bir su banyosunda 37 °C'de çözülür. Çözülmüş hücreler, büyüme ortamı içeren şişelere aktarılmak suretiyle doğrudan kültürlenebilir. Ayrıca, bu hücreler santrifüjlenerek dondurma ortamı bileşenleri uzaklaştırılabilir ve ardından yeni ortamlarda kültürlenebilir.

Biyogüvenlik Seviyesi:

B16 hücre hattı, biyogüvenlik seviyesi bir laboratuvarda işlenmeli veya muhafaza edilmelidir.

B16 cells

10x ve 20x büyütmede B16 melanom hücrelerinin yarı birleşik tabakası.

B16 hücre hattı: Avantajlar ve dezavantajlar

Diğer hücre hatları gibi, B16 da kendine özgü bir avantaj ve dezavantaj karışımına sahiptir. Bu melanom hücre hattının bazı önemli artıları ve eksileri bu bölümde listelenmiştir.

Avantajlar

B16, sunduğu avantajlar nedeniyle metastaz araştırmalarında yaygın olarak kullanılan ilk etkili fare hücre hattıdır. Bu cilt kanseri hücre hattının bazı avantajları şunlardır:

Yetiştirilmesi kolay

B16 hücre hattı, araştırma laboratuvarlarında kolayca kültürlenebilir. Kanser hücresi biyolojisi, sinyal yolları ve daha fazlasını incelemek için yaygın olarak kullanılır.

Hızlı büyüme

B16 melanom hücre hattı, yüksek bir çoğalma oranına sahiptir, bu da onu hücre bölünmesi ve büyüme süreçlerini incelemek için uygun hale getirir.

Tümörijeniklik

B16, invazyon, göç ve proliferasyon gibi tümör benzeri özelliklere sahip tümörjenik bir hücre hattıdır. Tümör oluşumu, ilerlemesi ve metastazını incelemek için değerlidir.

 

Dezavantajlar

B16 hücre hattıyla ilişkili dezavantajlar şunlardır:

İnsanlarla ilgisi olmaması

B16, bir fare melanom hücre hattı olduğu için insan cilt kanseri biyolojisini doğru bir şekilde temsil edemeyebilir ve bu da araştırma bulgularının uygulamaya aktarılabilirliğini sınırlayabilir.

Heterojenlik

B16 hücreleri heterojendir ve aynı kültür içinde çeşitli genetik ve fenotipik özellikler sergiler. Bu durum, sonuçların güvenilirliğini ve tekrarlanabilirliğini etkileyebilir.

 

B16 hücrelerinin uygulamaları

B16 hücre hattı, araştırma çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının birkaç umut verici uygulaması şunlardır:

  • Tümör biyolojisi: Bu fare cilt kanseri hücre hattı tümörjeniktir ve tümör biyolojisini anlamak için yaygın olarak kullanılır. B16 hücrelerini kullanarak tümör hücresi büyümesi, çoğalması ve metastazının arkasındaki hücresel mekanizmaları araştırmak için çeşitli çalışmalar yapılmıştır. 2020 yılında yapılan bir araştırma çalışmasında, B16 hücreleri kullanılarak uzun kodlamayan RNA olan LncRNA MEG3'ün melanom oluşumu, büyümesi ve metastazındaki rolü araştırılmıştır. Bu araştırma, kodlamayan RNA'nın miRNA-21/E-Cadherin eksenini modüle ederek bu hücresel olayları uyardığını ortaya koymuştur [2]. Benzer şekilde, B16 hücreleri kullanılarak tümörün neden olduğu immünosupresyonda Notch1 sinyalinin potansiyel rolünü araştırmak için bir çalışma yapılmıştır [3].
  • İlaç keşfi: B16 hücreleri, ilaç adaylarının potansiyel terapötik etkilerini doğrulamak ve test etmek için kullanılır. Bir çalışmada, B16 hücre hattı kullanılarak doğal bir bileşik olan neogambogik asidin anti-tümör etkisi değerlendirilmiştir. Çalışma sonuçları, bu bileşiğin PI3K/Akt/mTOR sinyal yolunu modüle ederek kanser hücresi ölümüne neden olduğunu ortaya koymuştur [4]. Başka bir çalışmada, B16 hücre hattı kullanılarak bir saponin olan Ginsenoside Rg3'ün anti-melanom etkisi araştırılmıştır. Araştırma, bu doğal bileşiğin ERK ve Akt yolaklarını aşağı regüle ederek anti-tümör aktivitesine neden olduğunu öne sürmüştür [5].

 

5. B16 Hücrelerini İçeren Araştırma Yayınları

İşte B16 melanom hücre hattını konu alan bazı önemli araştırma yayınları.

LncRNA MEG3, miR-21/E-kadherin eksenini modüle ederek melanomun büyümesini, metastazını ve oluşumunu teşvik eder

Cancer Cell International dergisinde (2020) yayınlanan bu makale, uzun kodlamayan RNA MEG3'ün miRNA-21/E-Cadherin eksenini modüle ederek B16 melanom hücrelerinin oluşumunu, büyümesini ve metastazını artırdığını öne sürmüştür.

Yeni bir psoralen türevi olan MPFC, B16 hücrelerinde p38 MAPK ve PKA sinyal yolaklarını aktive ederek melanogenezi artırır

Bu makale 2018 yılında International Journal of Molecular Medicine dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, B16 hücrelerinde bir psoralen türevi olan 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] kromen-2-on (MPFC) maddesinin melanojenik etkisini ve mekanizmalarını araştırmıştır. Çalışma, bu türevin PKA ve p38 MAPK hücre sinyalini uyararak melanogenezi teşvik ettiğini öne sürmüştür.

Melanom hücrelerinde Notch1 sinyalleşmesi, TGF-β1'in yukarı regülasyonu yoluyla tümör kaynaklı immünosupresyonu teşvik etmiştir

Bu araştırma, 2018 yılında Journal of Experimental & Clinical Cancer Research dergisinde yayınlanmıştır. Çalışmanın bulguları, B16 hücrelerinde Notch1 sinyal yolunun aktivasyonunun, TGF-β1 geninin ekspresyonunu artırarak antitümör bağışıklığı engelleyebileceğini göstermektedir.

Neogambogik asit, PI3K/Akt/mTOR sinyal yolunu kullanarak melanom B16 hücrelerinde apoptozu tetiklemektedir

Bu çalışma, 2020 yılında Chunlan Wu ve meslektaşları tarafından yürütülmüş ve Acta Biochimica Polonica dergisinde yayınlanmıştır. Bu araştırma, doğal bir bileşik olan neogambogik asidin, PI3K/Akt/mTOR sinyal kaskadını modüle ederek B16 melanom hücrelerinin ölümüne neden olabileceğini belirtmektedir.

Güçlü bir antikanser ajanı olan iridyum (III) kompleksi, AKT/mTOR yolunu inhibe ederek B16 hücrelerinde apoptozu ve otofajiyi indükler

Bu araştırma makalesi 2018 yılında European Journal of Medicinal Chemistry dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışmada araştırmacılar, B16 melanom hücrelerini kullanarak iridyum (III) kompleksi adlı bir bileşiğin antikanser aktivitesini incelemiştir.

Ailanthone, melanom B16 ve A375 hücrelerinde hücre döngüsü durmasını ve apoptozu indükler

Bu çalışma, bitkisel bir biyoaktif madde olan Ailanthone'un, B16 ve A375 melanom hücrelerinde apoptozu ve hücre döngüsü durmasını indükleyebildiği için antikanser potansiyeline sahip olduğunu öne sürmüştür. Bu makale 2019 yılında Biomolecules dergisinde yayınlanmıştır.

B16 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

B16 hücre hattının kültürleme ve transfeksiyon protokollerini açıklayan kaynaklar sınırlıdır.

Aşağıda, B16 hücreleri için bazı hücre kültürü protokolleri yer almaktadır. 

  • B16 hücrelerinin kültürü: Bu web sitesi, büyüme ortamları, alt kültür oluşturma, hücrelerin çözülmesi ve dondurulması dahil olmak üzere B16 hücrelerinin kültürü için gerekli tüm bilgileri içerir.

Referanslar

  1. Danciu, C. ve ark., Dört farklı B 16 fare melanom hücre alt hattının davranışı: C57 BL/6J derisi. Uluslararası deneysel patoloji dergisi, 2015. 96(2): s. 73-80.
  2. Wu, L., et al., LncRNA MEG3, miR-21/E-kadherin eksenini modüle ederek melanom büyümesini, metastazını ve oluşumunu teşvik eder. Uluslararası Kanser Hücresi Dergisi, 2020. 20: s. 1-14.
  3. Yang, Z., ve ark., Melanom hücrelerinde Notch1 sinyalleşmesi, TGF-β1'in yukarı regülasyonu yoluyla tümör kaynaklı immünosupresyonu teşvik etmiştir. Deneysel ve Klinik Kanser Araştırmaları Dergisi, 2018. 37(1): s. 1-13.
  4. Wu, C., ve ark., Neogambogik asit, PI3K/Akt/mTOR sinyal yolunu kullanarak melanom B16 hücrelerinde apoptozu indükler. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): s. 197-202.
  5. Meng, L., et al., Ginsenosid Rg3'ün ERK ve Akt yolaklarının aşağı regülasyonu yoluyla melanomda antitümör aktivitesi. Uluslararası Onkoloji Dergisi, 2019. 54(6): s. 2069-2079.

 

Farklı bir ülkede olduğunuzu veya şu anda seçili olandan farklı bir tarayıcı dili kullandığınızı tespit ettik. Önerilen ayarları kabul etmek ister misiniz?

Kapat