B16-F10 Hücreleri - Metastaz Araştırmalarında B16-F10 Melanom Hücre Hattının İncelenmesi
B16-F10 hücreleri, C57BL/6J faresinden elde edilen bir melanom hücre hattını oluşturur. Bu hücreler, cilt kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, tümörün gelişimi ve ilerlemesi ile terapötik müdahaleleri incelemek için bu hücreleri kullanır. Bu makale, B16-F10 melanom hücrelerinin temel özelliklerini ele alacaktır. Makalede özellikle şunlar yer alacaktır:
- Büyüme Ortamı
- B16-F10 hücreleri, DMEM besiyerinde kültürlenir. İdeal hücre büyümesi için besiyerine %10 FBS, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L Glikoz ve 1,0 mM Sodyum piruvat eklenir. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
- Çiftlenme Süresi
- B16-F10 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 20,1 saattir. Kültür koşullarına bağlı olarak 17 ila 21 saat arasında değişebilir.
- Büyüme Tipi
- B16-F10, yapışkan bir hücre hattıdır. Hücreler hızlı büyür ve tek tabakalı yapılar oluşturur.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Satın Alınabileceği Yer
- Cytion — B16-F10 Sipariş Et
- B16-F10 hücre hattının kökeni ve genel özellikleri
- B16-F10 hücrelerinin kültürleme bilgileri
- B16-F10 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar
- B16-F10 hücrelerinin araştırma uygulamaları
- B16-F10 Hücre Hattını Ele Alan Yayınlar
- B16-F10 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- B16-F10 hücre hattının kökeni ve genel özellikleri
- B16-F10 hücrelerinin kültürleme bilgileri
- B16-F10 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar
- B16-F10 hücrelerinin araştırma uygulamaları
- 5. B16-F10 Hücre Hattını Ele Alan Yayınlar
- B16-F10 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- Sıkça sorulan sorular
B16-F10 hücre hattının kökeni ve genel özellikleri
Bu bölümde, B16F10 melanom tümör hücrelerinin kökeni ve ayırt edici özellikleri hakkında bilgi edineceksiniz. Bu bilgiler, araştırma çalışmalarınızda hücre hattını verimli bir şekilde kullanmanıza yardımcı olacaktır. Temel olarak şunları öğreneceksiniz: B16-F10 hücreleri nedir? B16F10 neyden türetilmiştir? B16F12 hücre hattının morfolojisi nedir? B16F10 hücresinin boyutu nedir?
- B16-F10, C57BL/6J farelerinin deri dokusundan türetilen B16 tümör hücre hattının bir alt klonudur. Burada, B16F10 melanom hücreleri, bağışıklık sistemi zayıflamış veya singenik farelere B16 hattının intravenöz olarak enjekte edilmesinden sonra geliştirilmiştir. Bu hücreler, in vivo olarak metastaz yapmış akciğer kolonileri oluşturma potansiyelleri nedeniyle seçilmiş ve ardından in vitro olarak on döngü akciğer koloni oluşumu sonrasında sabitlenmiştir [1]. 1976 yılında Fidler ve meslektaşları tarafından geliştirilmiştir.
- B16-F10 hücre hatları, epitel benzeri ve iğ şeklinde bir görünüme sahiptir.
- B16-F10 hücrelerinin yaklaşık boyutu 15,4 ± 1,4 μm'dir [2].
B16-F1 ve B16-F10 hücreleri
B16-F1 ve B16-F10 hücreleri, B16 ana hücre hattından türetilmiştir. Her ikisi de aynı kaynaktan gelmektedir ve neredeyse benzer özelliklere sahiptir. Ancak, aralarındaki temel fark metastaz yetenekleridir. B16-F10 hücreleri yüksek, B16-F1 hücreleri ise düşük metastatik potansiyele sahiptir [3].
B16-F10 hücrelerinin kültürleme bilgileri
Bir hücre hattını işleme ve kültüre almadan önce, hücrelerin ikiye katlanma süresi, büyüme ortamı, koşullar ve hücre kültürü protokolleri hakkında bilgi sahibi olmalısınız. Bu bölümde şu konular ele alınacaktır: B16-F10 hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? B16-F10 hücreleri nasıl kültüre alınır? B16-F10 hücre ortamı nedir? B16-F10 hücreleri için hangi kültür koşulları önerilir?
B16-F10 Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
B16-F10 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 20,1 saattir. Kültür koşullarına bağlı olarak 17 ila 21 saat arasında değişebilir.
Yapışkan veya Süspansiyon Halinde:
B16-F10, yapışkan bir hücre hattıdır. Hücreler hızlı büyür ve tek tabaka oluşturur.
Bölünme oranı:
B16-F10 hücreleri 1:2 ila 1:4 bölünme oranında alt kültürlenir. Hücreler fosfat tamponlu salin (1x) ile yıkanır ve ardından oda sıcaklığında 8 ila 10 dakika boyunca Accutase pasaj çözeltisi ile inkübe edilir. Hücrelere taze besiyeri eklenir ve santrifüjlenir. Toplanan hücre peleti tekrar süspansiyon haline getirilir ve hücreler, bölme oranına göre taze kültür besiyeri içeren yeni şişeye dağıtılır.
Büyüme Ortamı:
B16-F10 hücreleri DMEM besiyerinde kültürlenir. Besiyerine ideal hücre büyümesi için %10 FBS, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L Glikoz ve 1,0 mM Sodyum piruvat eklenir. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:
B16-F10 hücreleri, %5 CO2 beslemesi ile 37 °C'de nemlendirilmiş bir inkübatörde büyütülür.
Saklama:
Dondurulmuş hücreler, hücre canlılığını korumak için -150 °C'nin altında elektrikli ultra düşük sıcaklık dondurucusunda veya sıvı azotun buhar fazında saklanır.
Dondurma Süreci ve Ortam:
B16-F10 hücreleri, saklama amacıyla CM-1 veya CM-ACF besiyerlerinde dondurulur. Bunun için, hücrelerin şoka girmesini önlemek amacıyla, sıcaklığın dakikada sadece 1 °C düşmesine izin veren yavaş bir dondurma işlemi önerilir.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş B16-F10 hücreleri, önceden ayarlanmış 37°C'lik su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca çözülür. Ardından, hücreler taze besiyerine eklenir ve dondurma besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Toplanan hücreler, bir büyüme besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirilir ve kültürleme için şişelere dökülür.
Biyogüvenlik Seviyesi:
B16-F10 hücre hattının işlenmesi ve muhafaza edilmesi için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar gereklidir.
B16-F10 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar
Diğer hücre hatları gibi, B16-F10 da bazı avantaj ve dezavantajlara sahiptir. Bu bölümde, bu deri melanom hücre hattının bazı önemli artıları ve eksileri ele alınmaktadır.
Avantajlar
B16-F10 hücre hattı, kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. B16-F10 hücrelerinin avantajları şunlardır:
Metastatik potansiyel
Deri melanomu B16F10 hücreleri yüksek metastaz potansiyeli sergiler, bu da onları kanser metastazı ve altta yatan mekanizmaların incelenmesi için değerli kılar.
İn vitro tümör modeli
B16-F10 hücreleri, kanserin ilerlemesini ve büyümesini incelemek için bir in vitro model görevi görür ve araştırmacıların kanseri tetikleyen hücresel ve moleküler mekanizmaları anlamalarına yardımcı olur.
Dezavantajlar
B16-F10 hücre hattıyla ilişkili dezavantajlar şunlardır:
Fare kaynaklı hücre hattı
B16-F10, fare kaynaklı bir hücre hattıdır ve bu da insanlara özgü çalışmalarda uygulanabilirliğini sınırlamaktadır. Bu hücrelerden elde edilen araştırma bulguları, her zaman insan biyolojisine tam olarak uygulanamayabilir.
B16-F10 hücrelerinin araştırma uygulamaları
B16-F10 hücre hattı, kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının birkaç umut verici uygulaması burada ele alınmaktadır.
- Kanser araştırması: B16-F10 hücre hattı, proliferasyon, invazyon, migrasyon ve hücre ölümü veya apoptoz dahil olmak üzere kanser hücresi süreçlerini incelemek için değerli bir modeldir. Ayrıca, araştırmacıların bu hücresel süreçleri yönlendiren moleküler mekanizmalar ve yolaklar hakkında bilgi edinmelerine yardımcı olur. 2018 yılında yapılan bir çalışmada, melanom hücrelerinde epitelyal-mezenkimal hücre geçişi ve metastazda CCR5'in (C-C kemokin reseptörü tip beş) rolü araştırılmıştır. Bulgular, CCR5 eksikliğinin tümör büyümesini ve metastazı kısıtladığını, buna karşın yüksek ekspresyonun B16-F10 hücrelerinin büyümesini ve metastazını artırdığını ortaya koymuştur. Daha ileri araştırmalar, CCR5'in, epitelyal-mezenkimal geçişi ve hücre göçünü teşvik etmek için PI3K/AKT/GSK3β sinyalini düzenleyen TGFβ1 ekspresyonunu düzenlediğini bildirmiştir [4].
- İlaç testi ve geliştirme: B16F10 melanom tümör hücreleri oldukça agresiftir ve bu nedenle potansiyel anti-tümör ilaçları ve tedavileri test etmek için uygundur. Araştırmacılar bu hücreleri kullanarak farklı bileşiklerin hücre büyümesi, çoğalması ve metastazı üzerindeki etkisini değerlendirir ve ilaç geliştirmeye yardımcı olurlar. 2018 yılında Valentina Nanni ve meslektaşları tarafından yürütülen bir çalışmada, Spartium junceumçiçeklerinin hidroalkolik ekstraktının terapötik etkileri araştırılmıştır. Çalışma, çiçek ekstraktının B16-F10 hücrelerinde yaşlanmayı tetiklemede etkili olduğunu ve bunun da hücre büyümesini ve melanogenezi baskılayarak potansiyel anti-kanser aktiviteleri sergileyebileceğini öne sürmüştür [5].
5. B16-F10 hücre hattını içeren yayınlar
B16-F10 melanom hücre hattını ele alan bazı önemli araştırma yayınları şunlardır:
Bu çalışma Nutrients (2020) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışmada, Sorghum bicolor etanolik ekstraktının cilt melanomu B16F10 hücrelerinde anti-melanojenik bir etkiye sahip olduğu öne sürülmüştür.
Kalsitriyol, B16–F10 Hücrelerinde Proliferasyonu Engeller ve Potansiyel Olarak Apoptozu İndükler
Medical Science Monitor Basic Research (2022) dergisinde yayınlanan araştırma, kalsitriol ilacının B16-F10 melanom hücrelerinde proliferasyonu inhibe ederek ve apoptozu indükleyerek anti-tümör etkileri sergilediğini öne sürmüştür.
Bu makale, Biochemical and Biophysical Research Communications (2022) dergisinde yayınlanmıştır. Bulgular, resorsinolik lipitler olan kardollerin B16-F10 hücre hattı üzerinde yoğun sitotoksisite gösterdiğini ortaya koymuştur.
Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) dergisinde yayınlanan çalışma, B16-F10 hücrelerini kullanarak Ginkgo biloba dış kabuk ekstraktının antimetastatik potansiyelini araştırmıştır.
World Neurosurgery (2018) dergisinde yayınlanan bu araştırma, timokinonun B16-F10 hücre büyümesini baskıladığı ve apoptozu indüklediği için intraserebral metastatik lezyonlara karşı etkili bir tedavi olabileceğini öne sürmüştür.
B16-F10 Hücre Hattı için Kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
B16F10 endotel hücreleri, cilt kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. İşte bu hücrelerin kültürleme ve transfeksiyon protokollerini açıklayan bazı çevrimiçi kaynaklar:
- B16F10 melanom hücrelerinin transfeksiyonu: Bu video eğitimi, B16-F10 hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmenize yardımcı olabilir.
- B16-F10 transfeksiyonu: Bu belge, cilt melanomu B16F10 hücreleri için in vitro DNA transfeksiyon protokolünü açıklamaktadır.
Aşağıdaki bağlantı, B16-F10 hücreleri için hücre kültürü protokolünü içerir:
- B16-F10 alt kültürü: Bu web sitesi, B16F10 melanom tümör hücreleri hakkında yararlı bilgiler içerir. Büyüme ortamları, ikiye katlanma süresi, hücrelerin alt kültürü için kültür koşulları ve protokolü ile kriyoprezervasyonlu ve proliferatif kültürlerin işlenmesi gibi konuları kapsar.
Referanslar
- Poste, G., et al., Kültürlenmiş hücre hatlarından, subkutan tümörlerden ve bireysel akciğer metastazlarından izole edilen B16 melanom klonlarının metastatik özelliklerinin karşılaştırılması. Kanser Araştırması, 1982. 42(7): s. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono ve S. Sugita, Konik Mikroakışkan Cihaz Kullanarak (-)-Epigallocatechin Gallate Tedavisinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi için B16 Melanom Hücre Varyantlarının Mekanofenotiplemesi. Micromachines, 2019. 10(3): s. 207.
- Danciu, C. ve ark., Dört farklı B16 fare melanom hücre alt hattının davranışı: C57BL/6J derisi. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): s. 73-80.
- Liu, J. ve ark., Melanomda CCR5'in yüksek ekspresyonu, TGFβ1 yoluyla epitelyal-mezenkimal geçişi ve metastazı artırır. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): s. 481-493.
- Nanni, V., et al., Spartium junceum L. çiçeklerinin hidroalkolik ekstresi, yaşlanmayı indükleyerek B16-F10 hücrelerinde büyümeyi ve melanogenezi inhibe eder. Phytomedicine, 2018. 46: s. 1-10.