B16-F10 Hücreleri - Metastaz Araştırmalarında B16-F10 Melanom Hücre Hattının Keşfedilmesi

B16-F10 hücreleri, C57BL/6J faresinden elde edilen bir melanom hücre hattını oluşturmaktadır. Cilt kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılırlar. Araştırmacılar bu hücreleri tümör gelişimi ve ilerlemesi ile terapötik müdahaleleri incelemek için kullanmaktadır. Bu makale B16-F10 melanom hücrelerinin temel yönlerini ele alacaktır. Özellikle şunları içerecektir:

B16-F10 hücre hattının kökeni ve genel özellikleri
B16-F10 hücrelerinin kültürleme bilgileri
B16-F10 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar
B16-F10 hücrelerinin araştırma uygulamaları
B16-F10 Hücre hattını içeren yayınlar
B16-F10 Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1. B16-F10 hücre hattının kökeni ve genel özellikleri

Bu bölüm size B16F10 melanom tümör hücrelerinin kökeni ve ayırt edici özellikleri hakkında bilgi verecektir. Araştırma çalışmalarınızda hücre hattını verimli bir şekilde kullanmanıza yardımcı olacaktır. Temel olarak şunları öğreneceksiniz: B16-F10 hücreleri nedir? B16F10 neyden türetilmiştir? B16F12 hücre hattının morfolojisi nedir? B16F10 hücresinin boyutu nedir?

B16-F10, C57BL/6J fare deri dokusundan türetilen B16 tümör hücre hattının bir alt klonudur. Burada, B16F10 melanom hücreleri, B16 hattının bağışıklık sistemi baskılanmış veya sinjenik farelere intravenöz olarak enjekte edilmesinden sonra geliştirilmiştir. Bu hücreler in vivo olarak metastaz yapmış akciğer kolonileri oluşturma potansiyellerine göre seçilmiş ve daha sonra in vitro olarak on döngü akciğer kolonisi oluşumundan sonra oluşturulmuştur [1]. Fidler ve meslektaşları tarafından 1976 yılında geliştirilmiştir.
B16-F10 hücre hatları epitel benzeri ve iğ şeklinde bir görünüme sahiptir.
B16-F10 hücrelerinin yaklaşık boyutu 15,4 ± 1,4 μm'dir [2].

B16-F1 ve B16-F10 hücreleri

B16-F1 ve B16-F10 hücreleri B16 ana hücre hattından türetilmiştir. Her ikisi de aynı kökene ve neredeyse benzer özelliklere sahiptir. Bununla birlikte, temel fark metastatik yetenekleridir. B16-F10 hücreleri yüksek, B16-F1 ise düşük metastatik potansiyele sahiptir [3].

Bir malign melanom tümörünün mikroskop altında yüksek oranda büyütülmüş kesiti.

2.b16-F10 hücrelerinin kültürleme bilgileri

Bir hücre hattını kullanmadan ve geliştirmeden önce, iki katına çıkma süresi, büyüme ortamı, koşullar ve hücre kültürü protokolleri hakkında bilgi sahibi olmalısınız. Bu bölümde tartışılacaktır: B16-f10 hücrelerinin ikiye katlanma süresi nedir? B16F10 hücrelerini nasıl kültüre alırsınız? B16-F10 hücre ortamı nedir? B16-F10 hücreleri için hangi kültür koşulları önerilir?

B16-F10 Hücrelerini Kültürlemek için Önemli Noktalar

İki Katına Çıkma Süresi:	B16-F10 hücrelerinin ikiye katlanma süresi yaklaşık 20,1 saattir. Kültür koşullarına bağlı olarak 17 ila 21 saat arasında değişebilir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	B16-F10 yapışık bir hücre hattıdır. Hücreler hızlı büyür ve tek tabaka oluşturur.
Bölünme oranı:	B16-F10 hücreleri 1:2 ila 1:4 bölünme oranında alt kültüre alınır. Hücreler fosfat tampon salin (1x) ile yıkanır ve ardından Accutase pasajlama solüsyonu ile ortam sıcaklığında 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Hücrelere taze besiyeri eklenir ve santrifüjlenir. Hasat edilen hücre peleti tekrar süspanse edilir ve hücreler taze kültür ortamı içeren yeni şişeye bölünme oranına göre dağıtılır.
Büyüme Ortamı:	B16-F10 hücreleri DMEM ortamında kültürlenir. Ortam, ideal hücre büyümesi için %10 FBS, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L Glukoz ve 1,0 mM Sodyum piruvat ile desteklenir. Ortam haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:	B16-F10 hücreleri nemlendirilmiş bir inkübatörde 37 °C'de %5 CO2 kaynağı ile büyütülür.
Depolama:	Dondurulmuş hücreler, hücre canlılığını korumak için elektrikli ultra düşük sıcaklıklı dondurucuda veya sıvı nitrojenin buhar fazında -150 °C'nin altında saklanır.
Dondurma İşlemi ve Ortam:	B16-F10 hücreleri depolama için CM-1 veya CM-ACF ortamında dondurulur. Bunun için, hücrelerin herhangi bir şok yaşamasını önlemek amacıyla dakikada sadece 1°C sıcaklık düşüşüne izin veren yavaş bir dondurma işlemi önerilir.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş B16-F10 hücreleri önceden ayarlanmış 37°C su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca çözdürülür. Ardından, hücreler taze besiyerine eklenir ve donmuş besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Toplanan hücreler bir büyüme ortamında yeniden süspanse edilir ve kültürleme için flasklara dökülür.
Biyogüvenlik Seviyesi:	B16-F10 hücre hattının kullanımı ve bakımı için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar gereklidir.

20x ve 10x büyütmede yarı akıcı B16-F10 hücreleri.

3.b16-F10 hücreleri: Avantajlar ve dezavantajlar

Diğer hücre hatları gibi B16-F10 da bazı avantajlar ve dezavantajlar sergilemektedir. Bu cilt melanom hücre hattının bazı önemli artıları ve eksileri bu bölümde tartışılmaktadır.

Avantajlar

B16-F10 hücre hattı kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. B16-F10 hücrelerinin avantajları şunlardır:

Metastatik potansiyel	Deri melanomu B16F10 hücreleri yüksek metastatik potansiyel sergilemekte, bu da onları kanser metastazı ve altında yatan mekanizmaları incelemek için değerli kılmaktadır.
İn vitro tümör modeli	B16-F10 hücreleri, kanser ilerlemesi ve büyümesini incelemek için in vitro bir model görevi görerek araştırmacıların kansere yol açan hücresel ve moleküler mekanizmaları anlamalarına yardımcı olur.

Dezavantajlar

B16-F10 hücre hattı ile ilişkili dezavantajlar şunlardır:

Fare türevi hücre hattı

B16-F10 fare türevi bir hücre hattıdır ve insana özgü çalışmalara uygulanabilirliğini sınırlamaktadır. Bu hücrelerden elde edilen araştırma bulguları her zaman insan biyolojisine tam olarak tercüme edilemeyebilir.

4.b16-F10 hücrelerinin araştırma uygulamaları

B16-F10 hücre hattı kanser araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattının birkaç umut verici uygulaması burada tartışılmaktadır.

Kanser araştırmaları: B16-F10 hücre hattı, proliferasyon, invazyon, migrasyon ve hücre ölümü veya apoptoz dahil olmak üzere kanser hücresi süreçlerini incelemek için değerli bir modeldir. Ayrıca, araştırmacıların bu hücresel süreçleri yönlendiren moleküler mekanizmalar ve yolaklar hakkında bilgi edinmelerine yardımcı olur. 2018'de yapılan bir çalışmada, melanom hücrelerinin epitelden mezenkimal hücreye geçişinde ve metastazında CCR5'in (C-C kemokin reseptörü tip beş) rolü araştırılmıştır. Bulgular, CCR5 eksikliğinin tümör büyümesini ve metastazı kısıtladığını, yüksek ekspresyonun ise B16-F10 hücrelerinin büyümesini ve metastazını artırdığını ortaya koymuştur. Daha ileri araştırmalar, CCR5'in TGFβ1 ekspresyonunu düzenlediğini, bunun da PI3K/AKT/GSK3β sinyalizasyonunu düzenleyerek epitelden mezenkimal geçişi ve hücre göçünü teşvik ettiğini bildirmiştir [4].
İlaç testi ve geliştirme: B16F10 melanom tümör hücreleri oldukça agresiftir ve bu nedenle potansiyel anti-tümör ilaçları ve tedavilerini test etmek için uygundur. Araştırmacılar bu hücreleri kullanarak farklı bileşiklerin hücre büyümesi, proliferasyonu ve metastazı üzerindeki etkisini değerlendirerek ilaç geliştirmeye yardımcı olmaktadır. Valentina Nanni ve meslektaşları tarafından 2018 yılında gerçekleştirilen bir çalışmada, Spartium junceum çiçeklerinin hidroalkolik özütünün terapötik etkileri araştırılmıştır. Çalışma, çiçek özütünün B16-F10 hücrelerinde senesensi indüklemede etkili olduğunu, bunun da hücre büyümesi ve melanogenez baskılanmasına yol açtığını, dolayısıyla potansiyel anti-kanser aktiviteleri gösterebileceğini öne sürmüştür [5].

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 305157

5.b16-F10 Hücre hattını içeren yayınlar

İşte B16-F10 melanom hücre hattını içeren bazı önemli araştırma yayınları:

Sorgum bicolor 'un Etanolik Özütünün B16/F10 Melanom Hücrelerinde IBMX ile İndüklenen Melanogenez Üzerine Anti-Melanojenik Etkisi

Bu çalışma Nutrients (2020) dergisinde yayımlanmıştır. Sorgum bicolor etanolik ekstraktının deri melanomu B16F10 hücrelerinde anti melanojenik etkiye sahip olduğunu öne sürmüştür.

Kalsitriol B16-F10 Hücrelerinde Proliferasyonu Engelliyor ve Potansiyel Olarak Apoptozu İndüklüyor

Medical Science Monitor Basic Research (2022) dergisinde yayınlanan araştırma, kalsitriol ilacının B16-F10 melanom hücrelerinde proliferasyonu inhibe ederek ve apoptozu indükleyerek anti-tümör etkiler gösterdiğini öne sürmüştür.

Kardollerin prooksidatif etkisi, murin B16-F10 melanom hücrelerine karşı sitotoksik aktivitelerinde rol oynar

Bu makale Biochemical and Biophysical Research Communications (2022) dergisinde yayımlanmıştır. Bulgular, resorsinolik lipidler olan Cardollerin B16-F10 hücre hattı üzerinde yoğun sitotoksisite uyguladığını ortaya koymuştur.

Ginkgo biloba ekzokarp ekstresi, PI3K/akt/NF-κB/MMP-9 sinyal yolunu içeren B16-F10 melanom metastazını inhibe eder

Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) dergisinde yayınlanan çalışmada, B16-F10 hücreleri kullanılarak Ginkgo biloba ekzokarp ekstraktının antimetastatik potansiyeli araştırılmıştır.

Timokinon, p-STAT3 inhibisyonu yoluyla B16-F10 melanom hücresinde apoptozu indükler ve bir murin intraserebral melanomda tümör büyümesini inhibe eder ..

World Neurosurgery'deki (2018) bu araştırma, timokinonun B16-F10 hücre büyümesini baskıladığı ve apoptozu indüklediği için intraserebral metastatik lezyonlara karşı etkili bir tedavi olabileceğini öne sürmüştür.

6.b16-F10 Hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

B16F10 endotel hücreleri cilt kanseri araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. İşte kültürleme ve transfeksiyon protokollerini açıklayan bazı çevrimiçi kaynaklar:

B16F10 melanom hücreleri transfeksiyonu: Bu eğitim videosu, B16-F10 hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmenize yardımcı olabilir.
B16-F10 transfeksiyonu: Bu belge cilt melanomu B16F10 hücreleri için in vitro DNA transfeksiyon protokolünü açıklayacaktır.

Aşağıdaki bağlantı B16-F10 hücreleri için hücre kültürü protokolünü içermektedir:

B16-F10 alt kültürleme: Bu web sitesi B16F10 melanom tümör hücreleri hakkında yararlı bilgiler içermektedir. Büyüme ortamı, ikiye katlama süresi, kültür koşulları ve hücreleri alt kültüre alma protokolü ile kriyoprezerve ve proliferatif kültürlerin işlenmesini içerir.

Referanslar

Poste, G., ve diğerleri, Kültürlenmiş hücre hatlarından, deri altı tümörlerden ve bireysel akciğer metastazlarından izole edilen B16 melanom klonlarının metastatik özelliklerinin karşılaştırılması. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
Nakamura, M., D. Ono ve S. Sugita, Konik Mikroakışkan Cihaz Kullanılarak (-)-Epigallocatechin Gallate Tedavisinin Etkinliğinin Değerlendirilmesi için B16 Melanoma Hücre Varyantlarının Mekanofenotiplendirilmesi. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
Danciu, C., et al., Dört farklı B16 murin melanom hücre alt dizisinin davranışı: C57BL/6J derisi. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
Liu, J., et al., Melanomda yüksek CCR5 ekspresyonu, TGFβ1 aracılığıyla epitelyal-mezenkimal geçişi ve metastazı artırır. Patoloji Dergisi, 2019. 247(4): p. 481-493.
Nanni, V., et al., Spartium junceum L. çiçeklerinin hidroalkolik ekstresi, senesensi indükleyerek B16-F10 hücrelerinde büyümeyi ve melanogenezi inhibe eder. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.