ARPE-19 Hücreleri - ARPE-19 ile Retina Pigment Epitel Hücreleri Araştırmalarına Özel Bir Bakış
ARPE-19, insan kaynaklı, kendiliğinden ortaya çıkan retina pigment epitel hücreleridir. Retina biyolojisi, patolojik durumlar ve terapötik müdahaleler (farmakoloji) ile ilgili çeşitli konuları incelemek için kullanılırlar. Bu makale, ARPE-19 ölümsüzleştirilmiş hücreler hakkında kapsamlı bilgiler sunmayı amaçlamaktadır. Makalede ağırlıklı olarak hücre hattının genel özellikleri, kültür koşulları ve çeşitli araştırma uygulamaları ele alınacaktır. Bu nedenle, bu makaleyi okuyarak aşağıdaki konularda kapsamlı bir anlayış kazanacaksınız:
- Büyüme Ortamı
- ARPE-19 hücre hattının kültürlenmesi için DMEM veya Ham’s F12 besiyeri kullanılır. ARPE-19 besiyeri, %5 FBS, 3,1 g/L glikoz, 15 mM HEPES, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM sodyum piruvat ve 1,2 g/L NaHCO3 ile takviye edilir. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilir.
- Çoğalma Süresi
- ARPE-19'un ikiye katlanma süresi yaklaşık 55-65 saattir. Popülasyonları 48 defaya kadar ikiye katlanabilir.
- Büyüme Tipi
- ARPE-19, yapışkan bir hücre hattıdır.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Temin Edilebilir
- Cytion — Sipariş ARPE-19
- ARPE-19 hücreleri: Köken ve genel özellikler
- ARPE-19 hücre hattı: Kültüre alma bilgileri
- ARPE-19 hücrelerinin avantajları ve sınırlamaları
- Araştırmada ARPE-19 hücre hattının uygulamaları
- ARPE-19 hücreleri: Araştırma yayınları
- ARPE-19 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- ARPE-19 hücreleri: Kökeni ve genel özellikleri
- ARPE-19 hücre hattı: Kültüre alma bilgileri
- ARPE-19 hücrelerinin avantajları ve sınırlamaları
- Araştırmada ARPE-19 hücre hattının uygulamaları
- 5. ARPE-19 hücreleri: Araştırma yayınları
- ARPE-19 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- Sıkça sorulan sorular
ARPE-19 hücreleri: Kökeni ve genel özellikleri
Bir hücre hattının kökenini ve genel özelliklerini bilmek, araştırmada etkili bir şekilde kullanılabilmesi için zorunludur. Bu makale bölümü, ARPE hücre hattı hakkındaki tüm bilgileri ele alacaktır. Örneğin, ARPE-19 hücre hattı nedir? Neden ARPE-19 hücreleri kullanılır? ARPE-19/HPV-16 hücre hattı nedir? ARPE-19 hücreleri ölümsüz mü? ARPE 19 hücre morfolojisi ve boyutu nedir?
- Ölümsüzleştirilmiş retina pigment epitel hücre hattı olan ARPE-19, bir kazada kafa travması sonucu hayatını kaybeden 19 yaşındaki bir erkeğin gözlerinden elde edilmiştir. 1986 yılında Amy Aotaki-Keen tarafından kurulmuştur.
- Bu hücreler, retina pigment epitel hücre belirteçlerini, yani CRALBP ve RPE-65'i eksprese ederler; bu da, morfolojik ve fonksiyonel polarite ile karakterize edilen stabil tek tabakalar oluşturabileceklerini düşündürür.
- ARPE-19 hücreleri, epitel hücresi benzeri bir morfolojiye sahiptir.
- ARPE-19 hücreleri, kromozom 9 ve 19'un uzun kolunda sırasıyla bir delesyon ve bir ekleme dışında çoğunlukla normal karyotipe sahiptir. Ayrıca, bazı anöploidiler de gözlemlenmektedir [1].
ARPE-19 hücre hattı: Kültüre alma bilgileri
Temel hücre kültürü bilgileri, bir hücre hattının doğru şekilde işlenmesi ve bakımı için çok önemlidir. Bu bölüm, ARPE-19 hücre hattı kültürüyle ilgili temel noktaları öğrenmenize yardımcı olacaktır. Öğrenecekleriniz: ARPE-19 ikiye katlanma süresi nedir? ARPE-19 tohumlama yoğunluğu nedir? ARPE-19 hücre yoğunluğu nedir? ARPE-19 dondurma ortamı nedir? ARPE-19 hücre hattı nasıl kültürlenir?
ARPE-19 Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar
Popülasyon Çoğalma Süresi:
ARPE-19'un ikiye katlanma süresi yaklaşık 55-65 saattir. Nüfusları 48 kata kadar ikiye katlanabilir.
Yapışkan mı, Süspansiyon mu:
ARPE-19, yapışkan bir hücre hattıdır.
Alt kültürleme oranı:
ARPE-19'un alt kültür oranı 1:3 ila 1:5'tir. Yapışkan hücreler 1x PBS ile durulanır ve ayrıştırma çözeltisi olan accutase ile 8 ila 10 dakika inkübe edilir. Ayrılan hücrelere taze besiyeri eklenir ve santrifüjlenir. Hücre peleti tekrar süspansiyon haline getirilir ve taze besiyeri içeren bir kültür şişesine dökülür.
Büyüme Ortamı:
ARPE-19 hücre hattını kültürlemek için DMEM veya Ham’s F12 besiyeri kullanılır. ARPE-19 besiyerine %5 FBS, 3,1 g/L glikoz, 15 mM HEPES, 1,6 mM L-glutamin, 1,0 mM sodyum piruvat ve 1,2 g/L NaHCO3 eklenir. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilir.
Büyüme Koşulları:
ARPE-19 hücreleri, %5 CO2 beslemesi ile 37°C sıcaklıktaki nemlendirilmiş bir inkübatörde tutulur.
Saklama:
Hücre hattı, hücrelerin canlılığını uzun süre korumak için sıvı azotun buhar fazında veya -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda saklanabilir.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
ARPE-19 dondurma ortamı olarak CM-1 veya CM-ACF kullanılır. Kısaca, hücreler, sıcaklığın dakikada sadece 1 °C düşmesine izin veren ve hücreleri şoktan koruyan yavaş dondurma yöntemi ile dondurulur.
Çözme Süreci:
Hücreler, önceden 37°C'ye ayarlanmış bir su banyosunda çözülür. Küçük bir buz parçası kaldıktan sonra, hücreler taze kültür ortamına eklenir ve santrifüjlenir. Bu işlem, dondurma ortamı bileşenlerini giderir. Ardından, hücre peleti yeniden süspansiyon haline getirilir ve hücreler kültürleme için bir şişeye aktarılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:
ARPE-19 hücreleri biyogüvenlik seviye 1 laboratuvarlarında işlenir.
ARPE-19 Hücrelerinin Avantajları ve Sınırlamaları
ARPE-19 hücreleri, retina hücre biyolojisi çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Diğer hücreler gibi, bu hücrelerin de bazı avantajları ve sınırlamaları vardır. Bunlardan birkaçı bu bölümde listelenmiştir:
Avantajlar
ARPE-19 hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:
Retina hücre modeli
ARPE-19 hücreleri, insan retina pigment epitel hücrelerine çok benzemektedir, bu da onları retina hastalıklarının incelenmesi ve ilaç testleri için ideal hale getirir.
Kararlı büyüme hızı
Bu hücreler istikrarlı bir büyüme gösterir ve uzun süreler boyunca muhafaza edilebilir, bu da uzun vadeli deneyleri kolaylaştırır.
Transfeksiyon uygunluğu
ARPE-19 hücre hattı, hem geçici hem de stabil ekspresyon çalışmalarında yaygın olarak kullanılan mükemmel bir transfeksiyon konakçısıdır.
Sınırlamalar
ARPE-19 hücre hattıyla ilgili bazı sınırlamalar şunlardır:
Sınırlı Farklılaşma
ARPE-19'un farklılaşması, birincil retina hücrelerine kıyasla sınırlıdır. Bu durum, farklılaşma ile ilgili bazı çalışmaları potansiyel olarak etkileyebilir.
Araştırmada ARPE-19 hücre hattının uygulamaları
ARPE-19 hücre hattının retina araştırmalarında çok sayıda uygulaması bulunmaktadır. Burada, bu retina pigment epitel hücre hattının bazı spesifik ve önemli araştırma kullanımlarından bahsettik.
- Retina hastalığı araştırması: ARPE-19 hücreleri, retina patogenezi hakkında değerli bilgiler sunar. Araştırmacılar, hastalık mekanizmalarını ve potansiyel tedavileri araştırmak için bu hücreleri kullanır. 2020 yılında yapılan bir çalışmada, dairesel RNA hsa_circ_0041795'in miRNA-646 ve VEGFC ile etkileşime girerek insan retina pigment epitel hücreleri ARPE-19'da yüksek glikozun neden olduğu hasarı kolaylaştırdığı bulunmuştur. Bu nedenle çalışma, bu dairesel RNA'yı diyabetik retinopatiyle mücadelede etkili bir terapötik ve tanısal hedef olarak önermektedir [2]. Benzer şekilde, Jing Yang ve meslektaşları ARPE-19 hücrelerini kullanarak diyabetik retinopatinin patogenezi hakkında bilgiler sağlamıştır. lncRNA SNHG1'i (Küçük Nükleolar RNA Konakçı Geni 1) inhibe etmenin, yüksek glikoz ile tedavi edilen ARPE-19 hücrelerinde inflamatuar yanıtı ve epitelyal-mezenkimal geçişi baskılayabileceğini araştırdılar [3].
- İlaç testleri: ARPE-19 hücreleri, ilaçların ve bileşiklerin etkinliğini ve güvenliğini değerlendirmek için kullanılır ve retina hastalıkları için tedaviler veya terapiler geliştirilmesine yardımcı olur. Örneğin, 2019 yılında yapılan bir çalışmada, Syzygium malaccense biyoaktiflerinin insan retina pigment epitel hücreleri olan ARPE-19'da hidrojen peroksit kaynaklı strese karşı koruyucu etkileri saptanmıştır [4]. Bunu takiben yapılan bir çalışmada, Prunella vulgaris var. L özütünün, ARPE-19 hücrelerinde ve fare modelinde mavi ışığın neden olduğu hasara karşı terapötik rolü saptanmıştır [5].
5. ARPE-19 hücreleri: Araştırma yayınları
Aşağıda, ARPE-19 retina pigment epitel hücrelerini konu alan bazı ilginç araştırma yayınları yer almaktadır.
ARPE-19 hücrelerinde oksidatif strese karşı mikroRNA tepkilerinin değerlendirilmesi
Bu araştırma makalesi 2018 yılında Cutaneous and Ocular Toxicology dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, hidrojen peroksit tedavisi yoluyla ARPE-19 insan retina pigment epitel hücrelerinde indüklenen oksidatif strese yanıt olarak miRNA ekspresyonunu değerlendirmiştir.
World Journal of Stem Cells (2021) dergisinde yayınlanan bu makale, ARPE-19 hücrelerinin koşullandırılmış ortamının, yağ dokularından elde edilen mezenkimal kök hücrelerin nöral farklılaşmasını teşvik eden büyüme faktörleri içerdiğini öne sürmüştür.
Bu çalışma International Journal of Molecular Sciences (2019) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışmada, quercetin'in, enflamatuar yanıtı iyileştirmek için MAPK ve NF-κB kaskadlarının aktivasyonunu önleyerek ARPE-19 hücrelerinde IL-1β ile uyarılan kemokin salınımını koruduğu belirtilmektedir.
Bu araştırma makalesi, International Journal of Molecular Sciences (2018) dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışma, oksidatif stres ve inflamasyonun ARPE-19 hücrelerinde SIRT1 (Sirtuin 1) ve DNMT'ler (DNA metiltransferazlar) fonksiyonları ile LINE-1 (uzun aralıklı nükleer eleman-1) metilasyonu üzerindeki olası etkilerini değerlendirmiştir.
Antioxidants (2022) dergisinde yayınlanan bu makale, Chrysanthemum boreale Çiçek Ekstraktlarının ARPE-19 hücrelerinde N-retiniliden-N-retiniletanolamin (A2E) kaynaklı retina hasarına karşı koruyucu etkiler gösterdiğini ortaya koymuştur.
ARPE-19 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
ARPE-19, yaygın olarak kullanılan bir retina epitel hücre hattıdır. ARPE-19 hücre kültürü ve transfeksiyon protokollerini kapsayan mevcut kaynaklar burada listelenmiştir:
- ARPE-19 transfeksiyonu: Bu video, ARPE-19 hücre hattı için transfeksiyon protokolünü öğrenmeye yönelik adım adım bir kılavuzdur.
ARPE-19 hücre kültürü protokolünü açıklayan bazı kaynaklar şunlardır:
- ARPE-19 hücre kültürü protokolü: Bu bağlantı, ARPE-19 hücre kültürü ve bakımı hakkında bilgiler içerir. ARPE-19 besiyeri, kültür koşulları, alt kültürleme protokolleri ve proliferatif ve kriyoprezervatif kültürlerin işlenmesi hakkında bilgiler içerir.
Referanslar
- Schnichels, S., et al., Retina in a dish: Cell cultures, retinal explants and animal models for common diseases of the retina. Progress in retinal and eye research, 2021. 81: s. 100880.
- Sun, H. ve X. Kang, hsa_circ_0041795, miR-646'yı emerek ve VEGFC'yi aktive ederek yüksek glikozun neden olduğu insan retina pigment epitel hücreleri (ARPE 19) hasarına katkıda bulunur. Gene, 2020. 747: s. 144654.
- Yang, J. ve ark., Sessizleştirilmiş SNHG1, Yüksek Glikozun Neden Olduğu ARPE-19 Hücrelerinin Epitel-Mezankimal Geçişini ve Enflamatuar Tepkisini Engelledi. J Inflamm Res, 2021. 14: s. 1563-1573.
- Arumugam, B., et al., Syzygium malaccense kaynaklı mirisetin türevlerinin ARPE-19 hücrelerinde hidrojen peroksit kaynaklı strese karşı koruyucu etkisi. Moleküler görme, 2019. 25: s. 47.
- Kim, J., K. Cho ve S.-Y. Choung, Prunella vulgaris var. L özütünün ARPE-19 hücrelerinde ve fare retinasında mavi ışığın neden olduğu hasara karşı koruyucu etkisi. Free Radical Biology and Medicine, 2020. 152: s. 622-631.