ARPE-19 Hücreleri - ARPE-19 ile Retina Pigment Epitel Hücresi Araştırmalarına Özel Bakış

ARPE-19, insan kaynaklı spontan olarak ortaya çıkan retina pigment epitel hücreleridir. Retina biyolojisi, patolojik durumlar ve terapötik müdahalelerin (farmakoloji) çeşitli yönlerini incelemek için kullanılırlar. Bu makale, ARPE-19 immortalize hücreleri hakkında kapsamlı bilgiler sunmayı amaçlamaktadır. Temel olarak, hücre hattının genel özellikleri, kültür koşulları ve çeşitli araştırma uygulamaları tartışılacaktır. Bu nedenle, bunu okuyarak aşağıdakiler hakkında kapsamlı bir anlayış kazanacaksınız:

ARPE-19 hücreleri: Kökeni ve genel özellikleri
ARPE-19 hücre hattı: Kültürleme bilgileri
ARPE-19 hücrelerinin Avantajları ve Sınırlamaları
ARPE-19 hücre hattının araştırma alanındaki uygulamaları
ARPE-19 hücreleri: Araştırma yayınları
ARPE-19 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1. ARPE-19 hücreleri: Kökeni ve genel özellikleri

Bir hücre hattının kökeninin ve genel özelliklerinin bilinmesi, araştırmada etkin kullanımı için zorunludur. Bu makale bölümü ARPE hücre hattı hakkındaki tüm bilgileri kapsayacaktır. Örneğin, ARPE-19 hücre hattı nedir? ARPE-19 hücreleri neden kullanılır? ARPE-19/HPV-16 hücre hattı nedir? ARPE-19 hücreleri ölümsüz müdür? ARPE 19 hücre morfolojisi ve boyutu nedir?

Ölümsüzleştirilmiş retina pigment epitel hücreleri hattı ARPE-19, bir kazada kafa travması nedeniyle ölen 19 yaşındaki bir erkeğin gözlerinden elde edilmiştir. Amy Aotaki-Keen tarafından 1986 yılında kurulmuştur.
Bu hücreler, CRALBP ve RPE-65 gibi retina pigment epitel hücre belirteçlerini ifade ederek morfolojik ve fonksiyonel polarite ile karakterize stabil tek tabakalar oluşturabildiklerini göstermektedir.
ARPE-19 hücreleri epitel hücre benzeri bir morfolojiye sahiptir.
ARPE-19 hücreleri, kromozom 9 ve 19'un uzun kolunda sırasıyla bir delesyon ve ekleme dışında çoğunlukla normal bir karyotipe sahiptir. Ayrıca, bazı anöploidiler de gözlenmektedir [1].

Retina çubuk ve konilerinin taramalı elektron mikrografı (SEM).

2.aRPE-19 hücre hattı: Kültürleme bilgileri

Temel hücre kültürü bilgileri, bir hücre hattının uygun şekilde kullanılması ve bakımı için çok önemlidir. Bu bölüm, ARPE-19 hücre hattı kültürü için kilit noktaları öğrenmenize yardımcı olacaktır. Şunları öğreneceksiniz: arpe-19 ikiye katlanma süresi nedir? ARPE-19 tohumlama yoğunluğu nedir? ARPE-19 hücre yoğunluğu nedir? ARPE-19 dondurma ortamı nedir? ARPE-19 hücre hattını nasıl kültürlersiniz?

ARPE-19 Hücrelerinin Kültürlenmesi için Önemli Noktalar

Nüfus İkiye Katlanma Süresi:	ARPE-19 ikiye katlanma süresi yaklaşık 55-65 saattir. En fazla 48 popülasyon ikiye katlanmasına maruz kalabilirler.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	ARPE-19 yapışık bir hücre hattıdır.
Alt kültivasyon oranı:	ARPE-19'un alt kültivasyon oranı 1:3 ila 1:5'tir. Yapışık hücreler 1x PBS ile durulanır ve 8 ila 10 dakika boyunca ayrıştırma solüsyonu, akutaz ile inkübe edilir. Ayrılan hücrelere taze ortam eklenir ve santrifüjlenir. Hücre peleti tekrar süspanse edilmiş ve taze besiyeri içeren bir kültür şişesine dökülmüştür.
Büyüme Ortamı:	ARPE-19 hücre hattını kültürlemek için DMEM veya Ham's F12 ortamı kullanılır. ARPE-19 ortamı %5 FBS, 3,1 g/L Glukoz, 15 mM HEPES, 1,6 mM L-Glutamin, 1,0 mM Sodyum piruvat ve 1,2 g/L NaHCO3 ile desteklenir. Ortam haftada 2 ila 3 kez değiştirilir.
Büyüme Koşulları:	ARPE-19 hücreleri nemlendirilmiş bir inkübatörde 37°C sıcaklıkta %5 CO2 kaynağı ile tutulur.
Depolama:	Hücre hattı, hücrelerin canlılığını uzun vadede korumak için sıvı nitrojenin buhar fazında veya -150°C sıcaklığın altında saklanabilir.
Dondurma İşlemi ve Ortam:	ARPE-19 dondurma ortamı olarak CM-1 veya CM-ACF dondurma ortamı olarak kullanılır. Kısaca, hücreler sıcaklıkta dakikada sadece 1 °C düşüşe izin veren ve hücreleri şoktan koruyan yavaş dondurma yöntemiyle dondurulur.
Çözdürme İşlemi:	Hücreler 37°C'de önceden ayarlanmış bir su banyosunda çözdürülür. Küçük bir buz kümesi kaldıktan sonra hücreler taze kültür ortamına eklenir ve santrifüjlenir. Böylece donmuş ortam elemanları uzaklaştırılır. Daha sonra, hücre peleti yeniden süspanse edilir ve hücreler kültürleme için bir şişeye dağıtılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:	ARPE-19 hücreleri biyogüvenlik 1 laboratuvarlarında işlenir.

ARPE-19 hücreleri alt kültürleme sonrası 10x büyütmede ve yarı akıcı.

3.aRPE-19 hücrelerinin Avantajları ve Sınırlamaları

ARPE-19 hücreleri retinal hücre biyolojisi çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Diğer hücreler gibi onlar da bazı avantajlar ve sınırlamalarla ilişkilidir. Bunlardan birkaçı bu bölümde listelenmiştir:

Avantajlar

ARPE-19 hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:

Retinal hücre modeli	ARPE-19 hücreleri insan retina pigment epitel hücrelerine çok benzediğinden retina hastalıklarının incelenmesi ve ilaç testleri için idealdir.
İstikrarlı büyüme oranı	Bu hücreler istikrarlı bir büyüme sergiler ve uzun süreli deneyleri kolaylaştıracak şekilde uzun süreler boyunca muhafaza edilebilir.
Transfeksiyona uygunluk	ARPE-19 hücre hattı, hem geçici hem de stabil ekspresyon çalışmalarında yaygın olarak kullanılan mükemmel bir transfeksiyon konağıdır.

Sınırlamalar

ARPE-19 hücre hattı ile ilgili bazı sınırlamalar aşağıda verilmiştir:

Sınırlı Farklılaşma

ARPE-19 farklılaşması birincil retina hücrelerine kıyasla sınırlıdır. Bu durum, farklılaşma ile ilgili bazı çalışmaları potansiyel olarak etkileyebilir.

4.aRPE-19 hücre hattının araştırma alanındaki uygulamaları

ARPE-19 hücre hattı retina araştırmalarında çok sayıda uygulamaya sahiptir. Burada, bu retina pigment epitel hücre hattının bazı özel ve önemli araştırma kullanımlarından bahsettik.

Retina hastalıkları araştırması: ARPE-19 hücreleri retina patogenezine ilişkin değerli bilgiler sunar. Araştırmacılar, hastalık mekanizmalarını ve potansiyel tedavileri araştırmak için hücreleri kullanmaktadır. 2020'de yapılan bir çalışma, dairesel RNA hsa_circ_0041795'in insan retina pigment epitel hücreleri ARPE-19'da yüksek glikoz kaynaklı hasarı kolaylaştırmak için miRNA-646 ve VEGFC ile etkileşime girdiğini buldu. Bu nedenle, çalışma bu dairesel RNA'yı diyabetik retinopati ile mücadele için etkili bir terapötik ve tanısal hedef olarak önermektedir [2]. Benzer şekilde, Jing Yang ve meslektaşları ARPE-19 hücrelerini kullanmış ve diyabetik retinopati patogenezine ilişkin bilgiler sağlamıştır. LncRNA SNHG1'in (Küçük Nükleolar RNA Konak Gen 1) inhibe edilmesinin, yüksek glikozla muamele edilmiş ARPE-19 hücrelerinin enflamatuar yanıtını ve epitelden mezenkimal geçişi baskılayabileceğini incelemişlerdir [3].
İlaç testi: ARPE-19 hücreleri, ilaçların ve bileşiklerin etkinliğini ve güvenliğini değerlendirmek için kullanılır ve retina hastalıkları için tedaviler veya terapiler geliştirmeye yardımcı olur. Örneğin, 2019 yılında yapılan bir çalışmada, Syzygium malaccense biyoaktiflerinin insan retina pigment epitel hücreleri ARPE-19'da hidrojen peroksit kaynaklı strese karşı koruyucu etkileri bulunmuştur [4]. Bunu takiben, bir çalışmada Prunella vulgaris var. L ekstraktının ARPE-19 hücrelerinde ve fare modelinde mavi ışık kaynaklı hasara karşı terapötik rolü bulunmuştur [5].

€650,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 305025

5.aRPE-19 hücreleri: Araştırma yayınları

Aşağıda ARPE-19 retina pigment epitel hücrelerini içeren bazı ilginç araştırma yayınları yer almaktadır.

ARPE-19 hücrelerinde oksidatif strese karşı mikroRNA yanıtlarının değerlendirilmesi

Bu araştırma makalesi 2018 yılında Cutaneous and Ocular Toxicology dergisinde yayımlanmıştır. Bu çalışmada, ARPE-19 insan retina pigment epitel hücrelerinde hidrojen peroksit muamelesi yoluyla indüklenen oksidatif strese yanıt olarak miRNA ekspresyonu değerlendirilmiştir.

ARPE-19 şartlandırılmış ortamı, adipoz kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin nöral farklılaşmasını destekler

World Journal of Stem Cells (2021) dergisindeki bu yayın, ARPE-19 hücrelerinin şartlandırılmış ortamının, adipoz dokulardan türetilen mezenkimal kök hücrelerin nöral farklılaşmasını teşvik eden büyüme faktörleri içerdiğini öne sürmüştür.

Quercetin, MAPK ve NF-κB sinyal yolakları aracılığıyla ARPE-19 hücrelerinde IL-1β ile indüklenen enflamatuar sitokinlerin ve kemokinlerin üretimini inhibe eder

Bu çalışma International Journal of Molecular Sciences (2019) dergisinde yayımlanmıştır. Quercetin'in, enflamatuar yanıtı iyileştirmek için MAPK ve NF-κB kaskadlarının aktivasyonunu önleyerek ARPE-19 hücrelerinde IL-1β ile uyarılan kemokin salınımını koruduğunu belirtmektedir.

Resveratrol, oksidatif stres ve inflamasyon altındaki ARPE-19 hücrelerinde SIRT1 ve DNMT fonksiyonlarını modüle eder ve LINE-1 metilasyon seviyelerini geri kazandırır

Bu araştırma makalesi International Journal of Molecular Sciences (2018) dergisinde yayımlanmıştır. Bu çalışmada, oksidatif stres ve inflamasyonun SIRT1 (Sirtuin 1) ve DNMT'lerin (DNA metiltransferazlar) işlevlerinin yanı sıra ARPE-19 hücrelerinde LINE-1 (uzun serpiştirilmiş nükleer element-1) metilasyonu üzerindeki olası etkileri değerlendirilmiştir.

Chrysanthemum boreale Çiçek Ekstraktlarının ARPE-19 Hücresinde A2E ile İndüklenen Retina Hasarına Karşı Koruyucu Etkisi

Antioxidants (2022) dergisindeki bu makale, Chrysanthemum boreale Çiçek Özlerinin ARPE-19 hücrelerinde N-retiniliden-N-retinylethanolamine (A2E) kaynaklı retina hasarına karşı koruyucu etki gösterdiğini ortaya koymuştur.

6.aRPE-19 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

ARPE-19 yaygın olarak kullanılan bir retinal epitelyal hücre hattıdır. ARPE-19 hücre kültürü ve transfeksiyon protokollerini kapsayan mevcut kaynaklar burada listelenmiştir:

ARPE-19 transfeksiyonu: Bu video, ARPE-19 hücre hattı için transfeksiyon protokolünü öğrenmeye yönelik adım adım bir kılavuzdur.

ARPE-19 hücre kültürü protokolünü açıklayan bazı kaynakları burada bulabilirsiniz:

ARPE-19 hücre kültürü protokolü: Bu bağlantı ARPE-19 hücre kültürü ve bakımı hakkında bilgi içerir. ARPE-19 besiyeri, kültürleme koşulları, alt kültürleme protokolleri ve proliferatif ve kriyoprezerve kültürlerin işlenmesi hakkında bilgiler içerir.

Referanslar

Schnichels, S., ve diğerleri, Bir tabakta retina: Hücre kültürleri, retina eksplantları ve retinanın yaygın hastalıkları için hayvan modelleri. Retina ve göz araştırmalarında ilerleme, 2021. 81: p. 100880.
Sun, H. ve X. Kang, hsa_circ_0041795, miR-646'yı süngerleştirerek ve VEGFC'yi aktive ederek yüksek glikozun neden olduğu insan retina pigment epitel hücrelerinin (ARPE 19) hasarına katkıda bulunur. Gen, 2020. 747: p. 144654.
Yang, J., et al., Susturulmuş SNHG1, Yüksek Glikoz ile İndüklenen ARPE-19 Hücrelerinin Epitelyal-Mezenkimal Geçişini ve Enflamatuar Yanıtını Engelledi. J Inflamm Res, 2021. 14: p. 1563-1573.
Arumugam, B., et al., Syzygium malaccense'den elde edilen mirisetin türevlerinin ARPE-19 hücrelerinde hidrojen peroksit kaynaklı strese karşı koruyucu etkisi. Moleküler görüş, 2019. 25: p. 47.
Kim, J., K. Cho ve S.-Y. Choung, Prunella vulgaris var. L ekstraktının ARPE-19 hücrelerinde ve fare retinasında mavi ışık kaynaklı hasarlara karşı koruyucu etkisi. Serbest Radikal Biyolojisi ve Tıbbı, 2020. 152: p. 622-631.