AGS Hücreleri - Kanser Araştırmalarında Mide Adenokarsinomu AGS Hücrelerinin İncelenmesi
AGS hücreleri, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan bir insan mide adenokarsinomu hücre hattını oluşturur. Özellikle tümör büyümesi, gelişimi, ilerlemesi ve terapötik müdahaleler dahil olmak üzere mide kanseri biyolojisini incelemek için kullanılır. Ayrıca, konak-patojen etkileşimlerini araştırmak için de kullanılır.
- Büyüme Ortamı
- AGS hücrelerinin kültürlenmesi için %10 FBS, 4 mM L-Glutamin, 4,5 g/L Glikoz, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM Sodyum piruvat içeren DMEM besiyeri kullanılır. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
- Çoğalma Süresi
- AGS hücrelerinin ikiye katlanma süresi 24 ila 48 saat arasındadır.
- Büyüme Tipi
- AGS hücreleri yapışkandır. Tek tabaka halinde büyürler.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-2
- Satın Alabileceğiniz Yer
- Cytion — AGS Siparişi
- AGS hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
- AGS hücre hattı hakkında kültür bilgileri
- AGS hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
- AGS hücrelerinin uygulamaları
- 5. AGS hücre hattı ile ilgili araştırma yayınları
- AGS hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- Sık sorulan sorular
AGS hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
Bir hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, o hücre hattının kökeni ve genel özellikleri hakkında bilgi sahibi olmak gerekir. Bu bölümde şu konular ele alınacaktır: AGS hücreleri nedir? AGS hücresinin kökeni nedir? AGS kanser hücre hattının morfolojisi nedir?
- AGS hücre hattı, mide adenokarsinomu olan 54 yaşındaki Kafkasyalı bir kadının mide dokusundan elde edilmiştir. 1979 yılında izole edilmiştir [1].
- AGS hücreleri epitel benzeri bir morfolojiye sahiptir.
- Gastrik epitelyal AGS hücreleri hiperdiploiddir. AGS hücreleri için modal kromozom sayısı 49'dur ve bu sayı hücrelerin yaklaşık %60'ında görülür. Poliploidi de hücrelerin yaklaşık %3,6'sında görülür.
AGS hücre hattı hakkında kültür bilgileri
Bir hücre hattının doğru şekilde kullanılması ve yönetilmesi için temel kültürleme kavramlarını bilmeniz gerekir. Özellikle şunları öğrenmelisiniz: AGS hücrelerinin çoğalma süresi nedir? AGS hücre besiyeri nedir? AGS hücreleri nasıl alt kültürlenir? Mide epitel AGS hücreleri için hangi dondurma besiyerleri kullanılır?
AGS Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar
Çoğalma Süresi:
AGS hücrelerinin ikiye katlanma süresi 24 ila 48 saat arasındadır.
Yapışkan veya Süspansiyon Halinde:
AGS hücreleri yapışkandır. Tek tabaka halinde büyürler.
Tohumlama yoğunluğu:
AGS hücreleri, 1 x 104 hücre/cm2 hücre yoğunluğunda ekilir. Hücreler, bu yoğunlukta 3 ila 5 gün içinde konfluent tek tabaka oluşturur. Eski besiyeri çıkarıldıktan sonra, hücreler 1 x PBS ile durulanır ve Accutase ayrıştırma çözeltisi ile inkübe edilir. Ayrılan hücreler kültür besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirilir ve santrifüjlenir. Hücre peleti tekrar süspansiyon haline getirilir ve AGS hücre sayımı yapıldıktan sonra, büyüme için yeni şişeye aktarılır.
Büyüme Ortamı:
AGS hücrelerini kültürlemek için %10 FBS, 4 mM L-Glutamin, 4,5 g/L Glikoz, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM Sodyum piruvat içeren DMEM besiyeri kullanılır. Besiyeri haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:
AGS hücreleri, %5 CO2 beslemeli nemlendirilmiş bir inkübatörde (37°C sıcaklıkta) tutulur.
Saklama:
Dondurulmuş AGS hücreleri, -150°C'nin altındaki sıcaklıktaki elektrikli dondurucularda veya daha uzun süre için sıvı azotun buhar fazında tutulur.
Dondurma Süreci ve Ortam:
AGS hücrelerini dondurmak için CM-1 veya CM-ACF besiyeri kullanılır. Hücre dondurma işlemi, sıcaklığın dakikada sadece 1°C düşmesine izin veren ve hücre canlılığını koruyan yavaş bir dondurma süreciyle gerçekleştirilir.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş mide epitel hücreleri, 37°C'lik su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca hızlı bir şekilde çalkalanır. Çözülen hücreler, taze kültür ortamında yeniden süspansiyon haline getirilir ve büyüme için yeni şişelere dökülür. 24 saatlik inkübasyondan sonra, dondurma ortamı bileşenlerini uzaklaştırmak için ortam yenilenir. Buna karşılık, çözülmüş hücreler santrifüjlenir ve dondurma ortamı bileşenleri uzaklaştırılır. Daha sonra hasat edilen hücreler tekrar süspansiyon haline getirilir ve kültür ortamını içeren şişeye aktarılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:
AGS hücre kültürü için biyogüvenlik seviyesi 2 laboratuvar ortamı gereklidir.
AGS hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
Bu makale bölümü, AGS hücreleriyle ilgili bazı temel avantaj ve sınırlamaları aydınlatacaktır.
Avantajlar
Mide epitel AGS hücrelerinin başlıca avantajları şunlardır:
Kültürlenmesi kolay
AGS mide karsinomu hücre hattı, hücre kültürü laboratuvarlarında kolayca muhafaza edilebilir. Karmaşık ve titiz hücre kültürü gereksinimleri yoktur. Ayrıca, iyi büyüme özellikleri sergiler, bu da onu mide kanseri biyolojisini incelemek için ideal bir seçim haline getirir.
Mide kanseriyle ilgisi
AGS hücreleri insan mide adenokarsinomundan elde edilmiştir, bu da onları mide karsinomu biyolojisi ve terapötik müdahaleleri incelemek için yaygın olarak kullanılmasını sağlamaktadır.
Sınırlamalar
AGS hücre hattıyla ilişkili sınırlama şudur:
İn vitro hücre modeli
AGS hücreleri, biyomedikal araştırma laboratuvarlarında yapay koşullar altında kültürlenir. Bu nedenle, in vivo mide kanseri mikroortamını ve diğer hücresel ve moleküler etkileşimleri tam olarak yansıtmayabilirler.
AGS hücrelerinin uygulamaları
AGS hücreleri, özellikle mide kanseri biyolojisini incelemek için kullanılır. Biyomedikal alanda birçok başka umut verici uygulamaları da vardır. AGS hücrelerinin ilginç araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:
- Mide kanseri araştırması: AGS hücreleri, mide kanserinin büyümesi, metastazı ve invazyonunun altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları araştırmak için mükemmel bir araştırma aracıdır. Araştırmacılar ayrıca, mide kanseri gelişimindeki farklı hücresel süreçleri, genetik mutasyonları ve sinyal yollarını incelemek için mide epitel AGS hücrelerini kullanmaktadır. Oncology Reports (2019) dergisinde yayınlanan bir çalışmada, mikroRNA-183-5p.1'in Bcl 2/P53 sinyal kaskadını inhibe ederek tümör hücresi proliferasyonunu, göçünü ve invazyonunu teşvik ettiği bulunmuştur. Ayrıca, bu etkileri göstermek için TPM1 genini de aşağı doğru düzenler. Bu nedenle, hem mikroRNA hem de TPM1, hedefe yönelik mide kanseri tedavileri geliştirmek için etkili moleküler hedefler olarak önerilmektedir [2].
- İlaç taraması: AGS hücreleri, yeni ve etkili anti-mide kanseri ilaçlarını taramak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, AGS hücre hattını kullanarak potansiyel ilaçların sitotoksisitesini ve etkinliğini değerlendirmektedir. Mide karsinomlarıyla mücadele etmek için yeni moleküler hedeflerin belirlenmesi ve yeni hedefli tedavilerin geliştirilmesi üzerine de çalışmalar yürütülmüştür. 2021 yılında yapılan bir araştırmada AGS mide kanseri hücreleri kullanılmış ve paklitaksel ilacının terapötik etkisi incelenmiştir. Bulgular, paklitakselin AGS hücrelerinde apoptoz veya hücre ölümünün ayrılmaz bir mekanizması olan mitotik felaketi tetiklediğini ortaya koymuştur. Ayrıca, mide kanseri hücrelerinde otofajiyi de teşvik etmiştir [3].
- Konak-patojen etkileşimleri: AGS kanser hücre hattı, konak-patojen etkileşimlerini de incelemektedir. Bu, araştırmacıların enfeksiyonda rol oynayan hücresel mekanizmaları ve tepkileri anlamalarına yardımcı olmaktadır. Örneğin, 2020 yılında yapılan bir çalışmada, Helicobacter pylori'nin dış membran veziküllerinde bulunan küçük kodlamayan RNA'ların, insan AGS hücrelerinde interlökin 8 salgılanmasını azalttığı gözlemlenmiştir [4].
5. AGS hücre dizisiyle ilgili araştırma yayınları
Makalenin bu bölümünde, AGS hücrelerini konu alan ilginç ve en çok atıf alan birkaç araştırma yayını ele alınacaktır.
Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) dergisinde yayınlanan bu çalışma, doğal bir bileşik olan salidrosidin, PI3K/AKT/mTOR sinyal yolunu modüle ederek mide epitel AGS hücrelerinde koruyucu otofaji ve hücre ölümünü indüklediğini öne sürmüştür.
Bu çalışma Biomedicine & Pharmacotherapy (2018) dergisinde yayınlanmıştır. Çalışma, AGS hücrelerinde astragalus polisakkarit ile apatinib ilacının sinerjik antikanser etkilerini araştırmıştır. Çalışma bulguları, astragalusun AKT sinyalini baskılayarak apatinibin antitümör etkilerini güçlendirdiğini ortaya koymuştur.
Journal of Ethnopharmacology (2018) dergisinde yayınlanan bu araştırma, Curcuma zedoaria Roscoe bitkisinden elde edilen doğal bir bileşik olan curcuzedoalidin, AGS hücrelerine karşı sitotoksisite potansiyeline katkıda bulunduğunu öne sürmüştür.
Gene (2018) dergisinde yayınlanan bu makale, FOXA1'in yukarı regülasyonunun AGS mide adenokarsinom hücrelerinin proliferasyonunu, epitelyal-mezenkimal geçişi (EMT) ve invazyonu baskıladığını öne sürmüştür.
Bu araştırma makalesi 2020 yılında International Journal of Medical Microbiology dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışmada, konak-patojen etkileşimlerini incelemek için AGS hücreleri kullanılmıştır. Bulgular, Helicobacter pylori'nin dış membran veziküllerinde AGS hücrelerindeki IL-8 düzeylerini etkileyen bazı kodlamayan RNA'lar içerdiğini ortaya koymuştur.
AGS hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Aşağıda AGS hücrelerini içeren birkaç kaynak bulunmaktadır.
- AGS hücre transfeksiyon protokolü: Bu video, mide epitel AGS hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmeye yönelik adım adım bir kılavuzdur.
Aşağıdaki bağlantı AGS hücre kültürü protokolünü içermektedir.
- AGS hücre kültürü protokolü: Bu web sitesi, AGS hücre besiyeri ve hücre kültürü protokolleri hakkında yararlı bilgiler içerir. Kısaca, gastrik epitel AGS hücrelerinin alt kültürlenmesi ve çoğalan ve kriyoprezervatif AGS kültürlerinin işlenmesi için bir protokol sunar.
- AGS hücrelerinin alt kültürü: Bu site, AGS hücrelerinin alt kültürleme prosedürünü ayrıntılı olarak açıklamaktadır.
Kaynakça
- Phuc, B.H. ve ark., İki Vietnamlı Helicobacter pylori suşunun karşılaştırmalı genomikleri, kardiyak olmayan mide kanseri hastasından alınan CHC155 ve duodenal ülser hastasından alınan VN1291. Scientific Reports, 2023. 13(1): s. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA‑183‑5p. 1, TPM1'i hedefleyerek mide kanseri AGS hücrelerinin göçünü ve istilasını teşvik eder. Düzeltme in/10.3892/or. 2020.7902. Onkoloji raporları, 2019. 42(6): s. 2371-2381.
- Khing, T.M. ve ark., AGS hücrelerinde apoptoz, otofaji ve mitotik felaket üzerine paklitakselin etkisi. Scientific Reports, 2021. 11(1): s. 23490.
- Zhang, H., et al., Helicobacter pylori dış membran vezikülleri tarafından paketlenmiş sncRNA'lar, insan hücrelerinde IL-8 salgılanmasını azaltır. Uluslararası Tıbbi Mikrobiyoloji Dergisi, 2020. 310(1): s. 151356.