AGS Hücreleri - Kanser Çalışmalarında Gastrik Adenokarsinom AGS Hücrelerinin Keşfi

AGS hücreleri, biyomedikal araştırmalarda yaygın olarak kullanılan bir insan gastrik adenokarsinom hücre hattını oluşturmaktadır. Özellikle tümör büyümesi, gelişimi, ilerlemesi ve terapötik müdahaleler dahil olmak üzere mide kanseri biyolojisini incelemek için kullanılmaktadır. Ayrıca, konakçı-patojen etkileşimlerini araştırmak için de kullanılır.

Bu makale gastrik epitelyal AGS hücrelerinin temellerini tartışacaktır. Özellikle aşağıdakileri kapsayacaktır:

AGS hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
AGS hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri
AGS hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar
AGS hücrelerinin uygulamaları
AGS hücre hattı üzerine araştırma yayınları
AGS hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

1.aGS hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni

Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri hakkında bilgi sahibi olmak, onunla çalışmaya başlamadan önce gereklidir. Bu bölüm aşağıdakileri kapsayacaktır: AGS hücreleri nedir? AGS hücresinin kökeni nedir? AGS kanser hücre hattının morfolojisi nedir?

AGS hücre hattı, mide adenokarsinomu olan 54 yaşındaki Kafkasyalı bir kadının mide dokusundan türetilmiştir. 1979 yılında izole edilmiştir [1].
AGS hücreleri epitel benzeri morfolojiye sahiptir.
Gastrik epitelyal AGS hücreleri hiperdiploiddir. AGS hücreleri için modal kromozom sayısı 49'dur ve bu sayı hücrelerin neredeyse %60'ında görülür. Poliploidi de hücrelerin yaklaşık %3,6'sında görülür.

Mikroskop altında enine kesitte mide karsinomu.

2.aGS hücre hattı hakkında kültürleme bilgileri

Bir hücre hattının uygun şekilde kullanılması ve yönetilmesi için temel kültürleme kavramlarını bilmeniz gerekir. Özellikle şunları öğrenmelisiniz: AGS hücre ikiye katlanma süresi nedir? AGS hücre ortamı nedir? AGS hücrelerini nasıl alt kültüre alırsınız? Gastrik epitelyal AGS hücreleri için hangi dondurucu ortamlar kullanılır?

AGS Hücrelerini Kültüre Etmek için Önemli Noktalar

İki Katına Çıkma Süresi:	AGS hücre ikiye katlanma süresi 24 ila 48 saat arasında değişmektedir.
Yapışık veya Süspansiyon Halinde:	AGS hücreleri yapışıktır. Tek tabakalar halinde büyürler.
Tohumlama yoğunluğu:	AGS hücreleri 1 x¹⁰⁴ ^hücre/cm2 hücre yoğunluğunda ekilir. Hücreler bu yoğunlukta 3 ila 5 gün içinde birleşik bir tek tabaka oluşturur. Eski ortam çıkarıldıktan sonra hücreler 1 x PBS ile durulanır ve Accutase ayrıştırma solüsyonu ile inkübe edilir. Ayrılan hücreler kültür ortamında yeniden süspanse edilmiş ve santrifüjlenmiştir. Hücre peleti tekrar süspanse edilmiş ve AGS hücre sayımından sonra büyüme için yeni şişeye dağıtılmıştır.
Büyüme Ortamı:	AGS hücrelerini kültürlemek için %10 FBS, 4 mM L-Glutamin, 4,5 g/L Glukoz, 1,5 g/L NaHCO3 ve 1,0 mM Sodyum piruvat içeren DMEM ortamı kullanılır. Ortam haftada 2 ila 3 kez değiştirilmelidir.
Büyüme Koşulları:	AGS hücreleri nemlendirilmiş bir inkübatörde (37°C sıcaklıkta) %5 CO2 kaynağı ile tutulur.
Depolama:	Dondurulmuş AGS hücreleri -150°C'nin altındaki sıcaklıklarda elektrikli dondurucularda veya sıvı nitrojenin buhar fazında daha uzun süre saklanır.
Dondurma İşlemi ve Ortam:	AGS hücrelerini dondurmak için CM-1 veya CM-ACF ortamı kullanılır. Hücre dondurma işlemi, dakikada sadece 1°C sıcaklık düşüşüne izin veren ve hücre canlılığını koruyan yavaş bir dondurma işlemiyle gerçekleştirilir.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş gastrik epitel hücreleri 37°C su banyosunda 40 ila 60 saniye boyunca hızla çalkalanır. Çözülen hücreler taze kültür ortamında yeniden süspanse edilir ve büyüme için yeni şişelere dökülür. 24 saatlik inkübasyondan sonra, donan ortam bileşenlerini uzaklaştırmak için ortam yenilenir. Bunun aksine, çözülen hücreler santrifüjlenir ve dondurucu ortam öğeleri çıkarılır. Daha sonra hasat edilen hücreler yeniden süspanse edilir ve kültür ortamını içeren şişeye dağıtılır.
Biyogüvenlik Seviyesi:	Biyogüvenlik seviyesi 2 laboratuvar ortamları AGS hücre kültürü için gereklidir.

20x büyütmede AGS hücreleri.

3.aGS hücre hattı: Avantajlar ve Sınırlamalar

Bu makale bölümü, AGS hücreleri ile ilişkili bazı temel avantaj ve sınırlamaları aydınlatacaktır.

Avantajlar

Gastrik epitelyal AGS hücrelerinin başlıca avantajları şunlardır:

Kültürü kolay	AGS gastrik karsinoma hücre hattı, hücre kültürü laboratuvarlarında kolaylıkla muhafaza edilebilir. Herhangi bir karmaşık ve telaşlı hücre kültürü gereksinimi yoktur. Dahası, iyi büyüme özellikleri sergilemesi onu mide kanseri biyolojisini incelemek için ideal bir seçim haline getirmektedir.
Mide kanseri ile ilgisi	AGS hücreleri insan gastrik adenokarsinomundan türetilmiş olup, gastrik karsinom biyolojisi ve terapötik müdahaleleri incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır.

Sınırlamalar

AGS hücre hattı ile ilgili sınırlama şudur:

İn vitro hücre modeli

AGS hücreleri biyomedikal araştırma laboratuvarlarında yapay koşullar altında kültüre edilmektedir. Bu nedenle, in vivo mide kanseri mikroçevresini ve diğer hücre ve moleküler etkileşimleri tam olarak kopyalayamayabilirler.

4.aGS hücrelerinin uygulamaları

AGS hücreleri özellikle mide kanseri biyolojisini incelemek için kullanılır. Biyomedikal alanda başka birçok umut verici uygulamaları vardır. AGS hücrelerinin ilginç araştırma uygulamalarından bazıları şunlardır:

Mide kanseri çalışması: AGS hücreleri, mide kanseri büyümesi, metastazı ve istilasının altında yatan hücre ve moleküler mekanizmaları araştırmak için mükemmel bir araştırma aracıdır. Araştırmacılar ayrıca mide kanseri gelişiminde farklı hücresel süreçleri, genetik mutasyonları ve sinyal yolaklarını incelemek için gastrik epitelyal AGS hücrelerini kullanmaktadır. Bir Onkoloji Raporları (2019) çalışması, mikroRNA-183-5p.1'in Bcl 2/P53 sinyal kaskadını inhibe ederek tümör hücresi proliferasyonunu, göçünü ve istilasını teşvik ettiğini bulmuştur. Ayrıca, bu etkileri göstermek için TPM1 genini de aşağı doğru düzenler. Bu nedenle, hem mikroRNA hem de TPM1, hedefe yönelik anti-mide kanseri tedavileri geliştirmek için etkili moleküler hedefler olarak önerilmektedir [2].
İlaç taraması: AGS hücreleri, yeni ve etkili anti-mide kanseri ilaçlarını taramak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Araştırmacılar, AGS hücre hattını kullanarak potansiyel ilaçların sitotoksisitesini ve etkinliğini değerlendirmektedir. Mide karsinomlarıyla mücadele etmek için yeni moleküler hedeflerin belirlenmesi ve yeni hedefe yönelik tedavilerin geliştirilmesi konusunda da çalışmalar yürütülmüştür. 2021'de yapılan araştırmada AGS mide kanseri hücreleri kullanılmış ve paklitaksel ilacının terapötik etkisi incelenmiştir. Bulgular, paklitakselin AGS hücrelerinde apoptoz veya hücre ölümünün ayrılmaz bir mekanizması olan mitotik bir felakete neden olduğunu ortaya koydu. Ayrıca, mide kanseri hücrelerinde otofajiyi de teşvik etmiştir [3].
Konakçı-patojen etkileşimleri: AGS kanser hücre hattı aynı zamanda konakçı-patojen etkileşimlerini de incelemektedir. Bu, araştırmacıların bir enfeksiyonda yer alan hücresel mekanizmaları ve tepkileri anlamalarına yardımcı olur. Örneğin 2020 yılında yapılan bir çalışmada, Helicobacter pylori 'nin dış membran veziküllerinde bulunan küçük kodlamayan RNA'ların insan AGS hücrelerinde interlökin 8 salgısını azalttığı gözlemlenmiştir [4].

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300408

5.aGS hücre hattı üzerine araştırma yayınları

Makalenin bu bölümünde AGS hücrelerini içeren birkaç ilginç ve en çok atıf alan araştırma yayını ele alınacaktır.

Salidrosid, PI3K/Akt/mTOR yolağı aracılığıyla insan mide kanseri AGS hücrelerinde apoptoz ve koruyucu otofajiyi indükler

Biomedicine & Pharmacotherapy'deki (2020) bu çalışma, doğal bir bileşik olan salidrosidin, PI3K/AKT/mTOR sinyal yolağının modülasyonu yoluyla gastrik epitelyal AGS hücrelerinde koruyucu otofaji ve hücre ölümünü indüklediğini öne sürmüştür.

Astragalus polisakkaridi, AKT sinyal yolunu inhibe ederek mide kanseri AGS hücrelerinde Apatinib'in antitümör etkilerini artırdı

Bu çalışma Biomedicine & Pharmacotherapy (2018) dergisinde yayımlanmıştır. Astragalus polisakkaritinin ve apatinib ilacının AGS hücrelerindeki sinerjik antikanser etkilerini araştırmıştır. Çalışma bulguları, astragalusun AKT sinyalini baskılayarak apatinibin antitümör etkilerini artırdığını ortaya koymuştur.

Curcuzedoalide, apoptoz indüksiyonu yoluyla Curcuma zedoaria rizomlarının insan mide kanseri AGS hücrelerine karşı sitotoksisitesine katkıda bulunur

Journal of Ethnopharmacology'de (2018) yer alan bu araştırma, Curcuma zedoaria Roscoe bitkisinden elde edilen doğal bir bileşik olan curcuzedoalide'in AGS hücrelerine karşı sitotoksisite potansiyeline katkıda bulunduğunu öne sürmüştür.

FOXA1'in aşırı ekspresyonu, insan mide kanseri AGS hücrelerinin hücre proliferasyonunu ve EMT'sini inhibe eder

Gene'deki (2018) bu yayın, FOXA1 upregülasyonunun AGS gastrik adenokarsinom hücrelerinin proliferasyonunu ve epitelden mezenkimal geçişi (EMT) ve invazyonu baskıladığını öne sürmüştür.

helicobacter pylori dış membran vezikülleri tarafından paketlenen sncRNA'lar insan hücrelerinde IL-8 salgılanmasını zayıflatır

Bu araştırma makalesi 2020 yılında International Journal of Medical Microbiology'de yayımlanmıştır. Bu çalışmada, konakçı-patojen etkileşimlerini incelemek için AGS hücreleri kullanılmıştır. Bulgular, Helicobacter pylori'nin dış membran veziküllerinde AGS hücrelerindeki IL-8 seviyelerini etkileyen bazı kodlamayan RNA içerdiğini ortaya koymuştur.

6.aGS hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

Aşağıda AGS hücrelerini içeren birkaç kaynak bulunmaktadır.

AGS hücre transfeksiyon protokolü: Bu video, gastrik epitelyal AGS hücreleri için transfeksiyon protokolünü öğrenmeye yönelik adım adım bir kılavuzdur.

Aşağıdaki bağlantı AGS hücre kültürü protokolünü içermektedir.

AGS hücre kültürü protokolü: Bu web sitesi AGS hücre ortamı ve hücre kültürü protokolleri hakkında faydalı bilgiler içermektedir. Kısaca, gastrik epitelyal AGS hücrelerinin alt kültüre alınması ve çoğalan ve kriyoprezerve edilmiş AGS kültürlerinin işlenmesi için bir protokol sağlar.
AGS hücrelerinin alt kültürlenmesi: Bu site AGS hücreleri için alt kültürleme prosedürünü ayrıntılı olarak açıklayacaktır.

Referanslar

Phuc, B.H., ve diğerleri, İki Vietnam Helicobacter pylori suşunun karşılaştırmalı genomiği, kardiyak olmayan bir mide kanseri hastasından alınan CHC155 ve bir duodenal ülser hastasından alınan VN1291. Bilimsel Raporlar, 2023. 13(1): p. 8869.
Lin, J., ve diğerleri, miRNA-183-5p. 1, TPM1 Corrigendum in/10.3892/or'u hedefleyerek mide kanseri AGS hücrelerinin göçünü ve istilasını teşvik eder. 2020.7902. Onkoloji raporları, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
Khing, TM, et al., Paklitakselin AGS hücrelerinde apoptoz, otofaji ve mitotik katastrof üzerindeki etkisi. Bilimsel Raporlar, 2021. 11(1): p. 23490.
Zhang, H., ve diğerleri, Helicobacter pylori dış membran vezikülleri tarafından paketlenen sncRNA'lar insan hücrelerinde IL-8 salgılanmasını zayıflatır. Uluslararası Tıbbi Mikrobiyoloji Dergisi, 2020. 310(1): p. 151356.