A375 Hücre Hattı - Melanom Araştırmaları Üzerine Bir Kılavuz

A375, toksikoloji ve immüno-onkoloji araştırmalarında yaygın olarak kullanılan bir insan melanom hücre hattıdır. Araştırmacılar bu hücre hattını kanser biyolojisi ve sinyal yolaklarını incelemek, potansiyel antikanser ajanları test etmek veya taramak ve yeni ve etkili terapötikler geliştirmek için kullanmaktadır.

A375 hücrelerinin kökeni ve genel özellikleri

Bir hücre hattının kökeni ve genel özellikleri hakkında bilgi sahibi olmak, araştırmada kullanımını planlamanıza yardımcı olabilir. Makalenin bu bölümünde A375 hücre hattının kökeni ve özellikleri ele alınacaktır. Örneğin, A375 hücre hattı nedir? A375 hücre hattı özellikleri nelerdir? A375 hücreleri nereden gelmektedir? A375 melanom hücrelerinin morfolojisi nedir? A375 hücre boyutu nedir?

Deri kanseri hücre hattı A375, 54 yaşında malign melanomlu bir kadının solid tümörünün eksplant kültüründen köken almıştır [1].
A375 hücreleri epitel benzeri morfolojiye sahiptir.
A375 hücre boyutu diğer hücre hatlarına kıyasla nispeten daha küçüktür. Kabaca 12 µm'lik bir çapa sahiptirler.
A375 melanom hücreleri hipotriploiddir. Bu hücre hattı için modal kromozom sayısı 62'dir. Genellikle her hücrede dokuz işaret kromozomu ve normal N2, N6 ve N22 kromozomlarının birer kopyası bulunur.

Bir doktor, bir yetişkinin cildindeki büyümeleri cilt kanseri açısından inceler.

A375 hücreleri: Hücre kültürü bilgileri

A375 hücre kültürlerinin bakımı kolaydır. Herhangi bir telaşlı hücre kültürü gereksinimleri yoktur. Bu bölüm gerekli hücre kültürü bilgilerini öğrenmenize yardımcı olacaktır. A375 ikiye katlanma süresi nedir gibi. A375 hücre hattı ortamı nedir? A375'in tohumlama yoğunluğu nedir? A375 melanom hücreleri yapışık mıdır?

A375 Hücrelerinin Kültürü için Önemli Noktalar

Nüfus ikiye katlanma süresi:	A375 ikiye katlanma süresi 20 saattir.
Yapışık veya Süspansiyon halinde:	A375 yapışık bir insan melanom hücre hattıdır.
Tohumlama Yoğunluğu:	1 x¹⁰⁴ hücre/cm2^hücreyoğunluğu A375 hücre kültürleri için idealdir. Yapışık hücreler 1 x fosfat tampon salin (PBS) ile durulanır ve pasajlama solüsyonu (Accutase) ile inkübe edilir. Daha sonra hücrelere kültür ortamı eklenmiş ve santrifüjlenmiştir. Hasat edilen hücreler bir kültür ortamında yeniden süspanse edilmiş ve büyüme için yeni flasklara dağıtılmıştır.
Büyüme Ortamı:	DMEM, %10 fetal sığır serumu (FBS), 4,5 g/L Glukoz, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-Glutamin ve 1,0 mM Sodyum piruvat ile desteklendiğinde ideal A375 ortamı olarak önerilmektedir. A375 ortamı haftada 2-3 gün yenilenmelidir.
Büyüme Koşulları:	A375 melanoma hücreleri %5 CO2 beslemeli nemlendirilmiş bir inkübatörde (37°C) büyütülür.
Depolama:	Dondurulmuş A375 hücreleri sıvı nitrojenin buhar fazında veya elektrikli dondurucuda -150°C'nin altında tutulmalıdır.
Dondurma İşlemi ve Ortam:	A375 hücre hattını dondurmak için CM-1 veya CM-ACF ortamı kullanılır. Hücre canlılığını korumak için sıcaklıkta kademeli olarak 1°C düşüşe izin veren yavaş bir dondurma işlemi tercih edilmiştir.
Çözdürme İşlemi:	Dondurulmuş A375 melanom hücreleri flakonu, sadece küçük bir buz kümesi kalana kadar 40 ila 60 saniye boyunca su banyosunda hızla çalkalanır. Hücrelere taze besiyeri eklenir ve donmuş besiyeri öğelerini uzaklaştırmak için santrifüjlenir. Elde edilen hücre peleti tekrar süspanse edilir ve yeni şişelere dökülür.
Biyogüvenlik Seviyesi:	A375 kültürleri biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvar ortamlarında işlenir ve muhafaza edilir.

20x büyütmede yapışkan A375 hücrelerinin konfluent tabakası.

A375 hücre hattının Avantajları ve Sınırlamaları

Diğer hücre dizileri gibi A375 melanom hücre dizisi de avantaj ve sınırlamaların benzersiz bir kombinasyonuyla ilişkilidir ve bu da onu melanom kanseri araştırmaları için değerli bir araç haline getirmektedir. Bu bölümde A375 hücre hattının yalnızca birkaç önemli avantajı ve dezavantajı listelenmiştir.

Avantajlar

A375 hücrelerinin önemli avantajları aşağıda belirtilmiştir:

Melanom tümör modeli: A375 hücre hattı malign bir melanom tümöründen türetilmiştir, bu nedenle melanom biyolojisini ve terapötik müdahaleleri araştırmak için çok değerli bir tümör modeli olarak hizmet eder. Bu hücreler, yüksek proliferasyon oranı ve invazivlik gibi melanom benzeri özellikler sergilemektedir.
Tümörijenisite: A375 hücreleri yüksek oranda tümörijeniktir, yani tümör oluşturabilirler. A375 hücrelerinin, anti-timosit serumu (bağışıklık sistemini baskılayıcı bir ajan) ile tedavi edilen NIH Swiss farelerinde agresif amelanotik melanomlar ürettiği bildirilmiştir.
İyi karakterize edilmiştir: A375 genetik olarak iyi karakterize edilmiş bir hücre hattıdır. Melanom gibi spesifik genetik mutasyonlara sahiptir. A375 mutasyonları A375 BRAF gen değişikliğini içerir ve bu da onu BRAF'a özgü inhibitörlere duyarlı hale getirir. Bu genetik profil, A375 hücrelerini altta yatan moleküler yolları ve hedefe yönelik tedavileri incelemek için harika bir kanser araştırma aracı haline getirmektedir.

Sınırlamalar

A375 hücreleri ile ilgili sınırlamalar şunlardır:

İn vitro sınırlamalar: A375 bir in vitro tümör modelidir. Melanomun özelliklerini taklit etmesine rağmen, melanom tümörlerinin karmaşıklığını tam olarak temsil edemez. Bu nedenle, in vitro bulgular klinik çalışmalara genelleştirilirken dikkatli olunmalıdır.

A375 Hücrelerinizi Şimdi Satın Alın

€430,00*

İçerik: 1.5 milliliter

Vergiler hariç fiyatlar artı nakliye masrafları

cryovial

Ürün numarası: 300110

A375 hücre hattının araştırma uygulamaları

A375 hücre hattı, kanser araştırmalarında kapsamlı araştırma uygulamalarına sahiptir. A375 hücrelerinin kullanıldığı yaygın alanlardan bazıları şunlardır.

Kanser araştırmaları: A375 hücreleri melanom araştırmalarında yaygın uygulamalara sahiptir. Araştırmacılar bu hücreleri cilt kanseri biyolojisini, süreçlerini ve hücre çoğalması, göçü ve istilası dahil olmak üzere altta yatan hücre sinyal mekanizmalarını araştırmak için kullanmıştır. Bu, araştırmacıların yeni moleküler terapötik hedefleri belirlemelerine de yardımcı olabilir. Lin Zhu ve meslektaşları tarafından 2019 yılında yürütülen bir çalışmada, oldukça agresif melanom hücreleri A375 kullanıldı ve mikroRNA-3662'nin A375 melanom hücrelerinin büyümesi ve istilası üzerindeki rolü bulundu. Çalışma bulguları, mikroRNA-3662'nin ZEB1 genini hedeflediğini ve A375 tümör modelinde in vitro ve in vivo melanom hücre büyümesini düzenlediğini belirtmektedir [2]. Benzer şekilde, 2018 yılında yapılan bir araştırma, PI3K/AKT ve MAPK/ERK yolaklarının A375 hücre hattının çoğalması ve metastazında rol oynadığını ortaya koymuştur [3].
İlaç keşfi ve testi: A375 hücre hattı, potansiyel antikanser ajanlarını test etmek ve taramak için yararlı bir in vitro tümör modelidir. Araştırmacılar bu A375 melanom hücrelerini kullanarak yeni kemoterapötik ilaçların, bileşiklerin ve diğer tedavilerin toksisitesini ve etkinliğini değerlendirmektedir. Örneğin, bir çalışmada greyfurt türevi mikro ve nanoveziküllerin A375 insan melanom kanseri hücreleri üzerindeki antikanser özellikleri araştırılmıştır. Sonuçlar, mikro ve nanoveziküllerin hücre döngüsünün durmasını ve apoptozu indüklediğini ve hücre çoğalması, göçü ve istilasında gen ekspresyonunu engellediğini ortaya koymuştur [4].

A375 hücreleri: Yayınlar

A375 hücrelerini içeren bazı önemli araştırma yayınlarından burada bahsedilmektedir.

D vitamini ve düşük kalsemik analogları, insan melanom A375 hücre hattında sisplatin ve dakarbazinin antikanser özelliklerini modüle eder

Bu çalışma 2019 yılında Journal of Oncology'de yayımlanmıştır. Çalışma, D vitamini ve analogları ile birlikte tedavinin A375 melanom hücrelerinde sisplatin ve dakarbazinin antikanser aktivitesini artırdığını ileri sürmüştür.

Seçilmiş aloe türlerinden elde edilen jel ve bütün yaprak ekstraktlarının anti-melanom etkilerinin (A375 hücre hattı) in vitro değerlendirilmesi

Bu araştırma 2022 yılında Journal of Herbal Medicine dergisinde yayımlanmıştır. Bu çalışmada A375 melanom hücrelerinde aloe vera jelinin anti-melanom etkileri araştırılmıştır.

Fermitin ailesi üyesi 2, MAPK yolunu etkinleştirmek için p-α-Pix'in Rac1'e bağlanmasını artırarak melanom ilerlemesini teşvik eder

Oncogene'deki (2021) bu çalışma, fermitin ailesi üyesi 2'nin (FERMT2 veya kindlin-2) p-α-Pix ve Rac1 ile bağlanma yoluyla MAPK'yi aktive ederek melanom progresyonunu teşvik ettiğini öne sürdü.

FARP1, kutanöz melanomda MAPK sinyal yolağını modüle ederek hücre proliferasyonunu kolaylaştırır

The American Journal of Dermatopathology'deki (2019) bu çalışma, FARP1'in kutanöz melanom gelişimini ve ilerlemesini kolaylaştırabileceğini öne sürmüştür. Bu nedenle, yararlı bir terapötik hedef olabilir.

Phyllodium elegans ekstraktlarının insan kanser hücre hatları üzerindeki sitotoksik ve apoptotik potansiyeli

Bu araştırma makalesi Bioengineered (2019) dergisinde yayımlanmıştır. Bu çalışmada, Phyllodium elegans bitkisi özütünün A375 de dahil olmak üzere insan karsinom hücre hatları üzerindeki sitotoksik ve apoptotik aktivitesi araştırılmıştır.

A375 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası

Aşağıda A375 hücrelerini içeren birkaç çevrimiçi kaynak bulunmaktadır.

A375 hücre transfeksiyonu: Bu eğitim videosu A375 hücre transfeksiyonunu adım adım öğrenmenize yardımcı olacaktır.
Hücre kültürü: Bu video hücre hattı kültürleme ile ilgili çok faydalı bilgiler içermektedir.

A375 hücreleri için hücre kültürü protokolleri burada listelenmiştir.

A375 hücre hattı: Bu bağlantı, A375 ortamı ve dondurulmuş ve çoğalan A375 kültürlerinin işlenmesi dahil olmak üzere A375 hücre hattı kültürü ve bakımı hakkında yararlı bilgiler içerir.

A375 Hücreleri için Sıkça Sorulan Sorular (SSS)

Referanslar

Avram, S., ve diğerleri, A375 insan melanom modellerinin tavuk embriyo korioallantoik membranı ve Balb/c çıplak fareler üzerinde standardizasyonu. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662, ZEB1'i hedefler ve oldukça agresif melanom hücre hattı A375'in istilasını azaltır. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C, PI3K/Akt ve MAPK/ERK yolaklarını baskılayarak melanoma A375 hücre proliferasyonunu ve metastazını inhibe eder. Yaşam bilimleri, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Greyfurt türevi mikro ve nanoveziküller, A375 insan melanom hücre hattında farklı metabolom profilleri ve antikanser aktiviteleri göstermektedir. Hücreler, 2020. 9(12): p. 2722.