4T1 Hücreleri - Meme Kanseri Hücre Araştırmaları ve Uygulamalarına Dair Temel Bilgiler
4T1, nakledilebilir bir fare meme kanseri hücre hattıdır. İnsan meme kanserini araştırmak için genetik olarak özdeş bir in vitro tümör modeli olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. 4T1 hücreleri oldukça invaziv ve tümör oluşturucudur; meme bezindeki birincil tümör bölgesinden karaciğer, lenf düğümleri, akciğerler, kemikler ve beyin dahil olmak üzere diğer bölgelere metastaz yapma eğilimindedirler, bu nedenle meme kanseri metastazını incelemek için idealdirler [1].
- Büyüme Ortamı
- 4T1 hücrelerinin kültürlenmesi için RPMI 1640 besiyeri kullanılır. İdeal hücre büyümesi için kültür besiyerine %10 fetal sığır serumu (FBS), 2,0 g/L NaHCO3 ve 2,1 mM stabil glutamin eklenir.
- Çiftlenme Süresi
- 4T1 meme kanseri hücreleri için bildirilen ortalama popülasyon ikiye katlanma süresi 14 saattir.
- Büyüme Tipi
- 4T1, yapışkan bir hücre hattıdır.
- Biyogüvenlik Seviyesi
- BSL-1
- Temin edilebilir
- Cytion — 4T1 Siparişi
- 4T1 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
- 4T1 hücre hattının kültürleme bilgileri
- T1 Hücre Hattı: Avantajlar ve Dezavantajlar
- 4T1 Hücre Hattını Satın Alın: Yüksek Kaliteli Meme Kanseri Modeli
- T1 Hücre Hattı: Kanser Araştırmalarında Uygulamalar
- 4T1 hücreleri: Araştırma yayınları
- 4T1 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
- 4T1 Hücre Hattı Hakkında Sık Sorulan Sorular
- Referanslar
- Sık sorulan sorular
4T1 hücrelerinin genel özellikleri ve kökeni
Bir hücre hattıyla çalışmaya başlamadan önce, o hücre hattının kökeni ve genel özellikleri hakkında bilgi sahibi olmak çok önemlidir. Bu bölümde, 4T1 meme kanseri hücrelerinin temel özelliklerinden bahsedeceğiz. Örneğin, 4T1 hücreleri nedir? 4T1 hücre hattının özellikleri nelerdir? 4T1 hücre hattının kökeni nedir? 4T1 hücre hattının morfolojisi nedir?
- 4T1, BALB/c suşu farelerde kendiliğinden ortaya çıkan bir meme tümöründen kaynaklanan bir meme tümör hücre hattıdır. Bu yüksek derecede invaziv ve tümörjenik hücreler, büyüme ve metastatik yayılma açısından insan meme kanserinin davranışını yakından taklit eder. Özellikle, 4T1 tümör modeli üçlü negatif meme kanserini (TNBC) araştırır.
- 4T1 hücreleri yapışkandır ve epitel hücresi benzeri bir morfolojiye sahiptir.
4T1 ve EMT-6 hücre hattı
4T1 ve EMT-6, üçlü negatif meme kanseri çalışmaları için immünojenik olmayan, fare hücre modelleri. Burada, 4T1, daha az invaziv özelliklere sahip EMT-6'ya göre daha agresif ve invaziv tümör hücreleridir [2].
4T1 ve 4T07 hücreleri
4T07 de bir fare kanser hücre hattıdır. 4T1 ve 4T07 hücreleri arasındaki temel fark şudur: 4T1 hücreleri birincil tümör bölgesinden ayrılıp yayılabilir ve gözle görülür ikincil metastazlar oluşturabilirken, 4T07 hücreleri birincil bölgeden ayrılsa da gözle görülür metastazlar oluşturamaz [3].
4T1 hücre hattının kültürleme bilgileri
4T1 meme kanseri hücre hattı, biyomedikal alanda geniş kapsamlı araştırma uygulamaları sunar. Bu hücreleri kültürlemek için, aşağıda açıklanan şu önemli noktaları gözden geçirmelisiniz: 4T1 ikiye katlanma süresi nedir? 4T1 hücreleri nasıl kültürlenir? 4T1 için hücre ekim yoğunluğu nedir?
4T1 Hücrelerinin Kültürü İçin Önemli Noktalar
Çiftlenme Süresi:
4T1 meme kanseri hücreleri için bildirilen ortalama popülasyon ikiye katlanma süresi 14 saattir.
Yapışkan mı, Süspansiyon mu:
4T1, yapışkan bir hücre hattıdır.
Alt kültürleme oranı:
4T1 üçlü negatif meme kanseri hücre hattı için 1:6 ve 1:8 bölme oranı önerilir. Bölme işlemi için hücreler PBS ile durulanır ve 8 ila 10 dakika boyunca Accutase enzimi ile inkübe edilir. Ayrışan hücreler santrifüj yoluyla toplanır ve taze bir besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirilir. Yeniden süspansiyon haline getirilen hücreler, büyüme için yeni şişeye aktarılır.
Büyüme Ortamı:
4T1 hücrelerinin kültürü için RPMI 1640 besiyeri kullanılır. İdeal hücre büyümesi için kültür besiyerine %10 fetal sığır serumu (FBS), 2,0 g/L NaHCO3 ve 2,1 mM stabil Glutamin eklenir.
Büyüme Koşulları:
4T1 tümör hücreleri, %5 CO2 beslemeli 37°C nemlendirilmiş inkübatörde tutulur.
Saklama:
Hücre canlılığını korumak için 4T1 hücreleri -150 °C'nin altındaki bir sıcaklıkta, yani elektrikli dondurucuda veya sıvı azotun buhar fazında saklanmalıdır.
Dondurma Süreci ve Ortamı:
4T1 hücre hattı için CM-1 veya CM-ACF önerilir. Sıcaklığın kademeli olarak 1°C düşmesini sağlayarak hücre canlılığını koruduğu için yavaş dondurma yöntemi tercih edilir.
Çözme Süreci:
Dondurulmuş hücre şişesi, hücreler çözülene ve sadece küçük bir buz parçası kalana kadar birkaç saniye boyunca 37 °C'lik su banyosunda tutulur. Bu hücreler taze besiyerinde yeniden süspansiyon haline getirilir ve kültürleme için şişeye dökülür. 24 saatlik inkübasyondan sonra, dondurma besiyeri bileşenlerini uzaklaştırmak için besiyeri değiştirilir.
Biyogüvenlik Seviyesi:
4T1 meme kanseri hücrelerinin kültürü için biyogüvenlik seviyesi 1 laboratuvarı önerilir.
T1 Hücre Hattı: Avantajlar ve Dezavantajlar
Makalenin bu bölümünde, 4T1 metastatik modeliyle ilgili avantajlar ve dezavantajlar ele alınacaktır.
Avantajlar
4T1 hücre hattının başlıca avantajları şunlardır:
- Tümörijeniklik:
4T1, yüksek tümörijenik bir hücre hattıdır. Bu hücreler, bir fareye enjekte edildiğinde meme kanseri çalışması için 4T1 singenik fare modeli oluşturma yeteneğine sahiptir. Bu nedenle, 4T1 modeli tümör gelişimi, büyümesi ve metastazını incelemek için ideal olarak kullanılır. Ayrıca, terapötik ilaçların taranması ve değerlendirilmesi için de yararlıdır.
- İn vitro metastatik model:
4T1 modeli, araştırmacıların metastaz sürecinde rol oynayan altta yatan mekanizmaları ve yolakları etkili bir şekilde araştırmasına olanak tanıyan doğal bir metastaz eğilimine sahiptir. Dahası, 4T1 hücreleri 6-tioguanine dirençlidir. Bu, hedef organları tartma ve nodülleri sayma ihtiyacını ortadan kaldırdığı için, diğer modellere kıyasla daha yüksek doğrulukla mikro-metastatik hücrelerin verimli bir şekilde tespit edilmesine yardımcı olur.
Dezavantajlar
4T1 hücre hattıyla ilişkili dezavantaj şudur:
- Agresiflik/hızlı büyüme hızı:
4T1 hücre hattı, oldukça agresif bir üçlü negatif meme kanseri hücre hattıdır. Hızlı büyüme hızı nedeniyle, bu hücre hattını uzun vadeli deneylerde kullanmak ve deneysel değişkenleri kontrol etmek zorlaşır.
4T1 Hücre Hattını Satın Alın: Yüksek Kaliteli Meme Kanseri Modeli
T1 Hücre Hattı: Kanser Araştırmalarındaki Uygulamaları
4T1 fare modeli hücre hattı, kanser biyolojisini incelemek ve yeni tedavileri değerlendirmek için değerli bir araştırma aracıdır. 4T1 hücrelerinin başlıca uygulamaları aşağıda listelenmiştir:
Kanser Biyolojisi
4T1 hücre hattı, kanserin gelişimi ve büyümesini incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Tümörün ilerlemesi ve metastazında rol oynayan farklı hücresel ve moleküler mekanizmaları araştırmak ve keşfetmek için ideal bir in vitro modeldir. Ayrıca, bu süreçlerde hücre sinyal yolaklarının, mikroçevrenin ve gen ekspresyonunun rolünü ortaya çıkarabilir. 2019 yılında yapılan bir araştırmada, kanser hücrelerinin istilası ve göçünün arkasındaki itici mekanizmaları keşfetmek için 4T1 hücreleri kullanılmıştır. Sonuçlar, STAT3, MMP2 ve MMP9 genlerinin bu süreçte rol oynadığını ve bu genlerin inhibisyonunun kanser hücrelerinin göçünü ve istilasını önemli ölçüde kısıtlayabileceğini ortaya koymuştur [4]. Benzer çalışmalar, tümör gelişimi ve metastazda rol oynayan birkaç başka sinyal yolunu da ortaya koymuştur.
Ayrıca, 4T1 modeli, bağışıklık hücresi infiltrasyonu ve birincil tümör büyümesi dahil olmak üzere meme kanseri mikroçevresini anlamada önemli bir rol oynamaktadır. 4T1 tümör mikroçevresine odaklanan çalışmalar, tümörün ilerlemesinde bağışıklık hücrelerinin ve CXCL13 ekspresyonu gibi sitokinlerin rolüne ilişkin önemli bilgiler sağlamıştır. Model ayrıca, özellikle meme karsinomu kolonizasyonunun yaygın olduğu geç evre meme kanserinde, metastatik nişlerin ve tümör metastazının araştırılmasına yardımcı olmaktadır.
Kanser Tedavisi Araştırmaları
4T1 hücre hattı, yeni tedavilerin taranması ve değerlendirilmesi için kanser tedavisi araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Bir çalışma, biberiye özünden (Rosemary-FeNPs) ve saf biberiye özünden elde edilen yeşil sentezlenmiş demir nanopartiküllerinin 4T1 hücre hattı üzerindeki sitotoksik potansiyelini araştırmıştır. Araştırma bulguları, biberiye-FeNP'lerin saf ekstrakttan daha umut verici olduğunu ortaya koymuştur [5]. Benzer şekilde, 2021 yılında yapılan bir çalışmada, 4T1 meme kanseri hücrelerinde ve bir 4T1 fare modelinde zencefil ekstraktının anti-tümör potansiyeli incelenmiştir [6].
Doğal özütlerin yanı sıra, 4T1 hücre hattı geleneksel kemoterapötik ajanların etkinliğini değerlendirmek için de kullanılmaktadır. Örneğin, sisplatin ile diğer tedavilerin kombinasyonunu içeren araştırmalar, 4T1 modelinde tümör hücresi ölümünün arttığını ve tümör ilerlemesinin azaldığını göstermiştir. 4T1 hücrelerine ateşböceği lusiferazının eklenmesi, tümör büyümesinin ve metastatik fenotipin gerçek zamanlı görüntülenmesini mümkün kılmış ve çeşitli tedavilerin etkisini değerlendirmeyi kolaylaştırmıştır.
Ayrıca, 4T1 hücre hattının 6-tioguanine direnci, mikro-metastatik hücreler üzerine yapılan çalışmaları kolaylaştırarak, metastazın saptanmasını ve analizini iyileştirmiştir. Bu hücre hattı, özellikle araştırmacıların insan kanserlerini yakından taklit edebildikleri ortotopik fare modelleri bağlamında, antitümör bağışıklığı ve immünoterapinin etkilerinin incelenmesinde de önemli bir rol oynamaktadır.
Genel olarak, 4T1 hücre hattı, kanser biyolojisinin temel mekanizmalarının anlaşılmasından yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesi ve test edilmesine kadar onkoloji araştırmalarında vazgeçilmez bir araç olmaya devam etmektedir.
4T1 hücreleri: Araştırma yayınları
Bu makale bölümü, 4T1 hücreleri ile ilgili birkaç ilginç ve en çok atıf alan yayını ele alacaktır.
Bu makale 2018 yılında Journal of Photochemistry and Photobiology dergisinde yayınlanmıştır. Araştırma, Madhuca longifolia'dan sentezlenen gümüş nanopartiküllerin, hücre duvarının bozulması ve ROS oluşumu yoluyla 4T1 tümör hücrelerinde anti-proliferatif bir etki gösterdiğini öne sürmüştür.
Verbascosidin meme kanseri 4T1 hücre hattı üzerindeki sitotoksisite ve apoptotik etkileri
BMC Pharmacology and Toxicology dergisinde (2021) yayınlanan bu çalışma, doğal bir bileşik olan verbaskosidin, TLR4 sinyalleşmesi yoluyla 4T1 meme kanseri hücrelerinde apoptotik etkiler yarattığını öne sürmüştür.
Eupatorin, 4T1 fare meme kanseri modelinde tümör ilerlemesini baskıladı ve bağışıklığı güçlendirdi
Bu araştırma, 2020 yılında Integrative Cancer Therapies dergisinde yayınlanmıştır. Bu çalışmada, 4T1 hücreleri kullanılarak bir 4T1 singenik fare modeli geliştirilmiş ve bu model kullanılarak Eupatorin'in antikanser potansiyeli araştırılmıştır. Eupatorin, 4T1 fare modelinde tümör gelişimini geciktirmiştir.
Iranian Journal of Pharmaceutical Research dergisinde (2018) yayınlanan bu araştırma, tıbbi bir bitki olan Viola odorata'nın 4T1 hücreleri üzerinde potansiyel sitotoksik etkileri olduğunu öne sürmüştür.
Bu çalışma, doketaksel yüklü katı lipit nanopartiküllerinin (DTX yüklü SLN'ler), 4T1 hücrelerinin kanser büyümesini ve akciğer metastazını kısıtladıkları için meme kanserini tedavi etmek ve metastazı önlemek için umut verici bir ajan olabileceğini öne sürmüştür.
4T1 hücre hattı için kaynaklar: Protokoller, Videolar ve Daha Fazlası
Aşağıda 4T1 hücreleri ile ilgili birkaç kaynak bulunmaktadır:
- 4T1 transfeksiyonu eğitimi: Bu video, 4T1 hücre hattı transfeksiyonunu gerçekleştirmek için adım adım bir kılavuzdur.
- Hücre hattının alt kültürlenmesi: Bu video, yapışkan hücre hatları için alt kültürleme protokolünü açıklamaktadır.
Aşağıdaki bağlantı, 4T1 hücreleri için hücre kültürü protokolünü içerir:
- 4T1 hücre hattı: Bu web sitesi bağlantısı, 4T1 kültürlerinin işlenmesiyle ilgili tüm yararlı bilgileri içerir. Kültür ortamı bilgileri, kriyoprezervatif kültürler ve çoğalan kültürler için işleme protokolleri bulunmaktadır.
4T1 Hücre Hattı Hakkında Sıkça Sorulan Sorular
4T1 blogu, meme kanseri büyümesi ve metastazı üzerine yapılan çalışmalarda yaygın olarak kullanılan 4T1 meme kanseri hücre hattıyla ilgili bilgiler, araştırma güncellemeleri ve deneysel teknikler sunmaktadır.
4T1 modeli de dahil olmak üzere meme kanseri hücre hatları, tümör büyümesi ve metastazın yanı sıra meme kanseri mikroortamındaki bağışıklık hücresi infiltrasyonunun incelenmesi açısından hayati öneme sahiptir.
CXCL13 ekspresyonu, bağışıklık hücrelerinin infiltrasyonu ve metastatik nişlerin oluşumunda rol oynadığı için meme kanseri araştırmalarında hayati öneme sahiptir ve tümörün ilerlemesi ile metastaz hakkında önemli bilgiler sağlar.
4T1 modeli gibi bez tümörü modelleri, ileri evre meme kanseri ve meme karsinomunun yayılmasını simüle etmek için kullanılır; bu da araştırmacıların hastalığın seyrini ve olası tedavi yöntemlerini anlamalarına yardımcı olur.
Birincil tümörün büyümesi, kanser metastazı araştırmalarında kritik bir faktördür ve tümörlerin diğer organlara nasıl yayıldığını araştırmak için bir temel oluşturur; örneğin, intraduktal fare modelinde olduğu gibi.
4T1 fare meme kanseri modeli, antitümör bağışıklığı, sisplatin ile kombinasyon tedavileri ve tümör hücresi ölümünü incelemek için kullanılır ve meme kanseri tedavisinin etkinliği hakkında kapsamlı bir bakış açısı sunar.
4T1 modeli de dahil olmak üzere ortotopik fare modelleri, insan meme kanserini yakından taklit eden bir ortamda tümör mikroortamını, bağışıklık tepkisini ve metastazı incelemek açısından hayati öneme sahiptir.
Görüntülenebilir bir 4T1 modeli, araştırmacıların tümör büyümesini ve metastazı gerçek zamanlı olarak görselleştirmelerine olanak tanıyarak, kemik metastazları, 4T1 tümörlerinin hacmi ve sisplatin gibi tedavilerin etkinliği üzerine yapılan çalışmaları kolaylaştırmaktadır.
Kanser immünoterapisi, bağışıklık sisteminin kanser hücreleriyle mücadele yeteneğini güçlendirerek metastatik nişleri hedef alır; genel etkinliği artırmak amacıyla genellikle sisplatin gibi diğer tedavilerle birlikte uygulanır.
Ateşböceği lusiferazı, tümör büyümesini ve metastatik fenotipi izlemek amacıyla 4T1 hücrelerine aktarılmakta olup, araştırmacılara kanserin ilerleyişini ve tedavi yöntemlerini incelemek için güçlü bir araç sunmaktadır.
Kaynakça
- Pulaski, B.A. ve S. Ostrand-Rosenberg, Fare 4T1 meme tümörü modeli. Curr Protoc Immunol, 2001. Bölüm 20: s. Birim 20.2.
- Maxwell, K.G., Tümörün Tamamına Yönelik Aşılama için Meme Kanseri Hücrelerinin İmmünomodülasyonu. 2016.
- Walker, I. ve ark., Meme tümörleri, Balb/C farelerinde merkezi proinflamatuar sitokin ekspresyonunu indükler, ancak davranışsal bozukluklara yol açmaz. Scientific Reports, 2017. 7(1): s. 1-13.
- Li, Y., ve ark., Doğal ürün pektolinarigenin tarafından Stat3 sinyal yolunun inhibisyonu, meme kanseri metastazını hafifletir. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: s. 1195.
- Farshchi, H.K. ve ark., Biberiye özütü ile demir nanopartiküllerinin yeşil sentezi ve kanser hücre hatları üzerindeki sitotoksisite etkisinin değerlendirilmesi. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: s. 54-62.
- Gholizadeh, A.P. ve ark., Balb/c faresinde 4T1 meme kanseri hücre hattı üzerinde zencefil özütünün etkisi. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): s. 43-49.