Förståelse av "passagenummer"

Begreppet "passage number" är centralt inom cellodling och avser det antal gånger en cellinje har subkultiverats eller överförts till ett nytt tillväxtmedium efter att den först har återupplivats från kryokonservering eller mottagits från en referenscellbank. Detta mått är avgörande för att spåra en cellkulturs härstamning och historia.

Översikt över processen

• Vid rutinmässig cellodling överförs cellerna till ett nytt medium när de uppnår en viss densitet för att upprätthålla tillväxten och förhindra överflöd. Varje sådan överföring registreras som en passage.
• När vi tog emot en cellinje, till exempel vid passage 60 från deponenten, fortsatte vi traditionellt från detta passage-nummer och ökade med varje subkultur. Denna praxis, som samtidigt bevarade en historisk tråd, ledde ofta till höga passagenummer redan från början. Med tanke på den omfattande och ofta decennielånga användningen av vissa cellinjer, till exempel HeLa som etablerades 1951, är det inte möjligt att fastställa det totala antalet passager sedan cellinjens start.
• För att förbättra tydligheten och kvaliteten i våra cellodlingsprocesser reviderade vi detta tillvägagångssätt i början av 2023. När vi nu initierar en odling från en ny vial, oavsett passagenummer från deponenten, nollställer vi och börjar räkna på nytt från passage ett för varje tillverkad batch

Motivering

Passage är en viktig procedur för att säkerställa att cellkulturer är friska och användbara för forskning. När cellerna växer för mycket drabbas de av kontaktinhibering, vilket minskar deras proliferationshastighet, vilket kan påverka experimentresultaten negativt. För att mildra dessa problem genomför Cytion strikta kontroller av de celldensiteter vid vilka subkulturer sker, och upprätthåller därmed låga passageantal under tillverkningen av sina cellinjer. Denna försiktighetsåtgärd bidrar till att förhindra de negativa effekterna av överdriven passage, såsom morfologiska avvikelser, förändringar i tillväxthastighet och genetisk drift, vilket kan leda till att cellerna skiljer sig markant från sitt ursprungliga tillstånd. Långa perioder av subkulturer kan också öka risken för mikrobiell kontaminering.

Vårt löfte

Vi ser till att de celler som levereras till forskare är så nära den ursprungliga genetiska sammansättningen och de fenotypiska egenskaperna som möjligt, vilket ökar tillförlitligheten i experimentella data. Genom att noggrant dokumentera varje passage bidrar Cytion dessutom till forskningens spårbarhet och reproducerbarhet, ett åtagande som återspeglar de höga standarderna för praxis inom cellodling. Forskare uppmuntras att föra noggranna register över passagenummer, både på odlingskärlen och i sina laboratorieanteckningsböcker, som en referens för sina cellkulturers hälsa och historia.