T98G-cellinjen
T98G-celler utgör en human glioblastomcellinje som vanligtvis används inom biomedicinsk forskning. I synnerhet används dessa celler i studier av hjärncancer för att undersöka viktiga celler och molekylära faktorer som bidrar till detta. Dessutom hjälper de forskare att screena och testa nya läkemedel mot cancer som kan hjälpa till med läkemedelsutveckling.
Den här artikeln kommer att innehålla alla viktiga detaljer om T98G-cellinjen som du behöver innan du börjar arbeta med den, t.ex:
- Allmänna egenskaper och ursprung för T98G-cellinjen
- Information om odling av T98G-cellinjen
- T98G cellinje: Fördelar och nackdelar
- Tillämpningar av T98G-celler
- Forskningspublikationer med T98G-celler
- Resurser för T98G-celler: Protokoll, videor och mer
1. Allmänna egenskaper och ursprung för T98G-cellinjen
Detta avsnitt av artikeln hjälper dig att utforska de grundläggande egenskaperna hos T98G-cellinjen. Det kommer att omfatta information om cellinjens ursprung, morfologi, storlek och ploidi. Dessutom kommer den att förstå följande förfrågningar på ett heltäckande sätt: Vad är T98G-celler? Vilken typ av cell är T98G? Varifrån kommer T98G? Vilka är egenskaperna hos T98G-cellinjen? Vad är glioblastomcellinjen T98G U87?
- T98G-cellinjen etablerades av GH Stein. Den består av fibroblastliknande celler som härstammar från hjärnvävnaden hos en 61-årig kaukasisk man med glioblastoma multiforme [1].
- T98G-cellerna är icke-tumorogena; de orsakar inte tumörer när de injiceras i nakna möss. De tenderar dock att proliferera med lämplig förankring i cellkulturen.
- Dessa celler har en fibroblastcellsliknande morfologi.
- Glioblastomcellinjen T98G representerar hyperpentaploidi. Det modala kromosomantalet varierar mellan 128 och 132. Högre ploidier kan förekomma i 1,39% av cellpopulationen.
T98 mot T98G
Båda är mänskliga glioblastomcellinjer och har ett liknande ursprung. Den enda skillnaden mellan dessa cellinjer är antalet kromosomer. T98G har nästan dubbelt så många kromosomer som T98. Därför kallas T98G för den polyploida varianten av T98.
T98G mot U87
U87 och T98G är båda mänskliga glioblastomcellinjer som används i hjärncancerforskning. U87 uppvisar en mer aggressiv fenotyp jämfört med T98G GBM.
2. Information om odling av T98G-cellinjen
Odlingsinformation om en cellinje är viktig att känna till innan du påbörjar ditt arbete med den. Det hjälper dig att hantera cellinjen på ett enkelt och bekvämt sätt i laboratoriet. Du bör veta följande: Vad är fördubblingstiden för T98G-cellinjen? Vilket tillväxtmedium är bäst för T98G-celler? Vilka är T98G-tillväxtegenskaperna? Vad är sådddensiteten för T98G-celler? Hur fryser du T98G-celler?
Viktiga punkter för odling av T98G-celler
|
Fördubblingstid: |
Den ungefärliga fördubblingstiden för T98G-celler är 40 timmar. Den kan variera beroende på odlingsförhållandena. |
|
Adherent eller i suspension: |
T98G-cellerna är adherenta. De fäster sig på botten av odlingskärlen och bildar monolager. |
|
Delningsförhållande: |
T98G-cellerna subkultiveras i ett delningsförhållande på 1:2 till 1:5. För detta tvättas cellerna först med 1 X PBS-buffert och inkuberas sedan med passagelösning (Accutase) under 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Efter inkubationen tillsätts de avskilda cellerna till färskt tillväxtmedium och centrifugeras. Därefter resuspenderas den uppsamlade cellpelleten försiktigt och cellerna fördelas i en odlingskolv som innehåller tillväxtmedium. |
|
Tillväxtmedium: |
EMEM-medium innehållande 10% fetalt bovint serum, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 och EBSS används för att odla T98G-celler. Mediet bör bytas ut 3 till 4 gånger per vecka. |
|
Tillväxtförhållanden: |
T98G-cellerna förvaras i en luftfuktad inkubator vid 37°C och ansluten till en CO2-anläggning. |
|
Förvaring: |
Frysta celler kan förvaras vid temperaturer under -150°C eller i ångfasen av flytande kväve för att skydda cellernas livsduglighet på längre sikt. |
|
Frysningsprocess och medium: |
T98G-celler rekommenderas att frysas i CM-1 eller CM-ACF cellfrysningsmedium. För detta föreslås en långsam frysningsprocess som endast tillåter en temperatursänkning på 1 °C per minut. Detta förhindrar att cellerna utsätts för chock och bibehåller deras livskraft. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta celler tinas försiktigt genom att de placeras i ett förvärmt vattenbad vid 37 grader Celsius i 40 till 60 sekunder. De resuspenderas sedan i färskt tillväxtmedium och överförs till en ny kolv. Efter 24 timmars inkubation byts mediet för att eliminera komponenter i frysmediet. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
T98G-kulturer förvaras i ett laboratorium med biosäkerhetsnivå ett. |
3. T98G cellinje: Fördelar och nackdelar
T98G är en allmänt använd glioblastomcellinje som härrör från människa. Den har flera för- och nackdelar som skiljer den från andra. Några anmärkningsvärda sådana diskuteras i detta avsnitt av artikeln.
Fördelarna med T98G
Fördelarna med T98G-cellerna är:
-
Väl karakteriserade
Väletablerad och välkarakteriserad cellinje. Omfattande studerad och dokumenterad i litteraturen.
-
In vitro-modell
Representerar egenskaper hos glioblastom, den mest aggressiva hjärntumören. Ett värdefullt verktyg för sjukdomsutredning, förståelse av biologi och behandlingsutveckling.
Nackdelar med T98G
Nackdelarna förknippade med T98G-celler är:
-
Heterogenitet
Genetisk heterogenitet i T98G-cellpopulationen kan leda till inkonsekvens i experimentella resultat och försvåra tolkningen av data.
4. Tillämpningar av T98G-celler
T98G-cellinjen är ett värdefullt verktyg inom cancerforskningen. Några viktiga forskningsapplikationer för T98G-cellerna listas här:
- Cancerforskning: T98G-cellinjen är ett värdefullt verktyg för att undersöka biologin hos glioblastomtumörer. Dessa celler används främst för att studera de invecklade molekylära vägar som ligger bakom glioblastomsjukdomens utveckling och progression. Dessutom används de för att identifiera genetiska mutationer som driver tumörtillväxt och andra mekanismer i cancerceller. Yang Chen och hans kollegor arbetade med dessa celler och fann att överuttryck av miRNA-21 minskar PDCD4-nivåerna (Programmed cell death protein 4) i T98G-cellerna. Detta leder till hämning av PDCD4-medierad T98G-cellapoptos. Studien tyder således på att miRNa-21 är ett potentiellt mål för utveckling av terapier [2]. I likhet med denna studie studerade Fanqiang Kong och medarbetare mikroRNA-15a:s roll i T98G-glioblastomcellernas proliferation och invasion. De fann att miRNA-15a-5p främjar dessa cellprocesser genom att rikta in sig på celladhesionsmolekyl 1 (CADM1) [3].
- Läkemedelstestning och terapeutisk utveckling: T98G är en utmärkt in vitro-modell för glioblastom för screening av nya läkemedel och utgör en plattform för att utvärdera effekten av potentiella cancerbehandlingar. Forskare testar också en mängd olika föreningar och behandlingar för att identifiera och upptäcka läkemedelskandidater med de mest lovande anti-glioblastomegenskaperna. Detta leder till utveckling av nya läkemedel och behandlingsstrategier, vilket ger hopp för glioblastompatienter. I en sådan studie undersöktes anticancerpotentialen hos en naturlig förening som kallas corilagin i den temozolomidresistenta T98G GBM-cellinjen. Studiens resultat tyder på att korilagin i kombination med temozolomid inducerar högre nivåer av antiproliferativa och antiapoptotiska effekter i cellerna [4].
5. Forskningspublikationer med T98G-celler
Följande är några intressanta och ofta citerade forskningspublikationer om T98G, glioblastomcellinjen.
Kemoterapeutisk effekt av SR9009, en REV-ERB-agonist, på mänskliga glioblastom T98G-celler
I denna publikation i ASN Neuro (2019) undersöktes anticancereffekterna av en REV-ERB-agonist kallad SR9009 på T98G-glioblastomceller.
Denna forskningsartikel i Neurochemical research (2019) föreslog att natriumbutyrat och quercetin synergistiskt hämmar skyddande autofagi i T98G-celler och ökar cellapoptos.
I denna studie i Genes (2023) utsattes den hypoxiaanpassade T98G-cellinjen för RNA-sekvensering och föreslog IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) som ett lovande terapeutiskt mål.
MicroRNA-548c-3p hämmar proliferation och migration av T98G-gliomceller genom att nedreglera c-Myb
Denna artikel publicerades i Oncology Letters (2017). I studien undersöktes att miRNA-548c-3p riktar sig mot T98G-onkogener (c-Myb) för att hämma proliferation och migration av T98G-celler.
I denna artikel i Journal of Medicinal Plants Research (2011) föreslås att kloroformextrakt av Dracocephalum tanguticum utövar antiproliferativa effekter på T98G-celler genom att modulera generna caspase-3, Bax och P21.
6. Resurser för T98G-celler: Protokoll, videor och mer
Här listas de resurser som finns tillgängliga för odling av T98G-celler och transfektionsprotokoll.
- T98G-transfektion: Denna forskningsartikel innehåller protokollet för T98G-transfektion. Den förklarar kortfattat metoden och erforderligt reagens.
Följande länkar hjälper dig mycket att lära dig T98G-cellkulturprotokoll och göra ditt arbete enkelt med det.
- T98G-celler: Denna webbplats innehåller viktig information om T98G-cellodlingsprotokoll, inklusive subkulturer och hantering av proliferativa och kryopreserverade kulturer. Dessutom hjälper den dig också att lära dig celltillväxtmedier, villkor och fördubblingstid.
Referenser
- Haehl, E., Endotelcellsinducerad radioresistens i glioblastom. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al, MicroRNA-21 nedreglerar uttrycket av tumörsuppressorn PDCD4 i den mänskliga glioblastomcellen T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al, MicroRNA-15a-5pfrämjar proliferation och invasion av T98G glioblastomceller genom att rikta in sig på celladhesionsmolekyl 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al, Corilagin inducerar höga nivåer av apoptos i den temozolomidresistenta T98G-gliomcellinjen. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.