SiHa-celler - ett nytt sätt att belysa forskning om livmoderhalscancer
SiHa-celler är livmoderhalscancerceller som ofta används inom biomedicinsk forskning. De är utmärkta transfektionsvärdar och lämpar sig därför väl för genuttrycksstudier. På grund av sitt mänskliga ursprung och sin relevans för livmoderhalscancer används dessa celler främst i studier inom cancerbiologi, virologi och läkemedelsutveckling.
SiHa-cellernas allmänna egenskaper och ursprung
Att förstå en cellinjes ursprung och allmänna attribut är avgörande, eftersom det påverkar dess användning inom din forskning. I detta artikelavsnitt kommer du att lära dig mer om SiHa-cellinjens ursprung, särskiljande egenskaper och mycket mer: Vad är SiHa-cellinjen för cancer? Vad är SiHa-celler HPV? Vad är SiHa-cellinjens ursprung? Vad är morfologin för SiHa?
- SiHa, cellinjen för livmoderhalscancer, härstammar från fragment av en primär livmoderbiopsi från en asiatisk kvinna (55 år) med skivepitelcancer [1].
- SiHa-cellinjen uppvisar en hypertriploid karyotyp. De flesta cellerna har ett genomsnittligt kromosomantal på mellan 69 och 72. Cirka 24% av cellerna har dock ett modalt kromosomnummer på 71.
- SiHa-celler är positiva för humant papillomvirus 16. De uppvisar en integration av cirka 1 till 2 kopior av HPV-genomet per cell [2].
- Dessa livmoderhalscancerceller uppvisar en epitelial morfologi.
SiHa cellinje: Information om odling
Det är inte lätt att upprätthålla en cellinjekultur om man inte känner till alla viktiga punkter för odling av den. Det bör du känna till: Vad är fördubblingstiden för SiHa? Vad är SiHa cellmedia? Hur odlar du SiHa-cellinjen?
Viktiga punkter för odling av SiHa-celler
|
Fördubblingstid: |
Fördubblingstiden för SiHa-celler är cirka 17 timmar. |
|
Adherent eller i suspension: |
SiHa är en adherent cellinje. |
|
Subkultiveringsförhållande: |
Subkultiveringsförhållandet för SiHa-celler är 1:2 till 1:4. För passering sköljs de adherenta cellerna med 1x PBS. Accutase-lösning tillsätts och cellerna inkuberas i 8 till 10 minuter vid rumstemperatur. Därefter tillsätts odlingsmedium och cellerna centrifugeras. Cellpelleten resuspenderas och cellerna hälls över i den nya kolven för odling. |
|
Tillväxtmedium: |
Eagle's minimum essential medium (EMEM )innehållande 10% FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 och Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) används för idealisk tillväxt av SiHa-celler. Medierna byts ut 2 till 3 gånger per vecka. |
|
Tillväxtförhållanden: |
SiHa-cellerna förvaras i en 37°C befuktad inkubator med 5% CO2-tillförsel. |
|
Förvaring: |
De frysta SiHa-cellinjeflaskorna med livmoderhalscancerceller förvaras vid en temperatur under -150°C i en elektrisk frys eller i ångfasen av flytande kväve under en längre tid. |
|
Frysningsprocess och medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysningsmedium används för frysning av SiHa-celler. Cellerna fryses med en långsam frysmetod som endast tillåter en sänkning av temperaturen med 1 °C per minut för att skydda cellernas livskraft. |
|
Upptiningsprocess: |
Frysta celler förvaras i 40 till 60 sekunder i ett 37°C vattenbad tills en liten isklump återstår. Därefter tillsätts färskt tillväxtmedium och cellerna centrifugeras för att avlägsna komponenterna i frysmediet. Cellpelleten resuspenderas och cellerna fördelas i en odlingskolv för tillväxt. |
|
Biosäkerhetsnivå: |
Biosäkerhetsnivå 1-laboratorium krävs för att hantera och underhålla SiHa-cellkulturer. |
Fördelar och nackdelar med SiHa-cellinjen
Liksom andra humana carcinomcellinjer har SiHa också vissa distinkta egenskaper som är förknippade med vissa fördelar och nackdelar. Här har vi diskuterat några viktiga sådana.
Fördelar med SiHa-cellinjen för livmoderhalscancer
- Modellför livmoderhalscancer
- Härstammar från skivepitelcancer i livmoderhalsen.
- Används för att studera mekanismer, tillväxt och utveckling av livmoderhalscancer.
- Uttrycker generna p53+ och pRB+ som är relaterade till DNA-reparation, cellcykelreglering och tumörbekämpning.
- Tumörframkallande potential
- SiHa-celler är tumörframkallande och kan framkalla dåligt differentierade epidermoida tumörer av grad III hos nakna möss.
- Används för in vivo cancerforskning och testning av anti-cancerbehandlingar.
Nackdelar med SiHa-celler
- Proliferationshastighet
- SiHa-celler sprider sig snabbt, vilket leder till överväxt.
- Kräver frekvent passage, vilket ökar risken för genetisk instabilitet, vilket kan påverka cellbeteendet över tid.
Forskningsapplikationer för SiHa-celler
SiHa-cellinjen används i stor utsträckning inom forskning om livmoderhalscancer. Några specifika tillämpningar av denna cellinje diskuteras här.
- Studier relaterade till humant papillomvirus (HPV): SiHa-celler är HPV 16-positiva och är därför värdefulla enheter för att studera infektion med humant papillomvirus, dess molekylära mekanismer och dess roll i utvecklingen och förloppet av livmoderhalscancer. Forskare använder också dessa celler för att undersöka virusreplikation, integration och dess inverkan på värdcellsprocesser. I en studie som genomfördes 2020 användes SiHa-cellinjen för att undersöka HPV E6/E7-onkoproteins roll i utvecklingen av livmoderhalscancer genom att rikta in sig på det med CRISPR-teknik. Resultaten visade att knockdown av E6/E7-gener orsakade SiHa-celltillväxthämning och apoptos. Därför kan dessa virusgener fungera som viktiga läkemedelsmål för att utveckla behandlingar mot HPV-associerad livmoderhalscancer [3].
- Cancerbiologi: SiHa-celler är en ovärderlig modell för att studera livmoderhalscancerns biologi, inklusive cancerutveckling, progression, metastasering och invasion. Forskare använder dessa celler för att utforska de genetiska mutationer och underliggande molekylära vägar som bidrar till utveckling och tillväxt av livmoderhalscancer, t.ex. en studie som använde SiHa-celler och fann att uppreglerad SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) uppmuntrar proliferation av livmoderhalscancerceller genom aktivering av MAPK-kaskaden [4].
- Screening och testning av läkemedel: SiHa är en livmoderhalscancerlinje som ofta används för att bedöma effekten av potentiella cancerläkemedel som är specifika för HPV-associerad livmoderhalscancer. Forskare undersöker läkemedlens antiproliferativa, apoptotiska och anti-metastatiska potential med hjälp av dessa celler. Till exempel en studie som genomfördes 2019 och som undersökte den cytotoxiska potentialen hos fruktextrakt av Vatica diospyroides Symington Type SS på SiHa-cellinjen för livmoderhalscancer [5].
SiHa-celler för din forskning!
Forskningspublikationer med SiHa-celler
Några viktiga och ofta citerade forskningspublikationer innehåller SiHa-cellinjen för skivepitelcancer i livmoderhalsen.
Denna publikation i OncoTargets and Therapy (2019) föreslog att en naturlig förening aloe-emodin utövar HPV E6 / E7 och glukosmetabolismassocierade apoptotiska effekter i SiHa livmoderhalscancerceller.
Denna artikel publicerades i Future Journal of Pharmaceutical Sciences 2022. Denna studie undersökte antitumöraktiviteterna hos Excoecaria agallocha (L.) växtbladsextrakt i SiHa-cellinjen för livmoderhalscancer.
Denna studie publicerad i Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) föreslog att 1, 10-Phenanthroline-molekylen vid koppling med zinksulfatnanopartiklar utövar betydande antiproliferativa effekter i SiHa-celler.
Denna forskning publicerades i Oncology Reports 2019. Studien visade att Astragaloside IV, en naturprodukt, undertrycker migrationen och invasionen av SiHa-celler genom att modulera TGF-β1-medierade PI3K- och MAPK-signalvägar.
Denna studie i Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) visade att IFI16 (interferon-gamma inducerbart protein 16) reglerar PD-L1-genen genom att aktivera STING-TBK1-NF-kB-vägen för att uppmuntra SiHa-celler med livmoderhalscancer att växa.
Resurser för SiHa Cell line: Protokoll, videor och mycket mer
Här är några online-resurser som innehåller SiHa-celler.
- Transfektion av SiHa-celler: Denna forskningsartikel innehåller ett protokoll för underhåll av SiHa-cancerceller från livmoderhalscancer och för SiHa-celltransfektion.
Följande länk innehåller information om cellodling för SiHa-celler.
- SiHacellinje: Denna webbplats innehåller mycket värdefull information om SiHa-cellinjen. Detta inkluderar information om tillväxtmedier, odlingsförhållanden, protokoll för subkulturering av SiHa-celler och hantering av dess proliferativa och kryokonserverade kulturer.
Vanliga frågor om SiHa Cervical Carcinoma Cells
Referenser
- Melzer, C., J. von der Ohe och R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al, Investigation of the influence of high-risk human papillomavirus on the biochemical composition of cervical cancer cells using vibrational spectroscopy. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al, In vitro och in vivo tillväxthämning av humana livmoderhalscancerceller via humant papillomavirus E6/E7 mRNA-klyvning med CRISPR/Cas13a-systemet. Antiviral forskning, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al., SEC61G främjar proliferation av livmoderhalscancer genom att aktivera MAPK-signalväg. Sjukdomsmarkörer, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Anticancerpotential hos fruktextrakt från Vatica diospyroides symington typ SS och deras effekt på programcelldöd hos cellinjer för livmoderhalscancer. Den vetenskapliga världstidskriften, 2019. 2019.
