SH-SY5Y-celler - Neuroblastomforskning och den neurovetenskapliga relevansen av SH-SY5Y-celler
Cellinjen SH-SY5Y, som härrör från humant neuroblastom, används i stor utsträckning inom medicinsk forskning för att undersöka neurodegenerativa sjukdomar och utveckla läkemedel. Forskarna använder dessa celler i sin ursprungliga odifferentierade form eller differentierar dem till celler som liknar neuroner.
Allmän information och ursprung för SH-SY5Y-cellinjen
I detta avsnitt behandlas grundläggande information om SH-SY5Y-cellinjen, inklusive dess ursprung, definition och cellstruktur. Vi kommer att ta upp frågor som dess morfologi och cellernas ursprung.
- SH-SY5Y är en cellinje som härrör från människa och som uppstod genom subkloning av neuroblastomcellinjen SK-N-SH 1970.
- Modercellinjen, SK-N-SH, utvecklades från benmärgsbiopsi från en fyraårig kvinnlig neuroblastompatient.
- SH-SY5Y-celler är fenotypiskt adrenerga och uttrycker dopaminerga markörer, vilket gör dem till en användbar in vitro-modell för studier av neurodegenerativa sjukdomar, neurogenes och hjärncellsegenskaper [1].
- SH-SY5Y-celler växer som klumpar av livskraftiga neuroblastiska celler med neuriter och är löst vidhäftande.
- Cellstorleken för SH-SY5Y-celler är 12 μm.
- Det modala kromosomnumret för SH-SY5Y-celler är 47, och de har en sällsynt markör för kromosom nummer 1, trisomi av 1q, som orsakas av att en extra kopia av 1q-segmentet sätts in i den långa armen av kromosom 1.
Odling av SH-SY5Y-celler
I neurobiologiska forskningslaboratorier är SH-SY5Y-celler de mest odlade neuroblastomcellerna. För att arbeta med dessa celler är det viktigt att förstå vilken typ av odlingsmedium som är lämpligt för deras odling, deras tillväxtegenskaper, optimal sådddensitet och rätt metod för att frysa dem. I detta avsnitt ges viktig information om odling av SH-SY5Y-celler för att hjälpa dig med dessa aspekter.
Viktiga punkter för odling av SH-SY5Y-celler
|
Populationsfördubblingstid: Den genomsnittliga populationsfördubblingstiden för SH-SY5Y-celler är cirka 3 till 4 dagar. |
|
Adherenta eller i suspension: SH-SY5Y är löst vidhäftande celler. De växer som klumpar när de utsäds i hög densitet. |
|
Utsådd densitet: Den optimala utplanteringsdensiteten för SH-SY5Y är 1 x 104 celler/cm2. SH-SY5Y-kulturer består av både vidhäftande och flytande celler. |
|
Tillväxtmedium: DMEM:Ham's F12-media kompletterat med 3,1 g/L glukos, 10% FBS och 1,6 mM L-glutamin är idealiskt för odling av SH-SY5Y-cellinjen. |
|
Tillväxtförhållanden (temperatur, CO2): SH-SY5Y-celler odlas vid 37°C i en luftfuktad inkubator med 5% CO2-tillförsel. |
|
Förvaring: För att upprätthålla livskraften hos SH-SY5Y-cellerna förvaras de i ångfasen av flytande kväve vid en temperatur under -150°C. |
|
Frysningsprocess och medium: CM-1- eller CM-ACF-frysmedier används för att frysa SH-SY5Y-celler. En långsam frysmetod som gradvis sänker temperaturen med 1°C väljs för att frysa denna neuroblastomcellinje. |
|
Upptiningsprocess: Frysta flaskor med SH-SY5Y-celler placeras i ett vattenbad med en temperatur på 37°C. Flaskan omrörs snabbt tills cellerna tinat och endast en liten isklump finns kvar. |
|
Biosäkerhetsnivå: SH-SY5Y-celler kan odlas i ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1. |
SH-SY5Y-celler: Fördelar och begränsningar
Fördelar och begränsningar
- Differentiering till neuroner: SH-SY5Y-celler kan differentieras till funktionella neuroner med hjälp av specifika föreningar, vilket ger ett mer bekvämt alternativ till primära neuroner och undviker etiska problem i samband med deras användning [2].
- In vitro-modell för neurodegenerativa sjukdomar: Uttrycket av molekylära markörer, inklusive dopaminerga neurala markörer, gör SH-SY5Y-celler lämpliga för studier av neurodegenerativa sjukdomar som Parkinsons sjukdom.
Begränsningar
- Osynkroniserad cellcykel: SH-SY5Y-cellkulturer uppvisar osynkroniserade cellcykler i ett odifferentierat tillstånd [3].
- Odefinierat differentieringstillstånd: SH-SY5Y-celler har ett odefinierat differentieringstillstånd som sträcker sig från ett tumörframkallande neuroblastomtillstånd till postmitotiska neuroner eller neurala progenitorceller. De uttrycker inte molekylära markörer som mogna neuronceller gör [4].
SH-SY5Y-celler för in vitro-neuropharmakologi och läkemedelsupptäckt
Användningsområden för SH-SY5Y-celler
Forskning om neurodegenerativa sjukdomar: SH-SY5Y-celler används för att studera neurodegenerativa sjukdomar, såsom Alzheimers och Parkinsons sjukdom. I en studie behandlades till exempel SH-SY5Y-celler med amyloid β-peptid 1-42 för att etablera en in vitro-modell av Alzheimers sjukdom. Den utvecklade cellinjen transfekterades sedan med pcDNA-17A och 17A shRNA för att undersöka effekten av det långa icke-kodande RNA 17A på Alzheimerliknande celler. Studien visade att LncRNA-17A reglerar apoptos och autofagi hos SH-SY5Y-celler, vilket efterliknar AD [5].
Utveckling av läkemedel: SH-SY5Y-celler används för att screena och validera läkemedel för deras terapeutiska effekt mot neurodegenerativa sjukdomar. I en studie som genomfördes 2021 framkallade man till exempel parkinsonism i SH-SY5Y-celler med hjälp av en herbicid (parakvat) och använde sedan dessa celler för att undersöka den terapeutiska potentialen hos en flavonoid, naringenin. Föreningen uppvisade en skyddande effekt mot Parkinsons sjukdomsmedierad neurodegeneration och neurotoxicitet i cellmodeller, vilket indikerar dess potential för att utveckla PD-behandlingar [6].
Forskningspublikationer som innehåller SH-SY5Y-celler
Det finns gott om forskningsstudier om SH-SY5Y-celler. I detta avsnitt beskrivs några viktiga exempel.
- LncRNA17A reglerar autofagi och apoptos hos SH-SY5Y-cellinjen som en in vitro-modell för Alzheimers sjukdom: I denna publikation föreslogs att LncRNA17A förmedlar apoptos och autofagi hos SH-SY5Y-celler som experimentellt omvandlats till Alzheimers sjukdomsmodell.
- Naringenin lindrar paraquat-inducerad dopaminerg neuronal förlust i SH-SY5Y-celler och en råttmodell av Parkinsons sjukdom: Denna studie föreslog Naringenin-föreningar som ett neuroprotektivt medel mot en experimentellt utvecklad cellulär och djurmodell av Parkisons sjukdom.
- Biokemisk karakterisering av proliferativ och differentierad SH-SY5Y-cellinje som en modell för Parkinsons sjukdom: Differentierade SH-SY5Y-celler användes för att karakterisera och utvärdera flera biokemiska processer som ofta studeras vid Parkinsons sjukdom.
- In vitro-effekter av acitretin på humana neuronala SH-SY5Y-celler: SH-SY5Y-celler användes för att studera neuronal differentiering. Forskare undersökte att Acitretin främjar neurondifferentiering och behandlar neurodegenerativa och neuroutvecklingsstörningar och hjärntumörer.
- Transformation av SH-SY5Y-cellinjen till neuronliknande celler: Undersökning av elektrofysiologiska och biomekaniska förändringar: I denna studie omvandlades SH-SY5Y-neuralblastomaceller till neuroner genom att de behandlades med retinoinsyra och BDNF-molekyler (Brain-Derived Neurotrophic Factor) och de biokemiska och elektrofysiologiska förändringarna i dem undersöktes.
Resurser för SH-SY5Y-celler: Protokoll, videor och mer
Flera online-resurser finns tillgängliga på denna berömda neuroblastomcellinje. Dessa resurser kan utbilda dig om hantering och underhåll av SH-SY5Y-kulturer.
Protokoll för cellodling
Följande webbplatsartiklar kan hjälpa dig att lära dig metoder för odling, frysning och upptining av SH-SY5Y-celler.
- Odling avSH-SY5Y-celler: Grundläggandeinformation om SH-SY5Y-celler, inklusive upptining, frysning och subkultur av celler.
- Subodling av SH-SY5Y-celler: Visar information om tillväxtmedier som används och subodlingssteg för SH-SY5Y-celler.
- Transfektering av SH-SY5Y-celler: I detta dokument beskrivs ett protokoll för transient transfektion för cellinjen SH-SY5Y.
- Protokoll för differentiering: I den här videon förklaras protokollet för differentiering av SH-SY5Y-celler.
Vi förväntar oss att denna artikel kommer att ge användbar information om SH-SY5Y-cellhantering, odling och användning i forskningsstudier; om du vill arbeta med denna neuroblastomcellinje, överväg att beställa från oss.
SH-SY5Y cellinje: Ofta ställda frågor
Referenser
- Carvajal-Oliveros, A., et al., Cellinjen BE (2)-M17 har en bättre dopaminerg fenotyp än den som traditionellt används för Parkinsonforskning SH-SY5Y, som mestadels är serotonerg. IBRO Neurovetenskapliga rapporter, 2022. 13: p. 543-551.
- Kovalevich, J. och D. Langford, Considerations for the use of SH-SY5Y neuroblastoma cells in neurobiology. Neuronal cell culture: methods and protocols, 2013: s. 9-21.
- Martin, E.-R., J. Gandawijaya och A. Oguro-Ando, A novel method for generating glutamatergic SH-SY5Y neuron-like cells utilizing B-27 supplement. Frontiers in Pharmacology, 2022: s. 4042.
- Feles, S., et al, Streamlining culture conditions for the neuroblastoma cell line SH-SY5Y: a prerequisite for functional studies. Methods and Protocols, 2022. 5(4): p. 58.
- Wang, X., M. Zhang och H. Liu, LncRNA17A reglerar autofagi och apoptos hos SH-SY5Y-cellinjen som en in vitro-modell för Alzheimers sjukdom. Biovetenskap, bioteknik och biokemi, 2019. 83(4): p. 609-621.
- Ahmad, M.H., et al, Naringenin lindrar paraquat-inducerad dopaminerg neuronal förlust i SH-SY5Y-celler och en råttmodell av Parkinsons sjukdom. Neuropharmakologi, 2021. 201: p. 108831.
