MX-1 Cellinje

MX-1 är en human bröstadenokarcinomcellinje som härrör från en xenograftmodell för bröstcancer i athymiska möss. De humana bröstadenokarcinomcellerna etablerades från brösttumören hos en 29-årig kaukasisk kvinna. MX1-cellerna är trippelnegativ bröstcancer (TNBC) som används i stor utsträckning för forskning om läkemedelsresistens, cellsignalering, läkemedelsresponsmekanism etc.

Ursprung och allmän information om MX-1-celler

Innan du arbetar med denna cellinje bör du lära dig dess muttrar och bultar. Vi kommer att granska nästan all allmän information om MX-1-cellinjen.

Den odödliga MX-1-cellinjen är en tumörframkallande cellinje som etablerats från en tumörxenograft. MX-1-celler anses vara en typ av trippelnegativ bröstcancer (TNBC) [1]. Dessutom är dessa celler östrogenreceptor- och p53-negativa, eftersom de inte uttrycker dessa gener.

MX-1-celler - ett modellsystem för trippelnegativ bröstcancer

Odlingsförhållandena för MX-1-cellinjen är inte särskilt krävande. Dessa celler kan lätt förökas och användas i olika forskningslaboratorier för transfektionsstudier. Med metoden för transient transfektion studeras vanligen de underliggande cellulära mekanismerna och genuttrycksmönstren i denna cellinje [2, 3].

Denna cellinje är ett bra modellsystem för bröstcancer. Den kan användas för att förstå de molekylära mekanismerna bakom sjukdomsförloppet och för att undersöka och utveckla läkemedel för att bekämpa sjukdomen. Mer specifikt kan den humana MX-1-cellinjen för bröstadenokarcinom vara ett alternativ till TNBC-celler eftersom den är östrogenreceptornegativ [4].

MX-1 cellinje: Information om odling

• Fördubblingstid: Populationsfördubblingstiden för INS-1-celler är cirka 44 timmar.
• Adherent eller i suspension: INS-1-celler växer både i suspension och adherent form.
• Förhållande mellan subkultivering: INS-1-celler subkultiveras i ett delningsförhållande på 1:3. I korthet samlas suspenderade celler in. Adherenta celler sköljs med PBS och inkuberas med Accutase-lösningen. Efter avskiljning tillsätts cellerna med färskt media. Därefter centrifugeras och samlas både suspenderade och vidhäftande celler upp. Cellerna resuspenderas försiktigt och fördelas i de nya kolvarna för tillväxt.
• Tillväxtmedium: RPMI 1640 används för odling av INS-1-cellinjen från råttinsulinom. Mediet kompletteras med 10% värmeinaktiverat fetalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 och 1 mM natriumpyruvat.
• Tillväxtförhållanden: INS-1-cellerna förvaras i en luftfuktad inkubator vid 37°C och med kontinuerlig tillförsel av 5% CO2.
• Förvaring: INS-1 betaceller kan långtidsförvaras i ångfasen av flytande kväve eller vid en temperatur under -150°C i en elektrisk frys.
• Frysningsprocess och medium: CM-1- eller CM-ACF-medier används för att frysa INS-1-celler genom en långsam frysningsprocess. Den tillåter endast en temperatursänkning på 1°C per minut för att skydda cellernas livskraft.
• Upptiningsprocess: Frysta INS-1-celler tinas i ett vattenbad som är förinställt på 37 grader Celsius i 40 till 60 sekunder. Efter upptining tillsätts cellerna med färsk media och hälls direkt i en ny kolv för tillväxt. Efter 24 timmar byts mediet ut för att eliminera komponenter i frysmediet.
• Biosäkerhetsnivå: Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 krävs för odling av INS-1-insulinomceller från råtta.

MX-1-celler: Tillämpningar inom forskning

Denna mänskliga bröstadenokarcinom MX-1-cellinje används ofta i bröstcancerstudier istället för celler som MDA-MB-231 eller MCF-7. Här är några speciella tillämpningar av denna cellinje inom cancerforskning.

Mekanismer för läkemedelsresistens

MX-1-celler används för att studera de molekylära faktorer som förmedlar utvecklingen av resistens mot bröstcancerläkemedel. Studier har i stor utsträckning använt MX-1-celler för att etablera läkemedelsresistenta modeller. I en studie som publicerades 2021 rapporterades användningen av MX-1-celler för att generera en doxorubicinresistent bröstcancercellinje. Den utvecklade cellmodellen validerade ABC-transportören ABCB1 och epitelial-mesenkymal transition (EMT) inblandning i förvärvandet av kemoresistens [5].

Genuttryck/cellsignalvägar

MX-1-cellinjen kan transfekteras transient för att belysa genuttrycksmönster och cellsignalvägar. I studier har MX-1-celler använts för transfektion med shRNA (short hairpin RNA) och icke-kodande RNA för att undersöka deras effekt på bröstcancercellers proliferation och tillväxt. Dessutom har associerade gensignaleringsvägar klarlagts [2, 6].

Screening av potentiella hämmare

MX-1-celler kan användas för screening av potentiella läkemedel mot bröstcancer eftersom de efterliknar cancercellernas mikromiljö. En forskningsstudie har visat den terapeutiska aktiviteten hos Vinorelbine, ett mikrotubulärt toxin, som utlöste celldöd och polyploidi i MX-1-celler [4].

Beställ din MX-1-cellinje idag

MX-1 cellinje Resurser: Protokoll, videor och mer

Det finns begränsade resurser tillgängliga när det gäller odlings- och transfektionsmetoder, men vi har samlat så mycket information som möjligt åt dig.

Protokoll för cellodling

MX-1-celler används i många studier för analys av transient transfektion. Här har vi listat några resurser som kan hjälpa dig med transfektionsprotokollen.

• Transfektion av MX-1-celler: Denna publikation beskriver protokollet för transfektion med siRNA i MX-1-celler för att utveckla en gen knock-out-modell.
• Transfektion av däggdjursceller: Den här artikeln innehåller all viktig information om transfektionsmetoder som används i cellinjer från däggdjur.

Vi hoppas att den här artikeln har gett dig värdefull kunskap om MX-1-cellinjen och att du har fått en bättre förståelse för hur man odlar, underhåller och använder dessa celler i din forskning. Om du är intresserad av att arbeta med MX-1-cellinjen, tveka inte att beställa från oss för att kickstarta din forskningsresa!

Vanliga frågor om MX-1-cellinjen för bröstcancer

Referenser

1. Stefanski, C.D. och J.R. Prosperi, Combating CHK1 resistance in triple negative breast cancer: EGFR-inhibering som potentiell kombinationsbehandling. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al, Analogen av cGAMP, c-di-AMP, aktiverar STING-medierad celldöd i östrogenreceptornegativa bröstcancerceller. Apoptos, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteomisk analys av hämmare avapoptosproteinliknande protein-2på bröstcancercellproliferation. Rapporter om molekylär medicin, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa och J. Magae, Vinorelbine, ett mikrotubulärt toxin, inducerar apoptos och polyploidi i MX-1, en mänsklig trippel-negativ bröstcancercellinje. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & kemoterapi, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al, Nongenotoxic ABCB1 activator tetraphenylphosphonium can contribute to doxorubicin resistance in MX-1 breast cancer cell line. Vetenskapliga rapporter, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al, Mixomics-analys av bröstcancer: Långt icke-kodande RNA linc01561 fungerar som ceRNA involverat i utvecklingen av bröstcancer. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.